专利名称：用于治疗低环gmp水平相关的疾病的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种稠合吡唑基化合物，以及这种稠合吡唑基化合物在制备PDE抑制剂药物中的应用。
由于cGMP是通过PDEs水解，因此由强PDE活性引起的、与cGMP不足相关的疾病可通过给予PDE抑制剂以增加cGMP水平而得以治疗。
下式(I)包括可用于实施本发明方法的一系列稠合吡唑基化合物 每个这类化合物包括吡唑基中心和两个芳基基团。第一个芳基Ar1为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可在环碳原子上被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。第二个芳基为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可在环碳原子上被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。与1-N相连的X(通过亚烷基、亚链烯基、或亚炔基部分连接，未显示)为氢、卤素、羧基、烷氧基羰基、硫代羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或芳基；芳基是指苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、硫代烷基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
这类化合物的一部分，包括第一个芳基为苯基或呋喃基的化合物，此苯基或呋喃基可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代；这类化合物的一部分还包括那些第一个芳基为呋喃基的化合物，该呋喃基在化合物的2’-C上与吡唑基中心的3-C相连，并且可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代(例如，在5’-C上)；还包括那些第二芳基为苯基或噻吩基的化合物，此苯基或噻吩基可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代；以及包括那些第二苯基为苯基的化合物，该苯基在5-C和6-C上都被亚甲基二氧基取代，或者在6-C上被卤素、烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代。
式(I)也包括另一组稠合吡唑基化合物，这些化合物也可用于实施本发明的方法。第一个芳基Ar1为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可在环碳原子上被卤素、烷基、烷氧基、羧基、硫代烷基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代。第二个芳基Ar2为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可在环碳原子上被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。X与上述定义相同。还与上述相同的是，X与1-N相连，或者直接连接、或者通过亚烷基、亚链烯基、或亚炔基连接部分连接。
这类化合物的子集包括，那些第一个芳基为苯基或呋喃基的化合物，此苯基或呋喃基可被烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、或(烷基硫代)烷基取代；还包括那些第一个芳基为呋喃基的化合物，该呋喃基与吡唑基中心的3-C相连，并且在例如5’-C上被烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、或(烷基硫代)烷基取代；以及包括那些第二芳基为苯基或噻吩基的化合物，此苯基或噻吩基可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代。
本文中的术语“烷基”，前缀“烷”(例如，在烷氧基中)，后缀“-烷基”(例如，在羟烷基中)是指直链的或支链的C1-18。术语“亚烷基”、“亚链烯基”和“亚炔基”分别是指二价的烷基、链烯基和炔基。除非另有指明，本文的所有科技术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。
上述化合物的实例包括1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-氟吲唑、1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-甲基吲唑、1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-甲氧基吲唑、1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑、和1-苄基-3-(5’-甲氧基甲基-2’-呋喃基)吲唑。1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑的结构如下所示，其中芳环中的原子已计数 简言之，如果合适的话，上述稠合吡唑基化合物可包括它们的药学上可接受的盐和前体药物。在稠合吡唑基化合物的带负电的离子基团(例如，碳酸盐)与带正电的抗衡离子(例如，钠)之间可形成这种盐。同样，稠合吡唑基化合物中的带正电的离子基团(例如，铵)也可与带负电的抗衡离子(例如，氯化物)形成一种盐。这类盐的例子包括，1-苄基-3-(5’-氨基甲基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑的盐酸盐和1-苄基-3-(5′-羧基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑的钠盐。前体药物的例子包括酯和其它药学上可接受的衍生物，当给患者使用时，它们可提供上述的稠合吡唑基化合物。
在治疗与低cGMP水平相关的疾病时，使用前将用于实施本发明方法的稠合吡唑基化合物配制成药物组合物。因此，用于治疗与低cGMP水平相关的疾病、含这种稠合吡唑基化合物和药学上可接受的载体的药物组合物也在本发明的范围之内。
本发明还涉及上述稠合吡唑基化合物之一用于制备治疗与低cGMP水平相关的药剂的用途。
一种治疗与低cGMP水平相关的疾病的方法，包括对需要的患者给予有效量的含有吡唑基中心、与吡唑基中心的3-C键合的第一芳基、和在吡唑基中心的4-C和5-C上稠合的第二芳基的化合物；其中吡唑基中心可在1-N上任意通过亚烷基、亚链烯基、或亚炔基连接部分被卤素、羧基、烷氧基羰基、硫代羰基、氨基羰基、羟烷基、烷氧基烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或芳基取代或不被取代，该芳基是指苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、硫代烷基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第一个芳基基团为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第二个芳基为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
所述的方法，其特征在于其中第一个芳基基团为苯基、或呋喃基，它们可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代；进一步优选其中第一个芳基基团为呋喃基，它在2’-C上与吡唑基中心的3-C相连、且可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代；进一步优选其中呋喃基在5’-C上被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代。
所述的方法，其特征在于其中第二个芳基为苯基、或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代。进一步优选其中第一个芳基基团为苯基、或呋喃基，它们可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代；或者优选第二个芳基为苯基，它被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代。进一步优选其中苯基在5-C和6-C上同时被亚甲基二氧基取代、或在6-C上被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代；进一步优选第一个芳基基团为苯基或呋喃基，它们可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代。进一步优选其中第一个芳基基团为苯基或呋喃基，它们可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代。进一步优选第一个芳基基团为呋喃基，它在2’-C上与吡唑基的3-C相连、且可被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代或不被取代。进一步优选其中呋喃基在5’-C上被烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选其中呋喃基在5’-C上被羟甲基取代。进一步优选其中苯基在5-C和6-C上同时被亚甲基二氧基取代；或者优选苯基在6-C上被卤素、烷基、烷氧基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选其中苯基被氟取代；或者优选其中苯基被甲基取代。或者优选苯基被甲氧基取代。
所述的方法，其特征在于其中该化合物选自以下结构 一种治疗与低cGMP水平相关的疾病的方法，包括对需要的患者给予有效量的含有吡唑基中心、与吡唑基中心的3-C键合的第一芳基、和在吡唑基中心的4-C和5-C上稠合的第二芳基的化合物；其中吡唑基中心可在1-N上任意通过亚烷基、亚链烯基、或亚炔基连接部分被卤素、羧基、烷氧基羰基、硫代羰基、氨基羰基、羟烷基、烷氧基烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或芳基取代或不被取代，该芳基是指苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、硫代烷基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第一个芳基基团为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、硫代烷基、(烷氧基)羰基、 (烷基硫代)羰基、氨基羰基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代；第二个芳基为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
上述方法，优选其中第一个芳基基团为苯基、或呋喃基，它们被烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选其中第二个芳基为苯基、或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；或者优选第一个芳基基团为呋喃基，它与吡唑基中心的3-C相连、且被烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选其中呋喃基在5’-C上被烷基、(烷氧基)烷基、氨基烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选第二个芳基为苯基或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；或者优选其中呋喃基被(烷氧基)烷基、或(烷基硫代)烷基取代。进一步优选其中第二个芳基为苯基或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；或者优选其中呋喃基被(烷氧基)甲基取代。进一步优选其中第二个芳基为苯基或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。进一步优选其中第二芳基为苯基。进一步优选其中呋喃基被甲氧基甲基取代。进一步优选其中该化合物具有以下结构 所述的方法，在实施例中其第二个芳基为苯基或噻吩基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。进一步优选其中第二个芳基为苯基，它被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
在下面说明书中对本发明的几个实施方式进行了详细描述。从下列说明书和权利要求书中，本发明的其它特点、目的和优点将显而易见。
该稠合吡唑基化合物可按如下合成将芳基羰基氯化物例如苯甲酰基氯化物与另一在芳基上至少含一个氢原子的含芳基化合物例如三氟甲基苯偶合偶连形成芳基芳基酮(例如三氟甲基苯基苯基酮)，其中的两个芳基(例如，苯基和苯基)分别与式(I)或(II)中的Ar1和Ar2相对应。然后将芳基芳基酮与肼(例如，苄基肼)反应形成腙，随后它被催化为稠合吡唑基化合物。由此得到的稠合吡唑基化合物有一个与3-C直接相连的芳基和另一个在吡唑基中心的4-C和5-C上稠合的芳基。通过进一步改性可得到稠合吡唑基化合物的衍生物。
下图描述了1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-甲氧吲唑的合成(详细的描述见下列实施例1) 此同样的合成图也可用于合成其它可用本发明方法实施的化合物，例如，1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-氟吲唑、1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6甲基氟吲唑、1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑、和1-苄基-3-(5’-甲氧基甲基-2’-呋喃基)吲唑。这些例证化合物的合成的描述见下面的实施例2、3、4和5。这些化合物的衍生物可通过使用下列反应物如单或多取代的苯甲酰基氯化物(不同于上图所示的4-甲氧苯甲酰氯化物)、单或多取代的2-糠酸盐(不同于上图所示的甲基2-糠酸盐)、和单或多取代的苄基腙(替代上图所示的苄基腙)来获得。
根据上面所示的合成图可制备3-苯基-吲唑化合物，除了用二苯甲酮(任意单或多取代的)代替2-呋喃基苯酮。作为起始步骤，将二苯甲酮与CrO3发生氧化得到苯酰苯酸。然后将苯酰苯酸与乙醇反应形成苯酰苯酸乙酯，然后通过一系列反应将它转化为3-苯基-吲唑(类似与上图所示)。如需要，可通过进一步改性将3-苯基-吲唑转化为其衍生物。
也可根据上图所示的合成方法制备含噻吩并吡唑部分的稠合吡唑基化合物，除了用2-噻吩基芳酮代替2-呋喃基苯酮。可以对由此得到的噻吩并吡唑基化合物的任意单或多取代基进行改性以得到另外的噻吩并吡唑基化合物。
在对需要治疗与低cGMP水平相关疾病(例如，心血管疾病，如冠心病和高血压，或者阳痿)的患者进行给药之前、将有效量的稠合吡唑基化合物或其盐配制成药物组合物。“有效量”是指需要对所治疗的患者产生治疗效果的化合物的量。Freireich等，《癌症化疗康复》(Cancer CheInother ReP.)，1966，50219描述了用于人和动物的剂量的相互关系(依据mg/m2体表面积)。体表面积可由患者的身高和体重大致确定。参见，例如“科学记数表”，《Geigy药剂》(Geigy Pharmaceuticals)，Anlley N.Y，1970，537。正如本领域技术人员所认识的，也可根据给药途径、赋形剂用量、和与其它治疗方法联合用药的可能性来改变有效剂量，其中的联合用药包括使用提高cGMP水平的其它药剂。药学上可接受的载体的例子包括胶体二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、十二烷基硫酸钠、和D&C黄#10。
本药物组合物可通过非肠道途径给药，例如局部、皮下、腹膜内、肌内、和静脉内给药。非肠道剂型的例子包括活性化合物的等渗盐水溶液、5％葡萄糖水溶液、或任何其它众所周知的药学上可接受的载体的水溶液。在本药物组合物中也可包括加溶剂，例如环糊精，或其它本领域熟练技术人员公知的溶剂。
可采用众所周知的方法将用于实施本发明方法的稠合吡唑基化合物配制成用于其它给药途径的剂型(例如，口服、经粘膜、或经皮)。例如，可将本药物组合物制成胶囊、熔封凝胶、或片剂的口服给药剂型。胶囊可包含任何众所周知的药学上可接受的物质例如明胶或纤维素衍生物。可根据常规方法配制片剂，即将活性化合物、固体载体、和润滑剂的混合物进行压片。固体载体包括例如淀粉和糖浆土。该化合物也可按硬壳片剂或胶囊的形式给药，它们包含例如乳糖、或山梨糖醇作为粘合剂、常规的充填剂、和制片剂。
可用适合的体外试验来初步评价稠合吡唑基化合物对PDE(它水解cGMP)的抑制作用。例如，冲洗血小板、将其悬浮在缓冲剂中、再通过超声裂解，从而得到含PDE的溶液。将欲试验的化合物和cGMP (PDE的底物)加入溶液中。随后加入ophiophagus hannah蛇毒以去除5’-GMP(由cGMP通过PDE的作用转化而成)中的磷酸盐、得到不带电的鸟苷。用离子交换树脂去除剩余的cGMP。然后将无cGMP溶液离心，取等份上清液在液体闪烁计数器中定量测定不带电的鸟苷。根据不带电鸟苷的数量评价PDE的活性。通过下列本领域众所周知的方法可进行体内筛选。
无须更多的详尽描述，我们相信本领域技术人员根据本文的说明可充分利用本发明。本文列举的所有出版物全部引作参考。因此，不应将下列具体的实施例仅仅解释为举例说明、也不是以任何方式限定本说明书的其它部分，这些实施例描述了用于本发明方法中的各种稠合吡唑基化合物的合成和生物学试验。
将刚刚制备的6.25g酮溶解在60mL甲醇中。在该溶液中加入9.0g苄肼和0.5mL醋酸。将如此得到的溶液进行加热回流直至反应完成。冷却后，除去溶剂得到残余物。将该残余物溶解在氯仿中，随后用稀释的HCl溶液和水冲洗、经无水硫酸镁干燥、然后过滤。除去滤液中的溶剂得到7.8g 5’-甲氧基羰基-2’-呋喃基4-甲氧基苯基酮苄腙。
将所有5’-甲氧基羰基-2’-呋喃基4-甲氧基苯基酮苄腙溶解在100mL二氯甲烷中。将如此得到的溶液逐滴加入40mL含28.2g Pb(OAc)4的二氯甲烷溶液中。将该溶液在30±2℃下反应30分钟、然后与122mL BF3.Et2O(含47％BF3)混合。将该混合物加热回流30分钟、然后注入1000mL冰水以终止反应。将由此得到的混合物分成两相，即有机相和含水相。分离有机层(较低的相)、随后用水和10％碳酸钠溶液冲洗、通过水洗中和、经无水硫酸镁干燥、并在真空下浓缩得到油性粗制品。然后将乙醇加入粗制品中，令该混合物放置过夜，其间沉淀出固体。收集沉淀物、并从乙醇中再结晶得到4.35mg1-苄基-3-(5’-甲氧基羰基-2’-呋喃基)6-甲氧吲唑，产率50％。(来自4-甲氧苯基-5’-甲氧基羰基-2’-呋喃酮)。mp108-109℃.MS(％)，m/z362(M+).IR(KBr)γmax1710cm-1(C＝O).1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ3.85(3H，s，-OCH3)，3.88(3H，s，-COOCH3)，5.71(2H，s，＝NCH2-)，6.95(1H，d，J＝8.5Hz，H-5)；7.16(1H，d，J＝3.5Hz，H-3’)；7.24-7.36(6H，m，H-7，苯基)；7.40(1H，d，J＝3.5Hz，H-4’)，7.98(1H，d，J＝8.5Hz，H-4)首先通过在20mL无水THF中搅拌88.8mg无水氯化钙和60mg氢硼化钠4小时制备氢硼化钙溶液。于30±2℃下在氢硼化钙溶液中逐滴加入30mL含93.0mg 1-苄基-3-(5’-甲氧羰基-2’-呋喃基)-6-甲氧吲唑的THF溶液。将由此得到的溶液加热回流6小时、冷却、用碎冰使之骤冷、置于减压下以去除THF、再过滤得到固体产物。通过柱色谱法(二氧化硅凝胶-苯)纯化该固体产物得到77.2mg化合物1、产率88.0％。mp109-110℃.MS(％)，m/z334(M+).IR(KBr)γmax3400cm-1(-OH).1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ1.90(1H，br，-OH)；3.80(3H，s，6-OCH3)，4.74(2H，d，J，＝4.9Hz，-CH2O-)；5.59(2H，s，＝NCH2-)；6.47(1H，d，J＝3.2Hz，H-4’)；6.59(1H，d，J＝2.0Hz，H-7)；6.84(1H，d，J＝3.2Hz，H-3’)；6.88(1H，dd，J＝8.5，1.5Hz，H-5)；7.17-7.31(5H，m，苯基-H)；7.91(1H，d，J＝8.5Hz，H-4)实施例21-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-氟吲唑(化合物2)的合成按照实施例1所述的方法合成化合物2，除了用4-氟苯甲酰氯化物代替4-甲氧苯甲酰氯化物。总产率为22％。
mp110-112C.
MS(％)，m/z322(M+).
IR(KBr)γmax3450cm-1(-OH).
1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)84.49(2H，br，-CH2O-)；5.45(1H，br，-OH)，5.88(1H，s，＝NCH2-)，6.48(1H，d，J＝3.2Hz，H-4’)；6.98(1H，d，J＝3.2Hz，H-3’)；7.10-7.18(1H，m，H-7)；7.24-7.36(5H，m，苯基-H)；7.70(1H，dd，J＝10.0，2.0Hz，C5-H)；和8.15(1H，dd，J＝8.5，5.1Hz，H-4)。
实施例31-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-6-甲基吲唑(化合物3)的合成按照实施例1所述的方法合成化合物3，除了用4-氟苯甲酰氯化物代替4-甲氧苯甲酰氯化物。总产率为13％。
mp112-114℃.
MS(％)，m/z318(M+).
IR(KBr)γmax3400cm-1(-OH).
1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ2.44(3H，s，-CH3)，4.50(2H，d.J＝5.2Hz，-CH2O-)，5.30(1H，br-OH)，5.64(2H，s，＝NCH2-)，6.45(1H，d，J＝3.3Hz，H-4’，)，6.07(1H，d，J＝3.3Hz，H-3’)，7.08(1H，dd，J＝8.3，1.0Hz，H-5)，7.19-7.36(5H，m，苯基-H)，7.57(1H，d，J＝1.0Hz，H-7)，和7.98(1H，dd，J＝8.3，1.0Hz，H-4).
实施例41-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-5，6-亚甲基二氧吲唑(化合物4)的合成按照实施例1所述的方法合成化合物4，除了用3，4-亚甲基二氧苯甲酰氯化物代替4-甲氧苯甲酰氯化物。总产率为29％。
mp122-123℃.
MS(％)，m/z348(M+).
IR(KBr)γmax3387cm-1(-OH).
1H-NMR(CDCl3)δ2.05(1H，br-OH)，4.71(2H，s，-CH2O-)，5.53(2H，s，＝NCH2-)，5.99(2H，s，-OCH2O-)，6.43(1H，d，J＝3.3Hz，H-4’)，6.61(1H，s，H-7)，6.76(1H，d，J＝3.3Hz，H-3’)，和7.20-7.31(6H，m，H-4，苯基).
实施例5
1-苄基-3-(5’-甲氧甲基-2’-呋喃基)吲唑(化合物5)的合成于10±2℃下、在5mL含0.2g 1-苄基-3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)吲唑的二氯甲烷溶液中加入1.5mL 1.0M BCl3/CH2Cl2溶液。在此温度下令由此得到的溶液反应4小时。然后将5mL甲醇加入该溶液中。在用冰水使之骤冷之前再搅拌该溶液1小时得到含二氯甲烷的提取混合物。通过水洗中和该提取物并经无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂，通过柱色谱法(二氧化硅凝胶-苯)纯化剩余的残余物得到0.15g l-苄基-3-(5’-甲氧基甲基-2’-呋喃基)吲唑、产率70％。
MS(％)，m/z318(M+).
IR(KBr)γmax1616cm-1(C-O).
1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ3.45(3H，s，-CH2OCH3)，4.56(3H，s，-CH2OCH3)，5.29(2H，s，＝NCH2-)，6.52(1H，d，J＝3.3Hz，H-4’)，6.91(1H，d，J＝3.3Hz，H-3’)，7.18-7.36(8H，m，H-5，6，7，苯基)，和8.12(1H，dd，J＝8.1，1.1Hz，H-4).
实施例6PDE 5的抑制按Teng等，Bedem.BioPhys.Acta.1989，990，315-320所述的方法制备洗涤的人血小板、将其悬浮在50 mM PH 7.4 Tris-HCl缓冲液(含5mM MgCl2)中、然后在4℃通过超声处理进行裂解。于4℃在39,000×g使溶解产物离心20分钟得到含PDE 5的上清液。取等份上清液制备Tris-HCl缓冲液中的PDE 5溶液，其中每一溶液含10μM欲试验的稠合吡唑基化合物(即，化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、或化合物5)。在将10μM cGMP加入每一PDE 5溶液之前，首先将每一PDE 5溶液在37℃培养5分钟。将含cGMP溶液在37℃培养30分钟(在此期间cGMP被PDE 5转化为5’-GMP)，加热1分钟至100℃，然后冷却至室温。然后在溶液中加入ophiopagus hannah蛇毒(0.1mL，1mg/mL)。在25℃培养由此得到的溶液30分钟以使5’-GMP转化为不带电的鸟苷。在该溶液中加入离子交换树脂结晶浆液(1.0mL；Dowex-1，从Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO购得)以结合并去除任何剩余的cGMP。然后离心由此得到的无cGMP溶液，取0.5mL上清液在液体闪烁计数器中对不带电的鸟苷进行定量测定。
结果显示所有的化合物1-5是潜在的PDE 5抑制剂。例如，观察到化合物1在抑制PDE 5中具有意外的低IC50值(3.5μM)。
其它实施方式我们已经对本发明的许多实施方式进行了描述。然而，应当知道在不脱离本发明的实质和范围的情况下可以进行各种改进。因此，其它实施方式也在下列权利要求书的范围之内。
权利要求
1.一种治疗与低cGMP水平相关的疾病的药物组合物，包括含有吡唑基中心、与吡唑基中心的3-C键连接的第一芳基、和在吡唑基中心的4-C和5-C上稠合的第二芳基的化合物；其中吡唑基中心可在1-N上任意通过亚烷基连接部分被卤素、羧基、烷氧基羰基、硫代羰基、氨基羰基、羟烷基、烷氧基烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或芳基取代或不被取代，该芳基是指苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、硫代烷基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第一个芳基基团为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第二个芳基为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
2.一种治疗与低cGMP水平相关的疾病的药物组合物，包括含有吡唑基中心、与吡唑基中心的3-C键连接的第一芳基、和在吡唑基中心的4-C和5-C上稠合的第二芳基的化合物；其中吡唑基中心可在1-N上任意通过亚烷基连接部分被卤素、羧基、烷氧基羰基、硫代羰基、氨基羰基、羟烷基、烷氧基烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、或芳基取代或不被取代，该芳基是指苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、硫代烷基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代；第一个芳基基团为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们被卤素、烷基、烷氧基、羧基、硫代烷基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代；第二个芳基为苯基、噻吩基、呋喃基、或吡咯基，它们可被卤素、烷基、烷氧基、羧基、(烷氧基)羰基、(烷基硫代)羰基、氨基羰基、羟烷基、(烷氧基)烷基、氨基、氨基烷基、硫代烷基、(烷基硫代)烷基、或烯化二氧基取代或不被取代。
全文摘要
本发明公开了治疗与低cGMP水平相关的疾病的方法。该方法包括对需要的患者给予有效量的含有吡唑基中心、与吡唑基中心的3－C键合的第一芳基、和在吡唑基中心的4－C和5－C上稠合的第二芳基的化合物。还公开了含这些化合物的药物组合物。
文档编号A61K31/416GK1429548SQ02159328
公开日2003年7月16日 申请日期2002年12月26日 优先权日2001年12月26日
发明者邓哲明, 李方辰, 李方源, 郭盛助 申请人:永信药品工业股份有限公司