专利名称：一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及复方制剂药物，特别是一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂及其制备方法。
背景技术：
目前常用的中成药，由于药物生产工艺技术落后，科技含量不足，剂型粗糙，消费者难以接受；工艺长时间的加热，导致热敏性有效成分的破坏。中医药对流感的治疗，具有独特的疗效。″不换金正气散″出自《太平惠民和剂局方》，是宋代治疗瘴疫时气引致的呕吐泄泻兼有表证的传统名方，用于外感风寒、湿滞脾胃之胃肠型感冒(流行性感冒的一种)。将中医传统名方″不换金正气散″用CO2超临界流体萃取技术提取精制，用药效学筛选指标进行有效成分的跟踪；而研制的新制剂，会有意想不到的好效果。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足而提供一种将古方与现代制剂技术相结合，既美观又方便、服用剂量小的用于治疗急性胃肠炎症和抗感冒病毒的复方制剂及其制备方法。
本发明的目的是这样实现的一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂，其特征在于复方制剂的组方是将苍术5-30份、厚朴5-30份、陈皮5-30份、广藿香油0.1-6份、陈皮5-30份、甘草浸膏1-10份、半夏5-30份、黄芩5-30份，加入常规辅料或赋形剂，制成口服制剂、雾化剂或注射剂。
一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂的制备方法，其特征在于取苍术、厚朴、陈皮原药材，粉碎成粗粉，超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取，萃取参数为萃取温度45±3℃，萃取压力25±5MPa，解析压力6～7MPa，解析温度55±5℃，二氧化碳流量为25±3L/h，萃取时间为3±1小时，所得萃取物置洁净容器中，备用；萃取后的药渣与半夏、黄芩用7-9倍水煎煮提取2-4次，每次1±0.5小时，滤过，合并滤液，滤液真空浓缩至相对密度1.20±0.05，放置至室温，喷雾干燥，干浸膏粉置洁净容器中，备用；取SFE-CO2提取物、水提干浸膏粉、甘草浸膏粉、广藿香油与适量淀粉混匀，加入4-6％羧甲基淀粉钠，混匀，干压制成颗粒，填充至胶囊，分装，即得。
本发明复方制剂中抗胃肠型感冒病毒的主要成分为厚朴酚、和厚朴酚、黄芩苷、苍术挥发油、广藿香油。本发明的胶囊剂定名为黄芩正气胶囊，(下同)。
本发明黄芩正气胶囊具有以下药理作用黄芩正气胶囊对大鼠幽门结扎性、应激性急性胃溃疡和盐酸-乙醇所致大鼠急性胃粘膜损伤有明显的抑制作用；能减少胃液和胃酸分泌，抑制胃蛋白酶活性；促进小鼠胃排空，并有抑制肠功能亢进小鼠的小肠推进作用，对正常及亢进离体兔肠有明显抑制作用；对醋酸腹腔注射、甲醛足跖注射所致小鼠疼痛均有明显的抑制作用。对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠蛋清性足肿胀、二甲苯所致小鼠耳肿胀均有明显抑制作用；体外具有抑制金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌及白色念珠菌等九种常见肠道致病菌的作用，其中对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、伤寒沙门氏菌和福氏志贺氏菌的抑菌作用较强。体外实验证明黄芩正气胶囊内容物对甲型流感病毒H3N2亚型、高致病性禽流感病毒H5N1亚型和乙型流感病毒株，在20mg/ml浓度时均有杀灭作用。
图1是本发明的工艺流程图。
具体实施例方式
下面实验例用于进一步说明本发明实验例1 黄芩正气胶囊治疗急性胃肠炎症主要药效学研究结果。
试验时动物随机分组，设正常或模型组为空白对照，选择功效与主治基本相似的藿香正气丸为阳性药物对照，相关试验设阿斯匹林、阿托品、易蒙停、乙酰胆碱、吗丁啉、雷尼替丁为阳性药物对照，以保证试验方法的可靠性。受试药物按临床剂量的5倍、10倍、20倍、30倍分别设3个剂量组(大鼠与家鸽为5倍、10倍、20倍，小鼠为10倍、20倍、30倍)。
试验结果表明黄芩正气胶囊对大鼠幽门结扎性、应激性急性胃溃疡和盐酸-乙醇所致大鼠急性胃粘膜损伤有明显的抑制作用；能减少胃液和胃酸分泌，抑制胃蛋白酶活性；促进小鼠胃排空，并有抑制肠功能亢进小鼠的小肠推进作用，对正常及亢进离体兔肠有明显抑制作用；对醋酸腹腔注射、甲醛足跖注射所致小鼠疼痛均有明显的抑制作用。对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠蛋清性足肿胀、二甲苯所致小鼠耳肿胀均有明显抑制作用；体外具有抑制金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌、伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌及白色念珠菌等九种常见肠道致病菌的作用，其中对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、伤寒沙门氏菌和福氏志贺氏菌的抑菌作用较强。
本研究结果表明，黄芩正气胶囊具有抗溃疡，调节胃肠运动，抑制胃液和胃酸分泌，抑制胃蛋白酶活性，以及镇痛、抗炎和抑菌的作用。本研究为黄芩正气胶囊燥湿运脾，行气和胃。主治四时伤寒，呕吐泄泻，腹胀等症提供了药理学依据，从而肯定了黄芩正气胶囊的有效性。
实验例2 黄芩正气胶囊体外抗流感病毒试验研究1材料1.1药物供试品黄芩正气胶囊SFE-CO2提取物，用DMSO溶解成20mg/ml的溶液备用；供试品黄芩正气胶囊水提取物，用双蒸水溶解成200mg/ml的溶液备用；利巴韦林注射液(100mg/ml)，批号031119，上海通用药业股份有限公司。
1.2试验毒株及敏感细胞流行性感冒病毒A/深圳/1/99(H3N2)(A型)；B/京防/184/93(B型)；禽流感病毒A/Goose/GD/2/96(H5N1)均由深圳市疾病控制中心提供。MDCK细胞(狗肾细胞)由中国疾病控制中心提供，经复苏、传代制成单层细胞。
1.3试剂RPMI1640细胞生长液(含10％新生牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100ug/ml)；RPMI1640细胞维持液(含青霉素100IU/ml、链霉素100ug/ml)。
1.4鸡血球悬液于公鸡翅下肱静脉采血，取2ml鸡血，置离心管中，加0.85％生理盐水洗涤3次，最后一次以每分钟2000转的速度沉淀10分钟，洗涤后的血球用0.85％生理盐水稀释成浓度为0.5％。
2方法2.1流感病毒毒力测定病毒血凝效价滴定流感病毒冻干菌株以，在鸡胚中培养传代后，在96孔板内用生理盐水做倍比稀释，得到病毒稀释度顺序为1∶2～1∶1024，同时以生理盐水为空白对照，采用鸡红血细胞做血细胞凝集试验测定血凝滴度，血凝滴度高的毒种在MDCK细胞培养内传代。细胞病变(CPE)测定将96孔细胞培养板中生长成单层的MDCK细胞上清吸弃，用细胞维持液洗一遍，分别加入已做10倍系列稀释的病毒悬液(10-1～10-8)，每稀释度平行2孔，每孔50μl，置37℃、5％CO2培养箱中培养，以细胞病变测定组织培养病毒的半数感染剂量即TCID50。
2.2供试品对MDCK细胞毒性测定将96孔细胞培养板中生长成单层的MDCK细胞上清吸弃，分别加入用细胞维持液稀释成不同浓度的供试品溶液(按1∶2～1∶128倍比稀释)，每稀释度平行2孔，每孔100μl，同时设溶媒对照和正常细胞对照，在37℃、5％CO2培养箱中培养，观察细胞病变，细胞出现融合、圆缩和脱落现象者，为药物有毒性。
2.3供试品对流感病毒血凝抑制试验血凝抑制试验在血凝板内进行，设空白溶媒对照(不加病毒和药物)、流感病毒对照(不加药物)、阳性药物对照(利巴韦林)和供试品药物2组。将药物以对细胞最大无毒浓度为起始浓度，分别按2倍系列稀释(由1∶2～1∶128共7个浓度，相当于含药量50％～0.78％)，加入用细胞培养液稀释的4倍血凝滴度流感病毒悬液，每孔中加入病毒悬液25μl，药物25μl后，在37℃、5％CO2培养箱中培养1～2小时，再加入0.5％鸡血球悬液50μl，摇匀，使红细胞与病毒充分混匀，置室温30分钟后观察血凝现象并记录结果。以出现“++”的流感病毒最高稀释度为血凝终点，该稀释度的倒数即为流感病毒的血凝滴度。
3.结果3.1病毒毒力测定结果3.1.13种流感病毒株血凝滴度见表1。
凝集抑制试验时采用4个血凝单位的病毒稀释液，因此从表1可见A型病毒1∶256时出现“++”结果，则1∶64稀释度为4个血凝单位；B型流感病毒和H5N1型流感病毒4个血凝单位分别为1∶128和1∶64。
表1 病毒血凝滴度测定结果
注“-”表示无细胞病变；“++++”表示一层红细胞均匀铺于管底；“+++”表示基本同上，但边缘不整齐，有下垂趋向；“++”表示血球于管底形成一个环状，四周有小凝块。
3.1.2 3种流感病毒株对MDCK细胞导致的病变结果见表2。
表2 病毒毒力测定结果
注“-”表示无细胞病变；“+～++++”分别表示～25％、～50％、～75％和100％产生细胞病变。
由表2可知，生长良好的MDCK细胞接种A型流感病毒后，病毒稀释度为10-5可见半数细胞病变，稀释度为10-3可见完全细胞病变，此型流感病毒的TCID50为10-5；接种B型流感病毒后，病毒稀释度为10-6可见半数细胞病变，稀释度为10-4可见完全细胞病变，此型流感病毒的TCID50为10-6；接种H5N1型流感病毒后，病毒稀释度为10-5可见半数细胞病变，稀释度为10-3可见完全细胞病变，此型流感病毒的TCID50为10-5。
3.2.2供试品对MDCK细胞毒性测定结果见表3表3.供试品对MDCK细胞毒性测定结果
由表3可知，利巴韦林TD0为1∶64(1.56mg/ml)，TD50为1∶32(3.12mg/ml)；水提膏粉TD0为1∶4(50mg/ml)，TD50为1∶2(100mg/ml)；SFE-CO2提取物TD0为1∶16(1.25mg/ml)，TD50为1∶8(2.5mg/ml)。
3.2.3供试品对流感病毒的血凝抑制试验结果见表4表4 供试品对流感病毒的血凝抑制试验结果
注“+”为出现血凝现象，“-”为不出现血凝现象由表4可知，SFE-CO2提取物对A型、B型和H5N1型流感病毒所致血凝的抑制浓度分别为1.25mg/ml、2.50mg/ml和1.25mg/ml；水提膏粉对A型、B型和H5N1型流感病毒所致血凝的抑制浓度分别为100mg/ml、50mg/ml和100mg/ml。
实验例3 黄芩正气胶囊治疗感冒的药效学研究本资料观察了黄芩正气胶囊的抗病毒、抗细菌、抗炎、解热及对免疫功能的影响。小鼠体内抗病毒实验表明，黄芩正气胶囊(中、高剂量)能显著抑制病毒感染小鼠的肺指数增高。体外抗病毒实验证明对呼吸道合胞病毒、腺病毒3型和柯萨奇B组病毒I型3种病毒增殖的抑制指数分别为8、4和1。阳性对照药抗感解毒冲剂对3种病毒增殖的抑制指数分别为4、4和2。二者相比，体外抑制病毒的效果无显著差异。
体外抑菌实验表明，黄芩正气胶囊对6种28株细菌均有不同程度的抑制作用。其中对金葡菌的抑制作用最明显；抗感解毒冲剂对金葡菌的抑制程度与本品相当，但对其他种细菌的抑制作用明显弱于本品。小鼠体内抗金葡菌实验证明黄芩正气胶囊和抗感解毒冲剂在体内对金葡菌感染均无明显的抑制作用。
抗炎作用实验结果表明，黄芩正气胶囊(18g/kg，36g/kg，72g/kg)对二甲苯所致的小鼠耳肿胀均有非常显著的抑制作用(p＜0.01)，抗感解毒冲剂(36g/kg)也表现非常显著的抑制作用，但作用弱于同剂量的黄芩正气胶囊。黄芩正气胶囊(36g/kg)对角叉菜胶所致肿胀有一定的抑制作用，但没有统计学意义18g/kg，72g/kg黄芩正气胶囊对角叉菜胶所致肿胀形成没有明显影响；同剂量的抗感解毒冲剂在角叉菜胶致炎后1小时有显著的抑制肿胀作用，致炎后2-5小时内没有影响。黄芩正气胶囊对乙酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加没有影响，36g/kg，72g/kg两个剂量组则能非常显著的抑制腹腔毛细血管通透性增加抗感解毒冲剂也有显著的抑制作用；同剂量两种药物比较，前者作用略强。
解毒作用实验结果表明，黄芩正气胶囊各剂量(18g/kg，36g/kg，72g/kg)与抗感解毒冲剂组(36g/kg)对干酵母引起的大鼠发热均无显著影响。
对免疫功能影响的实验结果表明，黄芩正气胶囊(36g/kg，72g/kg)对二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应有显著的抑制作用，具有一定的剂量依赖关系；抗感解毒冲剂组(36g/kg)也表现有抑制作用。
综上所述，黄芩正气胶囊具有抗病毒、抗菌作用；抗炎作用略强于同剂量的抗感解毒冲剂黄芩正气胶囊能抑制二硝基氯苯所致的小鼠迟发型超敏反应对干酵母引起的大鼠发热无显著影响。
图1为本发明的黄芩正气胶囊的生产工艺流程图。
具体实施方式
实施例1制成口服胶囊剂、片苍术21.3份、厚朴21.3份、陈皮21.3份、广藿香油0.5份、甘草浸膏2.4份、半夏21.3份、黄芩11.8份。
制成胶囊或片1000粒，口服，一次2粒，一日3次，连续服3天。
实施例2制成雾化剂苍术21.3份、厚朴21.3份、陈皮21.3份、广藿香油0.5份、甘草浸膏2.4份、半夏21.3份、黄芩11.8份。
制成雾化剂1000ml，每瓶50ml，每日5次，连续用3天。
实施例3制成冻干粉剂苍术21.3份、厚朴21.3份、陈皮21.3份、广藿香油0.5份、甘草浸膏2.4份、半夏21.3份、黄芩11.8份。
制成冻干粉剂1000g，每支5g，每日2次，肌肉注射，连续用3天。
实施例4制成静脉滴注剂苍术21.3份、厚朴21.3份、陈皮21.3份、广藿香油0.5份、甘草浸膏2.4份、半夏21.3份、黄芩11.8份。
制成静脉滴注剂，每支50ml，每日2次，静脉滴注，连续用3天。
实施例5制成口服液体制剂苍术21.3份、厚朴21.3份、陈皮21.3份、广藿香油0.5份、甘草浸膏2.4份、半夏21.3份、黄芩11.8份。
制成口服液体制剂1000ml，每支20ml，每日3次，连续用3天。
实施例6提取工艺苍术、厚朴、陈皮原药材，粉碎成粗粉，超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取，萃取参数为萃取温度45℃，萃取压力25MPa，解析压力6～7MPa，解析温度55℃，二氧化碳流量为25.0L/h，萃取时间为3小时，所得萃取物置洁净容器中，备用。萃取后的药渣与姜半夏、黄芩用8倍水煎煮提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液真空浓缩至相对密度1.20，放置至室温，喷雾干燥，干浸膏粉置洁净容器中，备用。
权利要求
1.一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂，其特征在于复方制剂的组方是将苍术5-30份、厚朴5-30份、陈皮5-30份、广藿香油0.1-6份、陈皮5-30份、甘草浸膏1-10份、半夏5-30份、黄芩5-30份，加入常规辅料或赋形剂，制成口服制剂、雾化剂或注射剂。
2.一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂的制备方法，其特征在于取苍术、厚朴、陈皮原药材，粉碎成粗粉，超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取，萃取参数为萃取温度45±3℃，萃取压力25±5MPa，解析压力6～7MPa，解析温度55±5℃，二氧化碳流量为25±3L/h，萃取时间为3±1小时，所得萃取物置洁净容器中，备用；萃取后的药渣与半夏、黄芩用7-9倍水煎煮提取2-4次，每次1±0.5小时，滤过，合并滤液，滤液真空浓缩至相对密度1.20±0.05，放置至室温，喷雾干燥，干浸膏粉置洁净容器中，备用；取SFE-CO2提取物、水提干浸膏粉、甘草浸膏粉、广藿香油与适量淀粉混匀，加入4-6％羧甲基淀粉钠，混匀，干压制成颗粒，填充至胶囊，分装，即得。
全文摘要
本发明涉及一种治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂及其制备方法，其特征在于复方制剂的组方是将苍术5－30份、厚朴5－30份、陈皮5－30份、广藿香油0.1－6份、陈皮5－30份、甘草浸膏1－10份、半夏5－30份、黄芩5－30份，用CO2超临界流体萃取技术提取精制，制成口服制剂、雾化剂或注射剂，制成一种既美观又方便、服用剂量小、医疗效果显著的用于治疗急性胃肠炎症和抗流感病毒的复方制剂。
文档编号A61P1/00GK1718232SQ200510035200
公开日2006年1月11日 申请日期2005年6月16日 优先权日2005年6月16日
发明者苏子仁, 赖小平, 陈建南 申请人:广州中医药大学