专利名称：作为治疗牙周炎的辅助物的穿心莲凝胶的制作方法
技术领域：
本发明涉及植物提取物提供能在牙周炎的治疗中作为辅助物使用的产品的用途。该产品带有生物适合的且可生物降解的载体，并以缓释剂型提供。该产品以草药提取物凝胶的形式存在，当它与牙周袋中的牙龈液(牙龈淋巴)接触时会变成液晶结构。该产品可以装在带有钝而且弯曲针头的特定注射器中，从而可以很方便将该产品置入牙周装中。
背景技术：
据报道，目前泰国40岁的人中有90％患有牙龈炎，其中80％的人在60岁时会发展成牙周炎。患者的牙龈、牙槽骨、牙骨质和牙周韧带发炎，特征为结合上皮向尖端移动以及附着在牙龈纤维、牙周韧带和牙骨质之间的结缔组织消失。患者的牙槽骨被吸收并形成袋。如果没有得到治疗，该病会进一步破坏支持骨，由此可以观察到牙松动，而且有时还会发现牙周脓肿。
对患者而言，基本的治疗方法，就是加强口腔卫生以控制住牙菌斑，对牙科医生而言，就是进行刮牙术和根面平整术。这一治疗方法并不总是充分有效的。这就导致了抗生素的辅助使用，添加抗生素通常采用局部分送系统，而不是全身使用抗生素。全身使用抗生素会导致副作用，例如全身使用甲硝唑会刺激胃肠道，并且在重复使用时会影响神经系统、皮肤和肾。而且在服用这种药期间不允许饮酒。在全身使用四环素的情形中，由于该药必须长期、高剂量服用才能在牙周袋中保持有效的浓度，其结果可能是正常的微生物环境被破坏，从而导致由真菌引发的双重感染和造成细菌抗药菌株的发展。
早期的局部分送系统采用非生物降解的载体物质，在抗生素药剂释放后不得不将该载体去除。这一系统具有很多缺点首先，将药物插入牙周袋中十分困难；而且在抗生素药剂释放完后患者不得不返回诊所，让牙科医生去除载体。而需要去除载体对牙龈的愈合可能有害并且也会刺激牙龈。
近来，已经开发出采用可生物降解物质的可控局部分送系统来解决此问题。这些包含了抗生素的系统虽然很好，但却十分昂贵。这类产品已有商品提供(例如含有甲硝唑的Elysol，或含二甲胺四环素的软膏)。这两类产品可以装入特殊的注射器和针头中，为置入牙周袋中作好准备。
发明详述根据本发明，将抗微生物提取物掺入到凝胶基质中以形成凝胶、薄片(chip)或软膏(在下文中统称为凝胶组合物)。
第一个方面，本发明提供了用于辅助治疗牙周炎的凝胶组合物，它含有(i)具有对抗牙周病原体的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，该提取物优选地来自于以下植物中的一种或多种穿心莲(Andrographis Paniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黄(Curcuma longa)；(ii)含有甘油单油酸酯和甘油三酯混合物的凝胶基质，其中组合物与牙龈液接触时会形成液晶结构。
第二个方面，本发明提供了用作治疗牙周炎的辅助物的组合物的制备方法，它包括(i)制备具有对抗牙周病原体的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，该提取物优选地来自于以下植物中的一种或多种穿心莲(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黄(Curcuma longa)；(ii)制备含有甘油单油酸酯和甘油三酯的混合物作为凝胶基质；(iii)将抗微生物提取物掺入到凝胶基质中并混合，制成与牙龈液接触时会形成液晶结构的组合物。
抗微生物提取物可以是任何含有能有效对抗牙周病原体的抗微生物或抗菌活性化合物(例如，对抗已知能导致牙周炎的牙龈卟啉单胞菌的化合物)的植物提取物。该提取物优选地取自穿心莲(Andrographis paniculata)——爵床科植物中的成员，或取自山竹果(Garcinia mangostana)或姜黄(Curcumalonga)，所述植物也含有有效对抗牙周病原体的抗微生物或抗菌活性化合物。
优选地，该提取物取自穿心莲。这样，该提取物含有以下化合物中的一种或多种穿心莲内酯(2-二萜内酯)；脱氧穿心莲内酯；14-脱氧-11，12-双脱氢-穿心莲内酯；14-脱氧-11-氧代-穿心莲内酯；14-脱氧-11-脱氢-穿心莲内酯；穿心莲内酯-19β-D糖苷；新穿心莲内酯；高穿心莲内酯；穿心莲酮；穿心莲醇；穿心莲硬脂酸酯；豆甾醇；青霉内酯。
下列方法可适用于制备抗微生物提取物
将洗干净的穿心莲(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的叶子和茎切成小块，在40-80℃的热空气烘箱中干燥2-8小时，然后碾成粉末并用1-4mm孔径的筛子筛分，将筛过的粉末放入密封性好的瓶子中保存。
将粉末用有机溶剂(例如乙醇，丙酮，氯仿或其它溶剂)提取，提取过程中的物质比例为400-700克粉末∶3000-7000克溶剂，采用索格利特抽提器在30-95℃中抽提3-80小时。
将活性炭加入到溶剂提取物中(1-5克活性炭∶2-10g穿心莲提取物)，混合并放置1-5小时以便使叶绿素脱色。
将混合物用滤纸(Whatman no.1)过滤，滤液采用旋转蒸发器在减压下，在30-95℃进行浓缩。然后将浓缩液放在沸水浴上蒸发，直到该浓缩液达到恒定重量，这样就形成了抗微生物提取物。
应当理解的是，本发明也可以采用其它本领域技术人员熟知的合适的提取方法来制备抗微生物提取物。植物的叶子或其它部分(例如根或根茎)都可适用作为提取活性成分的原料。对于穿心莲提取物来说，优选采用叶子。
凝胶基质用甘油单油酸酯和甘油三酯混合物来制备。甘油单油酸酯有商品提供，也可以在合适的催化剂存在下通过油酸和甘油发生反应而得到，其中包括了油酸单甘油酯和少量的其它脂肪酸。这样，甘油单油酸酯就成为油酸的甘油酯和其它脂肪酸的混合物，但它主要由油酸的单甘油酯组成，具有软化剂的特性。优选地，甘油单油酸酯中含有至少95wt％的油酸单甘油酯。
甘油三酯包括油和脂肪，是食物中常见脂肪的主要成分。甘油三酯含有脂肪酸，它们以饱和脂肪酸和/或不饱和脂肪酸的形式连接在甘油分子上。
在本发明所采用的甘油三酯中，优选的是采用一种油，特别是植物油(例如芝麻油，向日葵油、大豆油或红花油，或者它们的任意混合物)。
甘油单油酸酯与甘油三酯的重量比范围从2∶1到10∶1。甘油单油酸酯和甘油三酯的凝胶基质混合物在组合物中的掺入量为组合物重量的60％-95％。
当甘油单油酸酯与水或牙龈渗出液(牙龈淋巴)相接触时，它的粘度增加并形成立方中间相结构。与甘油三酯结合后，立方相结构会变成六角形的液晶结构。液晶结构可以把活性成分或草药提取物保持在晶体之间，然后再逐步地将活性成分释放出来，从而提供了一种缓释剂型。
抗微生物提取物(优选穿心莲提取物)的掺入量是组合物重量的0.5％-30％，优选1-20％，更优选1％-15％(％是基于干提取物)。然而，所采用的提取物的浓度必须要适合于使凝胶基质能变成液晶结构。
优选地在组合物中加入抗氧化剂或防腐剂，其掺入量优选为组合物重量的0.5％-5％。优选的抗氧化剂为D-α-生育酚乙酸酯。
组合物中也可以包含少量常用于凝胶制品中的辅助物质(例如稳定剂，均化剂，花纹造型剂，舒缓剂)。例如，甘油有助于为凝胶提供均匀的质地，同时也能对伤口起舒缓作用。胶原有助于伤口的愈合。优选的是将甘油或胶原或者两者一起掺入到组合物中，优选的掺入总量为组合物重量的0.1％-5％。
获得的凝胶优选地装入到带有弯曲钝针头的注射器中，以适于将凝胶置入牙周袋中。也可以采用其它便利的包装。
实施例实施例11、穿心莲植物的提取1.1将洗净的穿心莲(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的叶子和茎切成小块，在60℃的热空气烘箱中干燥5小时，然后碾成粉末并用3mm孔径的筛子筛分，将筛过的粉末放在密封性好的瓶子中保存。
1.2粉末用乙醇作溶剂提取，比例为550g粉末∶5000g溶剂，采用索格利特抽提器在65℃中抽提40小时。
1.3将活性炭加入到溶剂提取物中(3g活性炭∶6g穿心莲提取物)，混合并放置3小时以便使叶绿素脱色。
1.4混合物用滤纸(Whatman no.l)过滤，滤液采用旋转蒸发器在减压下，在65℃进行浓缩。然后将浓缩液放在沸水浴上蒸发，直到该浓缩液达到恒定重量。
2.用作治疗牙周炎的辅助物的组合物的制备2.1凝胶基质的制备将含有油酸甘油酯和其它脂肪酸的甘油单油酸酯和甘油三酯(芝麻油)按照甘油单油酸酯∶甘油三酯的重量比为6∶1进行混合。
2.2在凝胶中掺入穿心莲提取物向凝胶基质混合物中加入D-α-生育酚乙酸酯作为抗氧化剂、甘油以及穿心莲提取物，并且充分混合得到凝胶组合物。在凝胶组合物中各物质的含量为甘油单油酸酯/甘油三酯凝胶基质混合物占组合物重量的76.5％，穿心莲提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
3、临床对比研究在与Elysol(甲硝唑疑胶)的临床对比研究中，结果表明使用穿心莲凝胶的情形中黑色素菌落(导致牙周炎的厌氧微生物)的百分数明显减少，而在使用甲硝唑凝胶的情形中则没有发现其减少。
在与二甲胺四环素软膏的临床对比研究中，结果表明与用二甲胺四环素软膏治疗组以及对照组相比，穿心莲凝胶显著减少了能动的杆状微生物的百分数。
研究中还发现该凝胶在与牙龈液接触之后具有液晶结构。
实施例2采用与实施例1相同的方法和剂量，用醇提取法制备山竹果提取物，并将它掺入到凝胶基质混合物中。该凝胶基质混合物中甘油单油酸酯与甘油三酯(芝麻油)的重量比为6∶1，混合物中还包含D-α-生育酚乙酸酯作为抗氧化剂以及甘油。山竹果凝胶组合物中各物质含量为甘油单油酸酯/甘油三酯凝胶基质混合物占组合物重量的76.5％，山竹果提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
该凝胶在与水接触时形成液晶结构。初步实验表明山竹果凝胶与对照组相比能有效减少导致牙周炎的微生物的百分数。
实施例3采用与实施例1相同的方法和剂量，用醇提取法制备姜黄提取物，并将它掺入到凝胶基质混合物中。该凝胶基质混合物中甘油单油酸酯与甘油三酯(芝麻油)的重量比为6∶1，混合物中还包含D-α-生育酚乙酸酯作为抗氧化剂以及甘油。姜黄凝胶组合物中各物质含量为甘油单油酸酯/甘油三酯凝胶基质混合物占组合物重量的76.5％，姜黄提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
该凝胶在与水接触时形成液晶结构。初步实验表明姜黄凝胶与对照相组比能有效减少导致牙周炎的微生物的百分数。
权利要求
1.一种用于辅助治疗牙周炎的凝胶组合物，它包括(i)具有对抗牙周炎病原体的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，该提取物优选地取自植物穿心莲(Andrographis Paniculata)、山竹果(Garciniamangostana)和姜黄(Curcuma longa)中的一种或多种；(iii)含有甘油单油酸酯和甘油三酯混合物的凝胶基质，其中组合物与牙龈液接触时形成液晶结构；
2.根据权利要求1所述的组合物，其中甘油单油酸酯与甘油三酯的重量比范围从2∶1到10∶1。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所含的抗微生物提取物占组合物重量的1％-15％。
4.根据前述任一项权利要求所述的组合物，其中所含的甘油单油酸酯和甘油三酯混合物占组合物重量的80％-99％。
5.根据前述任一项权利要求所述的组合物，该组合物是可生物降解的缓释凝胶、薄片或软膏。
6.根据前述任一项权利要求所述的组合物，其中甘油三酯是选自芝麻油、向日葵油、大豆油和红花油的一种或多种植物油。
7.根据前述任一项权利要求所述的组合物，其中抗微生物提取物是从植物穿心莲中提取的。
8.根据前述任一项权利要求所述的组合物，进一步包含抗氧化剂或防腐剂。
9.根据权利要求8所述的组合物，其中所含的作为抗氧化剂的D-α-生育酚乙酸酯占组合物重量的0.5％-5％。
10.根据前述任一项权利要求所述的组合物，进一步包含甘油或胶原或者两者都有。
11.根据权利要求10所述的组合物，其中所含的甘油占组合物重量的0.1％-5％。
12.制备用作为治疗牙周炎的辅助物的组合物的方法，它包括(i)制备具有对抗牙周炎病原体的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，该提取物优选地来自于以下植物中的一种或多种穿心莲(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黄(Curcuma longa)；(ii)制备甘油单油酸酯和甘油三酯混合物作为凝胶基质；(iii)将抗微生物提取物掺入到凝胶基质中并混合，制成与牙龈液接触时会形成液晶结构的组合物。
13.根据权利要求12所述的方法，其中甘油单油酸酯与甘油三的重量比范围从2∶1到10∶1。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中抗微生物提取物的掺入量为组合物重量的1％-15％。
15.根据权利要求12至14中任一项权利要求所述的方法，其中甘油单油酸酯和甘油三酯混合物的掺入量为组合物重量的80％-99％。
16.根据权利要求12至15中任一项权利要求所述的方法，其中将组合物制备成可生物降解的缓释凝胶、薄片或软膏。
17.根据权利要求12至16中任一项权利要求所述的方法，其中甘油三酯是选自芝麻油、向日葵油、大豆油和红花油的一种或多种植物油。
18.根据权利要求12至17中任一项权利要求所述的方法，其中抗微生物提取物是从植物穿心莲制备的。
19.根据权利要求12至18中任一项权利要求所述的方法，进一步包括以组合物重量的0.5％-5％的量掺入D-α-生育酚乙酸酯，作为抗氧化剂。
20.根据权利要求12至19中任一项权利要求所述的方法，进一步包括以组合物重量的0.1％-5％的总量掺入甘油或胶原或甘油和胶原两者。
21.根据权利要求1至11中任一项权利要求所述的组合物用于制备治疗牙周炎的辅助物的用途。
全文摘要
本发明提供了一种用于辅助治疗牙周炎的组合物，该组合物为可生物降解的凝胶、薄片或软膏，它包括(i)具有对抗牙周炎病原体的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，该提取物优选地取自植物穿心莲(AndrographisPaniculata)、山竹果(Garcinia mangostana)和姜黄(Curcuma longa)中的一种或多种；以及(ii)含有甘油单油酸酯和甘油三酯混合物的凝胶基质。该组合物可生物降解，在与牙龈液接触时形成液晶结构，该液晶结构可以使活性成分逐步地释放，从而提供了缓释剂型。
文档编号A61K36/9066GK1416885SQ02154760
公开日2003年5月14日 申请日期2002年11月8日 优先权日2001年11月9日
发明者P·罗亚纳潘图, W·格利特萨纳番, M·斯里拉特, C·阿莫查特 申请人:马伊多尔大学