专利名称：降香羟丙基－β－环糊精包合物及其制剂和制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药制剂，更具体的说是降香的羟丙基-β-环糊精包合物及其制剂和制备方法。该包合物可用于制备注射剂、口服制剂和外用制剂，具有治疗心绞痛、心肌梗塞的作用。
背景技术：
降香为豆科植物降香檀Dalbergia odorifera T.Chen树干和根的干燥心材。别名绛香、降真香等。具有行气活血，止痛，止血的功能。主治脘腹疼痛，肝郁胁痛，胸痹刺痛，跌扑损伤，外伤出血等。
降香的主要化学成分为挥发油，挥发油中主要成分为反式-橙花叔醇，反式-β-金合欢烯、β-没药烯等。降香对心脑血管系统发挥作用的主要成分是挥发性成分，有实验表明降香挥发油及芳香水可明显抑制大鼠实验性血栓形成，提高孵育兔血小板cAMP的水平，促进兔血浆纤溶酶活性，具有抗血栓形成的作用。
对于治疗心脑血管系统的疾病，注射剂是一种起效快，作用好的剂型，但由于降香挥发油水溶性差，在水中几乎不溶，极大的降低了生物利用度，限制了药效的发挥，因而将降香制成中药注射剂受到了很大的限制。
目前，含降香的注射剂主要是取降香水蒸汽蒸馏的馏出液，除去油层的饱和水溶液，油层则被弃之，造成药材的浪费，同时，降香的水饱和溶液稳定性差。
业界人士在研究解决改善降香的水溶性问题上做了多方面的努力，有文献报道(郭春燕等.中国药师，2000，2，66)，采用β-环糊精对降香挥发油进行包合，降香挥发油的β-环糊精包合物能溶解于水中，同时提高了稳定性。但β-环糊精用量过大时会出现溶血的副作用，非肠道给药有肾毒性，25℃时水中溶解度为1.85％，40℃时为3.52％，溶解度仍低于注射剂溶解要求，因此，目前仍不能制成注射剂而应用于临床。
经检索，到目前为止，未发现任何有关于降香挥发油采用β-环糊精衍生物即羟丙基-β-环糊精进行包合，制备降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物及制剂和制备方法的专利和文献报道。
发明内容
为解决上述存在的问题，本发明的一个目的在于，提供一种降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物，能在不改变降香挥发油化学组成，仅利用新型辅料对其进行包合，提高其在水中溶解度，提高其稳定性和生物利用度。
本发明的另一个目的在于，提供降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物的制剂及其制备方法。应用有效的包合冻干工艺，制备出一种起效快、制剂质量稳定、生物利用度高，适用于治疗心血管疾病的中药制剂-注射用降香挥发油冻干粉及其他相关剂型。
经实验证明降香与羟丙基-β-环糊精按一定的比例包合后，降香的溶解度较包合前提高了40倍以上，由几乎不溶于水达到微溶于水，稳定性也有较大提高，从而完成了含有降香挥发油的注射制剂的制备，满足了临床的需要。
羟丙基-β-环糊精为β-环糊精的衍生物，具有两端开口的环状中空圆筒状分子结构，在分子空穴内可以包合大小和形状与空穴相适应的分子，羟丙基-β-环糊精的分子量为1300～1800，具有注射用辅料的性质极易溶于水，无溶血反应，毒性低，刺激性小，在人体内基本不被分解代谢，也不累积，可以提高许多药物的溶解度和稳定性，可应用于注射剂。
本发明所采用的技术方案是降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物，它是由下述原料按体积重量比(mL/g)组成降香挥发油羟丙基-β-环糊精＝1∶1～150；最佳配比为1∶10～45。经研究实验证明以1∶10～45比例包合，挥发油和羟丙基-β-环糊精的利用率最大，包合率可高达90％以上，羟丙基-β-环糊精用量少。尽管两者体积重量比为1∶1时即有包合物形成，但包合率较低，挥发油损失大，包合效果并不理想。
本发明的包合物制备方法，包括下列步骤首先选择符合中国药典规定的降香，经水蒸汽蒸馏法提取挥发油，水层浓缩至干，合并备用。
(1)按体积重量比(ml/g)1∶1～150取降香挥发油和羟丙基-β-环糊精。将羟丙基-β-环糊精溶于水中，比例为1∶1～200(重量体积比)。
(2)将含羟丙基-β-环糊精的水溶液在水浴中高速搅拌，缓慢滴加降香挥发油，全部滴加完毕后，密闭容器，继续高速搅拌0.5～16小时，室温静置或冰箱中冷藏1～36小时；(3)用0.22μm或0.45μm微孔滤膜过滤，滤液经灌装，冷冻干燥。得疏松白色粉末，即为降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物。
本发明的包合物也可采用其他方法制备，如超声波法，即将降香挥发油滴加到羟丙基-β-环糊精水溶液中，滴加的同时超声或滴加后超声10～40分钟，以超声代替搅拌，也可得到包合物；或采用研磨法，即将羟丙基-β-环糊精加适量水研磨为糊状，边研磨边加入降香挥发油，全部加完后继续研磨一段时间，低温真空干燥得包合物；也可采用磁力搅拌，球磨机、胶体磨研磨，高速组织捣碎机、高压(低压)均浆机均浆等方法高速搅拌。干燥的方法除冷冻干燥法外，还可采用真空干燥或喷雾干燥。
本发明包合物的制剂及其制备方法包括(1)将上述按一定比例制得的包合物溶液在百级净化车间，经过超滤和微孔滤膜过滤，滤液直接无菌灌装、冷冻干燥得注射用降香挥发油冻干粉针。
(2)将制得的包合物溶液加入其它药用辅料，调节渗透压、pH值，在百级净化车间，同上面操作，可制成注射剂或滴眼剂。
所述的注射剂主要包括调节pH值4-9的注射液；加入支持剂或赋形剂的冻干粉针；无菌分装的无菌粉针；加入等渗调节剂的输液等等。
(3)将制备的固体包合物加入药用辅料，按制剂要求，制成片剂、缓释片、速释片、控释片、胶囊、软胶囊、滴丸剂、软膏、栓剂、巴布剂、喷雾剂、气雾剂、经皮吸收制剂。
本发明所采用的药用辅料包括填充剂(如甘露醇、乳糖、聚乙二醇)，粘合剂(淀粉、微晶纤维素)，崩解剂(如羧甲基纤维素、低取代的羟丙基纤维素)，润滑剂(如滑石粉、硬脂酸镁)，湿润剂(如丙二醇、乙醇)，抗氧剂(如焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠)，防腐剂(苯甲醇)、等渗调节剂(NaCl、枸橼酸)等等，它们可以是常用剂量，以常用的配比与降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物混合，当包合物用量确定后，各药用辅料之间的配比可以根据需要适当调节。
本发明的优点在于提供了一种易溶于水的降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物，使降香挥发油的水溶性、稳定性增加，提高了降香挥发油的油利用率、溶出速率及生物利用度，减小了刺激性，同时提供了可供注射的降香挥发油冻干粉针及其制备方法。
本发明包合物的验证方法主要有(1).薄层色谱取降香挥发油包合物(约含降香挥发油6μl)加适量乙醚分三次洗涤，过滤，合并滤液，挥去乙醚，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为包合物乙醚洗涤液。洗涤后的包合物在干燥条件下挥去乙醚，加水溶解，用适量乙醚分三次萃取，合并乙醚萃取液，挥去乙醚，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为包合物提取液。另取降香挥发油，加无水乙醇制成每1ml含6μl的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙醚-三氯甲烷(7∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。结果降香挥发油包合物乙醚洗涤液无斑点，降香挥发油包合物提取液和降香挥发油对照品溶液斑点完全一致，说明降香挥发油形成了包合物，见附图1。
(2).差示热分析测试条件以Al2O3为参比，以10℃/min的升温速率在室温～400℃范围内对样品进行差示热分析。样品降香挥发油、羟丙基-β-环糊精、降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的机械物理混合物及降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的包合物。由DTA曲线可以看出，降香挥发油在169℃有一个吸热峰，在275℃有一个放热峰；羟丙基-β-环糊精在230℃有一个弱放热峰；二者的机械物理混合物在158℃有一个吸热峰，在230℃有一个放热峰，是降香挥发油和羟丙基-β-环糊精的峰的叠加；降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的包合物在203℃和277℃有两个放热峰，与上面三个样品的峰不同，表明形成一种新的物相，降香挥发油已被包合，见附图2-6。
(3).相溶解度分别配制浓度为0，2，4，8，10，12，14，16mg/ml的羟丙基-β-环糊精水溶液25ml，分别加入过量的降香挥发油，超声20min，静置，取下部溶液稀释至适当浓度，采用液相色谱法测定反式-橙花叔醇的含量。色谱条件为色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(15∶85)为流动相；检测波长为210nm；柱温30℃。理论板数按反式-橙花叔醇峰计算应不低于4000，反式-橙花叔醇峰与其他峰的分离度不小于1.5。以羟丙基-β-环糊精的摩尔浓度为横坐标，以反式-橙花叔醇的摩尔浓度为纵坐标作图，得相溶解度曲线。该曲线表明随着羟丙基-β-环糊精浓度的增加，所包合的反式-橙花叔醇浓度也增加，证明形成了包合物，见附图7。
图1为降香挥发油及包合物薄层色谱图，其中1.降香挥发油阳性时照溶液，2.降香挥发油包合物提取液，3.包合物乙醚洗涤溶液。
图2为降香挥发油的差示热分析谱图。
图3为羟丙基-β-环糊精的差示热分析谱图。
图4为降香挥发油与羟丙基-β-环糊精机械物理混合物的差示热分析谱图。
图5为降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物的差示热分析谱图。
图6为差示热分析综合比较图。其中1.降香挥发油的DAT曲线，2.羟丙基-β-环糊精的DAT曲线，3.降香挥发油与羟丙基-β-环糊精机械物理混合物的DAT曲线，4.降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物的DAT曲线。
图7为降香挥发油的羟丙基-β-环糊精包合物相溶解度曲线。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明实施例1取羟丙基-β-环糊精5g，溶于500ml注射用水中，在电力旋转搅拌、50℃水浴中，将降香挥发油0.2ml缓慢逐滴加入到羟丙基-β-环糊精水溶液中，密闭容器，继续剧烈搅拌2小时，室温静置24小时，使用0.45μm微孔滤膜过滤得包合物溶液，灌装，冷冻干燥，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的包合物，经液相色谱法测定，包合率为94％。
实施例2将例1得到的包合物粉末用乙醚洗涤，挥尽乙醚得白色包合物粉末。
实施例3取羟丙基-β-环糊精250g，溶于2500ml注射用水中，在电力旋转搅拌下、40℃水浴中，将降香挥发油5.0ml，缓慢逐滴加入到羟丙基-β-环糊精水溶液中，密闭容器，继续搅拌3小时，室温静置12小时，超滤，取部分滤液分装，冷冻干燥，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的包合物，经液相色谱法测定，包合率为95％。
实施例4将例3得到的剩余滤液，进行喷雾干燥，得到包合物粉末。
实施例5取羟丙基-β-环糊精30g，溶于150ml注射用水中，在超声振荡条件下，将降香挥发油0.66ml缓慢逐滴加入到羟丙基-β-环糊精水溶液中，密闭容器，继续超声振荡20分钟，冰箱中冷藏12小时，将包合后溶液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液冷冻干燥，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了包合物，经液相色谱测定，包合率为92％。
实施例6取羟丙基-β-环糊精1.7g，溶于35mL注射用水中，在磁力搅拌、35℃条件下，将降香挥发油0.17ml缓慢逐滴加入到羟丙基-β-环糊精水溶液中，密闭容器，继续搅拌2小时，室温静置30小时，使用0.45μm微孔滤膜过滤，分装，冷冻干燥，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了降香挥发油与羟丙基-β-环糊精的包合物，经液相色谱法测定，包合率为61％。
实施例7取羟丙基-β-环糊精2.5g，加2.5ml水于研钵中研磨为糊状，取降香挥发油0.16ml，逐滴加入羟丙基-β-环糊精中，边滴加边研磨，全部滴加完毕后，继续研磨20分钟，常温减压干燥，干燥物经研磨得白色粉末，经薄层色谱证实，形成了包合物。
实施例8取羟丙基-β-环糊精50g，溶于500ml注射用水中，加入降香挥发油0.5ml，用高压均浆机高速搅拌20分钟，室温静置12小时，得包合物溶液。
实施例9取羟丙基-β-环糊精150g，溶于500mL注射用水中，加入降香挥发油1ml，用胶体磨高速搅拌30分钟，室温静置12小时，得包合物溶液。
实施例10将实施例9包合物溶液用截留分子量5000～10000的滤膜超滤除热原后，再经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，无菌灌装，冷冻干燥，加塞压盖，得注射用降香挥发油冻干粉针。
实施例11将实施例8包合物溶液加磷酸钠5g调解pH至6.5-8，加入甘露醇20g、乳糖20g、甘氨酸15g，加入0.5g活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液按每支2mL进行分装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，加塞压盖。
实施例12将实施例4得到的包合物粉末150g，加糊精42g，微粉硅胶8g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒。
实施例13将实施例4得到的包合物粉末100g，加可压性淀粉100g、糊精25g、蔗糖25g、硬脂酸镁2.5g，混合均匀，粉末直接压片，制成1000片，包薄膜衣。
以上尽管本发明结合它的专门的实施例已做了详细的描述，但是很明显对本技术领域的熟练人来说仍能做出各种各样的变化和改进，这些都不会偏离本发明权利要求的精神实质和保护范围。
权利要求
1.一种降香羟丙基-β-环糊精包合物，其特征在于，它是由下达原料按体积/重量比组成，降香∶羟丙基-β-环糊精＝1∶1～150。
2.按权利要求1所述的包合物，其特征在于，所述的降香与羟丙基-β-环糊精的体积/重量比为1∶10～45。
3.一种降香羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法，其特征在于，按上述体积/重量比，将降香挥发油缓慢滴加到含羟丙基-β-环糊精的水溶液中，电动剧烈搅拌或置于超声波发生器中进行超声振荡，或采用胶体磨研磨、高压或低压均浆机均浆；使用微孔滤膜滤过或超滤得包合物溶液，经冷冻干燥或喷雾干燥，制得白色疏松粉末。
4.一种降香羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法，其特征在于，按上述体积/重量比，将降香挥发油加入到羟丙基-β-环糊精中，加入适量水研磨，采用低温真空干燥制得白色包合物粉末。
5.一种降香羟丙基-β-环糊精包合物制剂的制备方法，其特征在于，将得到的包合物溶液经除菌、除热原、无菌灌装、冷冻干燥制得冻干粉针；或将制备的包合物溶液加入药用辅料，调解渗透压，配成注射剂或滴眼剂。
6.一种降香羟丙基-β-环糊精包合物制剂的制备方法，其特征在于，将制备的白色包合物粉末加入药用辅料，制成片剂、缓释片、速释片、控释片、胶囊、软胶囊、滴丸剂、软膏、栓剂、巴布剂、喷雾剂、气雾剂、经皮吸收制剂。
全文摘要
本发明涉及降香的羟丙基－β－环糊精包合物及其制剂和制备方法。它是由降香和羟丙基－β－环糊精按重量比1∶1～150组成；将降香挥发油加入到羟丙基－β－环糊精的水溶液中，在一定温度下高速搅拌，静置，干燥后形成易溶于水的包合物；包合物水溶液经超滤和微滤，灌装，进行冷冻干燥，制成注射用降香冻干粉。本发明的包合物，能在不改变降香挥发油化学组成，仅利用新型辅料对其进行包合，包合率高达90％以上，具有起效快、制剂质量稳定、生物利用度高的特点，可以用来注射、口服或外用。用于治疗心脑血管疾病。
文档编号A61P9/10GK1961892SQ20051001593
公开日2007年5月16日 申请日期2005年11月8日 优先权日2005年11月8日
发明者张铁军, 王靖, 王文燕 申请人:天津药物研究院