专利名称：治疗脑血栓、冠心病、心胶痛的药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及以三七总皂苷、灯盏花素为原料组方制备的药品，其剂型为片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂。本发明所述制剂是由5～95％的三七总皂苷、灯盏花素和余量的药用辅料制成。本发明所述制剂的功能主治为活血化瘀、通络止痛、抑制血小板聚集和增加脑血流量；用于治疗脑血栓后遗症、冠心病，心绞痛。服用剂量小，安全、有效。本发明制剂比单用三七总皂苷和灯盏花素疗效更显著。
背景技术：
以提取物“三七总皂苷、灯盏花素”为原料组方，用于治疗脑血栓后遗症、冠心病，心绞痛而制成的片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂的药品尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供以三七总皂苷、灯盏花素为原料组方制成的片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂，用于治疗脑血栓后遗症、冠心病、心绞痛。本发明制剂服用剂量小，安全、有效。
本发明所述治疗脑血栓、冠心病、心绞痛的药物制剂是由5～95％的以上药材提取物和余量的药用辅料制成。
本药物制剂在制成片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂时，可选用的药用辅料包括淀粉、硬脂酸镁、羟丙基纤维素、羧甲基淀粉、蜂蜡、植物油、PEG6000、PEG4000、葡萄糖、液状石蜡、聚山犁酯、滑石粉等。
本发明制剂的毒性研究一、急性毒性实验取18-20g小鼠20只，于实验前停食4小时，24小时内灌胃给药3次，每次0.8ml/20g，日剂量26.4g/kg，给药后观察7天，观察动物毛色、活动、饮食及大小便情况，并以肉眼观察实验动物尸体。人用剂量2.1g/天，即相当于人用剂量的880.0倍。
结果显示给药7天后，实验动物毛色、活动、饮食及大小便均正常，尸体肉眼观察正常。给药前体重19.2±0.8(X±SD)，给药后体重26.4±0.8(Xt±SD)体重增加，无消瘦现象。
结论本发明制剂是一种无毒的中药制剂。
二、长期毒性实验实验方法1、分组给药取80只大鼠随机分为4组对照组、本发明制剂大、中、小剂量组。每组20只，雌雄各半。大剂量组每日给予8.0g/kg的本发明制剂，相当于人临床用量的267倍；中剂量组每日给予4.0g/kg的本发明制剂，相当于人临床用量的133倍；小剂量组每日给予2.0g/kg的本发明制剂，相当于人临床用量的66倍。大鼠适应实验环境一周后开始灌胃给药，每周7天，连续3个月，给药容量均为2ml/100g体重，每周按体重调整灌胃体积。给药3个月后，每组杀检14只(雌雄各7只)，进行各项指标检测，观察有无毒性反应。剩余大鼠停止给药2周后杀检，以观测有无继发性不良反应。
2、观察指标1)、一般状态给药期间每日观察大鼠精神、行为、活动、排便等情况。给药期间及恢复期每日检测各组进食量。
2)、体重给药期间和恢复期每周称体重一次。
3)、血液学检查大鼠给药期限结束后，放血处死，取血以血球计数仪测定白细胞总数(WBC)和分类、红细胞总数(RBC)、血红蛋白含量(Hgb)、血小板计数(PLT)、凝血时间。
4)、血清生物化学检查上述大鼠取血样，离心分离血清，用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨转肽酶(GGT)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、血糖(GLU)、总胆红素(TB)、肌酐(Crea)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)共计十一项。
5)、尸体解剖和脏器指数各组大鼠放血处死后，立即进行尸体解剖，肉眼观察个脏器有无病理改变，取出心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、前列腺、子宫、卵巢13个脏器，剥离后分别称重，并计算脏器指数(g/100g)。
6)、病理组织学检查将上述脏器放入10％中性甲醛溶液中固定，石蜡包埋、切片，经苏木素、伊红染色，再经脱水、透明、封固后光镜下观察；先对大剂量组、对照组大鼠的脏器进行检查，如果大剂量组发现异常，再对中剂量组、小剂量组脏器进行病理组织学检查。
7)、统计学处理比较组间差异采用t检验。
试验结果1)、一般状态本发明制剂8.0g/kg、4.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组大鼠在给药期间，精神、行为、活动、皮毛、排便、进食量等情况与对照组比较无显著差异。
2)、体重四组动物体重增长情况为，各给药组大鼠体重与对照组大鼠体重相比无显著差异。恢复期后各组动物体重无显著差异。
3)、血液学检测本制剂三个剂量组给药3个月，血液学指标的白细胞总数和分类、红细胞总数、血红蛋白含量、血小板计数、凝血时间检查结果表明各组间无显著差异；恢复期后，血液学检查显示各给药组与对照组比较均无显著差异。
4)、血清生物化学检查本制剂给药3个月后，中剂量组的BUN、GLU、CRE、TC与对照组相比有显著差异，恢复期后AST、BUN与对照组相比有显著差异，但均在正常范围内波动。给药3个月后，高剂量的CRE与对照组相比有显著差异，恢复期后GGT与对照组相比有显著差异，但均在正常范围内波动。小剂量组给药3个月及恢复期后与对照组比较均无显著差异。
5)、主要脏器检查本制剂三个剂量组与对照组大鼠在给药3个月及恢复期结束后均进行尸体解剖，肉眼观察主要脏器未见明显异常。给药3个月及恢复期结束后各给药组脏器指数与对照组比较均无显著差异。
6)、病理组织学检查给药3个月及恢复期结束后，病检结果表明大剂量组与对照组比较无显著差异。
结论本试验根据《中药新药研究的技术要求》、《中药新药研究指南》和《新药临床前安全性评价与实践》的要求，根据本发明制剂的临床用量、疗程，确定高剂量为8.0g/kg，为临床人用量的267倍；中剂量为4.0g/kg，为临床人用量的133倍；小剂量为2.0g/kg，为临床人用量的66倍。连续给药3个月，按要求观察了各指标。结果显示各给药组的体重、血液学指标、血清生物化学指标以及主要脏器指数和病理组织学检查与对照组无显著差异。
综上所述，本发明制剂在所用剂量和用药时间内经口给药，对大鼠无明显毒性作用。
本发明相关药效学研究一、本药物制剂的抗疲劳研究实验方法取昆明种小鼠50只，体重18-20g，雌雄各半，于实验前禁食4h，空白对照组(C组)ig 0.8ml/20g常水，阳性对照组药三七总甙片组(S组)给300mg/kg，本发明制剂高剂量组(H组)给160mg/kg，中剂量组(M组)给80mg/kg，低剂量组(L组)给40mg/kg，给药60min后，每鼠负重相当小鼠下沉时间，以秒(S)计算。
结果见下表本制剂对小鼠的抗疲劳作用n＝10 x±SD
结论本发明制剂高剂量160mg/kg具有极显著性意义(P＜0.001)，阳性对照组药三七总甙片300mg/kg与中剂量80mg/kg一样延长游泳时间与空白对照组比较具有极显著性意义(P＜0.001)，低剂量40mg/kg，具有显著性意义(P＜0.05)。
二、本制剂常压下耐缺氧作用实验方法取昆明种小鼠50只，体重18-20g，雌雄各半，分成五组，每组10只，实验前禁食4h，给水饮。空白对照组(C组)给常水40ml/kg，阳性对照药组(S组)给300mg/kg三七总甙片，供试药高剂量组(H组)160mg/kg，中剂量组(M组)给80mg/kg，低剂量组(L组)给40mg/kg，给药60min后，放入120ml容积的磨口广口瓶中(瓶口涂凡士林，装入新鲜钠石灰10g)将瓶盖密塞，观察每只小鼠停止呼吸时间，以秒(S)计算。
结果 见下表常压下对小鼠的耐缺氧作用n＝10 x±SD
结论本发明制剂高剂量160mg/kg与中剂量80mg/kg具有极显著性意义(P＜0.001)。阳性对照药组三七总甙片300mg/kg，耐缺氧时间的延长与空白对照组比较具有非常显著性意义(P＜0.01)。本发明低剂量组40mg/kg，具有显著性意义(P＜0.001)。
三、对凝血时间影响的研究实验方法 取家兔25只，体重2-2.5kg，雌雄各半，分成5组，灌胃(ig)给药，空白对照组(C组)给10ml/kg常水，阳性对照药(S组)给灯盏花素片240mg/kg，高剂量组(H组)给供试品240mg/kg，中剂量组(M组)给供试品120mg/kg，低剂量组(L组)给供试品60mg/kg，给药前测一次凝血时间，以秒(S)表示。
玻片法 1、自家兔耳缘静脉取血2大滴，置于玻片两端，立即记录时间。2、每5s钟用针尖沿一定方向挑动血滴一次，直至针尖使血滴内连续挑起纤维丝为止。另一滴血作为最后挑起纤维丝的对照。应注意挑动血滴时应横贯血滴直径，连续挑起纤维丝为凝血时间终点。如血滴小，干涸，连续挑不起纤维丝时，应再放2大滴再实验。
结果 见下表对家兔凝血时间的影响n＝5 x±SD
与空白对照组比ΔΔΔP＜0.001，ΔΔP＜0.01，ΔP＜0.05。
结论 本发明制剂高剂量组与阳性对照药灯盏花素片一样，在1，2，3，4(h)小时凝血时间延长有极显著性意义(P＜0.001)，阳性对4h时非常显著性意义(P＜0.01)，低剂量在1，2，3(h)时具有非常显著性意义(P＜0.01)而在给药后4(h)是凝血时间延长，没有显著性意义(P＞0.05)。
四、对家兔血小板数的影响实验方法 取家兔20只，体重2.0kg以上，雌雄兼用。罐胃(ig)给药，空白对照组(C组)给同体积的常水，阳性对照药，灯盏花素片组(S组)240ml/kg，供试品高剂量组(H组)240mg/kg，中剂量组(M组)120mg/kg，低剂量组(C组)60mg/kg。给药前每兔测血小板数1次，给药后1，2，3，4(h)每兔测血小板1次，取赤血盐液1ml于小试管中，采兔耳缘静脉血0.1ml于上述小试管中，混匀，待红细胞溶解后，待红细胞溶解后，充分混匀，滴入计数池内，稳定5-8分钟，在高倍显微镜下调焦点计数。查400小格内小板数乘1000即得。
结果 见下表对家兔血小板数的影响n＝10 x±SD
ΔΔP＜0.01，ΔP＜0.05，各组与空白对照组比较经t检验本制剂高剂量240mg/kg，有非常显著性意义(P＜0.01)，中剂量组120mg/kg与阳性对照药及低剂量组60mg/kg给药2h时具有显著性意义(P＜0.05)。
结论本发明制剂高剂量组灌胃240mg/kg，在1，2，3，4(h)内对血小板数有抑制作用，1，2，3，4(h)内有非常显著性意义(P＜0.01)，中剂量组120mg/kg与阳性对照药1，2，3，4(h)内及低剂量组60mg/kg给药2h时，有抑制血小板数增加的作用，有显著性意义(P＜0.05)。
五、对急性血瘀大鼠血液流变学的影响实验方法与结果SD大鼠，雌雄兼用，适应1周后随机分组，分组及剂量见表1，每天给药1次，连续8天，正常组及模型组给等容量生理盐水。末次给药0.5h后除正常组外，各鼠皮下注射0.1％肾上腺素0.8ml·kg-1，2h将大鼠置于4℃冰水中侵泡5min，2h后再皮下注射0.1％肾上腺素0.4ml·kg-1，禁食18h后取血，肝素抗凝，测定血液流变学指标，结果见表1。
结论 本实验结果表明，本制剂高剂量(64.7g生物·kg-1)能非常显著降低急性血瘀大鼠的全血粘度(低切)，还原粘度(低切)、红细胞聚集指数及红细胞电泳指数；显著降低全血粘度(中切、高切)，还原粘度(中切)及血浆粘度。
本制剂中剂量(32.4g生物·kg-1)能非常显著降低急性血瘀大鼠的红细胞聚集指数及红细胞电泳指数；显著降低全血粘度(低切)、还原粘度(低切)及血浆粘度。
本制剂低剂量(16.2g生物·kg-1)能显著降低急性血瘀大鼠的血沉、红细胞聚集指数、红细胞电泳指数及血浆粘度，对全血粘度无显著影响。
见表1
表1、对急性血瘀大鼠血液流变学的影响(X±SD，n＝10)
注与血瘀模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
具体实施例方式实施例1.取三七总皂苷、灯盏花素90份和药用辅料10份，混合均匀，压片即得；2.取三七总皂苷、灯盏花素20份和药用辅料80份，混合均匀，制成软胶囊即得；3.取三七总皂苷、灯盏花素30份和药用辅料70份，混合均匀，制成硬胶囊即得；4.取三七总皂苷、灯盏花素60份和药用辅料40份，混合均匀，制成颗粒即得；5.取三七总皂苷、灯盏花素70份和药用辅料30份，混合均匀，制成丸剂即得；6.取三七总皂苷、灯盏花素95份和药用辅料5份，混合均匀，制成散剂即得；7.取三七总皂苷、灯盏花素10份和药用辅料90份，混合均匀，按照常规工艺制成滴丸剂。
以上仅仅选录了部分代表性配方，实际上由于选择各药用辅料、用量及配比的不同，可选用的处方还很多。
权利要求
1.一种治疗脑血栓后遗症、冠心病，心绞痛的药物制剂，其特征在于由5～95％的三七总皂苷、灯盏花素和余量的药用辅料制成。
2.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为片剂。
3.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为软胶囊剂。
4.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为硬胶囊剂。
5.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为颗粒剂。
6.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为丸剂。
7.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为滴丸剂。
8.根据权利要求1所述的治疗脑血栓后遗症、冠心病，心胶痛的药物制剂，其特征在于药物制剂为散剂。
全文摘要
本发明涉及以三七总皂苷、灯盏花素为原料组方制备的药品，其剂型为片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂。本发明所述制剂是由5～95％的三七总皂苷、灯盏花素和余量的药用辅料制成。本发明所述制剂的功能主治为活血化瘀、通络止痛、抑制血小板聚集和增加脑血流量；用于治疗脑血栓后遗症、冠心病，心绞痛。服用剂量小，安全、有效。本发明制剂比单用三七总皂苷和灯盏花素疗效更显著。
文档编号A61K31/7042GK1686153SQ200510010738
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月12日 优先权日2005年4月12日
发明者代思炜 申请人:代思炜