一种具有免疫调节功能的维吾尔保健茶浸提工艺的制作方法

本发明涉及保健茶提取领域，具体而言，涉及一种具有免疫调节功能的维吾尔保健茶浸提工艺。

背景技术：

维吾尔保健茶，也称维吾尔茶、维吾尔土茶、维吾尔香茶，迄今已有1600多年的历史。维族人民通过在日常生活中饮茶，从而起到解腻、助消化的作用；同时，维族人民又根据维吾尔医药学和经验，以茶为基础，并添加多种药食两用的植物，总结和实践得到了一系列用于日常调养、增加营养和预防疾病的功能性饮品，形成了独具特色的维吾尔保健茶，此类保健茶茶汤红浓、滋味芳香，醇厚可口。

维吾尔传统医学善于采用食疗的方法养生，饮用保健茶用于防病健身也是历史悠久。传统的维吾尔保健茶并没有统一的配方，大多是由小豆蔻、肉豆蔻、肉桂、小茴香、丁香、胡椒、生姜、孜然、红枣、甘草、枸杞等药材中的几味与茯砖茶或者红茶复配而成。对于维吾尔茶所能够起到的功效，维吾尔医学给出了专业性的解释，认为维吾尔茶具有消除疲劳、疏肝养胃、祛风除寒、提神壮肾和利尿的功效，通过对其配方调整，还可以产生不同的功效，夏季可以消暑、生津解渴，冬季则有增加热量和御寒的功效。

现阶段，对于维吾尔茶的研究，主要关注点还是在于配方和制备工艺流程，对于维吾尔茶中有效成分提取和分析的研究并不多见，更没有对有效成分的提取方法和条件步骤的优化。

有鉴于此，特提出本发明。

技术实现要素：

本发明的第一目的在于提供一种具有免疫调节功能的维吾尔保健茶浸提工艺，所述方法中，通过对原料进行粉碎、冻干以及水浴浸提，从而能够将保健茶中的酚类等有效成分进行充分提取。

本发明的第二目的在于提供一种由本发明方法提取得到的维吾尔保健茶浸提液。

本发明的第三目的在于提供一种包含本发明维吾尔保健茶浸提液的保健品和/或药物。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种具有免疫调节功能的维吾尔保健茶浸提工艺，所述方法包括如下步骤：

将豆蔻、红花、玫瑰、丁香、薄荷、小茴香、甘草、干姜、姜黄以及茯砖茶分别研磨过筛，冻干后混合；将所得混合物水浴浸提，离心后收集上清液，即为维吾尔保健茶浸提液；优选的，所述豆蔻为印度豆蔻。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，按照重量份数计，各组分用量如下：豆蔻1～3份，红花2～5份，玫瑰2～5份，丁香0.2～1份，薄荷1～3份，小茴香1～3份，甘草1～3份，干姜0.2～1份，姜黄0.5～2份，以及茯砖茶5～15份。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，按照重量份数计，各组分用量如下：豆蔻1.5～2份，红花2～3份，玫瑰3～4份，丁香0.3～0.6份，薄荷2～3份，小茴香1.5～2份，甘草1～2份，干姜0.3～0.6份，姜黄0.5～1份，以及茯砖茶10～15份

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，过筛所用筛网的孔径为10～30目。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，水浴浸提的料液比为1:30～1:70g/ml。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，水浴浸提的温度为50～90℃。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，水浴浸提的时间为5～45min。

可选的，本发明所述维吾尔保健茶浸提方法中，离心的转速为3000～4000r/min；和/或，离心的时间为10～15min。

同时，本发明还提供了由本发明所述工艺得到的维吾尔保健茶浸提液。

进一步的，本发明也提供了包含本发明维吾尔保健茶浸提液的保健品和/或药物。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明方法中，通过对于提取步骤流程、物料比、提取温度以及提取时间等条件的调整和优化，从而能够更为有效、高效的将维吾尔茶中的酚类等有效成分进行提取，填补了领域的空白；

(2)本发明提取方法操作简易、步骤简便，且无需使用大型仪器，适于工业化生产；

(3)本发明维吾尔茶浸提液中有效物质含量高，具有良好的保健作用效果。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为没食子酸标准曲线；

图2为维吾尔保健茶浸提液和vc的还原力回归曲线图；

图3为不同浓度的维吾尔保健茶浸提液对小鼠巨噬细胞活力影响；

图4为不同浓度的维吾尔保健茶浸提液对细胞分泌no的影响。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

虽然维吾尔保健茶具有良好的保健功效，但对于茶叶中有效物质如何进行有效提取和分析的研究并不多见。本发明中，通过对原料处理方法、提取条件步骤的调整和优化，提供了一种能够有效的将维吾尔保健茶中的酚类等有效物质进行充分提取的方法，具体的，本发明方法包括如下步骤：

将豆蔻、红花、玫瑰、丁香、薄荷、小茴香、甘草、干姜、姜黄以及茯砖茶分别研磨后过筛，冻干后混合；

本发明用以提取的维吾尔保健茶原料如上，由将豆蔻、红花、玫瑰、丁香、薄荷、小茴香、甘草、干姜、姜黄以及茯砖茶所组成；

优选的，按照质量份数计，所述原料用量如下：豆蔻1～3份，红花2～5份，玫瑰2～5份，丁香0.2～1份，薄荷1～3份，小茴香1～3份，甘草1～3份，干姜0.2～1份，姜黄0.5～2份，以及茯砖茶5～15份；

更优选的，按照质量份数计，所述原料用量如下：豆蔻1.5～2份，红花2～3份，玫瑰3～4份，丁香0.3～0.6份，薄荷2～3份，小茴香1.5～2份，甘草1～2份，干姜0.3～0.6份，姜黄0.5～1份，以及茯砖茶10～15份；

进一步优选的，按照适量份数计，所述原料用量如下：印度豆蔻1.5份，红花3份，玫瑰3份，丁香0.3份，薄荷2份，小茴香1.5份，甘草1份，干姜0.3份，姜黄0.5份，以及茯砖茶15份；

将如上任一原料配方中各组分分别研磨，然后过筛，所用筛网的孔径优选的为10～30目；更优选的为15～20目；进一步优选的为18目；

然后，将筛选后的各组分在冻干机中进行冻干处理，处理的时间优选的为24h，冻干温度优选的为-5～-20℃；在冻干处理后，将各组分进行混合，得到混合物；

将所得混合物水浴浸提；

在本发明一个优选的方案中，水浴浸提的料液比(即混合物的质量克数与水体积毫升数的比例)控制在1:30～1:70g/ml；和/或，水浴浸提的温度控制在50～90℃；和/或，时间控制在5～45min；

更优选的，本发明中，料液比控制在1:50～1:60g/ml，浴浸提的温度控制在80～90℃，时间控制在20～25min；

通过对浸提时间、温度以及料液比的调整和优化，从而能够更加有效的将维吾尔茶中的有效成分提出出来，并提高酚类等有效物质的提取率；

在水浴浸提后，对混合体系进行离心分离，优选的，离心的转速控制在3000～4000r/min；和/或，离心的时间控制在10～15min；

离心后，将上清液收集，即为得到维吾尔茶浸提液。

由上述方法所得到的维吾尔茶浸提液中具有较高的酚类物质等功能组分含量，因而具有良好的抗氧化和提高免疫力的作用，并能够进一步用于制备具有抗氧化、提高免疫力功效的保健品或药品；

在具体的使用过程中，可以单独服用本发明的维吾尔茶浸提液或进一步的浸提液浓缩液，从而起到抗氧化和/或提高免疫的功效；或者将本发明维吾尔茶浸提液或进一步的浸提液浓缩液与其他功能组分和/或辅料作为复配营养液/药物服用。

实施例1

分别称取印度豆蔻1.5g，红花3g，玫瑰花3g，丁香0.3g，薄荷2g，小茴香1.5g，甘草1g，干姜0.3g，姜黄0.5g以及茯砖茶15g；

然后，将各原料分别粉碎后过18目筛，然后在-20℃条件下冻干24h，然后混合，得到混合物；

将混合物按照料液比1:40g/ml的比例在水浴锅中以水浸提，水浴的温度为70℃，提取的时间为25min；

然后，将混合体系在转速为3000r/min的条件下离心处理10min，并收集上清液，即为实施例1的维吾尔保健茶浸提液。

实施例2

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例2的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例2中，料液比为1:60g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例3

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例3的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例3中，提取时间为15min，料液比为1:50g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例4

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例4的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例4中，提取温度为80℃，料液比为1:50g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例5

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例5的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例5中，提取时间为35min，料液比为1:50g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例6

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例6的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例6中，提取时间为15min，提取温度为80℃，料液比为1:60g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例7

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例6的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例7中，料液比为1:40g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例8

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例8的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例8中，提取时间为35min，提取温度为80℃，料液比为1:60g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例9

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例9的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例9中，提取时间为25min，提取温度为90℃，料液比为1:60g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例10

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例6的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例10中，提取时间为25min，提取温度为90℃，其余均与实施例1相同。

实施例11

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例11的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例11中，提取时间为15min，提取温度为80℃，料液比为1:40g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例12

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例12的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例12中，提取时间为35min，提取温度为80℃，其余均与实施例1相同。

实施例13

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例13的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例13中，提取温度为90℃，料液比为1:60g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例14

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例14的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例14中，提取时间为35min，提取温度为90℃，料液比为1:50g/ml，其余均与实施例1相同。

实施例15

参照实施例1的方法得到维吾尔保健茶浸提液，即为实施例6的维吾尔保健茶浸提液；

其中，实施例15中，提取时间为15min，提取温度为90℃，料液比为1:50g/ml，其余均与实施例1相同。

实验例1维吾尔保健茶浸提液总酚含量测定

(1)标准曲线制定

准确称取没食子酸0.100g，用重蒸馏水溶解后定容至100ml，得到1mg/ml没食子酸标准溶液。

参照国标gb/t8313-2008《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》的方法，用重蒸馏水配置不同质量浓度的没食子酸标准溶液(0、15.625、31.25、62.5、125、250、500μg/ml)，各吸取20μl加入96孔板后加100μl的20％福林酚试剂，反应3min～8min内，加入80μl1mol/lna2co3溶液，用酶标仪摇动1min，混匀放置30min后测a760nm。

以没食子酸质量浓度为横坐标，a760nm为纵坐标，得到如图1所示的没食子酸标准曲线，标准方程y＝0.0051x+0.0243，r²＝0.9996；式中：y为吸光度；x为总酚质量浓度/(μg/ml)。

(2)维吾尔保健茶浸提液总酚含量的测定

取20μl维吾尔保健茶浸提液，按照标准曲线的测定方法，测定样品的a760nm，根据回归方程计算维吾尔调和土茶滤液中总酚的含量，如式(1)所示：

式中:ρ为总酚质量浓度/(mg/ml)；v为浸提液体积/ml；m为维吾尔保健茶质量/g。

按照如上所述方法分别测试实施例1-15的维吾尔保健茶浸提液中的总酚含量(每组实验重复3次，计算平均值)，结果如下表所示：

由如上表格的数据对比可知，不同料液比、提取时间以及提取温度条件下，所能够提取得到的总酚的含量并不相同，由此可见，无论是料液比、提取温度，还是提取时间等浸提条件对于提取效率和有效物质的提取率都是有所影响的。

进一步的，综合如上的实验结果，在料液比1:50～1:60g/ml，浸提温度80～90℃，时间20～25min的条件下能够获得较高多酚提取率。

实验例2

(1)维吾尔保健茶浸提液还原能力

配制0.2ml不同质量浓度的维吾尔保健茶浸提液(即不同总酚浓度的维吾尔保健茶浸提液)和vc溶液，与0.5ml磷酸缓冲液(0.2mmol/l，ph值6.6)和0.5ml铁氰化钾溶液(l.0％，质量分数)混匀，50℃孵育30min，迅速冷却；加入0.5ml三氯乙酸溶液(10％，质量分数)，混合后3000r/min离心10min，取上清液0.5ml，加入0.5ml纯水和0.1ml三氯化铁溶液(0.1％，质量分数)混匀，测定混合物溶液在700nm的吸光度；

根据测试数据得到如图2所示的维吾尔保健茶浸提液和vc的还原力回归曲线，由图2可知，维吾尔保健茶浸提液和vc均具有一定的还原力，且还原力随着体系质量浓度(维吾尔保健茶浸提液以总酚计)的增大而增强，呈明显的量效关系。

进一步的，维吾尔保健茶浸提液的还原力回归方程：y＝0.009x+0.096，r²＝0.993，vc还原力线性回归方程：y＝0.005x+0.012；

由此可见，在同等质量浓度下，维吾尔保健茶浸提液的fe³⁺还原能力要强于vc，本发明维吾尔保健茶具有良好的抗氧化保健功能。

(2)维吾尔保健茶浸提液细胞毒性试验

实验方法

mtt工作液配制：称取0.10g甲氮甲唑蓝，加入20mlpbs溶解，避光过滤，配制成5mg/mlmtt溶液。

mtt终止液配制：称取20.00gsds，加入0.176ml浓盐酸后，定容至20ml。

采用mtt法检测样品对raw264.7细胞毒性的影响。待细胞长至对数期后，取细胞悬浮液稀释细胞数为1×10⁶个/ml，以每孔100μl接种于96孔培养板，培养16～18h。向96孔板中加入不同总酚浓度的维吾尔保健茶浸提液，每个浓度设3个重复，于37℃、5％co2培养箱中培养24h，吸去上清液，每孔加入100μlmtt工作液，继续培养4h，加入100μlmtt终止液。待完全溶解后，用酶标仪测定550nm处吸光度值，结果如图3所示。

由图3的测试结果可知，不同浓度的维吾尔保健茶浸提液(以总酚计)对小鼠巨噬细胞活力影响的测试结果表明，各样品处理组细胞存活率与空白对照组相比较差异不显著。

由此可见，在一定浓度范围(6.25～100ug/ml，以总酚计)内，本发明维吾尔保健茶浸提液对细胞无明显的毒性作用。

(3)维吾尔保健茶浸提液对raw264.7细胞分泌no的影响

1.2不同浓度样品刺激raw264.7细胞释放no

取对数生长期细胞，调整细胞数为1×10⁶个/ml，以每孔100μl接种于96孔培养板，培养16h。以不同浓度的维吾尔保健茶浸提液(以总酚计)处理细胞，24h后griess法检测细胞上清液中no的含量。

取不同浓度的维吾尔保健茶浸提液刺激raw264.7细胞培养液中，采用griess法检测，结果如图4所示；

由图4结果可知，正常对照组raw264.7巨噬细胞上清液中仅含少量的no，添加6.25ug/ml、12.5ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml水提取，细胞培养液中no含量分别为1.52um、4.25um、14.14um、24.94um、37.24um，较空白对照组显著提高，表明维吾尔保健茶水提物对细胞免疫具有正向调节作用，促进免疫因子的释放，且效果明显。

本发明中采用粉碎、冷冻、混合以及水浴浸提等方法以得到维吾尔保健茶浸提液，同时通过对浸提的料液比、温度以及时间等条件的调整和优化，进一步提高了酚类等有效物质的提取率。同时，由本发明方法所提取得到的吾尔保健茶浸提液不会对细胞活性产生任何影响，同时还具有良好的抗氧化还原能力，并能够提高细胞免疫能力。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。