专利名称：具有光学活性的环丙烷羧酸的制备方法
技术领域：
本发明涉及(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸的制备方法。
用通式(1)表示的2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸，
(其中，X是氢原子或氯原子；当X是氢原子时Y是甲基，而当X是氯原子时Y是甲基或氟原子)，构成具有高效杀虫活性的同被称为合成的拟除虫菊酯的酸部分。
由于这些环丙烷羧酸在其C1和C3位有不对称碳原子，所以，有4种环丙烷羧酸立体异构体。而且，该拟除虫菊酯(其酸性部分是这些立体异构体之一)的杀虫活性随所要杀除的害虫，制剂的种类等变化。因此，人们需要一种利于工业化的生产所需特定环丙烷羧酸立体异构体的方法。
在此情况下，经过对如何建立利于工业化生产(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法深入研究之后，发明者成功地实现了本发明，发明者发现从节杆菌属(Genus Arthrobacter)微生物衍生的酯酶可以作用于通式(2)代表的2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯，
(其中，X是氢原子或氯原子；当X是氢原子时Y是甲基，而当X是氯原子时Y是甲基或氟原子；及R是C1-C4烷基。)使该酯被不对称水解。
本发明提供1.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由通式(2)表示的2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能与其作用的酯酶反应，并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被拆分成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸；2.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由通式(3)表示的2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸；3.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由通式(4)表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1 R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸；4.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由通式(5)表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸；5.根据上面1-4的方法，其中所说的酯酶是从节杆菌属微生物衍生的酯酶；及6.根据上面1-4的方法，其中所说的酯酶是从节杆菌SC-6-98-28菌株(FERM BP-3658)衍生的酯酶。
在包含于上述1-4的通式3-5表示的酯化合物中的环丙烷环的3位有以取代的乙烯基的双键为基础的几何异构体，即E-异构体和Z-异构体。这些几何异构体及其混合物以各种比例被用作本发明原料[2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯]，因此，可以得到对应于原料的终产物[(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸]。
本发明应用范围将随着下文描述的深入变得明显起来。但是，应该理解，详述和具体实施例以及本发明优选实施方案仅仅是为了说明本发明，因为，根据本发明详述，在本发明精神和范围之内的各种修改和改进对本领域专业人员都将是显而易见的。
另外，贯穿本说明书和权利要求书的术语“包含(comprise)”及其变化形式(comprises或comprising)，除非另有说明，将被理解为指包括指出的整体或步骤或者一组整体或步骤，但不排除任何其它整体或步骤或者一组整体或步骤。
通式(3)表示的2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯被用作本发明原料，它可以用，例如，《化学会志(J.Chem.Soc.)》，1076(1970)所述方法制备。羧酸酯可以是甲酯，乙酯，丙酯，丁酯等，其中，优选甲酯和乙酯。
通式(4)表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯被用作本发明原料，它可以用，例如，《化学综述(Chemical Listy)》52，688(1958)所述方法制备。羧酸酯可以是甲酯，乙酯，丙酯，丁酯等，其中，优选甲酯和乙酯。
通式(5)表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯被用作本发明原料，它可以用，例如，《化学综述(Chemical Listy)》52，688(1958)所述方法制备。羧酸酯可以是甲酯，乙酯，丙酯，丁酯等，其中，优选甲酯和乙酯。
用于本发明的酯酶是能够作用于并能不对称水解2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯使之成为(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯的酯酶，或者是能够作用于并能不对称水解2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯使之成为(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯的酯酶，或者是能够作用于并能不对称水解2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯使之成为(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯的酯酶。
用于本发明的酯酶，例如，是从节杆菌属微生物衍生的并且能够引起上述不对称水解的酯酶。例如，该酯酶可以由节杆菌SC-6-98-28菌株[FERM BP-3658保存在“国家生物科学和人类技术研究所工业科学技术处(National Institute ofBioscience and Human-Technology Agency of Industrialscience and Technology，地址1-3，Higashi 1 chomeTsukuba-shi Ibaraki-ken 305-0046，日本)”，根据布达佩斯条约的国际保藏机构]。优选用基因重组微生物制备该酯酶，因为这种微生物中已经引入了基因编码的酯酶，因此可以由它制备酯酶。更具体地，例如，是用公开的日本专利申请(JP-A)5-56,787号所述的基因重组微生物制备。
为了用上述微生物制备用于本发明的酯酶，可以采用常规方法将微生物接种到无菌液体培养基上，然后在有氧条件下将微生物在20-40℃培养1-8天。另外，可以采用补料分批培养的方式，即在生长过程中添加培养基。
对用于本发明的培养基组合物没有特殊限制，但条件是对用于本发明的微生物是可利用的，并且可以是用来培养常规微生物的培养基组合物。可提供碳和氮的物质包括葡萄糖，甘油，淀粉，糊精，糖蜜，油和脂肪，大豆粉，玉米浆，酵母提取物，牛肉提取物，动物和植物蛋白的水解物如聚胨，等等。有机盐和无机盐的实例包括钾、钠、镁、钙、铁、锰、钴、锌等的氯化物，硫酸盐，乙酸盐，碳酸盐和磷酸盐，更具体地，有氯化钾，氯化钠，氯化钴，硫酸镁，硫酸亚铁，硫酸锰，硫酸锌，硫酸铜，乙酸钠，碳酸钙，碳酸钠，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，磷酸氢钠和磷酸氢二钠，以及铵盐，如硫酸铵，氯化铵和硝酸铵，脲，等等。如果需要，也可以在培养基中加些通式(3)、(4)或(5)表示的脂肪酸酯或酯化合物。在使用基因重组微生物时，基因表达诱导物如异丙硫基-β-D-半乳糖苷(IPTG)可以在适当的点加到微生物的对数生产期中。
根据本发明方法，通式(2)代表的2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯，即通式(3)代表的2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯，通式(4)代表的2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯，或通式(5)代表的2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯的不对称水解反应是通过将酯与酯酶混合实现的。用于本发明的酯酶是，例如，含酯酶材料形式，如培养微生物的含酯酶培养液形式，微生物细胞的悬浮液形式，熔化的微生物细胞的悬浮液形式，酯酶的提取液形式，浓酯酶溶液，或它们的处理产物，如粗酯酶或纯酯酶的水溶液。如果需要，该微生物或酯酶可以被固定后再用于本发明方法。
虽然反应温度将根据反应的最佳温度和所用酯酶的热稳定性变化，但通常在20-70℃范围。因为，如果温度太高，酯酶的稳定性将会降低，而且在低温下反应速度变得不能接受地低。优选的反应温度是30-60℃。虽然pH值要根据反应的最佳温度和所用酯酶的稳定性变化，但反应期间的pH值通常在4-11范围，较理想的pH值是在7-10范围。
不对称水解反应完成之后，将形成的(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸，即(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸，(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸或(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸与未反应的酯分离，得到这些羧酸。为了分离回收羧酸，可采用溶剂萃取，柱色谱法，蒸馏等方法进行。
例如，回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸，即(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸，(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸或(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法包括以下步骤用有机溶剂，如甲基异丁酮，乙酸乙酯，乙醚，甲苯等，萃取反应溶液，与未反应的酯分离，过滤水层，加入无机酸，如盐酸，硫酸等，或有机酸，如乙酸等，使水溶液的pH值移到酸区，用有机溶剂，如甲基异丁酮，乙酸乙酯，乙醚，甲苯等，萃取该水溶液，过滤油层，并蒸馏掉有机溶剂，进而得到所要的产物。将未反应的酯进行处理，如外消旋化，处理后的酯可用作本发明方法的原料。或者，根据目的，将未反应的酯进行处理如水解，将其转变成拟除虫菊酯。
实施例下面将用实施例进-步说明本发明。因此，下列实施例被认为是说明而非限制本发明。
实施例1将100mL液体培养基(1L水中含有5g甘油，6g酵母提取物，溶有9g磷酸二氢钾和4g磷酸氢二钾，pH7.0)放在500mLErlenmeyer烧瓶中。给培养基灭菌，然后加入氨苄青霉素使其最终浓度为50μg/mL。将一铂环量斜面培养的大肠杆菌(其中已经按下面实施例所述方法引入了从杆细菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因)接种到培养基中。将培养基在30℃旋转摇动培养24小时，下一步，将1500mL液体培养基(1L水中含有15g甘油，25g酵母提取物，溶有0.4g磷酸二氢钾，2g硫酸镁和0.1g硫酸亚铁，pH7.0)放入容积为3L的小发酵罐(MDL型，由B.E.Marubishi Co.，Ltd.制造)，然后给该培养基灭菌。将15mL上述培养溶液接种到培养基中。通风并振荡着在30℃培养，然后在微生物对数生长期中间(培养开始后约13小时)加入使最终浓度为1mM的IPTG(异丙硫基-β-D-半乳糖苷)，诱导酯酶表达。之后，在培养基中加入灭菌后的新培养基，并继续培养40小时。
在80mL稀释(0.5M碳酸缓中溶液，pH9.5)过的培养溶液中加入4g 2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸甲酯(1R-立体异构体/1S-立体异构体＝50/50，反-立体异构体/顺-立体异构体＝98/2)，并将溶液在45℃搅拌20小时，同时将pH值调至9.5。取-部分反应溶液作为样品加入盐酸酸化，然后用乙酸乙酯萃取。在萃取液中加入内部标准物质(肉桂酸甲酯)后用气相色谱(柱HR20-M，0.53φ，30m，1μ，ULBON制造)分析，以测量酯的水解率，结果水解率为46％。
然后，在剩下的反应溶液中加入甲苯。萃取和分出各层后除去甲苯层。过滤所得水层，通过添加盐酸将其酸化。在水溶液中加入甲苯进行溶剂萃取。将如此得到的甲苯相浓缩并蒸发，得到1.5g 2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸。将如此得到的2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸进行液相色谱(柱CHIRALCEL OD，4.6φ×250mm，Daicel Ltd.制造)分析，以测量立体异构体的比例。结果是1R-反-立体异构体/1S-反-立体异构体/1R-顺-立体异构体/1S-顺-立体异构体＝100/0/0/0。
实施例2将100mL液体培养基(1L水中含有5g甘油，6g酵母提取物，溶有9g磷酸二氢钾和4g磷酸氢二钾，pH7.0)放在500mLErlenmeyer烧瓶中。给培养基灭菌，然后加入氨苄青霉素使其最终浓度为50μg/mL。将一铂环量斜面培养的大肠杆菌(其中已经按下面实施例所述方法引入了从节杆菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因)接种到培养基中。将培养基在30℃旋转摇动培养24小时，下一步，将1500mL液体培养基(1L水中含有15g甘油，25g酵母提取物，溶有0.4g磷酸二氢钾，2g硫酸镁和0.1g硫酸亚铁，pH7.0)放入容积为3L的小发酵罐(MDL型，由B.E.Marubishi Co.，Ltd.制造)，然后给该培养基灭菌。将15mL上述培养溶液接种到培养基中。通风并振荡着在30℃培养，然后在微生物对数生长期中间(培养开始后约13小时)加入使最终浓度为1mM的IPTG(异丙硫基-β-D-半乳糖苷)，诱导酯酶表达。之后，在培养基中加入灭菌后的新培养基，并继续培养40小时。
在80mL稀释(0.5M碳酸缓冲溶液，pH9.5)过的培养溶液中加入4g 2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸甲酯(1R-立体异构体/1S-立体异构体＝50/50，反-立体异构体/顺-立体异构体＝98/2)，并将溶液在45℃搅拌20小时，同时将pH值调至9.5。取一部分反应溶液作为样品加入盐酸酸化，然后用乙酸乙酯萃取。在萃取液中加入内部标准物质(肉桂酸甲酯)后用气相色谱(柱HR20-M，0.53φ，30m，1μ，ULBON制造)分析，以测量酯的水解率，结果水解率为47％。
然后，在剩下的反应溶液中加入甲苯。萃取和分出各层后除去甲苯层。过滤所得水层，通过添加盐酸将其酸化。在水溶液中加入甲苯进行溶剂萃取。将如此得到的甲苯相浓缩并蒸发，得到1.6g 2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸。将如此得到的2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸进行液相色谱(柱CHIRALCEL OD.4.6φ×250mm，DaicelLtd.制造)分析，以测量立体异构体的比例。结果是1R-反-立体异构体/1S-反-立体异构体/1R-顺-立体异构体/1S-顺-立体异构体＝100/0/0/0。
实施例3将100mL液体培养基(1L水中含有5g甘油，6g酵母提取物，溶有9g磷酸二氢钾和4g磷酸氢二钾，pH7.0)放在500mLErlenmeyer烧瓶中。给培养基灭菌，然后加入氨苄青霉素使其最终浓度为50μg/mL。将一铂环量斜面培养的大肠杆菌(其中已经按下面实施例所述方法引入了从节细菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因)接种到培养基中。将培养基在30℃旋转摇动培养24小时，下一步，将1500mL液体培养基(1L水中含有15g甘油，25g酵母提取物，溶有0.4g磷酸二氢钾，2g硫酸镁和0.1g硫酸亚铁，pH7.0)放入容积为3L的小发酵罐(MDL型，由B.E.Marubishi Co.，Ltd.制造)，然后给该培养基灭菌。将15mL上述培养溶液接种到培养基中。通风并振荡着在30℃培养，然后在微生物对数生长期中间(培养开始后约13小时)加入使最终浓度为1mM的IPTG(异丙硫基-β-D-半乳糖苷)，诱导酯酶表达。之后，在培养基中加入灭菌后的新培养基，并继续培养40小时。
在80mL稀释(0.5M碳酸缓冲溶液，pH9.5)过的培养溶液中加入4g 2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸甲酯(1R-立体异构体/1S-立体异构体＝50/50，反-立体异构体/顺-立体异构体＝98/2)，并将溶液在45℃搅拌20小时，同时将pH值调至9.5。取一部分反应溶液作为样品加入盐酸酸化，然后用乙酸乙酯萃取。在萃取液中加入内部标准物质(肉桂酸甲酯)后用气相色谱(柱HR20-M，0.53φ，30m，1μ，ULBON制造)分析，以测量酯的水解率，结果水解率为48％。
然后，在剩下的反应溶液中加入甲苯。萃取和分出各层后除去甲苯层。过滤所得水层，通过添加盐酸将其酸化。在水溶液中加入甲苯进行溶剂萃取。将如此得到的甲苯相浓缩并蒸发，得到1.6g 2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸。将如此得到的2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸进行液相色谱(柱CHIRALCEL OD，4.6φ×250mm，Daicel Ltd.制造)分析，以测量立体异构体的比例。结果是1R-反-立体异构体/1S-反-立体异构体/1R-顺-立体异构体/1S-顺-立体异构体＝100/0/0/0。
实施例4根据JP-A 5-56，787所述方法制备用于实施例1-3的大肠杆菌(其中已经引入由节杆菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因)。方法如下将质体PAGE-1(其中已经按JP-A 5-56，787所述方法引入了由节杆菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因)用限制酶Nsp(7524)V和Hind III消化，以切断含有酯酶基因转译区的DNA片段。然后，依照JP-A5-56,787所述将这些片段结扎在DNA片段上，这样的合成改变了酯酶基因引入密码子及其邻近的DNA序列，并通过用限制酶Bam HI和Hind III消化含虫胶助催化剂的表达载体pUC118(Takara Shuzo Co.，Ltd.制造)得到限制酶消化产物。在此方法中，发明者制备了处于虫胶助催化剂下游位置的节杆菌SC-6-98-28菌株衍生的酯酶基因用于大肠杆菌的表达质体。如此制备的表达质体被引入大肠杆菌(菌株JM105)。
综上所述，本发明可以制备通式(1)表示的(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸，该羧酸可用作利于工业化生产拟除虫菊酯方法的酸性成分。
权利要求
1.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由下面通式表示的2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中X是氢原子或氯原子；当X是氢原子时，Y是甲基，而当X是氯原子时，y是甲基或氟原子；及R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(取代的乙烯基)环丙烷-1-羧酸。
2.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由下面通式表示的2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸。
3.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由下面通式表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-1-丙烯基)环丙烷-1-羧酸。
4.制备(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸的方法，包括由下面通式表示的2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸酯与能对其作用的酯酶反应，
(其中，R是C1-C4烷基)并将该酯不对称水解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯，使得该酯被分解成(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸及其非对映体的酯；以及分离和回收(1R)-反-2，2-二甲基-3-(2-氯-2-氟乙烯基)环丙烷-1-羧酸。
5.根据权利要求1-4的方法，其中所说的酯酶是从节杆菌属微生物衍生的酯酶。
6.根据权利要求1-4的方法，其中所说的酯酶是从节杆菌SC-6-98-28菌株(FEKM BP-3658)衍生的酯酶。
全文摘要
本发明的目的是提供一种可以生产(1R)－反－2,2－二甲基－3－(取代的乙烯基)环丙烷－1－羧酸的方法,在工业化生产拟除虫菊酯的方法中该羧酸被用作酸性成分。包括由通式表示的2,2－二甲基－3－(取代的乙烯基)环丙烷－1－羧酸酯与能对其作用的酯酶反应,并将该酯不对称水解成上述羧酸及其非对映体的酯,以及分离和回收上述羧酸。
文档编号C12P7/40GK1262330SQ9910648
公开日2000年8月9日 申请日期1999年5月13日 优先权日1998年5月15日
发明者吹田喜数, 石井毅, 朝子弘之 申请人:住友化学工业株式会社