本发明属于食品加工领域，具体涉及一种叶黄素的酵母微胶囊及其制备方法。
背景技术：
叶黄素(Lutein)属含氧类胡萝卜素，广泛分布于高等植物中，在果实与花瓣中以酯的形式存在，在光合组织中以单体形式存在。叶黄素分子结构的碳骨架由中央多聚烯链和位于两侧的芳香环组成，并在每个芳香环上各有一个羟基。其化学结构决定了其生理功能。叶黄素为天然色素，由于其良好的着色效果被多数国家列入适用于食品、饲料、药物、及化妆品的10种类胡萝卜素之一。叶黄素具有多种生理学功能，能够提高畜禽繁殖力，可以着色，同时作为着色剂其本身对人体有良好的营养、抗病、保健效果。叶黄素具有良好的抗氧化性能，能防治白内障、调节人体免疫力、预防心血管疾病、延缓动脉硬化、预防癌症、防治年龄相关性视黄斑退化、修复紫外线照射对皮肤造成的损伤等。现国内外叶黄素日益成为不可缺少的物质。
万寿菊属菊科一年生草本花卉，又名臭芙蓉、万盏灯、蜂窝菊，原产墨西哥，由于其适应性较强，现已广植于世界各地。其性凉、味苦微辛，其有抑制细菌、镇静、解痉、扩张支气管、抗炎之功效。研究报道，万寿菊花瓣的色素成分主要是叶黄素及其酯，还有其它微量的多种类胡萝卜素。Philip等报道万寿菊中叶黄素占类胡萝卜素的85％，在常见类胡萝卜素来源植物中浓度最高。万寿菊花期长，一般夏、秋采摘、耐暑热、耐旱、少见病虫害，适宜于大面积种植，可作为叶黄素工业上提取分离的理想原料。
叶黄素不溶于水，微溶于油，不稳定，极易氧化，加热、光照等都会使其氧化失去活性。因此，如何对叶黄素进行高效提取及提取后如何避免失活是影响叶黄素大规模应用的重要因素。
超临界萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。超临界流体萃取过程是由萃取和分离组合而成，在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物体接触，借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，使其有选择性按极性大小，沸点高低和相对分子质量大小将各种成分依次萃取出来，以达到分离提纯的目的。传统工艺多存在能耗高、溶剂需回收、过程复杂、产品纯度不高等问题，超临界流体萃取法安全、无毒、不破坏活性成分，目前很多天然产物的超临界流体萃取工艺已从试验规模放大到工业化生产。此外，微胶囊是一种聚合物壁壳的微型容器或包装物，包括壁材和芯材两部分，是具有半透性或密封性的微小粒子。微胶囊应用广泛，现应用于食品、医药、纺织、涂料、农业、化妆品工业。它具有改善物料状态、体积、性能，去除杂质，提高芯材稳定性，隔离组分，掩盖不良味道、降低挥发性，控制芯材释放等优点。目前暂未有利用超临界萃取技术和微胶囊包埋技术处理叶黄素的报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种叶黄素的酵母微胶囊及其制备方法，是以万寿菊经提取制备的冻干粉为芯材，以经酶解温育后除去内容物的酵母细胞为包埋壁材，经水浴恒温震荡、离心、冷冻干燥制得叶黄素的酵母微胶囊产品。该微胶囊具有控制叶黄素缓慢释放、生物利用度高、制备工艺较为简单的特点，适合工业化大生产。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：
一种叶黄素的酵母微胶囊的制备方法，所述酵母微胶囊中，酵母细胞为包埋壁材，叶黄素为芯材，该制备方法包括：
a)取粒径为30～70目的万寿菊干花粉末，按照料液比1:0.5～8的比例加入30～98％乙醇，在萃取压力10～35MPa、温度30～80℃，分离釜Ⅰ压力2～12MPa、温度30～65℃，分离釜Ⅱ压力2～6MPa、温度18～27℃，萃取剂CO2流量15～65L/h的条件下超临界萃取20～200min，萃取液浓缩得叶黄素浸膏；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏，按照料液比1:18～22的比例溶解于正己烷，然后按照体积比4～6:2～4的比例向其中加入4～6％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度250～350r/min，15～25℃下皂化反应5～7h；过滤，调节pH值至中性，加入1～6倍体积的水脱盐后，分离收集上清液；
HPLC检测上清液中的叶黄素含量：HPLC检测条件为：Waters C18色谱柱：(4.6mm×150mm，5μm)、流动相A-甲醇/乙睛/水(80:10:10，v/v/v)、流动相B-甲醇/乙睛(40:60，v/v)、柱温25℃、流速0.8mL/min、进样量20μL，流动相A:流动相B＝3:1，洗脱20min，后绘制标准曲线。
c)取步骤b)的上清液，依次用截留分子量4500～5500Dal的聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ，截留分子量12000～14000Dal的聚醚砜超滤膜Ⅱ，截留分子量7500～8500Dal的聚醚砜超滤膜Ⅲ过滤分离杂质，表面流速均为3～5m/s，温度30～40℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥，粉碎过筛，制得叶黄素冻干粉；
d)取干酵母，例如麦酒酵母菌、发面酵母菌、圆酵母菌等适合人体摄取的酵母，加入18～22倍量的4～6％NaCl溶液，添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，20～90℃温育1～50h；离心，菌体残渣复溶，10～90℃搅拌5～100min，离心，洗涤，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加水分散，20～80℃下按照芯壁比为1:0.2～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～12h，离心，洗涤，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊。
计算酵母微胶囊包埋率：测定方法利用酵母细胞包埋前后干燥后的质量差计算包埋率：W％＝(ma-mb)/ma*100％；式中：W(％)为包埋率，mb为包埋前冻干酵母细胞的质量，ma为包埋后获得的酵母细胞总质量。上述叶黄素的酵母微胶囊的包埋率为60～85％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:2～4的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力12～18MPa、温度35～45℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量20～30L/h的条件下超临界萃取50～70min；所述步骤d)中，45～55℃温育25～27h；菌体残渣复溶后，75～85℃搅拌55～65min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为80～81％。。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:5～7的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力22～28MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量45～55L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，45～55℃温育25～27h；菌体残渣复溶后，35～45℃搅拌25～35min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为83～84％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:4～6的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力28～32MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量40～50L/h的条件下超临界萃取80～100min；所述步骤d)中，75～85℃温育46～50h；菌体残渣复溶后，65～75℃搅拌75～85min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为74～75％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:5～7的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力12～18MPa、温度60～70℃，分离釜Ⅰ压力7～MPa、温度40～50℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量40～50L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，35～45℃温育24～28h；菌体残渣复溶后，65～75℃搅拌25～35min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为80～81％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:3～5的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力28～32MPa、温度55～65℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度45～55℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量20～30L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，55～65℃温育24～28h；菌体残渣复溶后，65～75℃搅拌75～85min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为79～80％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:1～3的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力12～18MPa、温度55～65℃，分离釜Ⅰ压力6～8MPa、温度40～50℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量20～30L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，35～45℃温育24～28h；菌体残渣复溶后，35～45℃搅拌55～65min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为80～81％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:4～6的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力18～22MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度50～60℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量30～40L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，45～55℃温育18～22h；菌体残渣复溶后，25～35℃搅拌25～35min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为75～76％。
一实施例中：所述步骤a)中，按照料液比1:3～5的比例加入65～75％乙醇，在萃取压力12～18MPa、温度35～45℃，分离釜Ⅰ压力7～9MPa、温度40～50℃，分离釜Ⅱ压力3～5MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量20～30L/h的条件下超临界萃取110～130min；所述步骤d)中，45～55℃温育34～38h；菌体残渣复溶后，65～75℃搅拌5～15min；所述步骤e)中，65～75℃下按照芯壁比为1:3～5的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，4000～6000rpm搅拌1～3h，得到的叶黄素的酵母微胶囊包埋率为83～84％。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：
一种根据上述制备方法所制备的叶黄素的酵母微胶囊，所述酵母微胶囊中，酵母细胞为包埋壁材，叶黄素为芯材，其包埋率为60～85％。
本技术方案与背景技术相比，它具有如下优点：
本发明制备的叶黄素的酵母微胶囊，以叶黄素为芯材，以酵母细胞为壁材，利用不同的渗透压，使芯材物质渗透过细胞壁进入细胞内，即可形成微胶囊。微胶囊的芯物质载荷能力高，不仅保留了叶黄素防治年龄相关性视黄斑退化、防治白内障、抗氧化性能、预防心血管疾病、延缓动脉硬化、预防癌症调节人体免疫力、修复紫外线照射对皮肤造成的损伤等活性，而且具有酵母细胞的营养；微胶囊化还可以避免加热、光照等因素引起的叶黄素失活，增加了叶黄素的稳定性；微胶囊大小均一，无毒，生物相容性好，生物利用度高，可实现叶黄素的缓慢释放。且微胶囊呈干燥粉末状，方便应用，保存性能好，易生物降解，对环境友好。制作工艺简单，不需要或很少引入其他化学试剂，没有溶剂残留的危险，非常适合药物和食品添加剂的包埋；同时母来源广泛，可使用发酵工厂回收价格低廉的废酵母，适合工业化大生产。
附图说明
图1为本发明的工艺流程示意图。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容：
实施例1
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:3的比例加入3000mL的70％乙醇，在萃取压力20MPa、温度50℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，25℃，萃取剂CO2流量25L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏63.5g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，按干酵母：组合酶1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶(市售)，然后在50℃温育36h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，60℃搅拌70min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为62.8％。
实施例2
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:3的比例加入3000mL的70％乙醇，在萃取压力15MPa、温度40℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，25℃，萃取剂CO2流量25L/h的条件下超临界萃取60min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏58.8g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在50℃温育26h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，80℃搅拌60min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为80.5％。
实施例3
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过50目筛，按照料液比1:6的比例加入6000mL的70％乙醇，在萃取压力25MPa、温度55℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，25℃，萃取剂CO2流量50L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏62.5g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在50℃温育26h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，40℃搅拌30min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为83.1％。
实施例4
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:5的比例加入5000mL的70％乙醇，在萃取压力30MPa、温度55℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，25℃，萃取剂CO2流量45L/h的条件下超临界萃取90min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏58.5g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在80℃温育48h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，70℃搅拌80min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为74.3％。
实施例5
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:6的比例加入6000mL的70％乙醇，在萃取压力15MPa、温度65℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度45℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，25℃，萃取剂CO2流量45L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏50.3g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在40℃温育26h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，70℃搅拌50min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为80.2％。
实施例6
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过50目筛，按照料液比1:4的比例加入4000mL的70％乙醇，在萃取压力30MPa、温度60℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度50℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，温度25℃，萃取剂CO2流量25L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏58.1g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50的比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在60℃温育26h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，70℃搅拌80min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为79.6％。
实施例7
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:2的比例加入2000mL的70％乙醇，在萃取压力15MPa、温度60℃，分离釜Ⅰ压力7MPa、温度45℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，温度25℃，萃取剂CO2流量25L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏55.4g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在40℃温育26h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，40℃搅拌60min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为80.2％。
实施例8
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:5的比例加入5000mL的70％乙醇，在萃取压力20MPa、温度55℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，温度25℃，萃取剂CO2流量35L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏63.8g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶＝1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在50℃温育20h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，30℃搅拌30min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为75.3％。
实施例9
a)取万寿菊干花1000g，中药粉碎机粉碎，过40目筛，按照料液比1:4的比例加入4000mL的70％乙醇，在萃取压力15MPa、温度40℃，分离釜Ⅰ压力8MPa、温度45℃，分离釜Ⅱ压力4MPa，温度25℃，萃取剂CO2流量25L/h的条件下超临界萃取120min，萃取液过滤，回收溶剂，浓缩得叶黄素浸膏50.8g；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏5g按照料液比1:20的比例溶解于100mL正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入60mL的5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，用36％乙酸调节pH值至中性，加入等体积的水混匀，脱盐，静置，离心分离后收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次经聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ(膜面积0.17m2，膜截留分子量5000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅱ(面积2.51m2，膜截留分子量13000Dal)，聚醚砜超滤膜Ⅲ(膜面积2.51m2，膜截留分子量8000Dal)过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥制得叶黄素冻干粉；
d)取一定量的安琪干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，然后在50℃温育36h；5000rpm离心10min，弃去上清液，向菌体残渣中加入95％乙醇，70℃搅拌10min，5000rpm离心10min，水洗2次，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加入5倍蒸馏水形成水分散液，70℃水浴加热下，按照芯壁比为1:4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2h，5000rpm离心10min，蒸馏水水洗3次，多次离心后，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为83.5％。
本领域技术人员可知，当本发明的技术参数在如下范围内变化时，可以预期得到与上述实施例相同或相近的技术效果：
a)取粒径为40～60目的万寿菊干花粉末，按照料液比1:1～6的比例加入40～95％乙醇，在萃取压力15～30MPa、温度40～70℃，分离釜Ⅰ压力5～8MPa、温度40～55℃，分离釜Ⅱ压力4MPa、温度20～25℃，萃取剂CO2流量25～55L/h的条件下超临界萃取30～180min，萃取液浓缩得叶黄素浸膏；
b)取步骤a)的叶黄素浸膏，按照料液比1:20的比例溶解于正己烷，然后按照体积比5:3的比例向其中加入5％的KOH的甲醇溶液，在搅拌速度300r/min，20℃下皂化反应6h；过滤，调节pH值至中性，加入1～5倍体积的水脱盐后，分离收集上清液；
c)取步骤b)的上清液，依次用膜面积0.1～0.2m2、截留分子量5000Dal的聚偏氟乙烯超滤膜Ⅰ，膜面积2.5～2.6m2、截留分子量13000Dal的聚醚砜超滤膜Ⅱ，膜面积2.5～2.6m2、截留分子量8000Dal的聚醚砜超滤膜Ⅲ过滤分离杂质，表面流速均为4m/s，温度35℃；滤液浓缩至浸膏，冷冻干燥，制得叶黄素冻干粉；
d)取干酵母，加入20倍量的5％NaCl溶液，以干酵母：组合酶1：50比例添加脂肪酶与蛋白酶的组合酶，30～80℃温育1～48h；离心，向菌体残渣中加入95％乙醇，20～80℃搅拌10～90min，离心，洗涤，冷冻干燥，完成酵母细胞预处理；
e)取步骤d)得到的预处理后的酵母细胞，加水分散，30～70℃下按照芯壁比为1:0.25～4的比例加入步骤c)得到的叶黄素冻干粉，5000rpm搅拌2～10h，离心，洗涤，冷冻干燥，即得所述之叶黄素的酵母微胶囊，其包埋率为60～85％。
以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。