本发明涉及保健品技术领域，具体涉及一种增强免疫力缓解体力疲劳的保健胶囊及其制备方法。
背景技术：
随着社会的进步，生活节奏的加快，环境的变化，以及各方面的压力越来越大，人们身体长期超负荷运转，导致人们被各种各样的疾病所困扰，严重影响人们的生活质量和身体健康。现代医学研究表明，这些疾病的产生和久治不愈的根本原因在于人体自身长期的免疫力低下和易疲劳。
据世界卫生组织最近公布的一项预测性调查表明，全世界真正健康的人只有5％，免疫力低下、易疲劳的亚健康人群的比例已占到75％，其余为疾病状态，我国亚健康人群也超过70％，大城市尤为偏高。
通过检索国家食品药品监督管理总局(CFDA)数据库发现，在国家已批准的保健食品中，同时具有增强免疫力、缓解体力疲劳功能的保健食品只占其总量的2％左右。而且其中有些产品由于各种原因并未上市或已退市，实际在售的产品数量更是屈指可数。因此，面对庞大的免疫力低下和易疲劳人群，开发具有增强免疫力和缓解体力疲劳的保健食品来填补市场空缺十分迫切。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种保健胶囊及其制备方法，该保健胶囊具有增强免疫力、缓解体力疲劳的保健功能，食用安全、无 毒副作用，而且效果显著；同时，该制备方法的生产成本低、工艺简单，具有很好的市场开发应用前景。
为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种增强免疫力的保健胶囊，包括以下组分：玛咖粉、马鹿茸、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉、硬脂酸镁。
其中，各组分的重量份为：玛咖粉15～20份、马鹿茸6～10份、人参提取物3～6份、韭菜子提取物1～3份、淫羊藿提取物3～5份、淀粉3～10份、硬脂酸镁0.1～0.5份。
作为本发明优选的实施方案，保健胶囊包括以下按重量份计的组分：玛咖粉18份、马鹿茸7份、人参提取物4份、韭菜子提取物2份、淫羊藿提取物4份、淀粉4.8份、硬脂酸镁0.2份。
优选地，所述保健胶囊中的人参皂苷Re含量≥0.8％。
优选地，所述人参提取物中所含的总皂苷含量≥5.0％；淫羊藿提取物中所含的淫羊藿苷含量≥2.5％。
本发明还提供了一种如上所述的保健胶囊的制备方法，其包括以下步骤：
a、预处理：将处方量的马鹿茸进行60Co辐照灭菌，剂量为5KGy，备用；
b、粉碎、过筛：将辐照灭菌后的马鹿茸粉碎，过80目筛；分别称取处方量的玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉、硬脂酸镁，然后分别过80目筛，备用；
c、混合：将过筛后的马鹿茸粉、玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉置于混合机混合25～35min，至色泽均匀一致、无色差，得混合粉；再将所得的混合粉与硬脂酸镁混合5min，至色泽均匀一致、无色差，得总混粉；
d、填充、抛光、包装：将总混粉用胶囊填充机进行填充，按0.4g/粒的规格装量，正负偏差9％，得保健胶囊，抛光、包装，检验合格后入库。
优选地，所述步骤b中的人参提取物是按以下方法制备得到的：取人参饮片净选，破碎成粗颗粒，用70％乙醇回流提取3次，每次提取的料液比为1:8、提取时间为2h，过滤，合并滤液，得人参提取液；将人参提取液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa的条件下减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压干燥，得干浸膏；所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即人参提取物。
优选地，所述步骤b中的韭菜子提取物是按以下方法制备得到的：将韭菜子粉碎，用6倍量的70％乙醇回流提取3次，每次提取1.5h，合并滤液；将滤液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得到稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa的条件下减压干燥，得干浸膏；所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即韭菜子提取物。
优选地，所述步骤b中的韭菜子提取物是按以下方法制备得到的：取淫羊藿饮片净选，破碎成粗颗粒，用10倍量的70％乙醇回流提取2次，每次提取时间均为1.5h，过滤，合并滤液，得淫羊藿提取液；将淫羊藿提取液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压干燥，得干浸膏：所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即淫羊藿提取物。
优选地，所述步骤a、b、c、d均是在30万级生产洁净区以上条件下操作的。
本发明中的乙醇百分含量均为重量百分含量，如“70％乙醇”，指的是每100g乙醇水溶液中含有乙醇70g。本发明中的“相对密度”，均是指60℃下相对于水的 密度。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
(1)本发明以玛咖粉、马鹿茸、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物为主要原料，通过调摄补养，益卫气、补元气、养血气，全方位补养，增强机体脏腑功能，增加能量物质储备，扶正固本，达到增强免疫力和缓解体力疲劳的功效。
(2)本发明的配方配伍合理科学，各组分之间具有协同作用，具有显著的保健功效。玛咖粉中含有大量丰富的营养物质，如蛋白质、人体必需的氨基酸、多种矿物质和多种维生素等，以及玛咖生物碱、芥子油和甾醇类等次生代谢活性成分，使其产生抗疲劳和增强免疫力的作用；马鹿茸具有温肾壮阳、益精补血、强筋健骨之功效；人参味甘、微苦，性微温，归脾、肺、心、肾经，具有补气生血、扶正祛邪的功效；韭菜子作为中国传统补肾壮阳药材，拥有数千年的药用历史，具备很高的药用价值，现代药理研究证实，对于增强免疫力、缓解体力疲劳、抗氧化等方面均具有显著疗效；淫羊藿味甘，气香，性温不寒，能益精气、健筋骨、补腰膝、强心力等作用，现代药理研究证明，具有增强机体免疫功能、加强性腺功能、延缓衰老、抗疲劳等功效。综合以上原料可以看出，玛咖粉、马鹿茸、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物均具有增强免疫力、缓解体力疲劳功能。
(3)本发明所生产的产品，经动物功能试验和毒理试验证明，具有增强免疫力、缓解体力疲劳的保健功效，且对机体无任何毒副作用，可放心长期食用。
(4)本发明的产品是以现代化的制剂技术生产加工的，生产工艺水平先进，且操作方便，可实现工业化连续生产，生产成本较低。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
一种增强免疫力的保健胶囊，包括以下按重量份计的组份：玛咖粉15～20份、马鹿茸6～10份、人参提取物3～6份、韭菜子提取物1～3份、淫羊藿提取物3～5份、淀粉3～10份、硬脂酸镁0.1～0.5份。
其中，保健胶囊中的人参皂苷Re含量≥0.8％。优选地，人参提取物中所含的总皂苷含量≥5.0％；淫羊藿提取物中所含的淫羊藿苷含量≥2.5％。
优选地，人参提取物是按以下方法制备得到的：取人参饮片净选，破碎成粗颗粒，用70％乙醇回流提取3次，每次提取的料液比为1:8、提取时间为2h，过滤，合并滤液，得人参提取液；将人参提取液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa的条件下减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压干燥，得干浸膏；所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即人参提取物。
韭菜子提取物是按以下方法制备得到的：将韭菜子粉碎，用6倍量的70％乙醇回流提取3次，每次提取1.5h，合并滤液；将滤液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得到稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa的条件下减压干燥，得干浸膏；所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即韭菜子提取物。
韭菜子提取物是按以下方法制备得到的：取淫羊藿饮片净选，破碎成粗颗粒，用10倍量的70％乙醇回流提取2次，每次提取时间均为1.5h，过滤，合并滤液，得淫羊藿提取液；将淫羊藿提取液置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa减压浓缩至相对密度1.15～1.25，回收乙醇，得稠浸膏；将稠浸膏置于温度60～70℃、真空度0.06～0.08MPa条件下减压干燥，得干浸膏：所得干浸膏经粉碎，过80目筛，收集得到的干粉即淫羊藿提取物。
实施例1：
一种增强免疫力的保健胶囊，包括以下按重量份计的组份：玛咖粉18份、马鹿茸7份、人参提取物4份、韭菜子提取物2份、淫羊藿提取物4份、淀粉4.8份、硬脂酸镁0.2份。
如上所述的保健胶囊制备方法包括如下步骤：
a、预处理：将处方量的马鹿茸进行60Co辐照灭菌，剂量为5KGy，备用；
b、粉碎、过筛：将辐照灭菌后的马鹿茸粉碎，过80目筛；分别称取处方量的玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉、硬脂酸镁，然后分别过80目筛，备用；
c、混合：将过筛后的马鹿茸粉、玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉置于混合机混合30min，至色泽均匀一致、无色差，得混合粉；再将所得的混合粉与硬脂酸镁混合5min，至色泽均匀一致、无色差，得总混粉；
d、填充、抛光、包装：将总混粉用胶囊填充机进行填充，按0.4g/粒的规格装量，正负偏差9％，得保健胶囊，填充后的胶囊用抛光机进行抛光处理，抛光后的合格胶囊进行内包装，包装规格为60粒/瓶，检验合格后入库。
其中，以上操作均是在符合GB17405要求的30万级生产洁净区以上条件下进行的。
实施例2：
一种增强免疫力的保健胶囊，包括以下按重量份计的组份：玛咖粉16份、马鹿茸8份、人参提取物5份、韭菜子提取物2.5份、淫羊藿提取物3.5份、淀粉4.7份、硬脂酸镁0.3份。
如上所述的保健胶囊制备方法包括如下步骤：
a、预处理：将处方量的马鹿茸进行60Co辐照灭菌，剂量为5KGy，备用；
b、粉碎、过筛：将辐照灭菌后的马鹿茸粉碎，过80目筛；分别称取处方量的玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉、硬脂酸镁，然后分别过80目筛，备用；
c、混合：将过筛后的马鹿茸粉、玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉置于混合机混合25min，至色泽均匀一致、无色差，得混合粉；再将所得的混合粉与硬脂酸镁混合5min，至色泽均匀一致、无色差，得总混粉；
d、填充、抛光、包装：将总混粉用胶囊填充机进行填充，按0.4g/粒的规格装量，正负偏差9％，得保健胶囊，填充后的胶囊用抛光机进行抛光处理，抛光后的合格胶囊进行内包装，包装规格为60粒/瓶，检验合格后入库。
其中，以上操作均是在符合GB17405要求的30万级生产洁净区以上条件下进行的。
实施例3：
一种增强免疫力的保健胶囊，包括以下按重量份计的组份：玛咖粉15份、马鹿茸9份、人参提取物4.5份、韭菜子提取物3份、淫羊藿提取物4.5份、淀粉3.6份、硬脂酸镁0.4份。
如上所述的保健胶囊制备方法包括如下步骤：
a、预处理：将处方量的马鹿茸进行60Co辐照灭菌，剂量为5KGy，备用；
b、粉碎、过筛：将辐照灭菌后的马鹿茸粉碎，过80目筛；分别称取处方量的玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉、硬脂酸镁，然后分别过80目筛，备用；
c、混合：将过筛后的马鹿茸粉、玛咖粉、人参提取物、韭菜子提取物、淫羊藿提取物、淀粉置于混合机混合35min，至色泽均匀一致、无色差，得混合粉；再将所得的混合粉与硬脂酸镁混合5min，至色泽均匀一致、无色差，得总混粉；
d、填充、抛光、包装：将总混粉用胶囊填充机进行填充，按0.4g/粒的规格装量，正负偏差9％，得保健胶囊，填充后的胶囊用抛光机进行抛光处理，抛光后的合格胶囊进行内包装，包装规格为60粒/瓶，检验合格后入库。
其中，以上操作均是在符合GB17405要求的30万级生产洁净区以上条件下进行的。
一、缓解体力疲劳功能动物试验：
将SPF级雄性KM小鼠按体重随机分为空白对照组和三个保健胶囊实验组，受试物剂量分别为0.4g/kg.bw、0.8g/kg.bw和1.2g/kg.bw(分别相当于人体推荐摄入量的10、20和30倍)。各剂量组分别称取2g、4g和6g胶囊样品，溶于100ml蒸馏水中，按20ml/kg.bw灌胃，空白对照组动物灌胃等量的蒸馏水，每日一次，连续灌胃30天后分别进行以下实验。
1、负重游泳实验：末次给予受试物30min后，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水温25℃±1℃记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。
结果如表1所示，本发明的保健胶囊各剂量组小鼠的负重游泳时间与空白对照组比较均有所增加且0.8g/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P<0.05)。
表1保健胶囊对小鼠负重游泳时间的影响
2、血乳酸测定：末次给予受试物30min后，将动物置温度为30℃的水中不负重游泳10min，并于游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min各采眼球血20pL测定乳酸含量。并按以下公式计算血乳酸曲线下面积，以判断运动后血乳酸变化情况。
其中，血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min血乳酸值+2×游泳后休息20min血乳酸值)
表2保健胶囊对小鼠血乳酸含量的影响
结果如表2所示，保健胶囊游泳前、游泳后即刻、游泳后20min血乳酸水平以及三个时点血乳酸曲线下面积与空白对照组比较无差异(P>0.05)。
3、血清尿素氮测定：末次给予受试物30min后，将小鼠置温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5mL，血凝固后取血清用二乙酰一肟法测定血清尿素氮含量。
表3保健胶囊对小鼠血清尿素氮含量的影响
结果如表3所示，保健胶囊各剂量组小鼠的血清尿素氮与空白对照组比较均有所减少且0.4g/kg.bw剂量组血清尿素氮低于空白对照组(P<0.05)。
4、肝糖原测定：于末次给予受试物后30min处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干后置于冰面上的平皿内，迅速称取肝脏100mg，测定肝糖原含量(蒽酮法)。
表4保健胶囊对小鼠肝糖原含量的影响
结果如表4所示，保健胶囊各剂量组小鼠的肝糖原与空白对照组比较均有所增加且0.4g/kg.bw剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P<0.05)。
本次实验采用SPF级KM小鼠，本发明的保健胶囊按人体推荐剂量的10、20、30倍连续灌胃30天，结果表明：保健胶囊0.8g/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组(P<0.05)；0.4g/kg.bw剂量组肝糖原含量显著高于空白对照组(P<0.05)；0.4g/kg.bw剂量组血清尿素氮含量显著低于空白对照组(P<0.05)。依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)的评价标准，本发明所述的保健胶囊具有缓解体力疲劳的功能。
二、增强免疫力功能动物试验：
将SPF级雄性KM小鼠适应性喂养3天后，按体重随机分为空白对照组和三个保健胶囊实验组。受试物剂量分别为400mg/kg.bw、800mg/kg.bw、1200mg/kg.bw(分别相当于人体推荐摄入量的10、20和30倍)。灌胃液配制：称取1.2g、2.4g和3.6g保健胶囊内容物样品，分别溶于60ml蒸馏水中，按20ml/kg.bw灌胃。空白对照组动物以蒸馏水灌胃，各实验组动物以相应剂量的保健胶囊内容物样品，每日一次，连续灌胃30天后分别进行以下实验。
1、血清溶血素测定(血凝法)：在连续灌胃的第25天，动物腹腔注射2％SRBC 0.2ml免疫，继续灌胃5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置1h，剥离，2000r/min下离心10min，收集血清，用生理盐水将血清作倍比稀释，每份稀释12孔，将不同稀释度的血清置于血凝板中，每孔100μL，再加入0.5％SRBC悬液l00μL，混匀，置湿盒37℃3h后观察结果，记录每孔的凝集程度。按下式计算抗体积数。
抗体积数＝(S1+2S2+3S3+……nSn)
式中1、2、3……n代表对倍稀释的指数，S代表凝集程度的级别。
结果如表5所示，保健胶囊400mg/kg.bw剂量组抗体积数显著高于空白对照组(P<0.05)。
表5保健胶囊对小鼠血清溶血素产生的影响
2、抗体生成细胞检测(Jeme改良玻片法)：在连续灌胃的第25天，动物腹腔注射2％SRBC 0.2ml免疫，继续灌胃5天后，颈椎脱臼处死动物，无菌取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank's液洗3次，用完全1640培养液配成5xl06个/ml细胞悬液备用。在含有0.5ml表层培养基(45～50℃)的小试管中加50μL 10％SRBC和20μL脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于己刷琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中培养1.5h，在玻片架凹槽内加入SA缓冲液稀释的补体，继续培养1.5h后，计数溶血空斑数，以空斑数/106脾细胞表示。
结果如表6所示，保健胶囊三个剂量组空斑数显著高于空白对照组。
表6保健胶囊对小鼠抗体生成细胞产生的影响
注：*与空白对照组比较，P<0.05
3、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)：连续灌胃30天后，颈椎脱白处死动物，取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank's液洗3次，用完全1640培养液配成2xl07个/ml细胞悬液。将每只动物的细胞悬液取300μL分置于96孔培养板中，每孔100μL，每孔加靶细胞(YAC-1细胞，4xl05个/ml)l00μL，同时做靶细胞自然释放孔(靶细胞l00μL+培养液l00μL)及最大释放孔(靶细胞l0μL+1％NP-40l00μL)各8孔，37℃5％CO2培养4h，取出1500r/min下离心5min。将各孔上清液l00μL置于另一培养板中，每孔再加入l00μL基质液，10min后加lmol/L HC1 30μL终止反应，在492nm处测定O.D.值，按下式计算NK细胞活性率。
结果如表7所示，保健胶囊三个剂量组NK细胞活性率显著高于空白对照 组(P<0.05)。
表7保健胶囊对小鼠NK细胞活性的影响
注：*与空白对照组比较，P<0.05
结论：本实验采用SPF级雄性Balb/c小鼠，保健胶囊按人体推荐剂量的10、20、30倍连续灌胃30天，结果表明：在血清溶血素测定实验中，保健胶囊400mg/kg.bw剂量组抗体积数显著高于空白对照组(P<0.05)；在抗体生成细胞检测中，保健胶囊400mg/kg.bw剂量组空斑数显著高于空白对照组(P<0.05)；在NK细胞活性测定实验中，保健胶囊三个剂量组NK细胞活性率显著高于空白对照组(P<0.05)。依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)的评价标准，本发明的保健胶囊具有增强免疫力的功能。
三、安全性毒理学评价试验：
1、急性毒性试验(MTD法)
SD大鼠(体重180g-220g)20只，雌雄各半。设15g/kg.bw—个剂量组。准确称取受试物90g，加蒸馏水至240ml混悬，按2ml/100g.bw于动物空腹状态下分2次经口灌胃，间隔4小时，灌胃后观察两周内死亡动物数及一般健康情况，根据最大耐受量判断受试物的急性毒性。
结果见表8，保健胶囊15g/kg.bw剂量经口染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状或不良反应。即本检品对雌、雄性SD大鼠的急性经口MTD 大于15g/kg.bw，属无毒类。
表8保健胶囊对SD大鼠的急性经口毒性试验结果
2、大鼠30天喂养试验
断乳SD大鼠按体重随机分为四组，每组20只，雌雄各半。试验设一个对照组(基础饲料)和1.2、2.8和4.0g/kg.bw三个受试物剂量组(分别相当于人体推荐摄入量的30、70和100倍)。饲料配制方法：称取180g、420g和600g样品，掺入到基础饲料中，配成15kg饲料，并加工成颗粒饲料喂饲动物。动物自由摄食，连续30天，观察小鼠情况。
结果：对照组和3个剂量组动物在30天喂养期间，摄食、饮水、大小便正常，生长发育情况和一般表现良好，未观察到明显行为改变和中毒表现。
3、小鼠精子畸形试验：昆明种雄性小鼠(体重25g-35g)随机分为5组，每组5只。设阴性对照组(蒸馏水)、阳性对照组(CP 40mg/kg.bw)和2.5、5.0、10.0g/kg.bw三个保健胶囊剂量组(各组分别称取2.5、5.0和10.0g受试物，各加蒸馏水至20ml混悬)，按2ml/100g.bw经口灌胃动物，连续5天。于首次灌胃后第35天处死动物，取双侧附睾，按标准程序制片，每只动物观察1000个完整精子，记录各类畸形精子数。
结果如表9所示，阳性对照组的精子畸形率显著高于阴性对照组(P<0.01),保健胶囊各剂量组的精子畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05)， 显示本发明的保健胶囊在小鼠精子畸形试验中为阴性结果。
表9保健胶囊对小鼠血乳酸含量的影响
注：“0”为阴性对照；与阴性对照比较**，P<0.01。
结论：保健胶囊对大鼠的急性经口MTD大于15g/kg.bw，判属无毒类。小鼠精子畸形试验为阴性结果。在大鼠30天喂养试验中未见动物健康状况、生化、血液学指标和器官组织形态的异常变化，据此初步估计本发明的保健胶囊最大无作用剂量大于4.0g/kg.bw(人体推荐摄入量的100倍)。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。