专利名称：畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种复合菌，特别涉及一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用。
背景技术：
发酵饲料是指在人工控制条件下，微生物通过自身的代谢活动，将植物性、动物性和矿物性物质中的抗营养因子分解或转化，产生更能被牲畜采食消化、吸收的养分更高且无毒害作用的饲料原料。生产畜禽发酵饲料的微生物主要有酵母菌和乳酸菌，有时还有少量的芽孢杆菌。但是对于普通的畜禽饲料，如果含水量达到30%以上，有适量的酵母菌和乳酸菌就足够启动发酵了。目前，畜禽养殖行业逐渐开始推广使用发酵饲料，但是生产发酵饲料的菌种都是由专业的生物技术公司生产，生产工艺比较复杂，价格也很高。实际上，生产 畜禽发酵饲料用的菌种制剂不需要很复杂的操作工艺，也不需要很大的设备投入，一些简便的生产技术同样能达到很理想的效果。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，制备复合菌制剂的工序少，工艺简单，操作方便，无需大型设备的投入，推广性强，节约经济成本；所制备出的复合菌制剂能够有效促进饲料营养成分的转化，提高饲料转化率。本发明公开一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，所述复合菌制剂为含有面包酵母菌和乳酸菌的复合菌制剂，所述乳酸菌为采用高密度液体厌氧培养的厌氧乳酸菌，所述复合菌制剂的制备方法包括以下步骤a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与牛奶按重量比为红糖牛奶=1:19-22混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为105-115°C之下消毒18-22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用1-3倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:25-30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为115-125 下消毒18-22分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液乳酸菌=50:0. 05-0. I的乳酸菌，并在温度为35-40°C下恒温培养22-26小时，即得接种种液；c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35-45°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30-40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3-7分钟，然后加入1-2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1-4分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂；进一步，步骤a中，将红糖与牛奶按重量比为红糖牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为110°c之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；进一步，步骤a中，所述牛奶为不含抗生素且未经稀释的牛奶； 进一步，步骤b中，用2倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为120°C下消毒20分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液乳酸菌=50:0. 08的乳酸菌，并在温度为37°C下恒温培养24小时，即得接种种液；
进一步，步骤c中，将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；进一步，步骤d中，将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，然后加入I. 5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂；进一步,所述厌氧乳酸菌包括嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、粪肠球菌(Enterococcus. faecalis)和屎肠球菌(Enterococcus. faecium)中的一种或两种以上混合物。进一步，所述面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌；本发明还公开一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0. 1-0. 2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂。本发明的有益效果本发明的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，选用的乳酸菌同型乳酸发酵的厌氧菌，这些乳酸菌主要包括屎肠球菌、粪肠球菌和嗜热链球菌，它们都是畜禽养殖业最常用的乳酸菌，代谢过程基本不产生气体，只要保持发酵体系有较好的密闭性，这些乳酸菌就可以很好地生存和代谢，对绝大多数畜禽饲料的发酵都有较好的适用性。选用的酵母菌是面包酵母菌，就是商业市场上流通的生产面包的酵母菌，每克面包酵母干粉含100亿Cfu活性酵母菌；这种酵母液具有很好很广泛的适用范围，是一种生产畜禽发酵饲料很好的微生物。特别是在发酵的起始阶段，这种酵母菌有很强的发酵力，可以快速地消耗原料中残留的氧气，为乳酸菌的快速繁殖和正常代谢提供很好的厌氧环境。面包酵母菌是采用成熟的面包酵母干粉(安琪酵母粉，食品级面包酵母，已商业化流通)。乳酸菌采用高浓度液态培养，培养结束后用干燥的麦芽粉吸附，吸附的比例是30 40。即30 40倍重量的麦芽粉与I倍重量的液态乳酸菌培养液混合。由于普通干燥麦芽粉的含水量一般都不超过5%，因此通过大比例吸附稀释后，最终产品中的含水量一般不超过9. 0%。在真空包装条件下可存放3-6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50-65%左右。这种复合菌产品在畜禽发酵饲料中接种0. I 0. 2%就可以很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。
具体实施例方式实施例一a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为110°C之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。
b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为120°C下消毒20分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. 08的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为37°C下恒温培养24小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，即35倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I. 5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，即I. 5倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母 菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 15%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 6%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在65%。实施例二a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:19混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为105°C之下消毒18分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用I倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:25的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为115°C下消毒18分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. 05的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为35°C下恒温培养22小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液(后密封存储，在温度为35°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即30倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌I分钟，即I倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿Cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 1%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为粪肠球菌；本实施例中，将粪肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O . 8%，在真空包装条件下存放3个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50%。实施例三a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:22混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为115°C之下消毒22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用3倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为125°C下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. I的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为40°C下恒温培养26小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即30倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌I分钟，即I倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 1%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为屎肠球菌；本实施例中，将屎肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 8%，在真空包装条件下存放3个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50%。实施例四a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:22混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为105°C之下消毒22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用3倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为115°C下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. I的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为40°C下恒温培养22小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度 为35°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即40倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅7分钟，即2倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 15%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 7%，在真空包装条件下存放5个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在60%。实施例五a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:19混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为112°C之下消毒19分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:27的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为122°C下消毒19分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. 06的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为37°C下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为42°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入32乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即32倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I. 5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌I分钟，即I. 5倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。
本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 18%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为屎肠球菌；本实施例中，将屎肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 7%，在真空包装条件下存放4个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在55%。实施例六a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:21混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为108°C之下消毒21分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用I倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:26的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为118°C下消毒18分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. 07的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为39°C下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液(后密封存储，在温度为43°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入33乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即33倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I. 9吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌I分钟，即I. 9倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为粪肠球菌；本实施例中，将粪肠球菌按同等重量比替换为嗜热链球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 75%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在63%。实施例七a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:21混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为114°C之下消毒19分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用2倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:26的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为121°C下消毒22分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. I的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为36°C下恒温培养25小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为38°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液；d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入36乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即36倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅7分钟，即2倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 75%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在62%。实施例八
a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与未经稀释且不含抗生素的牛奶按重量比为红糖牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解，然后分装在三角瓶中，瓶口用棉塞封口，外包牛皮纸密封存储，并在温度为108°C之下消毒18分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基；红糖也可有蔗糖替代，同样能达到实验目的。b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用I倍于无抗生素牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，把溶液装在玻璃瓶中，用橡胶塞密闭玻璃瓶口，将该混合液在温度为124°C下消毒26分钟后冷却至常温以后转移到超净工作台上，然后打开橡胶瓶塞加入重量比为混合液厌氧乳酸菌=50:0. I的厌氧乳酸菌并用橡胶塞密闭瓶口，转移到恒温培养箱内，并在温度为40°C下恒温培养23小时，即得接种种液；成熟的种液如果不及时用，需要保存在4°C冰箱内，有效期为10天。c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为39°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液； d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入37乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3分钟，即37倍重量的麦芽粉与I倍重量的乳酸菌培养液混合，然后加入I吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅6分钟，即I倍重量的面包酵母粉与I倍重量的乳酸菌培养液(吸附后的)混合，面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌，制得畜禽发酵饲料用复合菌制剂，将复合菌制剂进行真空装袋保存。本实施例的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为O. 1%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，就能很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。本实施例中，所述厌氧乳酸菌为嗜热链球菌；本实施例中，将嗜热链球菌按同等重量比替换为粪肠球菌、屎肠球菌中的一种，或者按照同等重量比替换为嗜热链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌中的混合物，均得到合格的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，所得产品性质并无明显差别。本实施例制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂，含水量为O. 65%，在真空包装条件下存放6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在58%。上述实施例中，面包酵母菌粉、乳酸菌和麦芽粉均为外购产品，乳酸菌为厌氧型乳酸菌。而对于以上技术效果，实施例一的配比以及工艺参数，使用效果最好，明显优于其它实施例，为最佳。由此可见，上述方法制备的畜禽发酵饲料用复合菌制剂在真空包装条件下可存放3-6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50-65%左右。这种复合菌产品在畜禽发酵饲料中接种O. I O. 2%就可以很好地启动发酵，同时适用于好氧发酵和厌氧发酵，对于厌氧发酵体系更合适。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
权利要求
1.一种畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于所述复合菌制剂为含有面包酵母菌和乳酸菌的复合菌制剂，所述乳酸菌为采用高密度液体厌氧培养的厌氧乳酸菌，所述复合菌制剂的制备方法包括以下步骤 a.制备待接种的液体乳酸菌培养基将红糖与牛奶按重量比为红糖牛奶=1:19-22混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为105-115°C之下消毒18-22分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基； b.制备液体乳酸菌培养基的接种种液用1-3倍于牛奶重量倍的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:25-30的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为115-125 下消毒18-22分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液乳酸菌=50:0. 05-0. I的乳酸菌，并在温度为35-40°C下恒温培养22-26小时，即得接种种液； c.将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为35-45°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液； d.将步骤c中的乳酸菌培养液加入30-40乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附3-7分钟，然后加入1-2吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌1-4分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂。
2.根据权利要求I所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于步骤a中，将红糖与牛奶按重量比为红糖牛奶=1:20混合搅拌至红糖完全溶解并密封存储，并在温度为110°C之下消毒20分钟，然后冷却至常温即为待接种的液体乳酸菌培养基。
3.根据权利要求2所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于步骤a中，所述牛奶为不含抗生素且未经稀释的牛奶。
4.根据权利要求3所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于步骤b中，用2倍于牛奶重量的水将牛奶稀释，然后加入重量比为蔗糖牛奶稀释液=1:28的蔗糖后搅拌至蔗糖完全溶解，将该混合液在温度为120°C下消毒20分钟后冷却至常温，然后加入重量比为混合液乳酸菌=50:0. 08的乳酸菌，并在温度为37°C下恒温培养24小时，即得接种种液。
5.根据权利要求4所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于步骤c中，将步骤a中的液体乳酸菌培养基接入步骤b中的接种种液后密封存储，在温度为40°C下恒温静息培养至培养基出现明显的凝固状，即得乳酸菌培养液。
6.根据权利要求5所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于步骤d中，将步骤c中的乳酸菌培养液加入35乳酸菌培养液重量倍的干燥麦芽粉吸附5分钟，然后加入I. 5吸附后乳酸菌培养液重量倍的面包酵母粉混合搅拌3分钟，制得生产畜禽发酵饲料用复合菌制剂。
7.根据权利要求6所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于所述厌氧乳酸菌包括嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、幾肠球菌(Enterococcus.faecalis)和屎肠球菌(Enterococcus. faecium)中的一种或两种以上混合物。
8.根据权利要求7所述的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法，其特征在于所述面包酵母菌采用每克面包酵母干粉含100亿cfu的活性酵母菌。
9.根据权利要求8制得的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的应用，其特征在于向待发酵的饲料原料中加入重量百分比为0. 1-0. 2%的畜禽发酵饲料用复合菌制剂。
全文摘要
本发明的畜禽发酵饲料用复合菌制剂的制备方法、及其应用，选用的乳酸菌同型乳酸发酵的厌氧菌，主要包括屎肠球菌、粪肠球菌和嗜热链球菌，是畜禽养殖业最常用的乳酸菌，代谢过程基本不产生气体，只要保持发酵体系有较好的密闭性，对绝大多数畜禽饲料的发酵都有较好的适用性。选用的酵母菌是面包酵母菌，就是商业市场上流通的生产面包的酵母菌，每克面包酵母干粉含100亿cfu活性酵母菌；制备出的复合菌制剂含水量一般不超过9.0%，在真空包装条件下可存放3-6个月，酵母菌的数量基本不变，活性乳酸菌的数量保存在50-65%左右。这种复合菌产品在畜禽发酵饲料中接种0.1～0.2%就可以很好地启动发酵。
文档编号C12N1/20GK102864104SQ20121033279
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月10日 优先权日2012年9月10日
发明者钱昱龙 申请人:云南轩瑜生物科技有限公司