用于治疗自身免疫病和移植排斥反应的蛋白激酶c抑制剂的制作方法

专利名称：用于治疗自身免疫病和移植排斥反应的蛋白激酶c抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及蛋白激酶C抑制剂的新用途。
特别是，本发明涉及式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂及其可药用盐、水合物或溶剂化物的新用途。
式I的蛋白激酶C抑制剂如下 其中R1和R’1各自独立地是氢、烷基、卤烷基、链烯基、芳烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、酰氨基烷基、酰氧基烷基、氰基烷基、脒基烷基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基或式(a)、(b)或(c)的基团-(CH2)n-W-Het(a) 其中Het表示杂环基团；W表示NH、S或键；T表示NH或S；V表示O、S、NH或NCN；A表示烷硫基(alkylthio)、氨基、单烷基氨基或二烷基氨基；Ar表示芳基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；或R1和R2一起形成-(CH2)r-X-CH2-，其中r是1、2或3，并且X是CHR8或NR8，其中R8是(CH2)sR9，其中R9是氢、羟基、烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、三烷基氨基、叠氮基、酰氨基、烷氧基羰基、氰基、脒基或氨基羰基，并且s是0、1、2或3；R3是氢或CH3CO；R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基；并且n是1、2、3、4、5或6。
式II的蛋白激酶C抑制剂如下 其中R1是式(d)、(e)或(f)的基团 其中p和q各自独立地是1、2、3或4；s是0、1、2或3；t是1或2；u是0或1；并且R12是氢、烷基、卤烷基、环烷基、乙酰基、芳基、-CH(芳基)2、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、胍基、-C(＝N(烷氧基羰基))NH(烷氧基羰基)、脒基、羟基、羧基、烷氧基羰基或杂环基；R’1是氢、C1-4烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；并且R4、R’4、R5、R’5、R5、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基。
式III的蛋白激酶C抑制剂如下 其中R’1是氢、C1-C4烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R’2是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基；X是CR8R9，其中R8是(CH2)sR10，其中R9是(CH2)sR11，R10和R11各自独立地是羟基、烷氧基、羧基、酰氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、三烷基氨基、叠氮基、酰氨基、烷氧基羰基、氰基、脒基或氨基羰基，并且s是0、1、2或3；并且r是1、2或3。
式IV的蛋白激酶C抑制剂如下 其中R1是烷基单糖(alkylglycose)残基或(g)或(h)的基团 其中n是1、2、3、4、5或6；R’1是氢、C1-C4烷基、环丙基甲基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；并且R4、R，4、R5、R，5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基。
烷基，单独或联合，可以是包含1-7个碳原子，优选为1-4个碳原子的直链或支链烷基基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和戊基。“C1-C3烷基”是限制到1-4个碳原子的烷基。链烯基可以是2-7个碳原子的直链或支链烃，其包含一个或多个双键，优选为一个或两个双键。链烯基的实例包括亚乙烯基、1，3-亚丙烯基、1，3-丁间二烯基和1，3，5-己三烯基。
环烷基，单独或联合，可以是3-7个碳的环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
烷氧基，单独或联合，可以是通过-O-键共价结合的烷基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。烷氧基烷基可以是如CH3(CH2)-O-(CH2)m，可以是如叔丁氧基羰基或BOC。
卤烷基可以是具有一个或多个，优选为1-3个卤原子的烷基，如CH2Cl、CF3、CH2CF3、CH2(CF2)2CF3以及类似基团。
酰氨基或酰氨基烷基基团的酰基部分来源于含有最多7个碳原子，优选为最多4个碳原子的链烷酸，如乙酰基、丙酰基或丁酰基，或来源于芳香羧酸，如苯甲酰基。酰氧基是一个通过-O-键结合的酰基，如乙酰氧基、CH3C(＝O)O-。酰氨基是如CH3(C＝O)NH-(乙酰氨基)。同样，酰氨基烷基是CH3(C＝O)NH(CH2)m-。
芳基，单独或联合，可以是未取代的苯基或含有一个或多个，优选为1-3个取代基的苯基，上述取代基独立地选自卤素、烷基、羟基、苄氧基、烷氧基、卤烷基、硝基、氨基、酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基和氰基。芳烷基优选为苄基。
卤素可以是氟、氯、溴或碘。
“Het”或“杂环基”表示的杂环基团可以是稳定的、饱和的、部分未饱和的或芳香5-或6-元杂环基团。杂环的环由碳原子和1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子组成。杂环基团可以任选地被1-3个独立地选自卤素、烷基、羟基、烷氧基、卤烷基、硝基、氨基、酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亚磺酰基和烷基磺酰基的取代基取代，或当杂环基团是芳香的含氮杂环基团时，氮原子可以带有氧化物基团。这种杂环基团的实例包括咪唑基、咪唑啉基、噻唑啉基、吡啶基、吲哚基、呋喃基和嘧啶基。
“烷基单糖残基”可以是在C-1位通过C2-C4烷基与吲哚基连接的单糖部分。包含于烷基单糖残基中的单糖基是天然的或非天然的5或6碳糖，优选为选自阿洛糖基、阿卓糖基、葡糖基、甘露糖基、古洛糖基、艾杜糖基、半乳糖基、塔罗糖基、阿拉伯糖基、木糖基、来苏糖基、鼠李糖基、核糖基、脱氧呋喃糖基、脱氧吡喃糖基和脱氧核糖基。单糖可以是叠氮基取代的，O-乙酰化的，O-甲基化的，氨基、单或二烷基氨基取代的或酰氨基取代的。如，烷基单糖残基包括 式I-IV化合物可以以游离形式或盐形式，例如，与如有机或无机酸的加成盐存在，如盐酸盐、磷酸盐、乙酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐或酒石酸盐。根据本发明，游离形式或盐形式的式I-IV化合物可以以水合物或溶剂化物形式、无定形或晶体形式使用。
特别优选的蛋白激酶C抑制剂是式Ia、Ib、IIa和IIIa化合物或它们的盐。
式Ia化合物如下 其中R1式氢、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R’1是氢、C1-4烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；并且R2是氢或甲基。
式Ib化合物如下
其中R’1是氢或C1-C4烷基；X是CR8R9或NR8，其中R8是(CH2)sR10，其中R9是(CH2)sR11R10和R11各自独立地是氢、羟基、氨基、单烷基氨基或二烷基氨基，并且s是1；并且r是1或2。
式IIa化合物如下 其中R1是 其中或者s’是0并且R’12是氢或C1-4烷基；或者s’是1并且R’12是吡啶基，优选为2-吡啶基，并且R’1是氢、C1-4烷基或；式IIIa化合物如下
其中R’1是氢、烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；X是CR8R9或NR8其中R8是(CH2)sR10，其中R9是(CH2)sR11R10和R11各自独立地是羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、单烷基氨基或二烷基氨基，并且s是0或1；并且r是1或2。
更优选的是游离形式或盐形式(如盐酸盐)的3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-{(1-吡啶-2-基甲基)-哌啶-4-基}-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮，也称为LY 317615(下文中的化合物A)，和3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-(哌啶-4-基)-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮(下文中的化合物B)。
式I、II、III和IV化合物可以如本领域中公知的，如在US 5,545,636中描述的合成。
基于观察到的抑制蛋白激酶Cβ-1和β-2同工酶(如US 5,545,636中描述的)的活性，已发现式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂及其可药用盐、水合物或溶剂化物可有效治疗糖尿病相关疾病及其并发症、以及与β-1和β-2同工酶升高相关的疾病，如局部缺血、炎症、中枢神经系统障碍、心血管疾病、皮肤病、阿尔茨海默病和癌症。
现在已经发现式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa和IIIa的蛋白激酶C抑制剂及其可药用盐、水合物或溶剂化物可用于治疗和预防器官、组织或细胞移植排斥反应，如可用于治疗实体器官或组织，如心脏、肺、心肺联合(combined heart-lung)、肝、肾、胰腺、皮肤或角膜移植，或细胞(如干细胞)或产生胰岛素的细胞(如胰岛细胞)的接受者。它们也说明可预防移植物抗宿主疾病，如下文的骨髓移植。
根据本发明的特殊发现，本发明提供1.1在需要的受试者中治疗器官、组织或细胞移植排斥反应，如心脏、肺、心肺联合、肝、肾、胰腺、皮肤或角膜移植排斥反应，以及预防移植物抗宿主疾病的方法，该方法包括对该受试者施用治疗有效量的式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa和IIIa的蛋白激酶C抑制剂，优选为化合物A或B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
另外，现已经发现式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa和IIIa的蛋白激酶C抑制剂及其可药用盐或溶剂化物可用于治疗和预防自身免疫病，如结节病、纤维化肺、自发间质性肺炎、阻塞性气道疾病，包括如哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、特别是慢性或顽固性哮喘(例如晚期哮喘和气道高反应)的病症、支气管炎，包括支气管哮喘、婴儿哮喘、变应性类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肾病综合征狼疮、桥本甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、眼色素层炎、肾病综合征、类固醇依赖性和类固醇抵抗性肾病、掌跖脓疱病、过敏性脑脊髓炎、肾小球肾炎、银屑病、银屑病关节炎、变应性湿疹(变应性皮炎)、接触性皮炎和其他的湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松懈、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、红斑、皮肤嗜酸性粒细胞增多、痤疮、斑形脱发、嗜酸性粒细胞增多性肌膜炎、动脉粥样硬化、结膜炎、角膜结膜炎、角膜炎、春季结膜炎、伴有贝赫切特病的眼色素层炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦溃疡、巩膜炎、严重的眼内炎症、粘膜或如白三烯B4介导的疾病的血管炎症、胃溃疡、局部缺血疾病和血栓形成引起的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠病(例如克隆病和溃疡性结肠炎)、坏死性小肠结肠炎、肾病，包括间质性肾炎、古德帕斯丘综合征、溶血性尿毒症综合征和糖尿病肾病、选自多发性肌炎、吉-巴综合征、梅尼埃病和神经根病的神经疾病、胶原病包括，硬皮病、韦格纳肉芽肿病和Sogren综合征、慢性自身免疫肝病包括自身免疫肝炎、原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎、部分肝切除术、急性肝坏死(如由中毒、病毒性肝炎、休克或缺氧引起的坏死)、乙型病毒性肝炎、非甲/非乙型肝炎和肝硬化、爆发型肝炎、脓疱性银屑病、贝赫切特病、慢性活动性肝炎、埃文斯综合征、花粉症、特发性甲状旁腺功能减退、艾迪生病、自身免疫萎缩性胃炎、类狼疮肝炎、肾小管间质肾炎、膜肾炎、肌萎缩性侧索硬化或风湿热、特别是炎性肠病(IBD)，如克隆病和溃疡性结肠炎；肌萎缩性侧索硬化(ALS)；多发性硬化；类风湿性关节炎或丙型肝炎。
因此，本发明提供1.2在需要的受试者中治疗或预防如上所述的自身免疫病的方法，该方法包括对该受试者施用治疗有效量的式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa和IIIa的蛋白激酶C抑制剂，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
在本发明中，术语“治疗(teatment或treat)”指的是保护性或预防性治疗以及有疗效的或减轻疾病的治疗，包括治疗处于感染疾病危险中或疑似已经感染疾病的患者以及患病或已经被诊断为患有疾病或医学病症的患者。
在一系列其他具体或选择性的实施方案中，本发明也提供2.式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂，优选为化合物A或B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物在如上定义的方法中作为免疫抑制剂或免疫调制剂的用途。
3.式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂，优选为化合物A或B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物在如上定义的方法中制备作为免疫抑制剂或免疫调制剂药物组合物中的用途。
4.在如上定义的方法中药物组合物作为免疫抑制剂或免疫调制剂的用途，该药物组合物包含式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂，优选为化合物A或B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物以及一种或多种可药用的稀释剂或载体。
本发明的化合物在治疗和/或预防如以上所述的疾病或病症中的用途可在如以下描述的标准动物或临床试验中证明。
体外MLR
如T.Meo在“Immunological Methods”，L. Lefkovits和B.Peris编辑，Academic Press，N.Y.第227-239页(1979)中描述的鼠动物模型MLR，用于证明本发明的方法中使用的化合物的免疫抑制作用。Balb/c小鼠(雌性，8-10周)的脾细胞(0.5×106)与0.5×106照射(2000拉德)或丝裂霉素C处理的CBA小鼠(雌性，8-10周)脾细胞共同培养5天。照射的异源细胞诱导Balb/c脾细胞的增殖应答，该应答可以通过掺入到DNA中的标记前体测定。因为刺激物细胞被照射(或丝裂霉素C处理)，所以它们对Balb/c细胞未作出增殖应答而是保持其抗原性。测定不同稀释度的化合物对Balb/c细胞的抗增殖作用。并且计算引起50％细胞增殖抑制的浓度(IC50)。例如化合物B的IC50为195nM。
体外PKC试验根据以下方法测定本发明化合物对PKC的活性。试验在白色透明底的具有非结合表面的384孔微量滴定板上进行。反应混合物(25μL)包含在pH7.4的20mM Tris-HCl缓冲液中的1.5μM的十三肽受体底物(用Ala→Ser替换模仿PKC α假底物序列)、10μM33p-ATP、10mMMg(NO3)2、0.2mM CaCl2、蛋白浓度为25-400ng/mL(取决于所使用的同种型)的PKC、最终脂质浓度为0.5mM的脂囊泡(包含30mol％磷脂酰丝氨酸、5mol％DAG和65mol％磷脂酰胆碱)及0.1％BSA。温育在室温下进行60分钟。反应通过加入50μL终止混合物(100mM EDTA、200μM ATP、0.1％ Triton X-100磷酸缓冲盐w/o Ca、Mg中的0.375mg/孔链霉亲合素包被的SPA珠)终止。在室温下温育10分钟后，悬液以300g旋转沉降10分钟。掺入的放射性在Trilux计数器中测定1分钟。IC50测定是通过用1-1000μM范围内的浓度温育系列稀释的抑制剂的常规原理进行。IC50值通过用XL fit软件拟合的曲线图谱计算。
在本试验中，本发明的化合物，如式IIa化合物，抑制PKC的IC50≤1μM，优选为≤10nM。例如，化合物B抑制PKCα的IC50为3.0nM，PKCβ的IC50为2.0nM，PKCδ的IC50为2.0nM，PKCε的IC50为2.0nM。
体内大鼠心脏移植联合使用的种类雄性Lewis(RT1单元型)和DA(RT1单元型)。动物用可吸入的异荧烷(isofiuorane)麻醉。接下来供体大鼠通过腹下腔静脉和主动脉同时放血进行肝素化，打开胸腔并使心脏迅速冷却。结扎主动脉并将远端分为第一分支，且头臂动脉在第一杈处分开。左侧肺动脉结扎并分开，右侧分开但保持开放。其他所有的血管被自由剥离、结扎和分开并将供体心脏移至冰冷的生理盐水中。
受体通过下肾腹主动脉和腔静脉剖分和横断钳闭术制备。移植物用端边吻合进行移植，在供体头臂动脉和受体主动脉以及供体右侧肺动脉和受体腔静脉之间使用10/0单丝缝合线。移去钳子，移植物束缚在后腹腔，腹腔内容物用温生理盐水洗涤并且将动物缝合，使其在加热灯下恢复。移植物的存活通过每日触诊腹壁的供体心脏跳动来监控。当心跳停止时认为排斥完成。在用式I、II、III或IV化合物或其可药用盐或溶剂化物以日剂量10-30mg/kg，每日两次口服给药治疗的动物中获得了增加的移植物存活。在此模型中，当每日两次施用剂量为30mg/kg的式A化合物时，获得了移植物存活延长14、25、26天。
体内移植物抗宿主模型Wistar/F大鼠脾细胞(2×107)皮下注射到(Wistar/F×Fischer344)F1杂种鼠的右侧后足垫内。左足未处理。动物连续4天(0-3)用试验化合物治疗。腘淋巴结在第7天消失，并确定两个相应的淋巴结之间的重量差异。比较试验组淋巴结重量差异与未用试验化合物治疗的动物组的相应的淋巴结重量差异，结果表示为淋巴结增大的抑制(以百分比计)。在此试验中，当每日两次施用剂量为30mg/kg的式A化合物时，获得了60-80％，优选为70-80％的抑制。
体内治疗多发性硬化SJL/J小鼠慢性进行性实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型免疫在第0天，雌性SJL/J小鼠用200μL接种物免疫(皮下胁腹注射)，该接种物包含乳化于完全弗氏佐剂(CFA)中的500μg小牛髓鞘碱性蛋白(MBP)。在第9天，小鼠通过第二次MBP注射增强并且另外皮下辅助注射200ng百日咳杆菌(B.pertussis)毒素。在第11天进行最后的Pertussis注射。
大多数MBP免疫小鼠在第21天出现严重的EAE发作。接下来恢复期开始于第25天左右，在恢复期中小鼠保持约20天无症状。然后，在笫45-47天，大约50％的动物进入疾病的发展期。因此，除非另行规定，用试验化合物的治疗开始于第21天(疾病完全明确时)并且连续到第70天。重组小鼠β干扰素(INFβ Calbiochem/Biosciences)溶解于生理盐水中并且每周腹膜注射3次。本发明的化合物，如化合物A，通过管饲法每周口服给药5次。载体对照组的小鼠用MBP免疫并用水处理。
每个试验组由10只小鼠组成，每天检查这些小鼠的临床EAE症状。同时记录疾病发生率和EAE发作日。用0-3的等级评价EAE的临床等级。任何在开始药物治疗后发生的疾病相关死亡记录为最高分数3。
实施本发明的方法需要的日剂量将不同，其取决于如所使用的化合物、宿主、给药方式和治疗疾病的严重程度。作为单剂量或分剂量的日剂量范围优选为大约1-1000mg活性成分。
式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa或IIIa化合物可以以如上所述的游离形式或可药用盐形式施用。该盐可以通过常规的方法制备并且与游离化合物表现同样的活性顺序。
式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa或IIIa化合物，优选为化合物A或化合物B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物可以以单独活性成分施用或与在免疫调节方面(如用于治疗或预防异源或异种移植物急性或慢性排斥反应或自身免疫病)的其他药物联合施用。例如，它们可以与下列药物联合使用钙依赖磷酸酶抑制剂，如环孢菌素A、ISA Tx247、FK506、ABT-281、ASM 981；mTOR抑制剂，如瑞帕霉素、40-O-(2-羟乙基)-瑞帕霉素、CCI779、ABT578或rapalog，如AP23573、AP23464、AP23675、AP23841、TAFA-93、biolimus 7或biolimus 9等等；糖皮质激素；环磷酰胺；硫唑嘌呤(azathioprene)；甲氨蝶呤；S1P受体激动剂，如FTY 720或其类似物；来氟洛米或其类似物；咪唑立宾；霉酚酸或其盐，如钠盐；霉酸酯；15-脱氧斯潘格宁(deoxyspergualine)或其类似物；免疫抑制剂单克隆抗体，如白细胞受体的单克隆抗体，如MHC、CD2、CD3、CD4、CD11a/CD18、CD7、CD25、CD27、B7、CD40、CD45、CD58、CD137、ICOS、CD150(SLAM)、OX40、4-1BB或它们的配体，如CD154；或其他的免疫调节化合物，如具有至少一部分CTLA4细胞外区域的重组结合分子或其突变体，如至少CTLA4的细胞外部分或其突变体与非CTLA4蛋白序列如CTLA4Ig(如指定的ATCC68629)或其突变体，如LEA29Y连接，或其他的粘附分子抑制剂，如mAbs或低分子量抑制剂包括LFA-1拮抗剂、选择素拮抗剂和VLA-4拮抗剂。
根据前述本发明在另一方面提供5.上述定义的方法，包括如同时或相继联合施用治疗有效量的式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa或IIIa的蛋白激酶C抑制剂，如化合物A或化合物B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物，以及第二种药物，所述的第二种药物是如上所述的免疫抑制剂或免疫调制剂药物。
6.治疗联合，如药盒，包含a)式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa或IIIa的蛋白激酶C抑制剂，如化合物A或化合物B，或其可药用盐、水合物或溶剂化物，和b)至少一种选自免疫抑制剂和免疫调制剂药物的第二种药物。组分a)和组分b)可以同时或相继使用。该药盒可以包含给药说明书。
如上面说明的，当式I、II、III或IV，如式Ia、Ib、IIa或IIIa的蛋白激酶C抑制剂，或其可药用盐或溶剂化物与其他的免疫抑制剂或免疫调制剂药物联合施用，如用于预防或治疗上述急性或慢性移植排斥反应或自身免疫病时，联合施用的免疫抑制剂或免疫调制剂化合物的剂量自然将不同，其取决于使用的联合药物的类型，如其是类固醇还是环孢菌素、应用的具体药物、治疗的疾病等。
优选化合物A和化合物B，特别是应用于治疗或预防移植物排斥反应和预防移植物抗宿主疾病。
权利要求
1.式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂或其可药用盐、水合物或溶剂化物在制备用于治疗和预防自身免疫病的药物组合物中的用途，其中式I化合物是 其中R1和R’1各自独立地是氢、烷基、卤烷基、链烯基、芳烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、酰氨基烷基、酰氧基烷基、氰基烷基、脒基烷基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基或式(a)、(b)或(c)的基团 其中Het表示杂环基团；W表示NH、S或键；T表示NH或S；V表示O、S、NH或NCN；A表示烷硫基、氨基、单烷基氨基或二烷基氨基；Ar表示芳基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；或R1和R2一起形成-(CH2)r-X-CH2-，其中r是1、2或3，并且X是CHR8或NR8，其中R8是(CH2)sR9，其中R9是氢、羟基、烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、三烷基氨基、叠氮基、酰氨基、烷氧基羰基、氰基、脒基或氨基羰基，并且s是0、1、2或3；R3是氢或CH3CO；R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基；并且n是1、2、3、4、5或6；并且式II化合物是 其中R1是式(d)、(e)或(f)的基团 其中p和q各自独立地是1、2、3或4；s是0、1、2或3；t是1或2；u是0或1；且R12是氢、烷基、卤烷基、环烷基、乙酰基、芳基、-CH(芳基)2、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、胍基、-C(＝N(烷氧基羰基))NH(烷氧基羰基)、脒基、羟基、羧基、烷氧基羰基或杂环基；R’1是氢、C1-4烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；且R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基；并且式III化合物是 其中R’1是氢、C1-C4烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R’2是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基；X是CR8R9，其中R8是(CH2)sR10，其中R9是(CH2)sR11，R10和R11各自独立地是羟基、烷氧基、羧基、酰氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、三烷基氨基、叠氮基、酰胺基、烷氧基羰基、氰基、脒基或氨基羰基，并且s是0、1、2或3；且r是1、2或3；且并且式IV化合物是 其中R1是烷基单糖残基或(g)或(h)的基团 其中n是1、2、3、4、5或6；R’1是氢、C1-C4烷基、环丙基甲基、氨基烷基、单烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基；R2和R’2各自独立地是氢、烷基、烷氧基烷基、羟基烷基、C1-C3烷硫基、S(O)C1-C3烷基、CF3；R3是氢或CH3CO-；并且R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7和R’7各自独立地是氢、卤素、烷基、羟基、烷氧基、-COO(C1-C3烷基)、CF3、硝基、氨基、乙酰氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、C1-C3烷硫基或S(O)C1-C3烷基。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述自身免疫病选自如克隆病和溃疡性结肠炎的炎性肠病、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、类风湿性关节炎或丙型肝炎。
3.根据权利要求1所述的式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂或其可药用盐、水合物或溶剂化物在制备用于治疗和预防器官或组织移植排斥反应及预防移植物抗宿主疾病的药物组合物中的用途。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中所述蛋白激酶C抑制剂是式Ia、Ib、IIa、IIIa化合物或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中所述蛋白激酶C抑制剂是3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-{(1-吡啶-2-基甲基)-哌啶-4-基}-1H-吲哚-3-基]-吡各2，5-二酮，或3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-(哌啶-4-基)-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
6.用于治疗和预防器官或组织移植排斥反应及预防移植物抗宿主疾病和/或自身免疫病的药物组合物，其包含式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂或其可药用盐、水合物或溶剂化物以及一种或多种可药用稀释剂或载体。
7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述蛋白激酶C抑制剂是式Ia、Ib、IIa、IIIa化合物或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
8.根据权利要求6所述的组合物，其中所述蛋白激酶C抑制剂是3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-{(1-吡啶-2-基甲基)-哌啶-4-基}-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮或3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-(哌啶-4-基)-1H-吲哚-3-基]-吡咯2，5-二酮，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
9.一种药物组合，其包含a)式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂或其可药用盐、水合物或溶剂化物，及b)至少一种选自免疫抑制剂和免疫调制剂药物的第二种药剂。
10.一种药物组合，其包含a)式Ia、Ib、IIa或IIIa的蛋白激酶C抑制剂，如3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-{(1-吡啶-2-基甲基)-哌啶-4-基}-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮或3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-(哌啶-4-基)-1H-吲哚-3-基]-吡各2，5-二酮，或其可药用盐、水合物或溶剂化物，及b)至少一种选自免疫抑制剂和免疫调制剂药物的第二种药剂。
11.一种在需要的受试者中治疗或预防器官或组织移植排斥反应或自身免疫病，或预防移植物抗宿主疾病的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的式I、II、III或IV的蛋白激酶C抑制剂，如式Ia、Ib、IIa、IIIa化合物，优选为3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-{(1-吡啶-2-基甲基)-哌啶-4-基}-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮或3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-[1-(哌啶-4-基)-1H-吲哚-3-基]-吡咯-2，5-二酮，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。
全文摘要
本发明涉及如说明书中描述的式I、II、III或IV化合物在移植和自身免疫病中的用途。
文档编号A61P19/02GK1938019SQ200580010625
公开日2007年3月28日 申请日期2005年4月7日 优先权日2004年4月8日
发明者J·瓦格纳, W·舒勒 申请人:诺瓦提斯公司