专利名称：一种微生物肥料菌剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种菌剂的制作方法，特别是一种微生物肥料菌剂的制作方法。
背景技术：
中国是世界农业大国，用占世界9%的耕地养活了占世界22%的人口，在农业生产中取得了巨大的成绩，但是成绩的背后也付出了巨大的代价。近30年来，我国为满足粮食生产需要，其农用化学品投入已经达到了相当高的比例。自20世纪90年代起，我国成为世界最大的化肥生产和消费国。目前，我国是全球化肥投入水平最高的地区之一。常年食用残留化肥的农产品，会对人体产生一定的危害，化肥中的硝酸盐会被人体细菌还原成亚硝酸盐，这是一种致癌物质，同时化肥中的毒素在人体内常年堆积容易诱发高血压、心脏病、糖尿病等病症。对土壤而言，常年施用化肥，可引起土壤酸度变化，造成土壤中氢离子增多，易造成土壤酸化。土壤酸化后能溶解土壤中的一些营养物质，在降雨和灌溉的作用下，向下渗透补给地下水，使得营养成分流失，造成土壤贫瘠化，影响作物的生长。常年施用化肥，还可导致土壤板结，肥力下降。对环境而言，化肥还会对土壤产生污染。制造化肥的矿物原料及化工原料中，含有多种重金属放射性物质和其他有害成分，它们随施肥进入农田土壤造成污染。因此，我国自2004年至今，中央“I号文件”连续多年提出提高土壤有机质的要求，并制定了发展“生态农业”的规划，这促使有机肥、生物肥再次从幕后走到台前，步入了“朝阳产业”的行列。
发明内容
本发明的目的在于针对施用传统化肥影响人体健康、破坏耕地、污染环境的不足而提供的用于生产生物肥的微生物肥料菌剂的制作方法。本发明的目的是这样实现的
I、种子液的制备
①褐球固氮菌种子液的制备
称取磷酸氢二钾O. 8克，磷酸二氢钾O. 2克，硫酸镁O. 2克，硫酸钙O. I克，酵母膏O. 5克，甘露醇20克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. O 7. 2，即得褐球固氮菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种褐球固氮菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得褐球固氮菌种子液。②巨大芽孢杆菌种子液的制备
称取葡萄糖50克，玉米浆20毫升，碳酸钙3克，磷酸氢二钾I克，硫酸镁O. 5克，氯化钠O. 3克，氯化钾O. 3克，硫酸锰O. 05克，硫酸亚铁O. 05克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. O,即得巨大芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32 °C，接种巨大芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得巨大芽孢杆菌种子液。③蜡状芽孢杆菌种子液的制备称取可溶性淀粉30克、豆饼粉20克、磷酸氢二钾3克、MgSO4 I. 5克、CaCl2O. I克，力口水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. 2，即得蜡状芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种蜡状芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得蜡状芽孢杆菌种子液。④绿针假单胞菌种子液的制备
称取蛋白胨5克牛肉膏3克，氯化钠5克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至
7.0，即得绿针假单胞菌种子液培养基。取IO·Oml种子液培养基于500ml三角瓶中，121°C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种绿针假单胞菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得绿针假单胞菌种子液。⑤苏云金芽孢杆菌种子液的制备
取可溶性淀粉6克、葡萄糖6克、酵母粉4克、磷酸二氢钾I克、硫酸镁O. 5克、玉米浆25毫升，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. O,即得苏云金芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121°C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种苏云金芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得苏云金芽孢杆菌种子液。2、微生物肥料菌剂的制备
先配制固体发酵培养基，将麸皮、玉米面、米糠按80:10:10的比例混合，将麸皮、玉米面和米糠总重量2%的玉米浆、2%的尿素、1%的硫酸铵、O. 1%的磷酸二氢钾、O. 05%的硫酸镁加水溶解混匀后拌入麸皮、玉米面和米糠中，将培养基含水量控制在60 65%，混合均匀，常压蒸I小时，冷却至30°C，将褐球固氮菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液、蜡状芽孢杆菌种子液、绿针假单胞菌种子液、苏云金芽孢杆菌种子液分别接种到上述固体培养基中，接种量是每种菌种各5%，混合均匀后平铺到灭菌的竹帘上，厚度4 6厘米，在30 32°C恒温箱中发酵56 60小时，然后45°C条件下干燥至含水10%以下，即得成品。用本发明的菌剂生产微生物肥料，原料比较广泛，可以是畜禽粪便、餐厨垃圾、城市污水处理厂的污泥、农作物秸杆，也可以是食品加工企业的废料、造纸厂的废渣、糖厂酒厂的废渣等等，添加量O. I O. 2%。用本发明的产品生产微生物肥料不仅可以减少化肥的用量、增加农作物的产量、提高农作物产品的品质，增加农作物的营养成份，减少有害成分，还可以抵抗病虫害、增加土壤肥力，减少环境污染。(四)、具体实施方案
本发明采用的5支菌株全部采购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，分别是褐球固氮菌CICC20603、巨大芽孢杆菌CICC20665、蜡状芽孢杆菌CICC21687、绿针假单胞菌CICC20676、苏云金芽孢杆菌CICC23706。I、种子液的制备 ①褐球固氮菌种子液的制备
称取磷酸氢二钾O. 8克，磷酸二氢钾O. 2克，硫酸镁O. 2克，硫酸钙O. I克，酵母膏O. 5克，甘露醇20克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. O,即得褐球固氮菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种褐球固氮菌，在旋转摇床150rpm、30°C的条件下培养24小时，即得褐球固氮菌种子液。②巨大芽孢杆菌种子液的制备
称取葡萄糖50克，玉米浆20毫升，碳酸钙3克，磷酸氢二钾I克，硫酸镁O. 5克，氯化钠O. 3克，氯化钾O. 3克，硫酸锰O. 05克，硫酸亚铁O. 05克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. O,即得巨大芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121°C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种巨大芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、30°C的条件下培养24小 时，即得巨大芽孢杆菌种子液。③蜡状芽孢杆菌种子液的制备
称取可溶性淀粉30克、豆饼粉20克、磷酸氢二钾3克、MgSO4 I. 5克、CaCl2O. I克，力口水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. 2，即得蜡状芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种蜡状芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、30°C的条件下培养24小时，即得蜡状芽孢杆菌种子液。④绿针假单胞菌种子液的制备
称取蛋白胨5克牛肉膏3克，氯化钠5克，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至
7.0，即得绿针假单胞菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121°C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种绿针假单胞菌，在旋转摇床150rpm、30°C的条件下培养24小时，即得绿针假单胞菌种子液。⑤苏云金芽孢杆菌种子液的制备
取可溶性淀粉6克、葡萄糖6克、酵母粉4克、磷酸二氢钾I克、硫酸镁O. 5克、玉米浆25毫升，加水溶解并定容至1000ml，调节PH至7. 0，即得苏云金芽孢杆菌种子液培养基。取IOOml种子液培养基于500ml三角瓶中，121 °C灭菌20分钟，冷却至32°C，接种苏云金芽孢杆菌，在旋转摇床150rpm、28 32°C的条件下培养24小时，即得苏云金芽孢杆菌种子液。2、微生物肥料菌剂的制备
称取麸皮800克、玉米面100克、米糠100克混合均匀，将20毫升的玉米浆、20克的尿素、10克的硫酸铵、I克的磷酸二氢钾、O. 5克的硫酸镁加水全部溶解后拌入麸皮、玉米面和米糠中，将培养基含水量控制在60 65%，混合均匀，常压蒸I小时，冷却至30°C，将褐球固氮菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液、蜡状芽孢杆菌种子液、绿针假单胞菌种子液、苏云金芽孢杆菌种子液各50毫升分别接种到上述固体培养基中，混合均匀后平铺到灭菌的竹帘上，厚度4 6厘米，在30°C恒温箱中发酵60小时，然后45°C条件下干燥至含水10%以下，即得成品。
权利要求
1.一种微生物肥料菌剂的制作方法，其特征是将麸皮、玉米面、米糠按80:10:10的比例混合，将麸皮、玉米面和米糠总重量2%的玉米浆、2%的尿素、1%的硫酸铵、O. 1%的磷酸二氢钾、O. 05%的硫酸镁加水溶解混匀后拌入麸皮、玉米面和米糠中，将培养基含水量控制在60 65%，混合均匀，常压蒸I小时，冷却至30°C，将5株菌种种子液分别接种到上述固体培养基中，接种量是每种菌种各5%，混合均匀后平铺到灭菌的竹帘上，厚度4 6厘米，在30 32°C恒温箱中发酵56 60小时，然后45°C条件下干燥至含水10%以下，即得成品。
2.根据权利要求I所述的一种微生物肥料菌剂的制作方法，其特征是所株5株菌种分别为褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、绿针假单胞菌、苏云金芽孢杆菌。
全文摘要
一种微生物肥料菌剂的制作方法涉及一种菌剂的制作方法，特别是一种微生物肥料菌剂的制作方法。将麸皮、玉米面、米糠80:10:10的比例混合，将玉米浆、尿素、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁加水溶解混匀后拌入麸皮、玉米面和米糠中常压蒸1小时，冷却至30℃，将5种菌株分别接种到上述固体培养基中，发酵56～60小时，然后干燥即得成品。用本发明的菌剂生产微生物肥料，添加量为0.1～0.2%。用本发明产品生产的微生物肥料不仅可以减少化肥的用量、增加农作物的产量、提高农作物产品的品质，增加农作物的营养成份，减少有害成分，还可以抵抗病虫害、增加土壤肥力，减少环境污染。
文档编号C12N1/20GK102911905SQ20121043258
公开日2013年2月6日 申请日期2012年11月2日 优先权日2012年11月2日
发明者吕伟民, 刘复军, 赵云财, 李娜, 栗伟, 佟晓芳, 李振林, 王佐民, 尚维, 赵彤, 张欣, 宋殿峰, 张劲松 申请人:黑龙江省麒麟工贸公司