C下酶 解2小时，酶解物加热沸腾10分钟灭酶，6000r/min离心15分钟，上清液用截留分子量lkDa 的超滤膜过滤、脱盐，截留液进行浓缩、喷雾干燥，获得复合氨基酸粉末40g。
[0029] (3)按照复合氨基酸与牡蛎壳粉中钙离子最佳螯合条件为：pH值8,复合氨基酸与 牡嫩壳粉中妈离子质量比3 :l(mg:mg)，反应温度80°C，反应时间70min;取40g复合氨 基酸粉末和48g变性牡蛎壳粉，加入1L蒸馏水混合，搅拌，用NaOH调pH值为8,加热至温 度80°C，保温螯合70min。得到含高螯合盐的复合氨基酸螯合钙进行离心，去除不溶物；将 滤液减压浓缩，再加入95 %食用乙醇洗涤两次，抽滤，所得结晶在90°C烘箱中烘干，即得复 合氨基酸螯合钙68. 8g。
[0030] 实施例2
[0031] 本发明选用第一代钙制品碳酸钙、第二代钙制品乳酸钙、还有本发明的钙制品复 合氨基酸螯合钙均作为补钙剂，在动物体上进行了如下对比实验：
[0032] 实验一：复合氨基酸钙对小鼠被毛、皮肤和内脏器官的影响。
[0033] 步骤一：选取健康小白鼠40只，随机分4组，每组10只雌雄过半。3组除喂相同 的常规饲料外，另加不同的补钙剂进行对比实验，一组只喂养饲料做空白对比实验。补钙计 量的方法是：不同的补妈剂都折合成妈元素，即动物每公斤重，每天供妈元素的质量（mg. kg'cf1)。设4种处理：（1)复合氨基酸螯合钙组：供钙量为1.Omg.kg'cf1。喂养时不加维生 素D; (2)乳酸钙组：供钙量为1.Omg.kg'cf1; (3)碳酸钙组：加维生素D，供钙量为1.Omg. kg'cf1; (4)空白对照组：相同条件下喂养。
[0034] 步骤二：喂养期间记录小白鼠的生物学特征变化，14天后，解剖，观察内脏器官。
[0035] 实验结果：由动物实验一的观察看出，复合氨基酸螯合钙（1)组的小鼠被毛密致 程度，毛色洁白度，光泽度相比较而言，均好于乳酸钙（2)组、碳酸钙（3)组和空白对照（4) 组。解剖后发现复合氨基酸螯合钙（1)组的小鼠小肠毛细血管颜色较深，明显舒张，这说明 复合氨基酸螯合钙（1)组的吸收效果最好。若把复合氨基酸螯合钙作为补钙剂，换算成人 体用量时，每人每天计量应低于50mg为好。
[0036] 实验二：复合氨基酸螯合钙对小鼠骨钙的影响。
[0037] 步骤一：选取断乳一周的健康雄性大白鼠32只，随机分4组，每组8只。（1)组为 复合氨基酸螯合钙组，（2)组为乳酸钙组，（3)组为碳酸钙组，（4)组为空白对照组。
[0038] 步骤二：4组动物最初均喂养对照组饲料，一周后处死第（4)组大鼠，取出双侧股 骨待测。（1) (2) (3)组则分别开始喂添加复合氨基酸钙、乳酸钙、碳酸钙+维生素D的饲料， 四周后处死，取出双侧股骨待测。
[0039] 步骤三：双侧股骨全部称重后，置于经去离子水处理的石英坩埚内，在马弗炉中 (560±2) °C灰化20h后，以0. 1%稀硝酸定容20ml。待分析。钙的分析采用氢焰原子吸收 法。其结果列于表3中，仪器为IL-Video-22型原子吸收分光光度计。
[0040] 表3实验鼠血、骨组织中钙水平
[0041]
[0042] 实验结果：由表3可以看出，复合氨基酸钙⑴组的血钙同乳酸钙⑵组、碳酸钙 (3)组和空白对照（4)组相比，有显著的增加，特别是骨钙，同对照组相比，碳酸钙组增加了 14. 34%，乳酸钙组增加了 19. 86%，而复合氨基酸组增加了 31. 38%，这是一个不小的增加 量，这说明复合氨基酸钙组的钙在动物骨组织的蓄积水平比较高。
[0043] 通过动物实验的对比，我们可以得出本发明在新的理论指导下合成的复合氨基酸 螯合钙，其用量与目前所有的补钙剂相比，具有量小、高效、无阴离子污染等三大特点；是一 种既能解决贝壳类给环境治理带来的压力，又能制造出一种钙吸收率高，同时又具有既补 充氨基酸又补充钙的双重功效的复合氨基酸螯合钙制剂。
[0044] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限 于特定的细节和这里示出与描述的图。
【主权项】
1. 一种以牡蛎为原料制备的复合氨基酸螯合钙，其特征在于，包括牡蛎肉制备的复合 氨基酸粉和牡蛎壳制备的变性碳酸钙； 所述变性碳酸钙的可溶性钙含量为28. 08%，所述牡蛎肉制备的复合氨基酸粉和牡蛎 壳制备的变性碳酸钙的质量比1 : 1.5。2. -种以牡蛎为原料制备的复合氨基酸螯合钙的制备方法，其特征在于，包括以下步 骤： 步骤一，将活牡蛎放入净化槽中，循环供给经杀菌灯杀菌处理过的海水，让牡蛎通过呼 吸作用将体内消化管中的杂物吐出来；净化处理48小时后的牡蛎捞出，去杂洗净，进行壳 肉分尚处理； 步骤二，钙源的提取：将牡蛎壳先用自来水浸泡4h，不断搅动进行水洗；再用0. 5 %的 盐酸浸泡lh，不断搅动进行酸洗，刷洗去除牡蛎壳表面的泥沙、有机物等吸附物；然后用纯 化水浸泡漂洗数次，使其达到中性；洗净后的牡蛎壳经过l〇〇°C烘干lh，粉碎过100目筛，得 牡蛎壳粉；在牡蛎粉中加入3mol/L的盐酸87. 5ml，混合；在温度为IKTC的条件下作用2h， 过滤，减压浓缩，喷雾干燥制备成可溶性钙含量为28. 08 %的变性牡蛎壳粉； 步骤三，复合酸钙的制备：将开壳后的牡蛎肉，放入常压高温蒸汽笼内，通入高温蒸汽， 将牡蛎肉蒸熟、灭菌，趁热将蒸后的牡蛎汁及牡蛎转移至已经用蒸汽消毒过的研磨器中研 磨至浆状；将得到的牡蛎肉衆，按照酶与底物蛋白质量比为8000U/g的量加入中性蛋白酶， 用磷酸缓冲液调节溶液PH至7. 0 ;置于恒温水浴锅中55°C下酶解2h，酶解物加热沸腾10分 钟灭酶，6000r/min离心15min，上清液用截留分子量IkDa的超滤膜过滤、脱盐，截留液进行 浓缩、喷雾干燥，获得复合氨基酸粉末； 步骤四，螯合实验 取复合氨基酸干燥产物和变性牡蛎壳粉，两者质量比为1 : 1.5,混合，调节溶液pH值 为8,搅拌均匀后，在反应温度为80°C，进行螯合实验70min; 步骤五，成品的制备 得到含高螯合盐的复合氨基酸螯合钙进行离心，去除不溶物；将滤液减压浓缩，再加入 95%食用乙醇洗涤两次，抽滤，所得结晶在90°C烘箱中烘干，即得复合氨基酸螯合钙。
【专利摘要】本发明公开了一种以牡蛎为原料制备的复合氨基酸螯合钙，包括牡蛎制备的复合氨基酸粉和牡蛎壳制备的变性碳酸钙；所述变性碳酸钙的可溶性钙含量为28.08％，所述牡蛎肉制备的复合氨基酸粉和牡蛎壳制备的变性碳酸钙的质量比1∶1.5；使用本发明的复合氨基酸螯合钙不但改善了药物的吸收利用率，并且为牡蛎壳的综合利用开拓了一条新的途径，大大提高了淡水养殖业的附加值。
【IPC分类】A23L1/29, A23L1/305
【公开号】CN104905256
【申请号】CN201510262267
【发明人】庞兴军, 刘环, 苏兴建, 苏李凤, 曹丽伟, 苏铭龙
【申请人】北海富安源生物科技有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月21日