专利名称：治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法和质控方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法和质控方法，属于药品的技术领域。
背景技术：
目前，我国每年心脑血管病死亡约400万人，占死亡人数的3/5以上，已成为威胁人类健康的首要因素。尽管目前有大量中西药面试，但随着疾病谱的不断变化及老龄化年龄的到来，目前药物不断显示出它的局限性，为此，研究开发治疗心脑血管这一重大疾病的药物就始终成为人们关注的焦点和热点。
党参，具有补中益气，健脾益肺的功效，用于脾肺虚弱、气短心悸、食少便溏、虚喘咳嗽，内热消渴等症状，研究表明，党参中苷类成分为主的有效部位，具有补气强心、缓解心肌缺血、活血化瘀等作用，药效学和现代临床显示，党参对于气虚、脾虚导致的心脏疾患、休克等症有良好的疗效；曲克芦丁具有抑制血小板聚集，防止血栓形成，同时对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性药等作用，广泛应用于心脑血管疾病的治疗。但临床发现，党参制剂多为纯中药制剂，起效慢，疗程长，生物利用度不高，疗效波动性大；而曲克芦丁有一定的副作用，不适用于长期服用，临床应用也受到一定限制。检索文献和专利数据库，未发现有党参有效部位与曲克芦丁配伍组方的制剂。为此，本发明人采用党参有效部位党参总苷与曲克芦丁配伍组方，考查其成型工艺及药效作用，同时深入研究党参总苷与曲克芦丁配伍的最佳比例范围，进而为患者提供一种更加安全有效，疗效波动范围小，毒副作用小的药物制剂。
发明内容
鉴于以上情况，本发明人开发出一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，主要由党参总苷与曲克芦丁组方。党参总苷具有补气强心、缓解心肌缺血、活血化瘀等作用，曲克芦丁可抑制红细胞、血小板聚集，防止血栓形成，增加血氧饱和度，改善微循环，促进新血管生成，增进侧支循环，增加脑血流量，增加半暗带区域的供血，改善血流动力学的各项指标，促进病变周围神经功能的恢复，改善临床症状和体征，单独制剂已广泛用于心脑血管疾病的治疗。迄今为止，没有两者配伍的制剂。为此，本发明的目的在于公开这种主要由曲克芦丁与党参总苷组方的药物组合物，该药物组合物成分明确，质量可控，标本兼治，疗效明显提高；本发明的目的还在于提供该药物组合物不同剂型的制备方法和质控方法；在实验筛选的基础上，优选出二者的最佳的组方及工艺，得到的产品，经药效学试验表明，协同增效，较单独的党参制剂，曲克芦丁制剂，疗效均有显著提高。
本发明所采用的技术方案是一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，按照重量份数计算，它是主要由曲克芦丁1份和党参总苷0.01～10份组成。准确地说，按照重量份数计算，它是主要由曲克芦丁1份和党参总苷0.1～5份组成。优选的组方是按照重量份数计算，它是主要由曲克芦丁1份和党参总苷0.5～3份组成。
所述组合物剂型为直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、微丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解片、分散片剂、膜剂、舌下含片等药剂学上所有可以接受的剂型。优选的剂型包括直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及滴丸剂、微丸剂、口服液体制剂、口腔崩解片、分散片剂、舌下含片。
所述的组合物制剂可以在将党参总苷和曲克芦丁中的一种或两种制备成脂质体或前体脂质体的基础上制得。
党参总苷有效部位是市售的或采用如下的方法制备的取党参药材，加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩得党参粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、水返溶法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得党参总苷有效部位。
按照重量百分比计算，口服制剂中苷类成分的含量不低于制剂中扣除曲克芦丁量、制剂辅料量和水分量后的总固体量的50％，注射制剂中苷类成分的含量不低于扣除曲克芦丁量、制剂辅料量和水分量后的总固体量的70％；曲克芦丁含量应为制剂标示量的90.0％～110.0％。
注射用无菌块状物这样制备取曲克芦丁，加注射用水，加酒石酸或枸橼酸搅拌使之溶解，药液备用；取党参总苷加注射用水搅拌使溶解，滤过，滤液备用；将上述两药液合并，煮沸后加入0.5％(W/V)的活性炭，保持微沸30分钟，稍冷过滤，滤液调pH值至5.5～7.0，煮沸，冷藏(4℃)过夜，粗滤、精滤；将甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述滤液混匀，滤过，加注射用水至规定量，分装，冷冻干燥，预冻温度-45℃，预冻时间10h；开始抽真空，并升温至-40℃，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，升温至30℃，保持2h，即得。
所述的组合物主要用于治疗脾虚型、气虚型之冠心病、肺心病、脑缺血、血栓性静脉炎、毛细血管出血、神经衰弱、更年期综合症等疾病。
所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的质量控制方法包括以下全部或部分内容(1)指纹图谱测试，包括以党参苷类成分特征为主的指纹图谱；(2)党参药材、党参炔苷、党参苷I、苍术内酯III、曲克芦丁中全部或部分的鉴别测试方法；(3)党参炔苷、党参苷I、苍术内酯III、总苷、曲克芦丁中全部或部分成分的含量测试方法。
现有技术中，党参和曲克芦丁均是治疗心脑血管疾病的有效药物，但以党参入药的制剂，存在起效较慢，生物利用度低，疗效波动大等弊端，而曲克芦丁静脉给药虽然起效较快，但有不良反应，不适于长期服用；所以，本申请人将党参总苷与曲克芦丁组合成新制剂进行开发研究，通过配伍发挥两者在冠心病心绞痛、心律失常、肺心病、脑血栓等的协同互补效应，为心脑血管疾病的治疗增加一个新的用药选择。同时，可以系统深入研究党参总苷与曲克芦丁配伍的安全性和质量的可控性，为临床安全用药提供保证。通过血栓形成模型试验和血小板聚集试验，对这两种药物进行了系统的处方筛选试验，结果发现党参总苷∶曲克芦丁＝0.5～3∶1的处方药理作用较强且用量较低、制剂成型性和稳定性良好，两者配伍能达到增效减毒的效果。本发明的药物制剂，纯度高、成分明确，质量可控，同时克服了纯中药制剂疗效波动大，西药不良反应多的缺点，能确保临床疗效稳定和用药安全，相对于党参、曲克芦丁的单独制剂不仅疗效更好，标本兼治，协同增效减毒，而且使用携带均很方便，提供了多种不同的注射制剂和口服制剂的制备方法，适宜于不同人群使用，避免了剂型单一给医患人员带来的不利。
为证明本发明提供的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验。
实验例1对不同配比药效学比较研究1、药物法所致血栓形成模型试验健康雄性小鼠135只，体重25～35g，分为9组，分组见下表，每组15只，按下表所示给予相应药物，灌胃给药1小时后尾静脉注射胶原蛋白(250μg/只)与肾上腺素(9μg/只)的混合诱导剂，注射后即观察5分钟之内小鼠死亡数或15分钟内小鼠偏瘫的未恢复数，计算药物对小鼠脑血栓的保护率，结果见表1。
表1对胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓形成的影响
由表1可知，党参总苷和曲克芦丁不同配比的药物对胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓有保护作用，该作用的强弱程度与药物的配比有关。其中以党参总苷∶曲克芦丁＝0.5～3∶1的处方药理作用较强且用量较低。
2、对兔血小板聚集性的影响取家兔45只，体重3～5kg，雄性，分为9组，分组见下表，每组5只，按下表所示给予相应药物，给药前自心脏取血测定血小板表面活性和聚集性，于耳缘静脉注射相应药物或等量生理盐水，1小时后复查血小板表面活性或聚集性。结果见表2。
表2对血小板聚集性的影响
由表2可知，党参总苷和曲克芦丁不同配比的药物能显著降低血小板表面活性或聚集性作用，该作用的强弱程度与药物的配比有关。
表1、表2表明党参总苷配伍曲克芦丁能够产生协同增效作用，药效比单用同剂量曲克芦丁或党参总苷均有明显提高，曲克芦丁和党参总苷不同配比的药物均能显著增加疗效，但作用的强弱程度与药物的配比有关；从实验结果分析，党参总苷和曲克芦丁的最佳配比为曲克芦丁1份，党参总苷0.5～3份。
实验例2注射剂成型工艺研究2.1pH值对注射液的影响本申请人在研制中发现，适宜的酸碱度是药品稳定的重要因素，为适应人体生理需要，同时还要考虑药液中各类成分的性质，在配液时需要对药液的pH值进行适当调整。本申请人对不同pH值的注射液40℃放置3个月，分别考察其稳定性。
结果表明，本发明合理的pH值范围为5.5～7.0。
2.2冻干工艺考查2.2.1支架剂种类的筛选支架剂种类筛选
由表可知，在所筛选的辅料中，在其他条件相同的情况下，大部分辅料均可制成冻干粉针，但是从成品率、成型状况和样品的复溶性角度综合考察，单独使用甘露醇的效果好于其它几种辅料，即可满足注射剂各项要求，同时尽量减少添加过多辅料。
2.2.2支架剂用量筛选将不同浓度的甘露醇溶液(60mg/ml、120mg/ml和150mg/ml)与药液以不同比例进行混合，过滤，每支西林瓶装量为3ml，冷冻干燥。冻干条件-45℃，预冻8h后，开始抽真空，并升温至-40℃，保持10h；升温至-30℃，保持10h；升温至-20℃，保持10h；升温至-10℃，保持5h；升温至0℃，保持5h；升温至15℃，保持2h；升温至30℃，保持2h，结果如表。
甘露醇用量筛选
由表可知，当支架剂用量与药液的比例为2∶1时，样品性状以甘露醇浓度为120mg/ml和150mg/ml的样品比较好，60mg/ml的样品有部分塌陷，但是大部分还是成型的，但综合考虑辅料的用量和临床服用量，最佳选择甘露醇浓度为120mg/ml，甘露醇溶液与药液的体积比为2∶1。
实验例3分散片崩解剂筛选分散片中崩解剂的种类、数量直接影响到制剂的分散均匀性，是衡量分散片质量的主要指标，因此我们选用崩解时间为考核指标对不同的崩解剂进行考察，结果见下表。
崩解剂考核表
从上述试验的结果可以看出，大部分崩解剂都可以改善分散片的崩解时间，均可以达到分散片的要求。但是相比之下，采用交联聚乙烯吡咯烷酮和低取代羟丙基纤维素组合后，崩解效果最佳。
具体的实施方式本发明的实施例1曲克芦丁10g党参总苷30g取曲克芦丁、党参总苷加注射用水搅拌使溶解，滤过，滤液煮沸后加入0.5％(W/V)的活性炭，保持微沸30分钟，稍冷过滤，滤液调pH值至5.5～7.0，煮沸，冷藏(4℃)过夜，粗滤、精滤；将甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述滤液混匀，滤过，加注射用水至规定量，分装，冷冻干燥，预冻温度-45℃，预冻时间10h；开始抽真空，并升温至-40℃，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，升温至30℃，保持2h，即得含有3份党参总苷和1份曲克芦丁的注射用无菌块状物。
本发明的实施例2曲克芦丁10g党参总苷5g取曲克芦丁、党参总苷加注射用水搅拌使溶解，滤过，滤液调节pH值为5.5～7.0，加入0.5％经活化的针用活性炭，煮沸吸附，除炭，精滤，滤液加注射用水至规定量，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，分装到安瓿瓶中，灭菌，分装，即得含有0.5份党参总苷和1份曲克芦丁小容量注射液或注射用浓溶液。
本发明的实施例3曲克芦丁3g党参总苷15g取曲克芦丁、党参总苷，加入适量注射用水溶解，滤液加入规定量的葡萄糖或氯化钠，混合溶解后按体积加入0.5％的针用活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至适量，调pH值至5.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，加注射用水至全量，分装，灭菌，即得含有1份曲克芦丁和5份党参总苷的葡萄糖或氯化钠静脉输液。
本发明的实施例4曲克芦丁20g党参总苷2g取曲克芦丁加注射用水，搅拌使之溶解，药液备用；取党参总苷，加适量注射用水，搅拌使溶解，药液备用；将上述两药液合并，调pH值至5.5～7.0，加注射用水至规定量，混匀，加入0.6％的针用活性炭，煮沸30分钟，粗滤，再用0.45μm和0.22μm微孔滤膜滤过，分装到搪瓷盘中，冷冻干燥，第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为1.5小时，即搁板温度与产品温度基本一致的时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-16℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为2小时；第三阶段继续降温至-40℃，约需2小时，保持此温度2小时，直至产品完全冻牢，即开始抽真空，进入干燥程序，在-40℃恒温下-抽真空，缓慢升温，2～4℃/h，至最低共熔点温度，时间约为12小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分，时间约为14～16小时，保持35℃以上干燥1.5小时，在无菌条件下分装到西林瓶中，即得含有曲克芦丁1份和党参总苷0.1份的冻干注射用无菌粉末。
本发明的实施例5曲克芦丁10g党参总苷100g取曲克芦丁加注射用水搅拌使之溶解，药液备用；取党参总苷，加入适量注射用水溶解，药液备用；将上述两药液合并，按体积加入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至适量，调pH值至5.5～7.0，煮沸，4℃冷藏过夜，加注射用水至全量，粗滤、精滤，在进口温度为160℃，出口温度为60℃，气流速度为16m·s-1的条件下喷雾干燥，分装，即得含有1份曲克芦丁和10份党参总苷喷雾干燥无菌粉末。
本发明的实施例6曲克芦丁100g党参总苷1g将曲克芦丁与党参总苷混合均匀，加入8％的聚乙烯吡咯烷酮、3％交联聚维酮、适量柠檬黄，微粉硅胶，压制成片，即得含有1份曲克芦丁和0.01份党参总苷的口崩片。
本发明的实施例7曲克芦丁3g党参总苷12g将曲克芦丁、党参总苷，加入与物料比为2∶1的PEG4000和聚氧乙烯单硬脂酸酯(3∶1)混合均匀，置不锈钢容器内，混匀，加热至全部熔融后，保温30min，机械高速搅拌15min至均匀，转移至滴丸机，以二甲基硅油或液体石蜡为冷却剂，滴制，收集滴丸，除去表面的二甲基硅油或液体石蜡，包装，即得含有1份曲克芦丁和4份党参总苷的滴丸剂。
本发明的实施例8曲克芦丁4g党参总苷20g将曲克芦丁与党参总苷混合均匀，按主药∶辅料＝1∶1的比例加入磷酸氢钙，按主药∶辅料＝2∶1的比例加入交联聚乙烯吡咯烷酮和低取代羟丙基纤维素复合辅料混合均匀，制软材，制粒，干燥，整粒，加入适量滑石粉、微粉硅胶，混和均匀，压片，即得含有1份曲克芦丁和5份党参总苷分散片。
本发明的实施例9曲克芦丁3g党参总苷24g将曲克芦丁与党参总苷混合均匀，加入适量淀粉、糊精，制粒，干燥，加硬脂酸镁，包衣，即得含有1份曲克芦丁和8份党参总苷的片剂。
本发明的实施例10曲克芦丁7g党参总苷21g将曲克芦丁与党参总苷混合均匀，加入等量淀粉和等量糊精，混合均匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊，即得含有1份曲克芦丁和3份党参总苷的胶囊剂。
本发明的实施例11曲克芦丁2g党参总苷2g将曲克芦丁与党参总苷混合均匀，按药物量∶基质量＝1∶0.8加入大豆油，混匀；胶皮的配方为明胶∶甘油∶水∶二氧化钛＝100g∶40g∶70g∶1g，配料化胶条件为称量配料，投入化胶罐中，保温在60～70℃，搅拌5小时并同时抽真空脱气，待胶料均匀后放料，滤过后装入胶囊机之胶料桶中，保温在65℃左右，将上述物料装入胶囊机的药料桶中；调试压丸机，压丸；干燥，即得含有1份曲克芦丁和1份党参总苷软胶囊剂。
本发明的实施例12曲克芦丁15g党参总苷30g将曲克芦丁、党参总苷混匀，加等量淀粉、等量糊精混匀，制粒，包装，即得含有1份曲克芦丁和2份党参总苷的颗粒剂。
本发明的实施例13曲克芦丁2g党参总苷8g将曲克芦丁、党参总苷混匀，干燥，加入适量淀粉，用75％的乙醇和1.5％大豆油制软材，挤压-滚圆制丸，选丸，干燥，即得含有1份曲克芦丁和4份党参总苷的微丸剂。
本发明的实施例14曲克芦丁5g党参总苷15g将党参总苷、曲克芦丁混合均匀，溶于磷酸盐缓冲液(0.1M)中备用，将一定比例的豆磷脂、胆固醇溶于十八胺溶液中，加入上述药物的磷酸盐缓冲液溶液中，水浴式超声仪处理10min，得脂质体混悬液，磷酸盐缓冲液定容，过滤除菌，无菌分装，即得脂质体注射液。
本发明的实施例15曲克芦丁10g党参总苷5g将党参总苷、曲克芦丁混合均匀，溶于磷酸盐缓冲液(0.1M)中备用，将一定比例的豆磷脂、胆固醇溶于十八胺溶液中，加入上述药物的磷酸盐缓冲液溶液中，水浴式超声仪处理8min，得脂质体混悬液，低温冷冻干燥后，过180目筛，无菌分装，即得前体脂质体粉针剂。
以上实施例中的曲克芦丁是可直接购买的市售商品，党参总苷可以用市售的或是本发明提供的党参醇提取物、水提取物、水提醇沉提取物、半仿生提取物、超临界萃取物等，但是供口服的党参总苷中苷类成分的含量不低于50％，供注射用的党参总苷中苷类成分的含量不低于70％。
权利要求
1.一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于按照重量份数计算，它主要是由曲克芦丁1份和党参总苷0.01～10份制作而成。
2.按照权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于按照重量份数计算，它含有曲克芦丁1份和党参总苷0.1～5份制作而成。
3.按照权利要求1或2所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于按照重量份数计算，它含有曲克芦丁1份和党参总苷0.5～3份制作而成。
4.按照权利要求1～3任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于所述组合物剂型为直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、微丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解片、分散片剂、膜剂、舌下含片等药剂学上所有可以接受的剂型。
5.按照权利要求4所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于所述组合物剂型包括直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物以及滴丸剂、微丸剂、口服液体制剂、口腔崩解片、分散片剂、舌下含片。
6.按照权利要求4～5所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于所述的组合物制剂可以在将党参总苷和曲克芦丁中的一种或两种制备成脂质体或前体脂质体的基础上制得。
7.按照权利要求1～6中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于党参总苷有效部位是市售的或采用如下方法制备的取党参药材，加入水或乙醇溶液提取，合并提取液，过滤，滤液浓缩得党参粗提物，在此基础上采用乙醇沉淀法、水返溶法、柱层析法、萃取法、絮凝沉淀法中的一种或几种联合使用进行适当精制，得党参总苷有效部位。
8.按照权利要求4～6中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于以重量百分比计算，口服制剂中黄酮类成分的含量不低于制剂中扣除曲克芦丁量、制剂辅料量和水分量后的总固体量的50％，注射制剂中黄酮类成分的含量不低于扣除曲克芦丁量、制剂辅料量和水分量后的总固体量的70％；曲克芦丁含量应为制剂标示量的90.0％～110.0％。
9.按照权利要求1～5中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于注射用无菌块状物这样制备取曲克芦丁、党参总苷加注射用水搅拌使溶解，滤过，滤液煮沸后加入0.5％(W/V)的活性炭，保持微沸30分钟，稍冷过滤，滤液调pH值至5.5～7.0，煮沸，冷藏(4℃)过夜，粗滤、精滤；将甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述滤液混匀，滤过，加注射用水至规定量，分装，冷冻干燥，预冻温度-45℃，预冻时间10h；开始抽真空，并升温至-40℃，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，升温至30℃，保持2h，即得。
10.按照权利要求1～6中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的应用，其特征在于所述的组合物用于在制备治疗脾虚型、气虚型之冠心病、肺心病、脑缺血、血栓性静脉炎、毛细血管出血、神经衰弱、更年期综合症等疾病药物中的应用。
11.按照权利要求4～6中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下全部或部分内容(1)指纹图谱测试，包括以党参苷类成分特征为主的指纹图谱；(2)党参药材、党参炔苷、党参苷I、苍术内酯III、曲克芦丁中全部或部分的鉴别测试方法；(3)党参炔苷、党参苷I、苍术内酯III、总苷、曲克芦丁中全部或部分成分的含量测试方法。
全文摘要
本发明公开了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法和质控方法，属于药品的技术领域。它是主要由曲克芦丁和党参总苷组方，分别制成各种注射制剂及口服制剂剂型；本发明组合物制剂主要用于治疗脾虚型、气虚型之冠心病、肺心病、脑缺血、血栓性静脉炎、毛细血管出血、神经衰弱、更年期综合症等疾病，本发明制剂纯度高，成分明确，质量可控，疗效明显提高，同时安全范围大，疗效波动小。
文档编号A61K9/20GK1969926SQ20051011500
公开日2007年5月30日 申请日期2005年11月23日 优先权日2005年11月23日
发明者于文风 申请人:北京奇源益德药物研究所