专利名称：5－氨基乙酰丙酸或其衍生物的酸加成盐的制作方法
技术领域：
本发明涉及5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid，5-ALA)和其衍生物的某些盐、它们的制备和它们的用途，尤其是作为光化学疗法或诊断中的光敏剂(photosensitizing agent)的用途。本发明特别涉及新5-ALA的盐和新5-ALA酯的盐。
光化学疗法，或其实也是已知的光动力学疗法(photodynamic therapy，PDT)，是用于治疗皮肤或其它上皮器官或粘膜的各种异常或病症的技术，特别是癌症或初步癌性病变，以及某些非恶性病变，例如皮肤疾病如牛皮癣。
光化学疗法包括在身体的感染区上施用光敏(光化学治疗)剂，而后暴露于光敏灯，以便激活光敏剂并将它们转变为细胞毒素形式，由此杀死感染细胞或削弱它们的增殖潜力。
大量的光敏剂是已知的，包括著名的补骨脂素、卟啉(例如Photofrin)、克洛林和酞花青。当暴露于光时，这种药物变得具有毒性。
本领域已知的临床上最有效的光敏剂是5-氨基乙酰丙酸和其衍生物，例如酯例如5-ALA酯。例如，这些描述在WO91/01727、WO96/28412和WO02/10120中。迄今为止，只是建议这种化合物以它们的盐酸盐的形式用于临床的用途，例如，ALA-HCl形式，商品名Levulan(得自于DusaPharmaceuticals Inc.，Wilmington，US)，ALA甲酯HCl形式，商品名Metvix(PhotoCure ASA，Oslo，Norway)和ALA己基酯HCl形式，商品名Hexvix(同样得自于PhotoCure ASA)。
尽管在许多初期癌性疾病和癌性疾病及其它病症中，使用ALA和ALA衍生物的光化学疗法是临床上有效的，然而当配制用作药物，例如在PDT中时，这种化合物显示出一些局限性。例如，这些化合物(尤其是ALA和其盐酸盐)在药学制剂中具有不稳定的倾向。在某些情况下，这种化合物也可以与它们的物理化学性能有关的问题相关联，例如它们的结晶性能、溶解性或吸湿性能。
由此，存在可供选择的光化学治疗剂的需要。尤其是，对作为更好药物的中试剂存在需要，例如与那些本领域已知的药剂相比具有改进的物理化学性能(例如更稳定的物理化学性能、吸湿性更小等等)的光化学治疗剂。当用于PDT中时，与已知的光敏剂相比，这种药剂应该显示出同等的、或优选改进的效果(即，同等或增强的光化学治疗效果)，这也是合乎需要的。
意外地，现在发现某些5-氨基乙酰丙酸和其衍生物的盐，尤其是ALA酯的盐，具有用于药学制剂的所需性能(例如用于光化学疗法的制剂)，而且相对于已知的和本领域中使用的ALA化合物，许多这种盐具有提高的性能。特别地，已经发现，ALA和其衍生物与非HCl的酸的酸加成盐特别适合用于药学制剂，例如用于光化学疗法的制剂，这种酸具有大约5或更小的pKa，特别是磺酸。例如，现在已经发现，与已知的ALA化合物相比，这种化合物具有提高的物理化学性能，例如增加的稳定性(例如更低的吸湿性)。同样已经发现某些这种化合物比目前临床使用的ALA化合物显示出提高的效果(即增加的光化学治疗效果)，例如相对于ALA和ALA酯的相应盐酸盐。
由此，从一个方面考虑，本发明提供了5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)或5-ALA衍生物(例如5-ALA酯)与酸的酸加成盐，这种酸具有大约5或更小的pKa，条件是该酸不是盐酸。
在一个优选实施方案中，本发明提供了5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)或其衍生物(例如5-ALA酯的盐)与pKa小于大约3的酸的酸加成盐。这种酸的特别优选例子包括磺酸和磺酸衍生物。
优选，本发明的酸加成盐是药学可接受的。因此，优选的是，得到本发明盐的酸本身应该是药学可接受的。
在进一步方面中，本发明还提供了用作药物，例如用于光化学疗法或诊断的药物的这种化合物(即酸加成盐)。
本文中使用的术语“5-氨基乙酰丙酸”、“ALA”和“5-ALA”可互换使用，并且包括5-氨基-4-氧代戊酸。当相对于ALA而使用时，术语“衍生物”包括化学修饰的化合物，例如酯例如ALA酯。这种化合物典型地由修饰5-ALA羧基而形成。术语“衍生物”还包括其中5-氨基可以是取代或未取代的任何5-氨基乙酰丙酸化合物。换句话说，相对于5-ALA使用的术语“衍生物”包括这样的化合物，其中化学修饰可以出现在ALA的羧酸或5-氨基中的一处或两处。5-ALA的衍生物通常是已知的，并且描述在现有技术中，例如在WO96/28412和WO02/10120中，其全部内容引入本文中作为参考。用于本发明的5-ALA的优选衍生物是ALA酯，特别是其中5-氨基是未取代的5-ALA化合物的那些酯。
本文中使用的术语“磺酸”包括任何含有至少一个-SO3H基团的有机化合物。优选，其可以包括1、2或3个-SO3H基团，最优选1或2个，例如1个。当相对于磺酸使用时，术语“衍生物”包括任何含有至少一个(优选1、2或3个，最优选1或2个，例如1个)-SO3X基团(其中X是生理学可允许的阳离子，例如钠、钙、钾、镁或葡甲胺阳离子(meglumine cation))的这种化合物。
根据本发明的盐典型地衍生自ALA或ALA衍生物和单质子酸(mono-protic acid)，例如磺酸如甲磺酸，从而形式1∶1的盐。或者，可以在ALA或ALA衍生物与二-或三质子酸之间形成盐，例如磺酸例如乙烷-1，2-二磺酸、硫酸或磷酸。在使用具有一个酸性质子以上的酸的情况下，得到的化合物的化学计量比可以不是1∶1，例如2∶1(ALA∶酸)或3∶1(ALA∶酸)，或可以包括化学计量变化水平的盐的混合物。例如在硫酸的情况下，可以形成2∶1(ALA∶酸)的盐，而在磷酸的情况下，可以形成3∶1(ALA∶酸)的盐。多质子酸也能够与ALA或ALA衍生物形成其它盐。例如硫酸可以基于HSO4-阴离子提供1∶1(ALA∶酸)的盐，磷酸可以基于HPO42-和H2PO4-阴离子分别提供2∶1(ALA∶酸)和1∶1(ALA∶酸)的盐(或其组合)。而且，多质子酸还可以以与其它生理学可接受的碱(例如氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾和葡甲胺)的盐的形式，与ALA或其衍生物(例如与ALA酯)形成其它盐，例如1∶1的盐。
本发明的盐优选衍生自具有大约4或更小的pKa、更优选大约3或更小的pKa的酸。该酸可以是无机或有机酸。优选的无机酸包括氢溴酸，硫酸，磷酸，尤其是硝酸。优选的有机酸包括磺酸和磺酸衍生物。衍生自硝酸、磺酸和磺酸衍生物的那些盐是特别优选的。
更优选，本发明提供了式I的化合物
(其中R是氢原子或任选取代的烃基(例如C1-20烃基)或芳基(例如至多20个碳原子的芳基)，优选任选取代的烃基或芳基；R1和R2每个独立地表示氢原子或任选取代的直链、支链或环状烃基，其可以任选被一个或多个-O-、-NR3-、-S-或-PR3-基团间隔；和R3是氢原子或C1-6烃基)。
除非另外具体陈述，本文中使用的术语“烃基(alkyl)”包括任何长或短链、直链、支链或环状脂肪族的饱和或不饱和烃基团。任选地，这种基团可以被取代(例如单或多取代)，例如被下列取代羟基，烃氧基，酰氧基，硝基，烃氧羰基氧基，氨基，芳基，氧基，卤素(例如氟或氯)，-SR3，-NR32或-PR32基团(其中R3如上文所定义)。不饱和的烃基可以是单或多不饱和的，并且包括烯基和炔基两者。
本发明的优选化合物是那些式I的化合物，其中R是任选取代的(即单或多取代)、直链的、支链的或环状的(例如单或双环，桥接或非桥接)烃基，该烃基可以含有至多20个碳原子，或任选取代的(即单或多取代)芳基，该芳基优选含有至多20个碳原子。可以存在于基团R中的优选取代基包括C1-6烃基(例如甲基)，羟基，烃氧基，酰氧基，硝基，烃氧羰基氧基，氨基，芳基，氧基和卤素(例如氟或氯)。
通常，本发明的在ALA或ALA衍生物与磺酸化合物之间形成的盐，包括单一磺酸部分，即单质子酸。然而，如上所述，具有一个以上磺酸部分(例如2或3个这种基团)的化合物包括在本发明范围内。因此，可以存在于基团R中的其它取代基包括一个或多个、优选一个-SO2OH、-SO2OX(其中X如上文定义)或-SO2Oθ基团。可以用于制备本发明盐的二磺酸的代表性例子包括乙烷-1，2-二磺酸和萘-1，5-二磺酸。
就基团R而论，优选的烃基可以含有至多20个、但优选至多15个例如至多12个碳原子。然而，优选含有至多10个，例如至多5个、更优选1、2或3个碳原子的烃基。尤其是，优选具有至多10个碳原子的直链烃基，例如甲基、乙基或丙基。尽管这些基团可以是取代或未取代的，优选这些基团是未取代的。
就基团R而论，优选的芳基包括任选取代的苯基或萘基。优选，芳基是取代的，例如被一个或多个(例如一个、两个或三个)取代基取代，取代基可以包括C1-6烃基(优选C1-4烃基，例如甲基)，烃氧基(例如甲氧基)，硝基，卤素(例如氟或氯)，-SO3H，-SO3X(其中X如上文定义)，-SO2O-或三氟甲基。芳基的代表性例子包括甲苯(例如对甲苯)，苯，萘和萘磺酸酯(例如2-萘磺酸酯)。
就R1和R2而论，优选的烃基是那些含有至多20个、例如至多10个碳原子的烃基。尤其是，优选具有至多10个碳原子的饱和烃类，例如己基，庚基或辛基。然而也可以使用低级烃基，例如甲基、乙基和丙基。合适的烃基可以是直链或支链的。合适的支烃烷基的代表性例子包括2-甲基戊基和4-甲基戊基。通常直链的非支链烃基是优选的。
取代的烃基可以是单或多取代的。由此合适的基团R1和R2包括，例如，未取代的烃基，烃氧基烃基，羟基烃氧基烃基，多羟基烃基，羟基多亚烃基氧基烃基，氧杂烃基(oxaalkyl)，多氧杂烃基(polyoxaalkyl)等等。
优选的取代烃基R1基团包括那些带有一个或多个氧代的基团，优选被一个、两个或三个(优选两个或三个)氧代取代的直链C4-12烃基(例如C8-10烃基)。这种基团的例子包括3，6-二氧杂-1-辛基和3，6，9-三氧杂-1-癸基。
可以存在于式I化合物中的特别优选的取代的烃基R1基团包括被芳基取代(优选末端取代)的下述基团C1-6烃基，优选C1-4烃基，特别优选C1或C4烃基(例如甲基)。优选的芳基包括苯基、二苯基和单环的5-7元例如5或6-元杂芳环，特别是苯基，并且这种基团本身可以任选被取代，例如被一个或多个(例如一或两个)C1-6烃基(优选C1-4烃基，例如甲基)、烃氧基(例如甲氧基)、硝基、氟、氯或三氟甲基取代。合适的杂芳族基团包括那些含有至少一个选自氧、硫和氮杂原子的基团。优选的杂芳族基团是吡啶。
代表性的取代的烃基R1和R2包括烃氧基甲基，烃氧基乙基和烃氧基丙基或酰氧甲基，酰氧乙基和酰氧基丙基，例如新戊酰氧基甲基。
本发明优选的化合物包括那些式I的化合物，其中R1和/或R2，优选R1表示未取代的烃基或芳基取代的烃基(例如苄基)，其中芳基本身也可以被取代，如本文所描述。特别是，R1是C1-6烃基，例如C1或C6烃基或苄基，每个可以任选被取代。优选，C1或C6烃基和苄基是未取代的。特别优选这种化合物是ALA酯的盐，即R1如上所述，并且在N-末端两个R2基团是氢原子。
本发明特别优选的化合物是那些式I的化合物，其中R1表示未取代的烃基(例如C1-6烃基)或表示被芳基(例如苯基)取代的烃基(例如C1-2烃基)，和/或每个R2表示氢原子。
本发明最优选的化合物是下列物质的磺酸盐或磺酸衍生物盐ALA，甲基ALA酯，1-甲基戊基ALA酯，对-异丙基苄基ALA酯，对-甲基苄基ALA酯，苄基ALA酯，2-苯乙基ALA酯，己基ALA酯，环己基ALA酯，4-甲基戊基ALA酯，2-(2-乙氧基乙氧基)乙基ALA酯，对-[三氟甲基]苄基ALA酯，对-[叔丁基]苄基ALA酯，对-硝基苄基ALA酯，1-乙基丁基ALA酯，2-甲基戊基ALA酯，4-苯基丁基ALA酯，对-氟苄基ALA酯，3，3-二甲基-1-丁基ALA酯，2-氟苄基ALA酯，2，3，4，5，6-五氟苄基ALA酯，4-氯苄基ALA酯，2-甲氧基乙基ALA酯，3-硝基苄基ALA酯，3，4-[二-氯]苄基ALA酯，3，6-二氧杂-1-辛基ALA酯，3-氟苄基ALA酯，3，6，9-三氧杂-1-癸基ALA酯，3-吡啶基-甲基ALA酯，4-联苯-甲基ALA酯，4-甲氧基-苄基ALA酯，2-甲基苄基ALA酯，苄基-5-[(1-乙酰基氧基乙氧基)-羰基]氨基乙酰丙酸酯，和3-甲基苄基ALA酯。
本发明其它优选的化合物包括以上所述ALA化合物的硝酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、和硫酸盐。最优选的是，这种ALA化合物的磺酸盐、磺酸衍生物盐和硝酸盐，特别是磺酸盐和磺酸衍生物盐。
本发明更加优选的化合物是下列物质的磺酸盐或磺酸衍生物盐ALA，甲基ALA酯，1-甲基戊基ALA酯，对-异丙基苄基ALA酯，对-甲基苄基ALA酯，苄基ALA酯，己基ALA酯，4-甲基戊基ALA酯和2-(2-乙氧基乙氧基)乙基ALA酯。
ALA、甲基ALA酯、1-甲基戊基ALA酯、对-异丙基苄基ALA酯、对-甲基苄基ALA酯、苄基ALA酯、己基ALA酯、4-甲基戊基ALA酯和2-(2-乙氧基乙氧基)乙基ALA酯的硝酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐和硫酸盐也是本发明优选的化合物。
本发明特别优选的化合物包括ALA或ALA衍生物(例如ALA酯)与硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸的酸加成盐，或更尤其的是，与选自下述磺酸的酸加成盐萘-1，5-二磺酸，乙烷-1，2-二磺酸，对甲苯磺酸，甲磺酸，十二烷基磺酸，萘-2-磺酸，苯磺酸，2-羟基-乙磺酸，乙磺酸，和(+)-樟脑-10-磺酸。
尤其优选的盐是以上列出的那些衍生自硝酸或磺酸的盐。衍生自以上列出的磺酸的盐(例如衍生自甲磺酸、苯磺酸和对甲苯磺酸的盐)是特别优选的。
尤其优选的化合物的例子包括5-氨基-4-氧代戊酸甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸甲酯甲苯磺酸盐；2-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐；4-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐；4-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐；4-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸甲磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸甲酯甲磺酸盐；2-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐；
4-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐；4-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐；4-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐；2-(2-乙氧基乙氧基)乙基5-氨基-4-氧代戊酸酯苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯2-羟基乙磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯(1S)-10-樟脑磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯2-萘磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯硝酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯硫酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯磷酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸氢溴酸盐；和苄基5-氨基-4-氧代戊酸氢溴酸盐。
本发明化合物特别优选的包括下列物质的磺酸盐5-ALA，5-ALA甲酯，5-ALA己基酯和5-ALA苄基酯(例如5-氨基-4-氧代戊酸甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸甲酯甲苯磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸甲磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲磺酸盐；5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲磺酸盐；和5-氨基-4-氧代戊酸甲基酯甲磺酸盐)。5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯硝酸盐也是特别优选的化合物。
具有大约5或更小pKa的酸并且适合用于形成根据本发明的酸加成盐的酸，可以是非HCl的无机酸或有机酸。无机酸的代表性例子包括氢溴酸，硫酸，硝酸和磷酸。尤其优选硝酸。有机酸的代表性例子包括萘-1，5-二磺酸，乙烷-1，2-二磺酸，对甲苯磺酸，甲磺酸，十二烷基磺酸，萘-2-磺酸，苯磺酸，2-羟基-乙磺酸，乙磺酸，和(+)-樟脑-10-磺酸。
优选地，具有大约5或更小pKa的酸是有机酸。例如，该酸可以是具有大约3至大约5的pKa的有机酸，或可以是具有大约4或更小的pKa(例如大约3至大约4的pKa)的有机酸。优选的有机酸可以具有大约3或更小的pKa。
具有大约3或更小的pKa的有机酸的代表性例子包括萘-1，5-二磺酸，乙烷-1，2-二磺酸，环拉酸(cyclamic acid)，对甲苯磺酸，硫氰酸(thiocyanicacid)，甲磺酸，十二烷基磺酸，萘-2-磺酸，苯磺酸，草酸，2，2-二氯乙酸，乙二醇磷酸(glycophosphoric acid)，2-羟基-乙磺酸，L-天冬氨酸，马来酸，乙磺酸，(+)-樟脑-10-磺酸，谷氨酸，海藻酸，双羟萘酸酸(pamoic acid)，2-氧代-戊二酸，1-羟基-2-萘酸，丙二酸，龙胆酸(gentisic acid)，水杨酸和酒石酸。
pKa为大约3至大约4的有机酸的代表性例子包括半乳糖酸，柠檬酸，D-葡糖醛酸，乳糖酸，4-氨基水杨酸，羟基乙酸，D-葡庚糖酸，(-)-L-焦谷氨酸，DL-扁桃酸，(-)-L-苹果酸，马尿酸，D-葡糖酸，DL-乳酸和油酸。
具有pKa大约3至大约5的有机酸的代表性例子包括 苯甲酸，琥珀酸，4-乙酰胺基苯甲酸，戊二酸，肉桂酸，己二酸，癸二酸，(+)-樟脑酸(camphoric acid)，乙酸，樟脑酸(camporic acid)，烟酸(nicotinic acid)，异丁酸，丙酸，癸酸，月桂酸，棕榈酸，硬脂酸，十一碳烯酸和辛酸。上述披露的pKa为大约3至大约4的那些酸也可以包括在这组内。
本发明或用于本发明的化合物可以使用本领域所熟知的形成盐的标准工艺和方法来制备。
用于制备根据本发明的盐的起始原料包括ALA和其衍生物，例如ALA酯，可以使其与酸例如磺酸(例如对甲苯磺酸、甲磺酸)等等反应。
由此可以了解，本发明提供了用于制备本发明化合物的方法，所述方法包括5-氨基乙酰丙酸或其衍生物(例如ALA酯)与酸(例如磺酸或磺酸衍生物)反应。
或者，为了制备本发明的ALA酯的盐，可以使用一锅反应(one-potreaction)，其包括在酸(例如磺酸或磺酸衍生物)的存在下使5-氨基乙酰丙酸或其酯化衍生物与烷醇或其酯形成衍生物(ester-forming derivative)(例如与烷醇)反应。这种方法构成了本发明的另一方面。
更尤其是，本发明的这个方面提供了用于制备上文描述的酸加成盐(例如式I的化合物)的方法，所述方法包括使式II的化合物与式(III)的化合物在上文定义的酸例如式IV的磺酸的存在下进行反应的步骤式II的化合物R22N-CH2COCH2-CH2COY(II)(其中Y表示离去基团，例如羟基，卤素原子或烷氧基，或COY表示酸酐基团，R2如上文定义)
式III的化合物R1-OH (III)(其中R1是任选取代的直链、支链或环状烷基，其可以任选被一个或多个-O-、-NR3-、-S-或-PR3-基团间隔；R3是氢原子或C1-6烃基)；式IV的化合物R-SO2OH (IV)(其中R如上文所定义)。
这种反应可以方便地在溶剂或溶剂的混合物中、在至多100℃的温度(优选在室温)下进行，所述溶剂例如水、丙酮、甲醇、乙醇或四氢呋喃等等，优选为水。反应条件将取决于所使用的试剂，并且可以选择条件，由此获得该盐的最高产率。
本发明的化合物也可以由相应的盐酸盐制备，例如使用下面列出的离子交换法或通过“银-盐”方法。这些方法形成本发明的进一步方面。
离子交换法典型地包括将含有ALA或ALA衍生物的盐酸盐的溶液通过离子交换柱的第一步，和将洗脱液由柱加入到酸溶液(例如磺酸)中的第二步。可以使用能够将Cl-交换为碱性阴离子(例如氢氧离子)的任何离子交换树脂。合适的离子交换剂包括强碱性的阴离子交换树脂(例如Dowex11，AmberlystA26(OH)等等)。在该方法中，ALA或ALA衍生物的盐酸盐的氯离子在通过柱期间被交换为碱性(例如氢氧化物)离子。这样就提供了游离碱，然后其与酸(例如磺酸或磺酸衍生物)中和，由此同时形成ALA或ALA衍生物的相应酸(例如磺酸)加成盐。
由此，从进一步方面来看，本发明提供了用于制备根据本发明的酸加成盐(例如式I的化合物)的方法，所述方法包括(i)将包含ALA或ALA衍生物的盐酸盐(例如式Cl-R22N+H-CH2COCH2CH2CO2R1的化合物，其中R1和R2如上文定义)溶液与碱性阴离子交换树脂接触；(ii)任选地除去所述树脂；和(iii)将得到的溶液与包含上文定义的酸优选磺酸或磺酸衍生物(例如式RSO3H或RSO3X的化合物，其中R和X如上文定义)的溶液混合。
在银盐方法中，使ALA或ALA衍生物的盐酸盐与酸的银盐在AgCl不能溶解的溶剂(例如水)中反应。合适的银盐的例子包括甲磺酸银，对-甲苯磺酸银，苯磺酸银，硫酸银，磷酸银，硝酸银，等等。在这种方法中，银可以被任何其它阳离子替代，这种阳离子与氯离子在下述溶剂中形成不溶解化合物，在所述溶剂中ALA或ALA衍生物的盐酸盐与合适的酸加成盐(例如磺酸盐)至少部分地(例如基本上))。例如，可以使ALA或ALA衍生物的盐酸盐与磺酸的钠、钾、钙或镁盐在溶剂中反应，在这种溶剂中，NaCl/KCl/CaCl2/MgCl2是不能溶解的(例如非水的有机溶剂)。
由此，从进一步方面来看，本发明提供了用于制备本发明化合物(例如式I的化合物)的方法，所述方法包括(i)使ALA或ALA衍生物的盐酸盐(例如式Cl-R22N+H-CH2COCH2CH2CO2R1的化合物，其中R1和R2如上文定义)与上文定义的酸优选磺酸的银盐(例如式RSO3Ag，其中R如上文定义)在AgCl基本上不能溶解的溶剂中反应；和(ii)任选从得到的盐(例如磺酸盐)中分离AgCl。
上面描述的方法主要参考5-ALA和5-ALA衍生物与磺酸和磺酸衍生物的酸加成盐的制备来加以说明。然而，本领域技术人员很清楚，可以通过类似的方法制备根据本发明的其它酸加成盐，只不过其中磺酸或其衍生物被所需要的酸替代。
用作起始原料的化合物可以从文献中得知，并且在很多情况下是可商业购买的，或可以使用已知的方法获得。例如ALA得自于Sigma。用于制备ALA衍生物例如ALA酯的方法，例如描述在WO96/28412和WO02/10120中，其内容引入本文中作为参考。
在现有技术中是众所周知的、并且适合用作合成本发明酸加成盐(例如磺酸盐)的起始原料的一些盐酸盐例子包括ALA HCl，ALA甲基酯HCl，ALA己基酯HCl等等。
如上所述，本发明的化合物和根据本发使用的化合物具有有价值的药理学性质，即具有光敏性能的胞内卟啉的诱导物的用途，这种性能使它们可以用作光化学治疗药剂。然而，本发明的化合物与已知的ALA和ALA酯的盐例如盐酸盐，相比具有许多的优点。首先，本发明的化合物通常更稳定并且吸湿性更小；这种性能具有可以长期保存药物制剂的优点，而没有能够导致功效损失的活性物质的显著降解。其次，本发明的某些酸加成盐，尤其是硝酸加成盐和磺酸加成盐，令人吃惊地发现其具有提高的光敏性能；在施用硝酸或磺酸盐之后的荧光水平，比相应的盐酸盐的荧光水平高。
本发明的进一步方面相应地提供了一种药物组合物，其包含本发明的酸加成盐以及至少一种药学载体或赋形剂。
在进一步方面，提供了一种药物组合物，如上文描述，其用作例如光化学疗法或诊断的药物。
在更进一步方面，提供了本发明的酸加成盐在制备用于光化学疗法的治疗剂中的用途，特别是在制备用于治疗对光化学疗法敏感的身体外或内表面的病症或异常的治疗剂中的用途。
可以根据本发明治疗的异常和病症包括对光化学疗法敏感的任何恶性的、初期恶性的和非恶性的异常或病症，例如皮肤基底细胞癌(bcc)，肿瘤或其它增殖，皮肤病例如牛皮癣或光化性角化病和痤疮，皮肤擦伤，和其它疾病或感染例如细菌、病毒或真菌感染，例如疱疹病毒感染。本发明尤其适于治疗这样的疾病、病症或异常，其中组合物可以直接施加到所形成的分散病变(discrete lension)(这里使用的病变在广义上包括肿瘤等等)。
可以根据本发明治疗的内表面和外身体表面包括皮肤和所有其它的上皮和绒膜表面，包括例如粘膜，器官例如呼吸、胃-肠和生殖尿路的内层，和具有通往这种表面的中空管道的腺体(例如肝脏，具有皮脂腺的毛囊，乳腺，唾液腺和精囊腺)。除了皮肤之外，这种表面包括例如阴道的内层(lining)，子宫内膜和尿路上皮。这种表面也可以包括患病或癌性的组织切除之后在身体内形成的空隙，例如肿瘤(例如神经胶质瘤)切除之后的脑空隙。
由此，典型的表面包括(i)皮肤和结膜；(ii)口腔、咽、食道、胃、肠和肠的附属体、直肠和肛管的内层；(iii)鼻部通道、鼻窦、鼻咽、气管、支气管和细支气管的内层；(iv)输尿管、膀胱和尿道的内层；(v)阴道、子宫颈和子宫的内层；(vi)侧膜和脏层胸膜；(vii)腹膜和骨盆空隙的内层，和包含在那些空隙之内的器官的表面；(viii)硬脑膜和脑膜；(ix)实质组织中的任何肿瘤，该实质组织可以受光敏化灯的影响，例如直接、手术时、或通过插入针头的光纤的影响。
本发明的组合物可以用任何常规的方式、与一或多种生理学可接受的载体或赋形剂根据本领域众所周知的技术进行配制。如果合适的话，可以将根据本发明的化合物或组合物消毒，例如通过γ照射、高压消毒或加热消毒，在加入化合物或组合物存在于其中的载体或赋形剂前或后进行消毒，以提供无菌制剂。
组合物可以局部、口服或系统给药。优选为局部组合物，包括凝胶剂，乳膏剂，油膏，喷涂剂，洗剂，油膏剂(salves)，粘贴剂(sticks)，皂，粉末，子宫托(pressaries)，气雾剂，滴剂，溶液剂和本领域任何其它常规的药学形式。
油膏、凝胶剂和乳膏剂可以用含水或油性碱外加合适的稠化和/或胶凝剂进行配制。洗剂可以用含水或油性碱进行配制，并且通常也包含一或多种乳化、分散、悬浮、稠化或着色剂。粉末可以借助于任何合适的粉末碱形成。滴剂和溶液可以用含水或非水碱进行配制，也包含一或多种分散、增溶或悬浮剂。气溶胶喷雾剂可以借助于合适的推进剂而方便地从加压包装中释放。
或者，组合物可以以适合于口服或肠胃外给药的形式提供，例如通过皮内、皮下注射、腹膜内或静脉注射的形式。由此，可替代的药学形式包括普通的或糖衣片剂、胶囊、悬浮液和溶液剂，其中包含活性组分以及任选的一或多种惰性的常规载体和/或稀释剂，例如玉米淀粉，乳糖，蔗糖，微晶纤维素，硬脂酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，柠檬酸，酒石酸，水，水/乙醇，水/丙三醇，水/山梨糖醇，水/聚乙二醇，丙二醇，十八醇，羧甲基纤维素或脂肪物质例如硬脂(hard fat)或其合适的混合物。
组合物可以另外包括润滑剂，润湿剂，乳化剂，悬浮剂，防腐剂，甜味剂，调味剂，吸附增强剂，例如下列的表面渗透剂，等等。可以配制本发明的组合物，以便在使用本领域众所周知方法对患者给药后，提供活性组分的迅速、持续或延迟释放。还可以使用增溶和/或稳定剂，例如环糊精(CD)α、β、γ和HP-β环糊精。组合物可以是任何合适的剂型，例如乳状液或微脂粒、niosomes、微球体、纳米颗粒等等形式。然后可以将本发明的化合物吸收、并入或结合到这些形式中。
组合物中的本发明化合物的浓度，取决于化合物、组合物的性质，给药方式，待治疗的病情和患者，并且可以根据选择进行改变或调节。然而，通常合适的浓度范围是0.01到50％，例如0.05到20％，例如1-10％(w/w)。已经发现0.1到50％的治疗施用浓度范围是合适的，例如0.2到30％(w/w)。当化合物是高度亲脂性的时，可以使用更低的剂量，例如0.01到10％的浓度范围，例如0.02到1％(w/w)。
可以通过本领域已知的技术，实现局部给药至难达到的位点，例如通过利用导管或其它合适的给药系统。
给药至表面之后，将所治疗部位暴露于光线中，以实现光化学治疗的效果。在给药之后的期间(在此期间进行曝光)，取决于组合物的性质、待治疗的病情和给药的形式。通常可以约为0.5至48小时，例如1至10小时。
通常以40至200焦耳/cm2的剂量水平施加照射，例如100焦耳/cm2。
可以选择用于照射的光波长，以实现有效的光化学治疗效果。已经发现用白光照射是有效的，尤其是具有300-800nm波长范围的光线，例如500-700nm的范围。尤其重要的是包括波长630和690nm。
由此本发明的进一步方面提供了光化学治疗身体外或内表面的病症或异常的方法，包括对感染表面给药上文所定义的酸加成盐或组合物，并且将所述表面暴露于光线(例如白光)中，优选波长范围300-800nm的光线(例如波长范围380-440nm的蓝光)。或者，可以使用波长范围500-700nm的光线。
用于照射身体不同领域的方法，例如利用灯或激光，在本领域为大家所熟知(见例如Van den Bergh，Chemistry in Britain，May 1986p.430-439)。对于难达到的区域，可以使用光纤方便地实现。
可以将本发明的化合物用与其它光敏剂例如Photofrin、或与其它可以增加光化学治疗效果的活性组分一起进行配制和/或给药。例如，为了增加有效光敏剂原卟啉IX(Pp)的积聚，可以有利地包括螯合剂；利用螯合剂而产生的铁的螯合作用，可以防止其结合到Pp中，在亚铁螯合成酶的作用下形成血红素，由此引起Pp的累积作用。用这种方法，增加了光敏效果。
氨基多羧酸螯合剂尤其适合用于这方面，包括文献中描述的用于金属解毒或在核磁共振机造影剂中用于顺磁性金属离子螯合作用的任何螯合剂。具体提及的可以由EDTA、CDTA(环己烷二胺四乙酸)、DTPA和DOTA和其众所周知的衍生物/类似物组成。EDTA是优选的。为了实现铁-螯合效应，还可以使用去铁敏(desferrioxamine)及其它铁载体(siderophore)，例如与氨基多羧酸螯合剂例如EDTA同时使用。可以以0.05至20％，例如0.1至10％(w/w)的浓度方便地使用螯合剂。
如WO95/07077所述，还发现表面渗透助剂且特别是二烷基亚砜例如二甲基亚砜(DMSO)，可以在增加光化学治疗效果方面具有有益的效果。用于本发明的表面渗透助剂可以是描述在药学文献中的任何皮肤-渗入帮助药剂，例如螯合剂(例如EDTA)，表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠)，非表面活性剂，胆盐(例如脱氧胆酸钠)和脂肪酸(例如油酸)。合适的表面渗入帮助药剂的例子包括HPE-101(得自于Hisamitsu)，DMSO及其它二烷基亚砜，尤其是正癸基甲基-亚砜(NDMS)，二甲基磺胺醋酰，二甲基甲酰胺(DMFA)，二甲基乙酰胺，乙二醇，各种的吡咯烷酮衍生物(Woodford等人J.Toxicol.Cut.& Ocular Toxicology，1986，5167-177)，和Azone(Stoughton等人Drug Dpv.Ind.Pharm.1983，9725-744)，或其混合物。
然而DMSO是优选的，这是由于其抗组胺和抗炎药活性和其对于酶ALA-合成酶和ALA-脱氢酶(分别形成并将ALA缩合为胆色素原的酶)的刺激效应，由此增加了活性形式的形成，Pp。
可以以0.2至50％(w/w)例如大约10％(w/w)的浓度范围方便地提供表面渗透剂。
可以另外配制本发明的组合物，和/或与其它药剂一起给药，以提高PDT的功效。此外，当治疗肿瘤时，可以将已经发现对用于治疗肿瘤(O’Reilly等人，Nature Medicine，2，p689-692，1996；Yamamoto等人，AnticancerResearch，14，p1-4，1994；和Brooks等人，J.Clin.Invest.，96，p1815-1822，1995)的血管生成抑制剂(抗生成血管药物)与本发明的组合物在PDT中一起使用，以进一步破坏肿瘤的血管系统。可以使用的血管生成抑制剂包括TNP-470(AGM-1470，一种称为烟曲霉素的真菌分泌物的合成类似物；Takeda Chemical Industries Ltd.，Osaka，Japan)，血管抑素(Surgical ResearchLab.at Children′s Hospital Medical Center of Harvard Medical School)和整联蛋白αvβ3拮抗剂(例如单克隆抗体至整联蛋白αvβ3，The Scripps ResearchInstitute，LaJolla，CA)。
或者，或另外，可以使用免疫疗法药剂(例如抗体或效应子例如巨噬细胞活化因子)或化疗药剂，以提高根据本发明的PDT。给药这些辅助药剂，应该根据使用这些药剂的已知方法、依据途径、浓度和制剂来进行。根据它们的功能，可以在PDT以前、之后或期间给药这些辅助药剂。例如，血管生成抑制剂可以在PDT之后5至10天加入，以防止肿瘤再生。
其它抗癌症药剂可以类似地用于与本发明组合物的组合中，既可以作为制剂的一部分，也可以作为同时、单独或顺序给药的独立治疗。
当局部或系统地施加时，还发现葡萄糖可以促进PDT。当打算局部给药时，制剂例如乳膏剂可以方便地包含0.01％至10％葡萄糖(w/w)。
根据所治疗的病情和组合物的性质，用于本发明的化合物可以与这种其它任选的药剂共同给药，例如在单一组合物中，或它们可以顺序或单独给药。实际上，在很多情况下，特别有益的光化学治疗效果可以在单独的步骤中、在给药本发明化合物之前，通过用表面渗透辅助剂(surface-penetrating assisting agent)进行预处理来获得。此外，在一些情况下，用表面渗透辅助剂预处理、而后与表面渗透辅助剂同时给药光化学治疗药剂可以是有益的。当表面渗透辅助剂用于预处理时，其可以以高浓度例如至多100％(w/w)使用。如果使用这种预处理步骤，在预处理之后至多几个小时，例如在预处理之后5-60分钟，可以随后给药光化学治疗药剂。
从进一步方面考虑，本发明由此提供了一种产品，其包括本发明的酸加成盐、以及至少一种表面渗透辅助剂和任选一或多种螯合剂，在治疗对光化学疗法敏感的身体外或内表面的病症或异常中，作为同时、单独或连续使用的组合制剂。
换个角度看，本发明的这方面还提供了一种试剂盒，该试剂盒用于光化学治疗身体的外或内表面的病症或异常，包括a)包含本发明酸加成盐的第一容器，b)包含至少一种表面渗透辅助剂的第二容器；和任选地c)包含在所述第一容器之内或在第三容器之内的一或多种螯合剂。
应理解，使用上文描述化合物的治疗方法，不可避免地包括胞内卟啉的供应，胞内卟啉在所治疗的病症或异常的位点发荧光。虽然可以使用这种荧光的强度来排除异常的细胞，可以使用局部化荧光来显现异常或病症的规模、程度和状况。可以用蓝光(例如波长范围350-440nm的光线)激发来产生荧光，并且在波长范围550-750nm处测量。
然后可以将由此在所探查位点确定或确认的异常或病症，通过可供选择的治疗技术例如外科或化学处理来治疗，或利用本发明的治疗方法、通过荧光的继续形成来治疗，或通过在合适的位点进一步应用本发明的化合物来治疗。应理解，诊断技术可以比治疗用途需要更低水平的显色荧光。然而，通常0.2至30％例如1-5％(w/w)的浓度范围是合适的。在关于治疗用途以前，已经考虑了给药的位点、方法和方式，并且还适用于这里描述的诊断用途。
本发明的化合物还可以用于体外诊断技术，例如用于包含在体液中的细胞的检查。与异常组织相关的较高水平荧光可以方便地指示异常或病症。这种方法具有高灵敏度，并且可以用于异常或病症的早期检测，通过尿或唾液样品中的上皮细胞的检查来分别检查膀胱或肺恶性肿瘤。除了尿和唾液之外，可以用于诊断的其它有效的体液包括血液、精液、泪、脊髓液等等。还可以评价组织样品或制品，例如活检组织或骨髓样品。由此本发明提供了本发明化合物用于根据上述光化学疗法的诊断的用途、和进行所述诊断的产品和试剂盒。
本发明的进一步方面涉及通过化验患者的体液或组织样品来体外诊断异常或病症的方法，所述方法至少包括下面的步骤i)将所述体液或组织与根据本发明的酸加成盐混合，ii)将所述混合物暴露于光线中，iii)确定荧光水平，和iv)将荧光水平与对照水平进行比较。
在下面非限制性的实施例中参考附图更详细地描述本发明，其中图1显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光(skin fluorescene)，乳膏剂包含5-氨基-4-氧代戊酸的不同盐，狭条表示标准偏差；图2显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯的盐酸盐、甲苯磺酸盐和甲磺酸盐，狭条表示标准偏差；图3显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有5-氨基-4-氧代戊酸甲基酯的盐酸盐和甲磺酸盐，狭条表示标准偏差；图4显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有5-氨基-4-氧代戊酸甲基酯的盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐，狭条表示标准偏差；图5显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐和氢溴酸盐，狭条表示标准偏差；图6显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有苄基5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐、氢溴酸盐和硝酸盐，狭条表示标准偏差；
图7显示局部施用乳膏剂之后的皮肤荧光，乳膏剂含有苄基5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐，狭条表示标准偏差；图8显示甲基5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性；图9显示5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性；和图10显示己基5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性。
实施例15-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲苯磺酸盐的制备将碳酸氢钠(0.42克；5.0mmol)加入到5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐(0.5克；2.0mmol)的水(10毫升)和二氯甲烷(5毫升)的溶液中。将混合物彻底摇动并分离。将有机层吸出并加至对甲苯磺酸(0.38克；2.0mmol)中。用二氯甲烷(1×1毫升)提取含水部分。将合并的有机溶液蒸发，剩下黄色油，其在冷藏箱中过夜贮存可以固化。将残余物在170×25mm硅胶60柱上通过快速色谱法纯化，用乙腈(150ml)、5％甲醇/乙腈(methanol in acetonitrile)(500ml)和10％甲醇/乙腈(250ml)洗脱，收集15×50毫升馏份。将含有产品的馏份蒸发，剩下0.31克(40％)残余物。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.87(3H，t，J＝7Hz)，1.26(6H，br s)，1.56(2H，m)，2.29(3H，s)，2.54(2H，t，J＝7Hz)，2.79(2H，t，J＝6Hz)，4.0(4H，m)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.48(2H，d，J＝8Hz)，8.04(3H，br s).
实施例25-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲磺酸盐的制备(离子交换法)使5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐(1.0克；4.0mmol)的水(5毫升)和96％乙醇(5毫升)溶液通过AmberlystA-26(OH)(2.1克；8.8meq)柱到甲磺酸(0.38克；4.0mmol)的水溶液(3毫升)中。用50％乙醇水溶液(10ml)洗涤树脂柱，并将合并的洗脱液蒸干。干燥过夜之后，将残余物在170×25mm硅胶60柱上通过快速色谱法纯化，用乙腈(200ml)、5％甲醇/乙腈(500ml)、7.5％甲醇/乙腈(500ml)和10％甲醇/乙腈(750ml)洗脱，收集27×50毫升馏份。将含有产物的馏份蒸发，得到0.77克(62％)残余物，熔点132-134℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.87(3H，t，J＝6Hz)，1.27(6H，br s)，1.56(2H，m，J＝6Hz)，2.35(3H，s)，2.55(2H，t，J＝6Hz)，2.80(2H，t，J＝6Hz)，4.00(4H，m)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ13.8，21.8，24.9，27.0，30.8，34.1，39.5，46.6，64.0，171.8，202.4.
实施例35-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲磺酸盐使用离子交换法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和甲磺酸制备，熔点110-115℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.36(3H，s)，2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.37(5H，m)，8.10(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，39.5，46.6，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.4.
实施例45-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲苯磺酸盐使用离子交换法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和对甲苯磺酸制备，熔点120-125℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.62(2H，t，J＝6Hz)，2.83(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.37(5H，s)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，27.0，34.1，46.6，65.5，127.6，127.8，127.9，128.2，135.9，137.6，145.2，171.7，202.4.
实施例55-氨基-4-氧代戊酸甲磺酸盐的制备(银盐法)在用铝箔缠绕的塞好的锥形依氏烧瓶中，将5-氨基-4-氧代戊酸盐酸盐(1.0克；6.0mmol)的水(5毫升)的溶液加入到甲磺酸银(1.22克；6.0mmol)的搅拌水溶液(10毫升)中。将混合物搅拌过夜并转入离心管中。将混合物离心并倾析。将残余物用水(2×1毫升)洗涤。离心之后，将合并的水溶液冷冻干燥过夜，得到5-氨基-4-氧代戊酸甲磺酸盐(1.3克；96％产率)，熔点153.5-154.5℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.39(3H，s)，2.50(2H，t，J＝6Hz)，2.72(2H，t，J＝4Hz)，3.97(2H，s)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.2，34.2，39.5，46.6，173.2，202.6.
实施例6-5-氨基-4-氧代戊酸甲苯磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸盐酸盐和对甲苯磺酸银制备，熔点185-186℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.49(2H，t，J＝6Hz)，2.74(2H，t，J＝6Hz)，3.97(2H，s)，7.12(2H，d，J＝7Hz)，7.48(2H，d，J＝8Hz)，8.03(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，27.1，34.2，46.6，125.2，127.8，138，145，173.1，202.6.
实施例75-氨基-4-氧代戊酸甲酯甲磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸甲酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点135-137℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.54(2H，t，J＝8Hz)，2.79(2H，t，J＝6Hz)，3.59 3H，s)，3.98(2H，s)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.07(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，26.8，34.1，46.6，51.4，125.3，127.9，137.7，145.1，172.2，202.4.
实施例85-氨基-4-氧代戊酸甲酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸甲酯盐酸盐和对甲苯磺酸银制备，熔点138-140℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.54(2H，t，J＝8Hz)，2.79(2H，t，J＝6Hz)，3.59 3H，s)，3.98(2H，s)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.07(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，26.8，34.1，46.6，51.4，125.3，127.9，137.7，145.1，172.2，202.4.
实施例95-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点125℃和134-136℃(不同的晶形)。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.87(3H，t，J＝6Hz)，1.27(6H，br s)，1.56(2H，m，J＝6Hz)，2.35(3H，s)，2.55(2H，t，J＝6Hz)，2.80(2H，t，J＝6Hz)，4.00(4H，m)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ13.8，21.8，24.9，27.0，30.8，34.1，39.5，46.6，64.0，171.8，202.4.
实施例105-氨基-4-氧代戊酸己基酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐和对甲苯磺酸银制备，熔点116-118℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.86(3H，t，J＝6Hz)，1.26(6H，br s)，1.53(2H，m)，2.29(3H，s)，2.53(2H，t，J＝6Hz)，2.78(2H，t，J＝6Hz)，4.0(4H，m)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.06(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ13.8，20.7，21.9，24.9，27.0，28.0，30.8，34.1，46.6，64.0，125.3，127.9，137.6，145.2，171.8，202.4.
实施例112-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐使用银盐法，由2-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点128-133℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.88(6H，m)，1.0-1.4(4H，m)，1.74(1H，m，J＝6Hz)，2.35(3H，s)，2.56(2H，t，J＝6Hz)，2.81(2H，t，J＝8Hz)，3.75-3.96(2H，m)，3.97(2H，s)，8.12(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ14.0，16.5，19.3，23.6，27.0，31.6，34.1，34.9，39.5，46.6，68.6，171.8，202.4.
实施例122-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由2-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和对甲苯磺酸银制备，熔点125-127℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.88(6H，t，J＝6Hz)，1.0-1.4(4H，m)，1.73(1H，m)，2.29(3H，s)，2.56(2H，t，J＝6Hz)，2.80(2H，t，J＝6Hz)，3.75-4.0(2H，m)，3.98(2H，s)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.49(2H，d，J＝8Hz)，8.03(3H，brs).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ14.0，16.5，19.3，20.7，23.6，26.9，31.6，34.1，34.8，46.6，68.6，125.3，127.8，137.4，145.2，171.8，202.4.
实施例134-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐使用银盐法，由4-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点75-85℃和110-115℃(不同的晶形)。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.86(6H，d，J＝6Hz)，1.20(2H，m)，1.53(2H，m，2.39(3H，s)，2.55(2H，t，J＝6Hz)，2.80(2H，t，J＝8Hz)，3.90-4.04(4H，m)，8.18(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ22.3，25.9，27.0，27.0，34.1，34.3，39.5，46.6，64.2，171.8，202.4.
实施例144-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由4-甲基-1-戊基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和对-甲苯磺酸银制备，熔点96-100℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.86(6H，t，J＝6Hz)，1.16(2H，m)，1.53(1H，m)，2.29(3H，s)，2.57(2H，t，J＝6Hz)，2.78(2H，t，J＝6Hz)，3.95-4.05(4H，m)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，7.51(2H，d，J＝8Hz)，8.06(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，22.3，25.9，27.0，27.0，34.1，34.3，46.6，64.2，125.3，127.9，137.6，145.1，171.8，202.4.
实施例152-(2-乙氧基乙氧基)乙基5-氨基-4-氧代戊酸酯苯磺酸盐使用银盐法，由2-(2-乙氧基乙氧基)乙基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和苯磺酸银制备，熔点52-56℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.10(3H，t，J＝7Hz)，2.57(2H，t，J＝6Hz)，2.79(2H，t，J＝6Hz)，3.35-3.65(8H，m)，3.98(2H，s)，4.12(2H，t，J＝5Hz)，7.25-7.36(3H，m)，7.55-7.65(2H，m)，8.04(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ15.0，27.0，34.1，46.6，63.4，65.5，68.0，69.0，69.7，125.3，127.4，128.3，147.8，171.8，202.4.
实施例165-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点132-135℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.36(3H，s)，2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.37(5H，m)，8.10(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，39.5，46.6，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.4.
实施例175-氨基-4-氧代戊酸苄基酯2-羟基乙磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和2-羟基乙磺酸银制备，熔点76-82℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.67(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，3.65(2H，t，J＝7Hz)，3.98(2H，s)，5.10(2H，s)，7.37(5H，m)，8.13(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，46.6，53.5，57.5，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.4.
实施例185-氨基-4-氧代戊酸苄基酯(1S)-10-樟脑磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和(1S)-10-樟脑磺酸银制备，粘性油状物。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ0.75(3H，s)，1.04(3H，s)，1.31(2H，m)，1.75-1.97(3H，m)，2.24(1H，dt，J＝4and18Hz)，2.40(1H，d，J＝16Hz)，2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，2.90(1H，d，J＝16Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.36(5H，s)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ19.4，20.0，24.0，26.3，27.0，42.0，42.1，42.1，46.5，46.6，46.9，58.1，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.4，216.0.
实施例195-氨基-4-氧代戊酸苄基酯苯磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和苯磺酸银制备，熔点100-103℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.62(2H，t，J＝6Hz)，2.83(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.30-7.40，7.60-7.70(10H，m)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，46.6，65.5，122.9，125.3，127.5，127.6，127.8，128.2，128.2，135.9，147.8，171.7，202.4.
实施例205-氨基-4-氧代戊酸苄基酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和对-甲苯磺酸银制备，熔点146-148℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.62(2H，t，J＝6Hz)，2.83(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，5.10(2H，s)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.37(5H，s)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.08(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，27.0，34.1，46.6，65.5，127.6，127.8，127.9，128.2，135.9，137.6，145.2，171.7，202.4.
实施例215-氨基-4-氧代戊酸苄基酯2-萘磺酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和2-萘磺酸银制备，熔点137-141℃(dec)。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.62(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，4.00(2H，s)，5.10(2H，s)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.36(5H，s)，7.49(2H，m)，7.74(1H，dd，J＝2 and 8Hz)，7.86-8.00(4H，m)，8.18(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，46.6，65.5，123.7，123.9，126.1，126.3，127.2，127.6，127.8，128.2，131.9，132.6，134.7，135.9，137.6，145.1，171.7，202.4.
实施例224-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐使用银盐法，由4-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点120-124℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.30(3H，s)，2.36(3H，s)，2.61(2H，t，J＝6Hz)，2.83(3H，m)，3.98(2H，s)，5.05(2H，s)，7.22(4H，m)，8.14(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.6，23.6，27.0，34.1，39.5，46.6，65.4，127.8，128.8，132.8，137.1，171.7，202.4.
实施例234-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由4-甲基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和对-甲苯磺酸银制备，熔点115-119℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.29(3H，s)，2.30(3H，s)，2.59(2H，t，J＝6Hz)，2.82(3H，m)，3.97(2H，s)，5.04(2H，s)，7.19(6H，m，J＝8Hz)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.18(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，27.0，34.1，46.5，65.4，125.3，127.8，127.9，128.8，132.8，137.1，137.6，145.2，171.7，202.4.
实施例244-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲磺酸盐使用银盐法，由4-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和甲磺酸银制备，熔点113-115℃和125-127℃(不同的晶形)。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.20(6H，d，J＝6Hz)，2.36(3H，s)，2.62(2H，t，J＝6Hz)，2.85(3H，m)，3.99(2H，s)，5.06(2H，s)，7.27(4H，m)，8.15(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ23.7，27.0，33.1，34.1，39.5，46.6，65.4，126.1，127.9，133.2，148.1，171.7，202.4.
实施例254-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯甲苯磺酸盐使用银盐法，由4-异丙基苄基5-氨基-4-氧代戊酸酯盐酸盐和对-甲苯磺酸银制备，熔点121-123℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.20(6H，d，J＝6Hz)，2.29(3H，s)，2.60(2H，t，J＝6Hz)，2.82(2H，t，J＝6Hz)，2.88(1H，m)，3.98(2H，s)，5.05(2H，s)，7.12(2H，d，J＝8Hz)，7.26(4H，d，J＝2Hz)，7.50(2H，d，J＝8Hz)，8.10(3H，brs).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ20.7，2.7，27.0，33.1，34.1，46.6，65.4，125.3，126.1，127.8，133.2，137.5，145.5，148.1，171.7，202.4.
实施例265-氨基-4-氧代戊酸氢溴酸盐将5-苯二甲酰亚氨基-4-氧代戊酸甲酯(4.0克，14.5mmol)[Z.Naturforsch.41B，1593-94(1986)]和48％氢溴酸(40毫升)的搅拌混合物回流7小时，然后冷却至室温，并在冰箱中存储过夜。过滤之后，用水洗涤残余物，并在旋转蒸发器上蒸干合并的滤液，用乙醚(2×25ml)滴定。将残余物过滤，并在干燥枪(drying pistol)中、在30℃和15毫米汞柱下用硅胶干燥。将粗产品溶于甲醇(10毫升)和异丙醇(30毫升)中。加入乙醚(150毫升)，并使混合物静置2小时。滤出沉淀并如前所述进行干燥，得到2.5克(81％)，熔点137-140℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.49(2H，t，J＝6Hz)，2.76(2H，t，J＝6Hz)，3.99(2H，s)，8.13(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d，)δ27.1，34.3，46.6，173.1，202.5.
实施例275-氨基-4-氧代戊酸苄基酯氢溴酸盐将5-氨基-4-氧代戊酸氢溴酸盐(1.60克，7.5mmol)、苯甲醇(15毫升)和48％氢溴酸(8滴)的搅拌混合物加热至80℃(浴温)，保持2天。将混合物冷却至室温，并在0.12毫米汞柱下使用旋转蒸发器除去过量苯甲醇。用乙醚(2×50ml)滴定残余物，在160×55mm硅胶60柱上通过快速色谱法纯化残余物，用乙腈、5％甲醇/乙腈和10％甲醇/乙腈顺序洗脱。将含有产物的馏份合并，蒸发。用乙醚(5×15ml)滴定残余物，过滤，在30℃和15毫米汞柱下干燥，得到0.97克(43％)褐色粉末，熔点62-67℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.86(2H，t，J＝6Hz)，4.02(2H，s)，5.10(2H，s)，7.37(5H，s)，8.16(3H，br s).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.2，39.5，46.5，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.3.
实施例285-氨基-4-氧代戊酸苄基酯硝酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐和硝酸银制备，熔点82-86℃。
1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ2.63(2H，t，J＝6Hz)，2.84(2H，t，J＝6Hz)，4.00(2H，s)，5.10(2H，s)，7.37(5H，s)，8.10(3H，brs).
13C NMR(50MHz；DMSO-d6)δ27.0，34.1，39.5，46.6，65.5，127.6，127.8，128.2，135.9，171.7，202.4.
实施例295-氨基-4-氧代戊酸苄基酯硫酸盐(2∶1)
使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐(0.52克；2.0mmol)和Ag2SO4(0.31克；1.0mmol)水溶液(10毫升)制备。
用硅胶干燥之后的产率是0.51克(94％)。熔点106-109℃。
元素分析(通过Ilse Beetz Mikroanalytisches Laboratorium，96301Kronach，Germany进行)％C计算值53.32％测定值53.37％％H计算值5.97％测定值5.97％％S计算值5.93％测定值5.78％元素分析表明产物以硫酸盐(2∶1)形态存在，即(5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯)2SO4。
实施例305-氨基-4-氧代戊酸苄基酯磷酸盐使用银盐法，由5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯盐酸盐(0.52克；2.0mmol)和Ag3PO4(0.28克；0.67mmol)水溶液(10毫升)制备。
用硅胶干燥之后产率是0.36克。熔点93-95℃。
元素分析(通过Ilse Beetz Mikroanalytisches Laboratorium，96301Kronach，Germany进行)PO43-HPO42-％C计算值56.76％计算值53.33％ 测定值53.62％％H计算值6.35％ 计算值6.15％测定值6.08％％P计算值4.07％ 计算值5.73％测定值3.90％元素分析表示，产物不是所希望的磷酸盐(3∶1)；与C和H最接近相符的是单磷酸氢盐(5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯)2HPO4。相对低的P值可能由不完全反应所引起，例如可能还存在一些氯。
实施例31制剂5-氨基-4-氧代戊酸或其酯的不同盐是在研究皮肤的Unguentum Merck中配制的。所有的乳膏剂，每10克乳膏剂含有0.5mmol的物质，以保证相同摩尔浓度(假定10克乳膏剂等于10毫升，近似摩尔浓度是0.5mmol/10ml或50mM)。在下面表1中列出了所制备的制剂。
表1-皮肤制剂
*除用(a)标明的物质是通过离子交换法制备的以外，所有的盐是通过银盐方法制备的。
**对于所有的制剂，每10克乳膏剂中含有0.5mmol盐。
实施例32生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸的盐方法雌性Balb/c无胸腺裸鼠，重量大约22克，从the Department ofLaboratory Animals，The Norwegian Radium Hospital，Oslo，Norway处获得，用于研究。每个组由三个小鼠组成。
每个小鼠接受0.05-0.1克的制剂(见实施例31)，局部施加在身体肋部的右边，均匀分布并用绷带覆盖(Opsite Flexigrid；Smith and Nephew MedicalLtd.，Hull，England)。
所使用的纤维点测量装置由一束光学纤维组成，该光学纤维连接到可以产生407nm激发光线的分光荧光计上。将能够渗入组织中0.1-0.5mm的激发光线通过一半纤维导引至小鼠皮肤。收集所得到的辐射荧光光谱(550-750)nm，并通过剩余的纤维导引到用于定量分析的光电倍增器中。在给药之后的0、2、4、6、8、10、12和24小时测定源于皮肤的荧光光谱，并随时间绘图。
结果从图1可以看到，甲磺酸盐比HCl盐产生稍微高的最大皮肤荧光。
实施例33生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯的盐制剂的制备描述于实施例31中。使用与实施例32相同的实验系统，结果示于图2中。
从图2可以看到，甲磺酸盐和甲苯磺酸盐比盐酸盐产生高25-30％的最大皮肤荧光。甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的初始荧光累积作用和最大荧光都比盐酸盐的出现更快。
实施例34生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸甲酯的盐制剂的制备描述于实施例31中。使用与实施例32相同的实验系统，结果示于图3中。
从图3可以看到，与盐酸盐相比较，5-氨基乙酰丙酸甲基酯的甲磺酸盐在皮肤荧光方面产生大量的增加。
实施例35生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸己基酯的盐制剂的制备描述于实施例31中。使用与实施例32相同的实验系统，结果示于图4中。
从图4可以看到，与盐酸盐相比较，5-氨基乙酰丙酸己基酯的甲苯磺酸盐产生与盐酸盐相同的皮肤荧光。
实施例36制剂5-氨基-4-氧代戊酸或其苄基酯的不同盐是在研究皮肤的UnguentumMerck中配制的。所有的乳膏制剂，每10克乳膏剂中含有0.5mmol物质，以确保相同的摩尔浓度。在2∶1盐的情况下进行校正，以使5-氨基-4-氧代戊酸或相应酯的摩尔浓度相当于0.5mmol/10g乳膏剂。假定10克乳膏剂等于10毫升，近似摩尔浓度是0.5mmol/10ml＝50mM。在下面表2中列出了所制备的制剂。
表2-皮肤制剂
*假定1/2摩尔硫酸盐或磷酸氢盐/摩尔5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯。
实施例37生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸的盐制剂的制备描述于实施例36中。使用与实施例32相同的实验系统，除了在636nm而非550-750nm处测量皮肤荧光之外。结果见图5。
实施例38生物活性-5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯的盐制剂的制备描述于实施例36中。使用与实施例37相同的实验系统。结果见图6和7。
从图6可以看到，与盐酸盐相比较，5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯的硝酸盐在引起皮肤荧光方面更有效。
从图7可以看到，与相应的盐酸盐相比较，5-氨基-4-氧代戊酸苄基酯的硫酸盐和磷酸盐使较差的皮肤荧光诱发剂。然而，与盐酸盐相比，硫酸盐和磷酸盐的最大荧光出现较早。
实施例395-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性将5-氨基-4-氧代戊酸己基酯的盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的样品(2毫克)在室温和环境湿度下保持4天。没有显著的变化。
将5-氨基-4-氧代戊酸己基酯的盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的样品(2毫克)保持在室温和100％湿度下。放置过夜之后，盐酸盐潮解。两天之后，甲磺酸盐潮解，而甲苯磺酸盐四天之后潮解。
实施例405-氨基-4-氧代戊酸甲酯盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性将5-氨基-4-氧代戊酸甲酯盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的样品称重，并在密室中、在利用饱和硫酸铵溶液形成的75-84％相对湿度下、在室温(大约25℃)下保存在30ml塑料杯中。然后在不同的时间间隔之后，称重样品，以监测水的吸收。同时还可以检测样品的外观，以确定潮解的起始。结果见图8。
从图8可以看到，根据所监测的重量，盐酸盐和甲磺酸盐都大量程度的吸水，而且22小时之后出现潮解(通过图中的星号表示)。相反，在试验阶段，5-氨基-4-氧代戊酸甲酯的甲苯磺酸盐没有吸水，并且外观没有变化。
实施例415-氨基-4-氧代戊酸盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性将5-氨基-4-氧代戊酸盐酸盐和甲苯磺酸盐的样品称重，并在密室中、在利用饱和硫酸铵溶液形成的75-84％相对湿度下、在室温(大约25℃)下保存在30ml塑料杯中。然后在不同的时间间隔之后，称重样品，以监测水的吸收。同时还可以检测样品的外观，以确定潮解的起始。结果见图9。
从图9可以看到，根据所监测的重量，5-氨基-4-氧代戊酸的盐酸盐大量程度的吸水。22.5小时之后，盐酸盐出现起始潮解(通过图中的星号表示)。相反，在试验阶段，甲苯磺酸盐没有吸水，并且外观没有变化。
实施例425-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐、甲磺酸盐和甲苯磺酸盐的吸湿性将5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐和甲苯磺酸盐的样品称重，并在密室中、在利用饱和硫酸铵溶液形成的75-84％相对湿度下、在室温(大约25℃)下保存在30ml塑料杯中。然后在不同的时间间隔之后，称重样品，以监测水的吸收。同时还可以检测样品的外观，以确定潮解的起始。结果示于图10。
在图10中可以看到，根据所监测的重量，5-氨基-4-氧代戊酸己基酯盐酸盐没有大量程度的吸水，但仅仅5.0小时之后出现起始潮解(由图中的星号表示)。甲磺酸盐吸水至某种程度，但没有出现潮解。在试验阶段期间，己基5-氨基-4-氧代乙酰丙酸的甲苯磺酸盐没有吸水并且外观没有变化。
权利要求
1.5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)或5-ALA衍生物(例如5-ALA酯)与酸的酸加成盐，所述酸具有大约5或更小的pKa，优选大约3或更小，条件是该酸不是盐酸。
2.权利要求1中所要求的酸加成盐，其衍生自式X的化合物R22N-CH2COCH2-CH2CO-OR1(X)其中R1和R2每个独立地表示氢原子或任选取代的直链、支链或环状烃基，其可以任选被一个或多个-O-、-NR3-、-S-或-PR3-基团间隔；以及R3是氢原子或C1-6烃基。
3.权利要求2所要求的酸加成盐，其中在式X中，R1表示未取代的烃基(例如C1-6烃基)或表示被芳基(例如苯基)取代的烃基(例如C1-2烃基)，和/或每个R2表示氢原子。
4.权利要求2或权利要求3所要求的酸加成盐，其中R1是苄基或取代的苄基。
5.权利要求2所要求的酸加成盐，其中所述的式X化合物是5-ALA，5-ALA甲酯，5-ALA己基酯，5-ALA苄基酯，5-ALA2-甲基戊基酯，5-ALA4-甲基戊基酯，5-ALA2-(2-乙氧基乙氧基)乙酯，5-ALA4-甲基苄基酯或5-ALA4-异丙基苄基酯。
6.权利要求2所要求的酸加成盐，其中所述的式X化合物是5-ALA，5-ALA甲酯，5-ALA己基酯或5-ALA苄基酯。
7.权利要求1至6中任一项所要求的酸加成盐，其中所述酸是有机酸。
8.权利要求7的酸加成盐，其中所述酸是磺酸或磺酸衍生物。
9.权利要求1自的式I的酸加成盐 其中R是氢原子或任选取代的烃基(例如C1-20烃基)或芳基(例如至多20个碳原子的芳基，优选为任选取代的烃基或芳基；R1和R2每个独立地表示氢原子或任选取代的直链、支链或环状烃基，其可以任选被一个或多个-O-、-NR3-、-S-或-PR3-基团间隔；以及R3是氢原子或C1-6烃基。
10.权利要求9的酸加成盐，其中R是任选取代的苯基或甲基。
11.权利要求9或权利要求10的酸加成盐，其中在式I中，R1表示未取代的烃基(例如C1-6烃基)或表示被芳基(例如苯基)取代的烃基(例如C1-2烃基)，和/或每个R2表示氢原子。
12.权利要求9至11中任一项的酸加成盐，其中R1是苄基或取代的苄基。
13.权利要求9中的酸加成盐，其是下列物质的磺酸加成盐5-ALA，5-ALA甲酯，5-ALA己基酯，5-ALA苄基酯，5-ALA2-甲基戊基酯，5-ALA4-甲基戊基酯，5-ALA2-(2-乙氧基乙氧基)乙酯，5-ALA4-甲基苄基酯或5-ALA4-异丙基苄基酯。
14.权利要求9中的酸加成盐，其是下列物质的磺酸加成盐5-ALA，5-ALA甲酯，5-ALA己基酯或5-ALA苄基酯。
15.权利要求13或权利要求14的酸加成盐，其中所述酸是萘-1，5-二磺酸，乙烷-1，2-二磺酸，对甲苯磺酸，甲磺酸，十二烷基磺酸，萘-2-磺酸，苯磺酸，2-羟基-乙磺酸，乙磺酸，或(+)-樟脑-10-磺酸。
16.权利要求1至7中任一项的酸加成盐，其中所述酸是环拉酸，硫氰酸，草酸，2，2-二氯乙酸，乙二醇磷酸，L-天冬氨酸，马来酸，谷氨酸，海藻酸，双羟萘酸酸，2-氧代-戊二酸，1-羟基-2-萘酸，丙二酸，龙胆酸，水杨酸或酒石酸。
17.权利要求1至6中任一项的酸加成盐，其中所述酸是无机酸。
18.权利要求17的酸加成盐，其中所述酸是氢溴酸，硫酸，硝酸或磷酸，优选硝酸。
19.权利要求1至6中任一项的酸加成盐，其中所述酸是磺酸、磺酸衍生物或硝酸。
20.根据前述权利要求中任一项的酸加成盐，其中所述酸是药学可接受的。
21.用于制备权利要求1至20中任一项的酸加成盐的方法，所述方法包括使5-氨基乙酰丙酸或其衍生物(例如ALA酯)与酸反应。
22.用于制备权利要求1至20中任一项的酸加成盐的方法，所述方法包括使5-氨基乙酰丙酸或其酯化衍生物与烷醇或其酯形成衍生物(例如与烷醇)在酸的存在下反应。
23.用于制备权利要求1至20中任一项的酸加成盐(例如式I的化合物)的方法，所述方法包括(i)将包含ALA或ALA衍生物的盐酸盐(例如式Cl-R22N+H-CH2COCH2CH2CO2R1的化合物，其中R1和R2如权利要求2所定义)的溶液与碱性阴离子交换树脂接触；(ii)任选地除去所述树脂；和(iii)将得到的溶液与包含酸的溶液混合，所述酸优选为磺酸或磺酸衍生物。
24.用于制备权利要求1至20中任一项的酸加成盐(例如式I的化合物)的方法，所述方法包括(i)使ALA或ALA衍生物的盐酸盐(例如式Cl-R22N+H-CH2COCH2CH2CO2R1的化合物，其中R1和R2如权利要求2所定义)在AgCl基本上不能溶解的溶剂中与酸的银盐反应，所述酸优选为磺酸或磺酸衍生物；和(ii)任选从得到的盐中分离AgCl。
25.一种酸加成盐，其是通过将5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)或5-ALA衍生物(例如5-ALA酯)与pKa为大约5或更小，优选大约3或更小的酸接触(例如反应)得到的，条件是该酸不是盐酸。
26.一种酸加成盐，其是通过权利要求21至24中任一项的方法得到的。
27.一种药物组合物，包括权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐，以及至少一种药学载体或赋形剂。
28.权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐或组合物，作为药物的用途，例如用于光动力学治疗的用途。
29.权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐在制备用于光化学疗法的治疗剂的用途，优选为在制备用于治疗对光化学疗法敏感的身体外或内表面的病症或异常的治疗剂的用途。
30.光化学治疗身体外或内表面的病症或异常的方法，所述方法包括对感染表面给药权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐或组合物，并且将所述表面暴露于光线(例如白光)中，优选波长范围300-800nm的光线(例如波长范围380-440nm的蓝光)。
31.一种产品，包括权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐、以及至少一种表面渗透辅助剂和任选的一或多种螯合剂作为组合制剂，所述组合制剂在治疗对光化学疗法敏感的身体外或内表面的病症或异常中用于同时、独立或顺序使用。
32.用于光化学治疗身体的外或内表面的病症或异常的试剂盒，包括a)第一容器，含有权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐，b)第二容器，包含至少一种表面渗透辅助剂；和任选地c)一或多种螯合剂，其包含在所述第一容器之内或在第三容器之内。
33.通过化验患者的体液或组织样品来体外诊断异常或病症的方法，所述方法至少包括下面的步骤i)将所述体液或组织与权利要求1至20、25或26中任一项的酸加成盐混合，ii)将所述混合物暴露于光线中，iii)确定荧光水平，和iv)将荧光水平与对照水平进行比较。
全文摘要
本发明提供了5－氨基乙酰丙酸(5－ALA)或5－ALA衍生物(例如5－ALA酯)与pKa为约5或更小的，优选为约3或更小的酸的酸加成盐，条件是该酸不是盐酸。特别优选的盐是那些源于选自下列物质的盐包括磺酸和其衍生物，氢溴酸，硫酸，硝酸和磷酸。本发明的盐特别适合用于身体外表面或内表面的病症或异常的诊断和光化学疗法中的光敏剂。
文档编号A61K31/195GK1938264SQ200580009845
公开日2007年3月28日 申请日期2005年3月29日 优先权日2004年3月26日
发明者乔恩·E·布雷恩登, 阿斯拉克·戈达尔, 尼尔斯·O·尼尔森, 乔·克拉维尼斯 申请人:弗托库尔公司