一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明为微生物领域，特别涉及一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基，所述培养基的组分包括21g/L疱肉培养基、4.0g/L乳糖、15.0g/L胰月示、7.55g/L大豆胨、1.54g/L偏亚硫酸氢钠、1.5g/L柠檬酸铁铵，pH值为7.5-7.7。所述疱肉培养基为每升疱肉培养基中含有蛋白胨20.0g、牛肉浸粉3.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸橼酸钠5.8g、去氧胆酸钠0.33g、磷酸二氢钠2.0g。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。
【专利说明】-种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明为微生物领域，特别涉及一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基及 其应用。
【背景技术】
[0002] 产气荚膜梭菌（C.perfringens)是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌， 因能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量气体，导致组织严重气肿，继而影响血液供应， 造成组织大面积坏死，加之本菌在体内能形成荚膜，故名产气夹膜梭菌。
[0003] 肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌，在罐头食品及密封腌渍食物中具有极 强的生存能力，是毒性最强的毒素之一。肉毒杆菌是一种致命病菌，在繁殖过程中分泌毒 素，是毒性最强的蛋白质之一。军队常常将这种毒素用于生化武器。人们食入和吸收这种 毒素后，神经系统将遭到破坏，出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。
[0004] 培养基（Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料， 一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养 基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变 质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培 养基），较长时间的贮存，必须放在3?6°C的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在 均改制成粉末。
[0005] 培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类 为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
【发明内容】
[0006] 本发明克服现有技术中的不足，提供一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养 基及其应用。
[0007] 本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不 同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基 的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了 本发明的培养基。
[0008] 本发明所采用的技术方案为：
[0009] -种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基，所述培养基的组分包括21g/L疱 肉培养基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亚硫酸氢钠、1. 5g/L柠 檬酸铁铵，pH值为7. 5-7. 7。
[0010] 在以上方案的基础上，所述疱肉培养基为每升疱肉培养基中含有蛋白胨20. 0g、 牛肉浸粉3. 0g、酵母浸粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸橼酸钠5. 8g、去氧胆酸钠 〇· 33g、磷酸二氢钠2. 0g。 toon] 本发明还公开了所述的胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基的应用，用于产 气荚膜梭菌的平板计数。
[0012] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳 糖为可发酵糖类提供碳源；偏亚硫酸氢钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中 心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；D-环丝氨酸抑制非梭菌的细菌。
[0013] 称取本品47. 0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装于500ml锥形瓶中各250ml， 121°C高压灭菌15分钟。倾倒平皿前，每250ml培养基（50°C )中，加入过滤除菌的0. 5% D-环丝氨酸溶液20ml。
[0014] 本发明的有益效果：
[0015] 1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；
[0016] 2、菌生长迅速，变异率低；
[0017] 3、便于观察，分析。
【具体实施方式】 [0018] 实施例1 :
[0019] 一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基，所述培养基的组分包括21g/L疱 肉培养基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亚硫酸氢钠、1. 5g/L柠 檬酸铁铵，pH值为7. 5-7. 7。
[0020] 所述疱肉培养基为每升疱肉培养基中含有蛋白胨20. 0g、牛肉浸粉3. 0g、酵母浸 粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸橼酸钠5. 8g、去氧胆酸钠0. 33g、磷酸二氢钠2. 0g。
[0021] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳 糖为可发酵糖类提供碳源；偏亚硫酸氢钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中 心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；D-环丝氨酸抑制非梭菌的细菌。
[0022] 称取本品47. 0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装于500ml锥形瓶中各250ml， 121°C高压灭菌15分钟。倾倒平皿前，每250ml培养基（50°C )中，加入过滤除菌的0. 5% D-环丝氨酸溶液20ml。
[0023] 在 36 ± 1 °C 培养 20-24 小时
[0024] 质控菌株 |生长情况|其它特征 产气荚膜梭菌i 黑色菌落 生孢梭菌 +++ / 沙门氏菌 ~ 7
[0025] 上述【具体实施方式】中的实施例是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列 举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下所做的任何变化和修改，都应属本发 明所限定的保护范围之内。
【权利要求】
1. 一种胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基，其特征在于所述培养基的组分包括 21g/L疱肉培养基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亚硫酸氢钠、 1. 5g/L柠檬酸铁铵，pH值为7. 5-7. 7。
2. 根据权利要求1所述的胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基，其特征在于所述 疱肉培养基为每升疱肉培养基中含有蛋白胨20. Og、牛肉浸粉3. Og、酵母浸粉5. Og、可溶性 淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸橼酸钠5. 8g、去氧胆酸钠0. 33g、磷酸二氢钠2. 0g。
3. -种根据权利要求1所述的胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基的应用，其特 征在于用于产气荚膜梭菌的平板计数。
【文档编号】C12R1/145GK104232735SQ201410473324
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月16日 优先权日:2014年9月16日
【发明者】吴联顺, 杨光 申请人:青岛永通电梯工程有限公司