专利名称：作为酪氨酸激酶抑制剂的咪唑衍生物的制作方法
背景技术：
本发明的目的是发现具有宝贵性质的新化合物，特别是能够用于制备药品的那些。
本发明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶信号转导、特别是酪氨酸激酶和/或丝氨酸/苏氨酸激酶信号转导的抑制、调节和/或调控在其中扮演角色，此外涉及包含这些化合物的药物组合物，和这些化合物治疗激酶-诱发的疾病的用途。
具体而言，本发明涉及抑制、调节和/或调控酪氨酸激酶信号转导的式I化合物、包含这些化合物的组合物和使用它们治疗哺乳动物酪氨酸激酶-诱发的疾病和病症的方法，例如血管生成、癌症、肿瘤形成、生长与繁殖、动脉硬化、眼部疾病(例如衰老-诱发的黄斑变性、脉络膜新血管化和糖尿病性视网膜病)、炎性疾病、关节炎、血栓形成、纤维化、肾小球性肾炎、神经变性、银屑病、再狭窄、伤口愈合、移植排斥、代谢性疾病和免疫系统疾病，以及自体免疫疾病、硬变(cirrhosis)、糖尿病和血管疾病，包括不稳定性和渗透性等。
酪氨酸激酶是一类具有至少400种成员的酶，它们催化蛋白质底物中腺苷三磷酸的末端磷酸(γ-磷酸)向酪氨酸残基的转移。酪氨酸激酶被认为通过底物磷酸化作用在各种细胞功能中的信号转导中扮演关键角色。尽管信号转导的确切机理尚不清楚，不过酪氨酸激酶已被显示是细胞增殖、致癌作用和细胞分化中的重要因素。
酪氨酸激酶可以分为受体型酪氨酸激酶和非受体型酪氨酸激酶。受体型酪氨酸激酶具有细胞外部分、跨膜部分和细胞内部分，而非受体型酪氨酸激酶完全是细胞内的(参见Schlessinger and Ullrich，Neuron 9，383-391(1992)和1-20(1992)的评论)。
受体型酪氨酸激酶由大量具有不同生物活性的跨膜受体组成。因而，已经确认了约20种不同的受体型酪氨酸激酶子家族。一种酪氨酸激酶子家族被称为HER子家族，由EGFR、HER2、HER3和HER4组成。来自这种受体子家族的配体包括表皮生长因子、TGF-α、双调蛋白、HB-EGF、β动物纤维素和heregulin。这些受体型酪氨酸激酶的另一子家族是胰岛素子家族，它包括INS-R、IGF-IR和IR-R。PDGF子家族包括PDGF-α与-β受体、CSFIR、c-kit和FLK-II。另外，还有FLK家族，它由激酶插入结构域受体(KDR)、胎肝激酶-1(FLK-1)、胎肝激酶-4(FLK-4)和fms酪氨酸激酶-1(flt-1)组成。由于两组之间的相似性，PDGF和FLK家族通常是被一起讨论的。关于受体性酪氨酸激酶的详细讨论，参见Plowman等人，DN& P 7(6)334-339，1994的文章，引用在此作为参考。
RTK(受体型酪氨酸激酶)也包括TIE2及其配体血管生成素(angiopoietin)1和2。现在已经发现越来越多的这些配体的同系物，它们的作用尚未得到清楚详细的证明。TIE1已知是TIE2的同系物。TIE RTK在内皮细胞上被选择性表达，参与血管生成和血管成熟的过程。所以，它们尤其可能是血管系统疾病和其中利用血管或者甚至重新生成血管的病变中的宝贵目标。除了新血管化和成熟的防止以外，新血管化的刺激也可能是活性成分的宝贵目标。参考下列关于血管生成、肿瘤发育和激酶信号转导的文章G.Breier Placenta(2000)21，增刊A，Trophoblasr Res 14，S11-S15F.Bussolino等人，TIBS 22，251-256(1997)G.Bergers & L-E.Benjamin Nature Rev Cancer 3，401-410(2003)P.Blume-Jensen &.Hunter Nature 411，355-365(2001)M.Ramsauer & P.D’Amore J.Clin.Invest.110，1615-1617(2002)S.Tsogkos等人，Expert Opin.Investig.Drugs 12，933-941(2003)在L.K.Shawyer等人，Cancer Cell 1，117-123(2002)和D.Fabbro & C.Garcia-Echeverria Current Opin.Drug Discovery & Development 5.701-712(2002)中给出了已经试用于癌症疗法的激酶抑制剂的实例。
非受体型酪氨酸激酶同样由大量子家族组成，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK。每一这些子家族进一步细分为不同的受体。例如，Src子家族是最大的子家族之一。它包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。Src子家族酶与瘤形成有联系。关于非受体型酪氨酸激酶的更多详细讨论，参见BolenOncogene，82025-2031(1993)的文章，引用在此作为参考。
受体型酪氨酸激酶和非受体型酪氨酸激酶都参与引起各种病理条件的细胞信号转导途径，包括癌症、银屑病和免疫应答过高。
已经有人提出，各种受体型酪氨酸激酶和与它们结合的生长因子在血管生成中扮演角色，尽管可能有些间接促进血管生成(Mustonen和Alitalo，J.Cell Biol.129895-898，1995)。这些受体型酪氨酸激酶之一是胎肝激酶1，也称为FLK-1。人FLK-1的类似物是含有激酶插入结构域的受体KDR，也称为血管内皮细胞生长因子受体2或VEGFR-2，因为它以高亲和性结合VEGF。最后，这种受体的鼠类版本也称为NYK(Oelrichs等人，Oncogene 8(1)11-15，1993)。VEGF和KDR是一个配体-受体对，它在血管内皮细胞的增殖和血管的形成与萌芽中扮演重要角色，它们分别被称为血管发生和血管生成。
血管生成以血管内皮生长因子(UEGF)的过度活性为特征。VEGF实际上由配体家族组成(Klagsburn和D’Amore，Cytokine & Growth FactorReviews 7259-270，1996)。VEGF结合高亲和性跨膜酪氨酸激酶受体KDR和相关的fms酪氨酸激酶-1，也称为Flt-1或血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)。细胞培养和基因剔除实验表明，每一受体对血管生成的不同方面有贡献。KDR介导VEGF的致有丝分裂功能，而Flt-1似乎调控非致有丝分裂功能，例如与细胞粘连有关的那些。抑制KDR因而可调控致有丝分裂VEGF活性的水平。事实上，肿瘤生长已显示敏感于VEGF受体拮抗剂的抗血管生成效应(Kim等人，Nature 362，841-844，1993)。
已经确认了VEGFR的三种PTK(蛋白酪氨酸激酶)受体VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(Flk-1或KDR)和VEGFR-3(Flt-4)。VEGFR-2是特别受关注的。
实体肿瘤因此可以用酪氨酸激酶抑制剂治疗，因为这些肿瘤依赖于血管生成来生成支持它们生长所必需的血管。这些实体肿瘤包括单核细胞性白血病、脑、泌尿生殖、淋巴系统、胃、喉和肺癌，包括肺腺癌和小细胞性肺癌。进一步的实例包括其中观察到Raf-激活性致癌基因(例如K-ras、erb-B)的过渡表达或活化的癌症。这些癌症包括胰腺和乳腺癌。这些酪氨酸激酶的抑制剂因此适合于预防和治疗由这些酶导致的增殖性疾病。
VEGF的血管生成活性不局限于肿瘤。VEGF解释了在糖尿病性视网膜病的视网膜之中或附近所产生的血管生成活动。视网膜中的这种血管生长引起视力退化，最终失明。灵长动物中如视网膜静脉阻塞等病症和小鼠pO2水平降低都升高眼部VEGF mRNA和蛋白质水平，引起新血管化。抗-VEGF单克隆抗体或VEGF受体免疫融合蛋白的眼内注射抑制灵长动物和啮齿动物模型中的眼部新血管化。与人糖尿病性视网膜病中VEGF的诱导原因无关，眼部VEGF的抑制适合于治疗这种疾病。
VEGF的表达在动物和人类肿瘤邻近坏死区域的低氧区也显著增加。另外，VEGF被ras、raf、src和p53突变型致癌基因(在对抗癌症中都是很重要的)的表达增量调节。抗-VEGF单克隆抗体抑制裸鼠中的人肿瘤生长。尽管相同的肿瘤细胞在培养物中继续表达VEGF，不过这些抗体没有降低它们的有丝分裂比率。因而，从肿瘤衍生的VEGF不会充当自分泌致有丝分裂因子。VEGF因此通过它的旁分泌血管内皮细胞趋化性与致有丝分裂活性，通过促进血管生成而在体内对肿瘤生长有贡献。这些单克隆抗体也抑制无胸腺小鼠中通常不太完全血管化的人结肠癌的生长，降低来自经接种细胞的肿瘤的数量。
Flk-1的VEGF-结合性构件Flt-1、即经截短以消除胞质酪氨酸激酶结构域但是保留膜锚的小鼠KDR受体同系物在病毒中的表达事实上终止了可移植成胶质细胞瘤在小鼠中的生长，可能是通过与跨膜内皮细胞VEGF受体生成杂二聚物的显性失活机理。如果两种VEGF等位基因都被剔除，在正常情况下随着实体肿瘤一起在裸鼠中生长的胚胎干细胞没有产生可检测的肿瘤。总之，这些数据表明了VEGF在实体肿瘤生长中的角色。在病理性血管生成中牵涉有KDR或Flt-1的抑制，这些受体适合于治疗其中血管生成是总病理学一部分的疾病，例如炎症、糖尿病性视网膜血管化以及各种形式的癌症，因为肿瘤生长已知依赖于血管生成(Weidner等人，N.Engl.J.Med.，324，1-8，1991)。
血管生成素1(Ang1)是内皮-特异性受体型酪氨酸激酶TIE-2的配体，是一种新的血管生成因子(Davis等人，Cell，1996，871161-1169；Partanen等人，Mol.Cell Biol.，121698-1707(1992)；美国专利No.5,521,073；5,879,672；5,877,020；6,030,831)。首字母缩写TIE代表“具有Ig和EGF同源性结构域的酪氨酸激酶”。TIE用于确认一类受体型酪氨酸激酶，它们完全在血管内皮细胞和早期造血细胞中表达。TIE受体激酶通常以EGF样结构域和免疫球蛋白(IG)样结构域的存在为特征，后者结构域由被链之间二硫桥键所稳定的细胞外折叠单元组成(Partanen等人，Curr. TopicsMicrobiol.Immunol.，1999，237159-172)。与在血管发育的早期阶段发挥其功能的VEGF相反，Ang1及其受体TIE-2在血管发育的晚期阶段发挥作用，也就是在血管转化(转化涉及血管腔的生成)和成熟期间(Yancopoulos等人，Cell，1998，93661-664；Peters，K.G，Circ.Res.，1998，83(3)342-3；Suri等人，Cell 87，1171-1180(1996))。
因此，预期TIE-2的抑制应当干扰由血管生成引发的新血管系统的转化和成熟，并且应当从而干扰血管生成过程。此外，VEGFR-2激酶结构域结合位点的抑制将阻滞酪氨酸残基的磷酸化，起到干扰血管生成引发的作用。因此必须假定，TIE-2和/或VEGFR-2的抑制应当防止肿瘤的血管生成，并且起到延缓或者完全消除肿瘤生长的作用。因此，有可能提供对于癌症和其他与不适当血管生成有关的疾病的治疗。
本发明涉及调节、调控或抑制TIE-2的方法，用于预防和/或治疗与不规则的或紊乱的TIE-2活性有关的疾病。确切而言，式I化合物也能够用于治疗某些形式的癌症。此外，式I化合物能够用于在某些现有癌症化疗中提供附加或协同效应，和/或能够用于恢复某些现有癌症化疗和放疗的功效。
式I化合物此外能够用于分离和研究TIE-2的活性或表达。另外，它们特别适合用在与不规则的或紊乱的TIE-2活性有关的疾病的诊断方法中。
本发明此外涉及调节、调控或抑制VEGFR-2的方法，用于预防和/或治疗与不规则的或紊乱的VEGFR-2活性有关的疾病。
本发明此外涉及作为Raf激酶抑制剂的式I化合物。
蛋白质磷酸化是细胞功能调节的基础过程。蛋白激酶与磷酸酶的协调作用控制磷酸化的程度，因此控制特异性靶蛋白的活性。蛋白质磷酸化的主要角色之一是在信号转导中，其中细胞外信号被蛋白质磷酸化和去磷酸化事件级联所扩增和传播，例如在p21ras/raf途径中。
p21ras基因被发现是Harvey(H-Ras)和Kirsten(K-Ras)大鼠肉瘤病毒的致癌基因。在人类中，细胞Ras基因(c-Ras)的特征性突变已经与很多不同的癌症类型有关。这些突变型等位基因赋予Ras组成活性，已经显示可转化培养物中的细胞，例如鼠细胞系NIH 3T3。
p21ras致癌基因是人实体癌发育和进展的主要贡献者，在所有人类癌的30％中发生突变(Bolton等人(1994)Ann.Rep.Med.Chem.，29，165-74；Bos.(1989)Cancer Res.，49，4682-9)。在其正常的、未突变的形式中，Ras蛋白是几乎所有组织中由生长因子受体引导的信号转导级联的关键要素(Avruch等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，279-83)。
在生物化学中，Ras是一种鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，GTP-结合的活化形式与GDP-结合的静息形式之间的循环受到Ras内源性GTP酶活性和其他调节性蛋白质的严格控制。Ras基因产物与鸟嘌呤三磷酸(GTP)和鸟嘌呤二磷酸(GDP)结合，并且水解GTP为GDP。Ras在GTP-结合的状态下是有活性的。在癌症细胞中的Ras突变体中，内源性GTP酶活性被降低，蛋白质因此传送组成型生长信号至下游效应器，例如Raf激酶。这引起携带这些突变体的细胞的癌性生长(Magnuson等人，(1994)Semin.CancerBiol.，5，247-53)。Ras原致癌基因需要功能上完整的C-Raf-1原致癌基因，目的是转导高级真核生物中由受体型和非受体型酪氨酸激酶引发的生长和分化信号。
活化的Ras是C-Raf-1原致癌基因的活化所必需的，但是Ras激活Raf-1蛋白(Ser/Thr)激酶的生物化学步骤现在已被充分鉴定。已经显示，向Raf激酶给予失活性抗体或者共同表达显性失活Raf激酶或显性失活MEK(MAPKK)、即Raf激酶的底物，通过抑制Raf激酶信号发送途径来抑制活性Ras的效应，引起已转化细胞向正常生长表型的逆转，参见Daum等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，474-80；Fridman等人(1994)J Biol.Chem.，269，30105-8；Kolch等人，(1991)Nature，349，426-28和Weinstein-Oppenheimer等人，Pharm.& Therap.(2000)，88，229-279。
与之相似，Raf激酶的抑制(借助反义寡脱氧核苷酸)已经在体外和体内与多种人肿瘤类型生长的抑制有关联(Monia等人，Nat.Med.1996，2，668-75)。
Raf丝氨酸-与苏氨酸-特异性蛋白激酶是胞质酶，它们刺激多种细胞系统中的细胞生长(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Handbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253页；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184；Rapp，U.R.，等人(1990)Inv.Curr.Top.Microbiol.lmmunol.Potter and Melchers(eds.)，Berlin，Springer-Verlag 166129-139)。
已经鉴定了三种同工酶C-Raf(Raf-1)(Bonner，T.I.，等人(1986)Nucleic Acids Res.141009-1015)、A-Raf(Beck，T.W.，等人(1987)NucleicAcids Res.15595-609)和B-Raf(Qkawa，S.，等人(1998)Mol.Cell.Biol.82651-2654；Sithan-andam，G等人(1990)Oncogene1775)。这些酶在它们在各种组织中的表达上有所不同。Raf-1在所有器官中和在所有已被检查的细胞系中被表达，A-与B-Raf分别在泌尿生殖和脑组织中被表达(Storm，S.M.(1990)Oncogene 5345-351)。
Raf基因是原致癌基因当以特定改变的方式表达时，它们能够引发细胞的恶性转化。引起致癌性活化的基因改变通过除去或干扰蛋白质的N-末端负性调节结构域而生成组成活性蛋白激酶(Heidecker，G，等人(1990)Mol.Cell Biol.102503-2512；Rapp，U.R.等人(1987)Oncogenes andCancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo)。向NIH 3T3细胞微量注射致癌性活化的而非野生型版本的、用大肠杆菌表达载体制备的Raf蛋白，导致形态学转化，并且刺激DNA合成(Rapp，U.R.，等人(1987)Oncogenesand Cancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo；Smith，M.R.，等人(1990)Mol.Cell Biol.103828-2833)。
所以，活化的Raf-1是细胞生长的细胞内激活物。Raf-1蛋白丝氨酸激酶是有丝分裂原信号转导的下游效应器的候选，因为Raf致癌基因克服了由细胞突变(Ras回复细胞)或微量注射抗-Ras抗体所致细胞Ras活性阻滞所导致的生长抑制(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Hahdbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253页；Smith，M.R.，等人(1986)Nature(伦敦)320540-543)。
C-Raf功能是通过多种膜-结合性致癌基因的转化和通过血清所含有丝分裂原的生长刺激所需要的(Smith，M.R.，等人(1986)Nature(伦敦)320540-543)。有丝分裂原经由磷酸化作用调节Raf-1蛋白丝氨酸激酶活性(Morrison，D.K.，等人(1989)Cell 58648-657)，这也影响亚细胞分步(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.等人(1988)Cold SpringHarbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。Raf-1激活性生长因子包括血小板衍生生长因子(PDGF)(Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、集落刺激因子(Baccarini，M.，等人(1990)EMBO J.93649-3657)、胰岛素(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118)、表皮生长因子(EGF)(Morrison，R.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、白介素-2(Turner，B.C，等人(19911)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)与白介素-3和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Carroll，M.P.，等人(1990)J.Biol.Chem.26519812-19817)。
用有丝分裂原处理细胞后，瞬时活化的Raf-1蛋白丝氨酸激酶易位于核周区和核(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。含有活化Raf的细胞的基因表达模式被改变(Heidecker，G，等人(1989)Genes and signaltransduction in multistage carcinogenesis，N.Colburn(ed.)，Marcel Dekker，Inc.，New York，339-374页)，Raf致癌基因在瞬时转染测定法中激活来自Ap-I/PEA3-依赖性启动子的转录(Jamal，S.等人(1990)Science 344463-466；Kaibuchi，K.，等人(1989)J.Biol.Chem.26420855-20858；Wasylyk，C.，等人(1989)Mol.Cell Biol.92247-2250)。
细胞外有丝分裂原激活Raf-1存在至少两种独立的途径一种牵涉蛋白激酶C(KC)，第二种由蛋白酪氨酸激酶引发(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512131-12134；Kovacina，K.S.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118；Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA858855-8859；Siegel，J.N.等人(1990)J.Biol.Chem.26518472-18480；Turner，B.C.，等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)。在每种情况下，活化都牵涉Raf-1蛋白质磷酸化。Raf-1磷酸化可以是由自主磷酸化扩增的激酶级联的后果，或者可以完全是由自主磷酸化所导致，自主磷酸化是由公认的激活性配体与Raf-1调节结构域的结合所引发，与二酰基甘油激活PKC相类似(Nishizuka，Y.(1986)Science 233305-312)。
细胞调节的主要机制之一是通过细胞外信号跨越膜的转导作用，这继而调控细胞内的生物化学途径。蛋白质磷酸化代表了细胞内信号从分子到分子传播的一种过程，最终导致细胞应答。这些信号转导级联受到高度调节，并且经常是重叠的，这显然是因为存在很多蛋白激酶以及磷酸酶。蛋白质的磷酸化主要发生在丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残上，蛋白激酶因此根据它们磷酸化位点的特异性加以分类，也就是丝氨酸/苏氨酸激酶和酪氨酸激酶。由于磷酸化是细胞内无所不在的过程，并且由于细胞表型大大受到这些途径活性的影响，目前相信大量疾病状态和/或疾病可归因于激酶级联的分子组分中的异常活化或功能突变。所以，已经相当多地关注于这些蛋白质和能够调控它们活性的化合物的鉴别。关于评论，参见Weinstein-Oppenheimer等人，Pharma.& Therap.，2000，88，229-279。
因此需要合成特异性抑制、调节和/或调控酪氨酸激酶和/或Raf激酶信号转导的小化合物，这也是本发明的目标。
已经发现，根据本发明的化合物及其盐具有非常宝贵的药理性质，同时被良好耐受。
确切而言，它们表现酪氨酸激酶抑制性质。
此外已经发现，根据本发明的化合物是Raf激酶的抑制剂。由于该酶是p21ras的下游效应器，这些抑制剂证实适合于用在药物组合物中，用于其中适用Raf激酶途径抑制的人类或兽医学，例如治疗由Raf激酶介导的肿瘤和/或癌性细胞生长。确切而言，这些化合物适合于治疗人和动物实体癌症，例如鼠类癌症，因为这些癌症的进展依赖于Ras蛋白信号转导级联，因此敏感于通过中断该级联、即抑制Raf激酶的治疗。因此，给予根据本发明的化合物或其药学可接受盐以治疗由Raf激酶途径介导的疾病，尤其癌症，包括实体癌症，例如癌(例如肺、胰腺、甲状腺、膀胱或结肠)、骨髓疾病(例如髓性白血病)或腺瘤(例如绒毛状结肠腺瘤)、病理性血管生成和转移性细胞迁移。这些化合物此外适合于治疗补体激活依赖性慢性炎症(Niculescu等人，(2002)Immunol.Res.，24191-199)和HIV-1(人免疫缺陷病毒1型)诱发的免疫缺陷(Popik等人，(1998)J.Virol.726406-6413)。
已经惊人地发现，根据本发明的化合物能够与信号发送途径相互作用，尤其本文所述信号发送途径，优选Raf激酶信号发送途径。根据本发明的化合物优选地表现有利的生物活性，容易在酶类测定法中加以证明，例如本文所述测定法。在这样的酶类测定法中，根据本发明的化合物优选地表现和导致抑制效应，这通常为合适范围、优选微摩尔范围、更优选纳摩尔范围的IC50值所证实。
正如本文所讨论的，这些信号发送途径与多种疾病相关。因此，根据本发明的化合物通过与一种或多种所述信号发送途径相互作用而适合于预防和/或治疗依赖于所述信号发送途径的疾病。
本发明因此涉及作为本文所述信号发送途径的促进剂或抑制剂、优选抑制剂的根据本发明的化合物。本发明因此优选地涉及作为Raf激酶途径的促进剂或抑制剂、优选抑制剂的根据本发明的化合物。本发明因此优选地涉及作为Raf激酶的促进剂或抑制剂、优选抑制剂的根据本发明的化合物。本发明进而更优选地涉及作为一种或多种选自如下的Raf激酶的促进剂或抑制剂、优选抑制剂的根据本发明的化合物A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本发明特别优选地涉及作为C-Raf-1的促进剂或抑制剂、优选抑制剂的根据本发明的化合物。
本发明此外涉及一种或多种根据本发明的化合物的用途，用于治疗和/或预防由Raf激酶所导致、介导和/或传播的疾病，优选本文所述疾病，特别是由选自如下的Raf激酶所导致、介导和/或传播的疾病A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本文所讨论的疾病通常分为两组，过度增殖性和非过度增殖性疾病。在这一点上，银屑病、关节炎、炎症、子宫内膜异位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫学疾病、自体免疫疾病和免疫缺陷疾病被视为非癌性疾病，其中关节炎、炎症、免疫学疾病、自体免疫疾病和免疫缺陷疾病通常被视为非过度增殖性疾病。在这一点上，脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、肾癌、结肠直肠癌、乳腺癌、头癌、颈癌、食道癌、妇科癌症、甲状腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病被视为癌性疾病，所有它们通常被视为过度增殖性疾病。尤其是癌性细胞生长、尤其是由Raf激酶介导的癌性细胞生长是作为本发明目标的疾病。本发明因此涉及作为治疗和/或预防所述疾病的药品和/或药品活性成分的根据本发明的化合物，涉及根据本发明的化合物在制备用于治疗和/或预防所述疾病的药物中的用途，以及涉及治疗所述疾病的方法，包括将一种或多种根据本发明的化合物施用于需要这种施用的患者。
可以显示，根据本发明的化合物在异种移植肿瘤模型中具有体内抗增殖作用。将根据本发明的化合物对患有过度增殖性疾病的患者给药，例如以抑制肿瘤生长、减少与淋巴增殖性疾病有关的炎症、抑制移植排斥或由组织修复引起的神经病学伤害等。本发明化合物适合于预防或治疗目的。本文所用的术语“治疗”用于表示疾病的预防和现有病症的治疗。通过在明显的疾病形成之前给予根据本发明的化合物来实现对增殖的预防，例如预防肿瘤的生长、预防转移生长、减少与心血管手术有关的再狭窄等。作为替代选择，这些化合物通过稳定或改善患者的临床症状，用于治疗进行中的疾病。
宿主或患者可以属于任何哺乳动物种类，例如灵长类，特别是人类；啮齿动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔；马、牛、狗、猫等。动物模型是实验研究用的，提供治疗人类疾病的模型。
特定细胞对用根据本发明的化合物治疗的敏感性可以借助体外试验加以测定。通常，将细胞的培养物与不同浓度根据本发明的化合物合并一段时间，足以允许活性成分诱导细胞死亡或者抑制迁移，通常在约一小时与一周之间。体外试验可以使用来自活组织检查样品的培养细胞进行。然后统计处理后剩余的存活细胞。
剂量因所用具体化合物、具体疾病、患者状态等而异。治疗剂量通常足以减少靶组织中的不可取细胞群，同时维持患者的生存能力。治疗一般持续直至已经发生相当程度的减少，例如细胞负载减少至少约50％，并且可以持续直至基本上在机体中不再检测到不可取的细胞。
关于信号转导途径的确认和多种信号转导途径之间相互作用的检测，多位科学家已经开发了适合的模型或模型系统，例如细胞培养物模型(例如Khwaja等人，EMBO，1997，16，2783-93)和转基因动物模型(例如White等人，Oncogene，2001，20，7064-7072)。关于信号转导级联中某些阶段的确定，可以利用相互作用的化合物来调控信号(例如Stephens等人，BiochemicalJ.，2000，351，95-105)。根据本发明的化合物也可以用作在动物和/或细胞培养物模型中或者在本申请提到的临床疾病中测试激酶-依赖性信号转导途径的试剂。
激酶活性的测量是一项本领域技术人员熟知的技术。采用底物、例如组蛋白(例如Alessi等人，FEBS Lett.1996，399，3，33-338页)或碱性髓磷脂蛋白的测定激酶活性的基因试验系统如文献所述(例如Campos-Gonzalez，R.和Glenney，Jr.，J.R.1992，J.Biol.Chem.267，14535页)。
关于激酶抑制剂的确认，可用多种测定系统。在闪烁近似测定法中(Sorg等人，J.of Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和快速平板测定法中，测量蛋白质或肽底物被γATP的放射性磷酸化。在抑制性化合物的存在下，可检测到放射性信号降低或完全没有。此外，均相时间-分辨荧光共振能量转移(HTR-FRET)和荧光极化(FP)技术适合作为测定方法(Sills等人，J.of Biomolecular Screening，2002，191-214)。
其他非放射性ELISA测定方法使用特异性磷酸抗体(phospho-AB)。phospho-AB仅结合磷酸化的底物。这种结合可以借助化学发光检测，使用二抗过氧化物酶-缀合的抗-绵羊抗体(Ross等人，2002，Biochem.J.，即将公布，原稿BJ20020786)。
有很多疾病都与细胞增殖和细胞死亡(细胞程序死亡)失调有关。有关病症包括但不限于如下。根据本发明的化合物适合于治疗多种病症，其中存在平滑肌细胞和/或炎性细胞向血管内膜层的增殖和/或迁移，导致通过该血管的血流受限，例如在新生内膜阻塞性损伤的情况下。有关阻塞性移植物血管疾病包括动脉粥样硬化、移植术后冠状血管疾病、静脉移植物狭窄、吻合修复术周再狭窄、血管成形术或支架(stent)放置之后的再狭窄等。
根据本发明的化合物也适合作为p38激酶抑制剂。
抑制p38激酶的杂芳基脲描述于WO 02/82859中。
现有技术在WO 2003032989中描述了治疗Bechcet综合征和葡萄膜炎的苯并稠合脲。在WO 200296876中公开了氨基甲酸酯和草酰胺化合物是肿瘤坏死因子抑制剂，用于治疗哮喘、阿尔茨海默氏病和疼痛。WO 200104115公开了芳基-与杂芳基-取代的脲，它们可以用作细胞分裂素抑制剂，治疗炎性和自体免疫疾病。在WO 200055139中描述了其他芳基-与杂芳基-取代的脲，它们可以用作细胞分裂素抑制剂，治疗骨关节炎或溃疡性结肠炎。在WO 00/43384中描述了治疗炎性疾病的杂环-取代的脲。EP 0 286 979公开了芳基-与杂芳基-取代的脲，它们可以用作抗心律失常剂。WO200006550描述了苯基-取代的脲是脂质过氧化物酶抑制剂。Madsen等人在WO 03/000245中公开了取代的芳基与杂芳基化合物，尤其用于治疗变应性鼻炎、动脉粥样硬化、哮喘或癌症。在WO 00/76515中描述了芳基-与杂芳基-取代的脲衍生物是IL-8受体拮抗剂。
发明概述本发明涉及式I化合物
其中R1、R2、R3R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、链烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亚烷基-Het、-O-亚烷基-NR10R11或CONR10R11，选自R1、R2、R3、R4、R5的两个相邻基团一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此独立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此独立地表示H或A，Het表示单环或二环的饱和、不饱和或芳族杂环，具有1至4个N、O和/或S原子，该环可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)单-、二-或三-取代，A表示具有1至10个C原子的烷基，另外，其中1-7个H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此独立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
本发明也涉及这些化合物的旋光活性形式(立体异构体)、对映体、外消旋物、非对映体、水合物和溶剂合物。术语化合物的溶剂合物用来表示惰性溶剂分子向化合物的加合，由于它们相互的吸引力而生成。溶剂合物例如是一或二水合物或醇化物。
术语“药学可用衍生物”用来表示例如根据本发明的化合物的盐和所谓的前体药物化合物。
术语“前体药物衍生物”用来表示这样的式I化合物，它们已经借助例如烷基或酰基、糖或寡肽被修饰，并且在生物体内迅速裂解生成根据本发明的有效化合物。
它们也包括根据本发明的化合物的生物可降解的聚合物衍生物，例如Int.J.Pharm.115，61-67(1995)所述。
措辞“有效量”表示药品或药物活性成分在组织、系统、动物或人体中导致例如研究人员或医师所寻求或需要的生物学或医学反应的量。
另外，措辞“治疗有效量”表示与没有接受该量的相应受治疗者相比，具有下列后果的量改善了的疾病、综合征、病症、主诉、障碍或副作用的治疗、愈合、预防或消除，或者疾病、主诉或障碍的进展的减少。
措辞“治疗有效量”也涵盖有效增加正常生理功能的量。
本发明也涉及式I化合物的混合物、例如两种非对映体的混合物的用途，例如比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶100或1∶1000。它们特别优选地是立体异构化合物的混合物。
根据本发明的化合物也可以是各种多晶型，例如无定形和结晶性多晶型。根据本发明的化合物的所有多晶型都为本发明所覆盖，是发明的另一方面。
本发明涉及式I化合物及其盐和制备根据权利要求1-10的式I化合物及其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体的方法，其特征在于a)关于制备其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如权利要求1所示含义，与式III化合物反应，
其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，或者b)关于制备其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，与氯甲酸酯衍生物反应，得到中间体氨基甲酸酯衍生物，随后使其与式II化合物反应，或者c)关于制备式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如权利要求1所示含义，与式VI化合物反应，R8-CH(NH2)-CN VI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并与式VII化合物反应，
CR9(OA’)3VII其中R9具有如权利要求1所示含义，A’表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，或者d)关于制备其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物与式VIII化合物反应， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，L表示Cl、Br、I或者游离或经过反应性官能修饰的OH基团，或者e)将其中R10、R11表示H的式I化合物通过烷基化转化为其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或将式I的碱或酸转化为它的盐之一。
上下文中的基团R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、X和X’具有如权利要求1所示含义，另有明确规定除外。
A表示烷基，它是未分支(线性)或分支的，具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个C原子。A优选地表示甲基，此外乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基，此外还有戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基，此外例如优选三氟甲基。
A非常特别优选地表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，优选甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1，1，1-三氟乙基。A也表示环烷基。环烷基优选地表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。
A’优选地表示甲基、乙基、丙基或丁基。
亚烷基优选地是未分支的，优选地表示亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基或亚戊基。
在优选的实施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每种情况下彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR8R9。
在特别优选的实施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每种情况下彼此独立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11。
R1、R2、R3、R4、R5优选地在每种情况下彼此独立地表示例如H；A，例如甲基或乙基；OH；OA，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或三氟甲氧基；NO2；NH2；NHA，例如甲基氨基；NA2，例如二甲氨基或二乙氨基；Hal；CN；COOA，例如甲氧羰基或叔丁氧羰基；-OHet，例如1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基氧基或哌啶-4-基氧基；-O-亚烷基-Het，例如2-(哌啶-1-基)乙氧基或2-(吗啉-4-基)乙氧基；-O-亚烷基-NR8R9，例如2-氨基乙氧基、2-(二甲氨基)乙氧基、2-(二乙氨基)乙氧基或2-(N，N-乙基，甲基氨基)乙氧基；或CONR8R9，例如氨基羰基。
R6和R7优选地表示H。
R8优选地表示CONH2或CN。
R10和R11优选地表示H。
Het优选地表示单环的饱和、不饱和或芳族杂环，具有1至4个N、O和/或S原子，该环可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN或羰基氧(＝O)单-、二-或三-取代。
与进一步的取代基无关，Het例如表示2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，1-、3-、4-或5-吡唑基，2-、4-或5-唑基，3-、4-或5-异唑基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-异噻唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外优选1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-3-或-5-基，1-或5-四唑基，1，2，3-二唑-4-或-5-基，1，2，4-二唑-3-或-5-基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，3-或4-哒嗪基，吡嗪基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基，4-或5-异吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基，3-、4-、5-、6-或7-苯并异唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基，4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-二唑基，2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基，5-或6-喹喔啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并[1，4]嗪基，此外优选1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-基，1，4-苯并二烷-6-基，2，1，3-苯并噻二唑-4-或-5-基或2，1，3-苯并二唑-5-基。
杂环基团也可以是部分或完全氢化的。Het因而也可以表示例如2，3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，2，5-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，四氢-2-或-3-呋喃基，1，3-二氧杂环戊烷-4-基，四氢-2-或-3-噻吩基，2，3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，2，5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，1-、2-或3-吡咯烷基，四氢-1-、-2-或-4-咪唑基，2，3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基，四氢-1-、-3-或-4-吡唑基，1，4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-比啶基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1-、2-、3-或4-哌啶基，2-、3-或4-吗啉基，四氢-2-、-3-或-4-吡喃基，1，4-二烷基，1，3-二烷-2-、-4-或-5-基，六氢-1-、-3-或-4哒嗪基，六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基，1-、2-或3-哌嗪基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]嗪基，此外优选2，3-亚甲二氧基苯基，3，4-亚甲二氧基苯基，2，3-亚乙二氧基苯基，3，4-亚乙二氧基苯基，3，4-(二氟亚甲二氧基)苯基，2，3-二氢苯并呋喃-5-或-6-基，2，3-(2-氧代亚甲二氧基)苯基或者3，4-二氢-2H-1，5-苯并二氧杂-6-或-7-基，此外优选2，3-二氢苯并呋喃基或者2，3-二氢-2-氧代呋喃基。
在进一步优选的实施方式中，Het表示单环的饱和杂环，具有1至3个N、O和/或S原子，它是未取代的或者可以被COOA单取代。本文的单环饱和杂环特别优选地表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基。
Het非常特别优选地表示1-、2-、3-或4-哌啶基或者2-、3-或4-吗啉基，其中Het可以被COOA取代。
Hal优选地表示F、Cl或Br，以及I，特别优选F或Cl。
链烯基优选地代表乙烯基、1-或2-丙烯基、1-丁烯基、异丁烯基、仲丁烯基，此外优选1-戊烯基、异戊二烯基或1-己烯基。
炔基优选地代表乙炔基、丙炔-1-基，此外丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基或戊炔-3-基。
遍及本发明的所有出现一次以上的基团都可以是相同或不同的，也就是彼此独立的。
式I化合物可能具有一个或多个手性中心，因此可以存在多种立体异构形式。式I涵盖所有这些形式。
因此，本发明特别涉及这样的式I化合物，其中至少一个所述基团具有如上所示优选的含义之一。一些优选的化合物组可以用下列子式Ia至Ih表示，它们符合式I，并且其中没有详细表征的基团具有如式I所示含义，但是其中在Ia中，X不存在或者表示NH，X’表示NH；在Ib中，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR8R9；在Ic中，Het表示单环的饱和杂环，具有1至3个N、O和/或S原子，该环是未取代的或者可以被COOA单取代；在Id中，R6、R7表示H；在Ie中，R8表示CONH2或CN；在If中，X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，Het表示单环的饱和杂环，具有1至3个N、O和/或S原子，该环是未取代的或者可以被COOA单取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN；在Ig中，X不存在或者表示NH，X，表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们各自是未取代的或者被COOA单取代；在Ih中，X、X’各自彼此独立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此独立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们各自是未取代的或者被COOA单取代，A表示具有1至10个C原子的烷基，另外，其中1-7个H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
式I化合物以及它们的制备原料另外借助本身已知的方法制备，如文献所述(例如标准著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischenChemie[Methods of Organic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)，确切而言在已知的和适合于所述反应的反应条件下。这里也可以使用本身已知的变通方式，这里没有详细描述。
如果需要的话，原料也可以就地生成，以便它们不从反应混合物中分离，而是立即进一步转化为式I化合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物可以优选地通过使式II化合物与式III化合物反应而得。
式II化合物和式III化合物是公知的。
反应一般在惰性溶剂中、在有机碱如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉的存在进行。依赖于所用条件，反应时间在几分钟与14天之间，反应温度在约0℃与150℃之间，通常在15℃与90℃之间，特别优选在15℃与30℃之间。
适合的惰性溶剂例如是烃类，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烃，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇类，例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚类，例如二乙醚、二异丙醚、四氢呋喃(THF)或二烷；二醇醚类，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮类，例如丙酮或丁酮；酰胺类，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈类，例如乙腈；亚砜类，例如二甲基亚砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸类，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯类，例如乙酸乙酯，或者所述溶剂的混合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物此外可以优选地通过使式IV化合物与氯甲酸酯衍生物反应而得，例如氯甲酸4-硝基苯基酯，得到中间体氨基甲酸酯，随后使其与式II化合物反应。
反应一般在惰性溶剂中，在酸结合剂的存在下进行，优选碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，或者碱金属或碱土金属、优选钾、钠、钙或铯的另一种弱酸盐。有机碱的加入也是适合的，例如三乙胺、二甲基苯胺、N，N’-二亚甲基二胺、吡啶或喹啉。依赖于所用条件，反应时间在几分钟与14天之间，反应温度在约0℃与150℃之间，通常在20℃与130℃之间，特别优选在60℃与90℃之间。
适合的惰性溶剂例如是烃类，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烃，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇类，例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚类，例如二乙醚、二异丙醚、四氢呋喃(THF)或二烷；二醇醚，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮类，例如丙酮或丁酮；酰胺类，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈类，例如乙腈；亚砜类，例如二甲基亚砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸类，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯类，例如乙酸乙酯，或者所述溶剂的混合物。
式IV原料是公知的。
式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，可以优选地通过使式U化合物与式UI化合物和式VII化合物反应而得。
式V、VI和VII化合物是公知的。
反应一般在惰性溶剂中进行，如上所示。依赖于所用条件，反应时间在几分钟与14天之间，反应温度在约0℃与150℃之间，通常在20℃与130℃之间，特别优选在60℃与90℃之间。
其中X不存在、X’表示NH的式I化合物此外可以优选地通过使式II化合物与式VIII化合物反应而得。
式VIII化合物是公知的。
在式VIII化合物中，L优选地表示Cl、Br、I或者游离或经过反应性修饰的OH基团，例如活化酯、咪唑酰胺(imidazolide)或具有1-6个C原子的烷基磺酰氧基(优选甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基)或具有6-10个C原子的芳基磺酰氧基(优选苯磺酰氧基或对-甲苯磺酰氧基)。
这种在典型的酰化反应中活化羧基的基团类型如文献所述(例如标准著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie[Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
活化的酯有利地就地生成，例如加入HOBt或N-羟基琥珀酰亚胺。
优选使用其中L表示OH的式VIII化合物。
反应一般在惰性溶剂中、在以下物质存在下进行酸结合剂，优选有机碱，例如DIPEA、三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉，或者过量的式VIII羧基组分。
碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐或者碱金属或碱土金属、优选钾、钠、钙或铯的另一种弱酸盐的加入也可能是可取的。
依赖于所用条件，反应时间在几分钟与14天之间，反应温度在约-30℃与140℃之间，通常在-10℃与90℃之间，特别优选在约0℃与约70℃之间。
适合的惰性溶剂是上文提到的那些。
游离氨基的烷基化在有机化学的常规条件下进行的(例如标准著作所述，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie [Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
药用盐和其他形式所述根据本发明的化合物可以使用它们最终的非盐形式。另一方面，本发明也涵盖以它们药学可接受盐形式使用这些化合物，这可以借助本领域已知的工艺从各种有机和无机酸和碱衍生而来。式I化合物的药学可接受盐形式大部分是借助常规方法制备的。如果式I化合物含有羧基，其适合的盐之一可以通过使该化合物与适合的碱反应而成，得到相应的碱加成盐。这类碱例如是碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，例如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇化物，例如乙醇钾和丙醇钠；和各种有机碱，例如哌啶、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺。同样包括式I化合物的铝盐。在某些式I化合物的情况下，酸加成盐可以通过将这些化合物用药学可接受有机与无机酸处理而成，例如卤化氢，例如氯化氢、溴化氢或碘化氢；其他矿物酸及其相应的盐，例如硫酸盐、硝酸盐或磷酸盐等；和烷基-与单芳基-磺酸盐，例如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐；和其他有机酸及其相应的盐，例如乙酸盐、三氟乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。因此，式I化合物的药学可接受酸加成盐包括如下乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐(arginate)、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯苯甲酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、半乳糖酸盐(来自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐、邻苯二甲酸盐，但是这不代表限制。
此外，根据本发明的化合物的碱盐包括铝、铵、钙、铜、铁(III)、铁(II)、锂、镁、锰(III)、锰(II)、钾、钠和锌盐，但是这不打算代表限制。上述盐中，优选铵盐；碱金属盐钠和钾盐；和碱土金属盐钙和镁盐。从药学可接受有机无毒性碱衍生的式I化合物的盐包括下列碱的盐伯胺、仲胺与叔胺、取代的胺、也包括天然存在的取代的胺、环状胺，和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、氯普鲁卡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺(苯乍生)、二环己胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、hydrabamine、异丙胺、利多卡因、赖氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤类、可可碱、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羟甲基)甲胺(氨丁三醇)，但是这不打算代表限制。
含有碱性含氮基团的本发明化合物可以用下列试剂季铵化，例如(C1-C4)烷基卤化物，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二(C1-C4)烷基酯，例如硫酸的二甲基、二乙基和二戊基酯；(C10-C18)烷基卤化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C1-C4)烷基卤化物，例如苄基氯和苯乙基溴。使用这类盐可以制备根据本发明的水溶性和油溶性化合物。
上述药用盐中优选的包括乙酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、羟乙磺酸盐、扁桃酸盐、葡甲胺、硝酸盐、油酸盐、膦酸盐、新戊酸盐、磷酸钠、硬脂酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、硫代苹果酸盐、甲苯磺酸盐和氨丁三醇，但是这不打算代表限制。
碱性式I化合物的酸加成盐如下制备使游离碱形式与足量所需的酸接触，按照常规方式导致盐的生成。游离碱可以再生，通过使盐形式与碱接触，按照常规方式分离游离碱。关于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解性，游离碱形式在某些方面不同于其相应的盐形式；不过出于本发明的目的，盐相当于其各自的游离碱形式。
正如所提到的，式I化合物的药学可接受碱加成盐是与金属或胺生成的，例如碱金属和碱土金属或有机胺。优选的金属是钠、钾、镁和钙。优选的有机胺是N，N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普鲁卡因。
根据本发明的酸性化合物的碱加成盐如下制备使游离酸形式与足量的所需碱接触，按照常规方式导致盐的生成。游离酸可以再生，通过使盐形式与酸接触，按照常规方式分离游离酸。关于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解性，游离酸形式在某些方面不同于其相应的盐形式；不过出于本发明的目的，盐相当于其各自的游离酸形式。
如果根据本发明的化合物含有一个以上能够生成这种类型药学可接受盐的基团，本发明也涵盖多元盐。典型的多元盐形式例如包括酒石酸氢盐、二乙酸盐、二富马酸盐、二葡甲胺、二磷酸盐、二钠盐和三盐酸盐，但是这不打算代表限制。
关于上述，可以看到措辞“药学可接受盐”在这一点上用来表示包含式I化合物的一种盐形式的活性成分，特别是如果这种盐形式赋予该活性成分以优于活性成分游离形式或以前使用的任何其他活性成分盐形式的药动学性质。活性成分的药学可接受盐形式也能第一次为这种活性成分提供前所未有的所需药动学性质，甚至就其在机体中的治疗功效而言能够对这种活性成分的药效学具有积极的影响。
本发明此外涉及药品，包含至少一种式I化合物和/或其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括其任意比例的混合物，以及可选地赋形剂和/或助剂。
药物制剂可以以剂量单元的形式给药，每剂量单元包含预定量的活性成分。这样一种单元例如可以包含0.5mg至1g、优选1mg至700mg、特别优选5mg至100mg根据本发明的化合物，这依赖于所治疗的病症、给药的方法和患者的年龄、体重和条件，或者药物制剂可以以剂量单元的形式给药，每剂量单元包含预定量的活性成分。优选的剂量单元制剂包含如上所示的每日剂量或部分剂量或者其相应比例的活性成分。此外，这种类型的药物制剂可以利用药学领域公知的方法加以制备。
药物制剂能够适用于经由任何所需适合方法的给药，例如口服(包括口腔或舌下)、直肠、鼻、局部(包括口腔、舌下或透皮)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内或真皮内)方法。这类制剂可以利用药学领域已知的所有方法加以制备，例如合并活性成分与一种或多种赋形剂或一种或多种助剂。
适用于口服给药的药物制剂可以作为独立的单元给药，例如胶囊剂或片剂；粉剂或颗粒剂；在水性或非水性液体中的溶液或悬液；可食用泡沫或泡沫食品；或者水包油型液体乳剂或油包水型液体乳剂。
因而例如，在以片剂或胶囊剂形式口服给药的情况下，可以将活性成分组分与口服无毒性和药学可接受惰性赋形剂合并，例如乙醇、甘油、水等。粉剂如下制备将化合物粉碎成适合的微小尺寸，将其与以相似方式粉碎的药物赋形剂混合，例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露糖醇。同样可以存在矫味剂、防腐剂、分散剂和染剂。
胶囊剂如下制备如上所述制备粉末混合物，再填充到成形明胶外壳中。在填充操作之前，可以向粉末混合物加入助流剂和润滑剂，例如高分散性硅酸、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或聚乙二醇的固体形式。同样可以加入崩解剂或增溶剂，例如琼脂、碳酸钙或碳酸钠，目的是提高服用胶囊后药品的可利用性。
另外，如果需要或必要的话，同样可以向混合物掺入适合的粘合剂、润滑剂和崩解剂以及染剂。适合的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类(例如葡萄糖或β-乳糖)、从玉米制成的甜味剂、天然与合成橡胶(例如阿拉伯胶、黄蓍胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡类等。用在这些剂型中的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂不受限制地包括淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。片剂如下配制例如制备粉末混合物，造粒或干法压制该混合物，加入润滑剂和崩解剂，压制全部混合物得到片剂。粉末混合物如下制备将以适合方式粉碎的化合物与稀释剂或基质混合，如上所述，可选地与粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮，溶解延迟剂例如石蜡，吸收加速剂例如季盐，和/或吸收剂例如膨润土、高岭土或磷酸二钙。粉末混合物可以如下造粒将其用粘合剂湿润，例如糖浆、淀粉糊、acadiamucilage或者纤维素或聚合物材料的溶液，再压制过筛。作为造粒的替代选择，可以使粉末混合物通过压片机，得到不均匀形状的团决，打碎形成颗粒。加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油可以润滑颗粒，目的是防止黏附于片剂冲模。然后压制已润滑的混合物得到片剂。也可以将根据本发明的化合物与自由流动性情性赋形剂合并，然后直接压制得到片剂，不进行造粒或干法压制步骤。可以存在透明或不透明的保护层，由虫胶密封层、糖或聚合物材料层和蜡光层组成。可以向这些包衣加入染剂，目的是区分不同的剂量单元。
口服液、例如溶液、糖浆和酏剂可以被制成剂量单元的形式，以便给定量包含预定量的化合物。糖浆可以通过将化合物溶于含有适合矫味剂的水溶液而制备，而酏剂是使用无毒性醇性载体制备。悬液可以通过将化合物分散在无毒性载体中配制。同样可以加入增溶剂和乳化剂例如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐剂、口味添加剂例如薄荷油或天然甜味剂或糖精，或者其他人工甜味剂等。
如果需要的话，口服给药用剂量单元制剂可以被包封在微囊中。制剂也可以以这样一种方式制备，以便释放被延长或延迟，例如将粒状材料包裹或包埋在聚合物、蜡等中。
式I化合物及其盐、溶剂合物和生理功能衍生物也可以以脂质体递送系统的形式给药，例如小型单层囊、大型单层囊和多层囊。脂质体可以从各种磷脂生成，例如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱。
式I化合物及其盐、溶剂合物和生理功能衍生物也可以使用化合物分子与之偶联的作为个别载体的单克隆抗体而递送。类胰蛋白酶抑制剂还可以与作为可定向药物载体的可溶性聚合物偶联。化合物也可以与作为靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这类聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酸酰胺苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或聚氧乙烯-聚赖氨酸，被棕榈酰残基取代。此外，化合物可以与一类适合于实现药物控制释放的生物可降解聚合物偶联，例如聚乳酸、聚ε已内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二羟基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物。
适用于透皮给药的药物制剂可以作为独立的硬膏剂给药，用于与接受者表皮进行延长的、紧密接触。因而例如，活性成分可以借助离子电渗作用从硬膏剂中递送，离子电渗如Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)的一般术语所述。
适用于局部给药的药物化合物可以被配制成软膏剂、霜剂、悬液、洗剂、粉剂、溶液、糊剂、凝胶、喷雾剂、气雾剂或油剂。
关于眼睛或其他外部组织的治疗，例如口腔和皮肤，制剂优选地作为局部软膏剂或霜剂施用。在给予软膏剂的制剂情况下，可以采用活性成分与石蜡类或水可混溶性霜剂基质。作为替代选择，活性成分可以被配制成含有水包油型基质或油包水型基质的霜剂。
适用于局部施用于眼睛的药物制剂包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮在适合的载体中，特别是水性溶剂。
适用于局部施用在口腔中的药物制剂涵盖锭剂、含片(pastille)和漱口剂。
适用于直肠给药的药物制剂可以以栓剂或灌肠剂的形式给药。
其中载体物质是固体的适用于鼻给药的药物制剂包含粒径例如在20-500微米范围内的粗粉，以鼻嗅的方式给药，也就是从靠近鼻放置的含粉末容器中经由鼻孔迅速吸入。适合于作为鼻喷雾剂或滴鼻剂给药、以液体作为载体物质的制剂涵盖活性成分在水或油中的溶液。
适用于吸入给药的药物制剂涵盖微细的粒状粉尘或烟雾，其可以借助各种类型的加压气雾剂分配器、喷雾器或吹入器生成。
适用于阴道给药的药物制剂可以作为阴道栓、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂给药。
适用于肠胃外给药的药物制剂包括水性与非水性无菌注射溶液，包含抗氧化剂、缓冲剂、制菌剂和溶质，借此它们制剂被赋予与所治疗接受者的血液等渗；和水性与非水性无菌悬液，可以包含悬浮介质和增稠剂。制剂可以在单剂量或多剂量容器中给药，例如密封的安瓿和小瓶，并且贮存在冷冻干燥(冻干)状态下，以便仅在使用前不久才有必要加入无菌载体液体，例如注射用水。按照处方制备的注射溶液和悬液可以从无菌粉剂、颗粒剂和片剂制备。
不言而喻，除了上述特别提到的成分以外，制剂还可以包含本领域关于特定制剂类型常用的其他成分；因而例如，适合于口服给药的制剂可以包含矫味剂。
式I化合物的治疗有效量依赖于大量因素，例如包括动物的年龄与体重、需要治疗的确切病症及其严重性、制剂的属性和给药的方法，最终取决于主治医生或兽医。不过，根据本发明的化合物就肿瘤生长、例如结肠或乳腺癌治疗而言的有效量一般在0.1至100mg/kg接受者(哺乳动物)体重每天的范围内，特别通常在1至10mg/kg体重每天的范围内。因而，体重70kg的成年哺乳动物的实际每天用量通常在70与700mg之间，该量可以作为每天单一剂量给予，或者通常在每天一系列部分剂量中给予(例如两次、三次、四次、五次或六次)，以便总的每日剂量是相同的。盐或溶剂合物或者其生理功能衍生物的有效量可以随根据本发明的化合物本身的有效量来确定。可以假定，相似的剂量适合于上述其他病症的治疗。
本发明此外涉及药品，包含至少一种式I化合物和/或其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括其任意比例的混合物，和至少一种另外的药品活性成分。
本发明也涉及套件(药盒)，由独立包装的(a)有效量的式I化合物和/或其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括其任意比例的混合物，和(b)有效量的另外的药品活性成分组成。
套件包含适合的容器，例如盒子、单个的瓶子、袋子或安瓿。套件例如可以包含独立的安瓿，各自含有有效量的式I化合物和/或其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括其任意比例的混合物，和有效量的另外的药品活性成分的溶解或冻干形式。
用途本发明化合物适合作为哺乳动物、尤其人类的药物活性成分，治疗酪氨酸激酶-诱发的疾病。这些疾病包括肿瘤细胞的增殖、促进实体肿瘤生长的病理性新血管化(或血管生成)、眼部新血管化(糖尿病性视网膜病、衰老-诱发的黄斑变性等)和炎症(银屑病、类风湿性关节炎等)。
本发明涵盖式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗或预防癌症的药品。优选治疗的癌发源于脑癌、泌尿生殖道癌、淋巴系统癌、胃癌、喉癌和肺癌。另一组优选的癌症形式是单核细胞性白血病、肺腺癌、小细胞性肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤和乳腺癌(breastcarcinoma)。
本发明也涵盖根据本发明权利要求1的化合物和/或其生理可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗或预防其中牵连有血管生成的疾病的药品。
这样一种其中牵连有血管生成的疾病是眼部疾病，例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、衰老-诱发的黄斑变性等。
式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物在制备用于治疗或预防炎性疾病的药品中的用途也落入本发明的范围。这类炎性疾病的实例包括类风湿性关节炎、银屑病、接触性皮炎、迟发型过敏反应等。
本发明也涵盖式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗或预防哺乳动物酪氨酸激酶-诱发的疾病或酪氨酸激酶-诱发的病症的药品，其中关于这种方法，向需要这类治疗的患病哺乳动物给予治疗有效量的根据本发明的化合物。治疗量因具体疾病而异，本领域技术人员无需额外努力即可确定。
本发明也涵盖式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗或预防视网膜血管化的药品。
治疗或预防眼部疾病如糖尿病性视网膜病和衰老-诱发的黄斑变性的方法同样是本发明的一部分。治疗或预防炎性疾病如类风湿性关节炎、银屑病、接触性皮炎和迟发型过敏反应以及治疗或预防选自骨肉瘤、骨关节炎和佝偻病的骨病变的用途同样落入本发明的范围。
措辞“酪氨酸激酶-诱发的疾病或病症”表示依赖于一种或多种酪氨酸激酶活性的病理条件。酪氨酸激酶直接或间接参与多种细胞活动的信号转导途径，包括增殖、粘连、迁移和分化。与酪氨酸激酶活性有关的疾病包括肿瘤细胞的增殖、促进实体肿瘤生长的病理性新血管化、眼部新血管化(糖尿病性视网膜病、衰老-诱发的黄斑变性等)和炎症(银屑病、类风湿性关节炎等)。
可以将式I化合物对患者给药以治疗癌症。本发明化合物抑制肿瘤血管生成，从而影响肿瘤的生长(J.Rak等人，Cancer Research，554575-4580，1995)。式I化合物的血管生成-抑制性质也适合于治疗某些形式的涉及视网膜新血管化的失明。
式I化合物也适合于治疗某些骨病变，例如骨肉瘤、骨关节炎和佝偻病，也称为致癌性骨软化(Hasegawa等人，Skeletal Radiol.28，41-45页，1999；Gerber等人，Nature Medicine，Vol.5，No.6，623-628页，1999年6月)。由于VEGF通过在成熟破骨细胞中表达的KDR/Flk-1直接促进破骨性骨吸收(FEBS Let.473161-164(2000)；Endocrinology，1411667(2000))，本发明化合物也适合于治疗和预防涉及骨吸收的病症，例如骨质疏松和佩吉特氏病。这些化合物也可以通过减少局部缺血后的脑水肿、组织伤害和再灌注损伤，用于减少或预防发生在脑缺血事件后的组织伤害，例如中风(Drug News Perspect 11265-270(1998)；J.Clin.Invest.1041613-1620(1999))。
本发明因而涉及式I化合物及其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体、包括其任意比例的混合物的用途，用于制备治疗激酶信号转导的抑制、调节和/或调控在其中扮演角色的疾病的药品。
这里优选的激酶选自酪氨酸激酶和Raf激酶。
酪氨酸激酶优选地是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
优选式I化合物及其药学可用衍生物、溶剂合物和立体异构体、包括其任意比例的混合物的用途，用于制备治疗受到根据权利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影响的疾病的药品。
特别优选制备药品的用途，所述药品用于治疗受到根据权利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影响的疾病。
尤其优选治疗疾病的用途，其中该疾病是实体肿瘤。
实体肿瘤优选地选自鳞状上皮、膀胱、胃、肾、头颈、食道、子宫颈、甲状腺、肠、肝、脑、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系统、胃、喉和/或肺的肿瘤。
实体肿瘤此外优选地选自肺腺癌、小细胞性肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、结肠癌和乳腺癌。
此外优选治疗血液和免疫系统肿瘤的用途，优选地治疗选自如下的肿瘤急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
本发明此外涉及式I化合物治疗其中牵连有血管生成的疾病的用途。
该疾病优选地是眼部疾病。
本发明此外涉及治疗视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、衰老-诱发的黄斑变性和/或炎性疾病的用途。
炎性疾病优选地选自类风湿性关节炎、银屑病、接触性皮炎和迟发型过敏反应。
本发明此外涉及根据本发明的化合物治疗骨病变的用途，其中骨病变发源于骨肉瘤、骨关节炎和佝偻病。
式I化合物适合于制备治疗由Raf激酶所导致、介导和/或传播的疾病的药品，其中该Raf激酶选自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
优选治疗疾病的用途，所述疾病优选选自过度增殖性和非过度增殖性。
它们是癌性疾病或非癌性疾病。
非癌性疾病选自银屑病、关节炎、炎症、子宫内膜异位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫疾病、自体免疫疾病和免疫缺陷疾病。
癌性疾病选自脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、肾癌、结肠直肠癌、乳腺癌、头癌、颈癌、食道癌、妇科癌症、甲状腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
式I化合物也可以与其他熟知的治疗剂同时给药，根据它们对抗所治疗的病症的特定有用性加以选择。例如，在骨病症的情况下，可取的组合包括抗吸收性双膦酸类，例如阿仑膦酸和利塞膦酸；整联蛋白阻滞剂(如下进一步所定义)，例如αvβ3拮抗剂；用在激素替代疗法中的缀合雌激素，例如Prempro、Premarin和Endometrion；选择性雌激素受体调控剂(SERM)，例如雷洛昔芬、屈洛昔芬、CP-336，156(Pfizer)和拉索昔芬；组织蛋白酶K抑制剂；和ATP质子泵抑制剂。
本发明化合物也适合于与已知的抗癌剂组合。这些已知的抗癌剂包括如下雌激素受体调控剂、雄激素受体调控剂、类视色素受体调控剂、细胞毒性剂、抗增殖剂、异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂和另外的血管生成抑制剂。本发明化合物特别适合于与放疗同时给药。本领域已经描述过抑制VEGF与放疗联合的协同效应(WO 00/61186)。
“雌激素受体调控剂”表示干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物，与机理无关。雌激素受体调控剂的实例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、fulvestrant、2，2-二甲基-丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)苯基酯、4，4’-二羟基二苯酮-2，4-二硝基苯基腙和SH646。
“雄激素受体调控剂”表示干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物，与机理无关。雄激素受体调控剂的实例包括非那雄胺与其他5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和乙酸abiraterone。
“类视色素受体调控剂”表示干扰或抑制类视色素与受体结合的化合物，与机理无关。这类类视色素受体调控剂的实例包括bexarotene、维甲酸、13-顺式-视黄酸、9-顺式-视黄酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4’-羟基苯基)视黄胺(retinamide)和N-4-羧基苯基视黄胺。
“细胞毒性剂”表示主要通过直接作用于细胞功能或者抑制或干扰细胞减数分裂而导致细胞死亡的化合物，包括烷基化剂、肿瘤坏死因子、插层剂、微管蛋白抑制剂和拓扑异构酶抑制剂。细胞毒性剂的实例包括但不限于tirapazimine、sertenef、肿瘤坏死因子、异环膦酰胺、tasonermin、氯尼达明、碳铂、六甲密胺、松龙苯芥、二溴卫矛醇、雷诺氮芥、福泰氮芥、nedaplatin、奥沙利铂、泰莫佐罗、heptaplatin、雌莫司汀、二丙胺磺酯、三芥环膦酰胺、尼莫司汀、螺溴丙酰胺、嘌米舌泊、洛巴铂、satraplatin、profiromycin、顺铂、irofulven、dexifosfamide、顺式-胺二氯(2-甲基吡啶)铂、苄基胍、glufosfamide、GPX100、(反式，反式，反式)双-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-铂(II)]双[二胺(氯)铂(II)]四氯化物、diarizidinyl-精胺、三氧化砷、1-(11-十二烷氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、必桑郡、米托蒽醌、吡柔比星、pinafide、戊柔比星、amrubicin、抗瘤酮、3’-去氨基-3’-吗啉代-13-脱氧-10-羟基去甲柔红霉素、安那霉素、galarubicin、elinafide、MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-氮丙啶基-4-甲磺酰基柔红霉素(参见WO 00/50032)。
微管蛋白抑制剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’，4’-二脱氢-4’-脱氧-8’-降长春花碱、多西他赛、根霉素、dolastatin、mivobulin isethionate、auristatin、cemadotin、RPR109881、BMS184476、vinflunine、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春花碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸叔丁基酰胺、TDX258和BMS188797。
拓扑异构酶抑制剂例如是拓扑替康、hycaptamine、伊立替康、rubitecan、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外亚苄基教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]中氮茚并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)-二酮、lurtotecan、7-[2-(N-异丙氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐山、2’-二甲氨基-2’-脱氧依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊二烯(dioxol)-6-酮、2，3-(亚甲二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]菲啶、6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟基乙氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2-(二乙氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。
“抗增殖剂”包括反义RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，和抗代谢物，例如山萮阿糖啶、卡莫氟、呋氟啶、喷托他丁、多西氟尿啶、曲麦克特、氟达拉滨、卡培他滨、galocitabine、阿糖胞苷酯、fosteabine钠水合物、雷替曲塞、paltitrexid、emitefur、噻唑呋林、脱氧氮杂胞苷、nolatrexed、pemetrexed、nelzarabine、2’-脱氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯酰基]甘氨酰氨基]-L-甘油-B-L-甘露吡喃庚糖基(mannoheptopyranosyl)]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、troxacitabine、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b]-1，4-噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩酰基(thienoyl)-L-谷氨酸、氨嘌呤、5-氟尿嘧啶、丙胺菌素、11-乙酰基-8-(氨甲酰氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、swainsonine、洛美曲索、右丙亚胺、methioninase、2’-氰基-2’-脱氧-N4-棕榈酰基-1-B-D-呋喃阿拉伯糖基(arabinofuranosyl)胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲。“抗增殖剂”也包括除“血管生成抑制剂”下所列那些以外的生长因子单克隆抗体，例如司徒曼布，和肿瘤抑制基因，例如p53，它可以经由重组病毒-介导的基因转移而递送(参见例如美国专利No.6069134)。
本发明此外涉及式I化合物制备治疗疾病的药品的用途，其中该疾病是以紊乱的血管生成为特征。该疾病优选地是癌症疾病。
紊乱的血管生成优选地由紊乱的VEGFR-1、VEGFR-2和/或VEGFR-3活性所导致。
因此也特别优选根据本发明的化合物制备用于抑制VEGFR-2活性的药品的用途。
测定法借助下述测定法测试实施例所述式I化合物，发现具有激酶抑制活性。其他测定法可从文献获知，本领域技术人员能够容易地实施(例如参见Dhanabal等人，Cancer Res.59189-197；Xin等人，J.Biol.Chem.2749116-9121；Sheu等人，Anticancer Res.184435-4441；Ausprunk等人，Dev.Biol.38237-248；Gimbrone等人，J.Natl.Cancer Inst.52413-427；Nicosia等人，In Vitro 18538-549)。
VEGF受体激酶测定法向4∶1聚谷氨酸/酪氨酸底物(pEY)掺入放射性标记的磷酸盐，测量VEGF受体激酶活性。在滤膜上捕集磷酸化的pEY产物，借助闪烁计数法量化放射性标记磷酸盐的掺入。
材料VEGF受体激酶将人KDR(Terman，B.I.等人，Oncogene(1991)Vol.6，1677-1683页)和Flt-1(Shibuya，M.等人，Oncogene(1990)Vol.5，519-524页)的细胞内酪氨酸激酶结构域作为谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因融合蛋白克隆。这通过将KDR激酶的胞质结构域以与GST基因羧基末端的框内融合方式克隆来实现。使用杆状病毒表达载体(pAcG2T，Pharmingen)，在Spodopterafrugiperda(Sf21)昆虫细胞(Invitrogen)中表达可溶性重组GST-激酶结构域融合蛋白。
溶解缓冲液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.5％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽与抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟(均来自Sigma)。
洗涤缓冲液50mM Tris pH 7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽与抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
透析缓冲液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，50％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽与抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
10x反应缓冲液200mM Tris pH7.4，1.0M NaCl，50mM MnCl2，10mM DTT和5mg/ml牛血清白蛋白[BSA](Sigma)。
酶稀释缓冲液50mM Tris pH7.4，0.1M NaCl，1mM DTT，10％甘油，100mg/ml BSA。
10x底物750μg/ml聚(谷氨酸/酪氨酸4∶1)(Sigma)。
终止溶液30％三氯乙酸，0.2M焦磷酸钠(均来自Fisher)。
洗涤溶液15％三氯乙酸，0.2M焦磷酸钠。
过滤平板Millipore #MAFC NOB，GF/C玻璃纤维96孔平板。
方法A-蛋白质纯化1、将Sf21细胞用重组病毒感染，感染复数为5个病毒颗粒/细胞，在27℃生长48小时。
2、所有步骤都在4℃进行。在1000xg离心收获已感染的细胞，用1/10体积的溶解缓冲液在4℃溶解30分钟，继之以在100000xg离心1小时。然后使上清液通过用溶解缓冲液平衡过的谷胱甘肽琼脂糖酸(Pharmacia)，用5体积的同一缓冲液继之以5体积的洗涤缓冲液洗涤。将重组GST-KDR蛋白用洗涤缓冲液/10mM还原型谷胱甘肽(Sigma)洗脱，对透析缓冲液透析。
方法B-VEGF受体激酶测定1、在50％DMSO中的测定溶液中加入5μl抑制剂或对照。
2、加入35μl反应混合物，其中含有5μl 10x反应缓冲液、5μl 25mMATP/10μCi[33p]ATP(Amersham)和5μl 10x底物。
3、加入10μl KDR(25nM)的酶稀释缓冲溶液开始反应。
4、在室温混合并温育15分钟。
5、加入50μl终止溶液终止反应。
6、在4℃温育15分钟。
7、转移90μl等分试样至过滤平板。
8、抽吸，用洗涤溶液洗涤3次。
9、加入30μl闪烁合剂，密封平板，在Wallace Microbeta闪烁计数器中计数。
人脐静脉内皮细胞致有丝分裂作用测定介导对生长因子的致有丝分裂反应的VEGF受体的表达在很大程度上受限于血管内皮细胞。人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在培养物中响应于VEGF处理而增殖，可以用作测定系统以量化KDR激酶抑制剂对VEGF刺激的效应。在所述测定法中，将静息HUVEC单层用载体或供试化合物处理，2小时后加入VEGF或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。通过测量[3H]胸苷向细胞DNA的掺入，测定对VEGF或bFGF的致有丝分裂反应。
材料HUVEC从Clonetics Corp.获得作为原代培养分离株冷冻的HUVEC。在内皮生长培养基(EGM；Clonetics)中获得细胞，第3-7代用于致有丝分裂测定。
培养平板NUNCLON 96-孔聚苯乙烯组织培养平板(NUNC #167008)。
测定培养基Dulbecco改性Eagle培养基，其中含有1g/ml葡萄糖(低葡萄糖DMEM；Mediatech)加10％(v/v)胎牛血清(Clonetics)。
供试化合物将供试化合物的储备溶液系列稀释在100％二甲基亚砜(DMSO)中，直到400倍于它们的所需最终浓度。在向细胞加入前不久，在测定培养基中进行最终稀释至1x浓度。
10x生长因子在测定培养基中制备人VEGF 165溶液(500ng/ml；R & D Systems)和bFGF溶液(10ng/ml；R & D Systems)。
10x[3H]胸苷
将[甲基-3H]胸苷(20Ci/mmol；Dupont-NEN)在低葡萄糖DMEM培养基中稀释至80μCi/ml。
细胞洗涤培养基Hank平衡盐溶液(Mediatech)，其中含有1mg/ml牛血清白蛋白(Boehringer-Mannheim)。
细胞溶解溶液1N NaOH，2％(w/v)Na2CO3。
方法1通过胰蛋白酶化作用收获在EGM中供养的HUVEC单层，平板接种在96-孔平板中，密度为4000细胞每100μl测定培养基每孔。在37℃和含有5％CO2的潮湿气氛中，阻止细胞生长达24小时。
方法2将生长阻止培养基用100μl测定培养基代替，所述测定培养基含有载体(0.25％[v/v]DMSO)或所需最终浓度的供试化合物。所有测定都进行一式三份。然后将细胞在37℃/5％CO2下温育2小时，以允许供试化合物进入细胞。
方法32小时预处理阶段后，加入10μl/孔测定培养基、10x VEGF溶液或10xbFGF溶液刺激细胞。然后在37℃/5％ CO2下温育细胞。
方法4在生长因子的存在下24小时后，加入10x[3H]胸苷(10μl/孔)。
方法5加入[3H]胸苷后三天，抽吸除去培养基，将细胞用细胞洗涤培养基洗涤两次(400μl/孔继之以200μl/孔)。然后加入细胞溶解溶液(100μl/孔)，在37℃加热30分钟，使经洗涤的粘附细胞增溶。将细胞溶解产物转移至含有150μl水的7ml玻璃闪烁小瓶。加入闪烁合剂(5ml/瓶)，借助液体闪烁分光术测定与细胞缔合的放射性。
根据这些测定法，式I化合物是VEGF的抑制剂，因而适合于抑制血管生成，例如治疗眼部疾病，例如糖尿病性视网膜病，和用于治疗癌，例如实体肿瘤。本发明化合物抑制培养物中VEGF-刺激的人血管内皮细胞致有丝分裂作用，IC50值为0.01-5.0μM。这些化合物也显示相对于相关酪氨酸激酶的选择性(例如FGFR1和Src家族；关于Src激酶与VEGFR激酶之间的关系，参见Eliceiri等人，Molecular Cell，Vol.4，915-924页，1999年12月)。
TIE-2试验例如可以类似于WO 02/44156所示方法进行。
该测定法测定在放射性33P-ATP的存在下，供试物质对底物聚(Glu，Tyr)被TIE-2激酶磷酸化的抑制活性。在温育期间，磷酸化的底物与“快速平板(flashplate)”微量滴定平板的表面结合。除去反应混合物后，将微量滴定平板洗涤数次，随后测量其表面上的放射性。供试物质的抑制效应导致放射性低于未受干扰的酶反应。
上下文中的所有温度均以℃表示。下列实施例中，“常规操作”表示如果必要的话加入水，如果必要的话调节pH至2与10之间的数值，这依赖于终产物的构成，将混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，分离各相，有机相经硫酸钠干燥，蒸发，产物经过硅胶色谱和/或结晶纯化。硅胶上的Rf值；洗脱剂乙酸乙酯/甲醇9∶1。
质谱(MS) EI(电子撞击电离)M+FAB(快速原子轰击)(M+H)+ESI(电子喷射电离)(M+H)+APCI-MS(大气压化学电离-质谱)(M+H)+实施例11-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲(A1)的制备类似于下列流程进行。
1.1 1-[4-(叔丁氧羰基氨基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制备将0.597g 2-甲氧基-5-三氟甲基苯胺溶于10ml二氯甲烷，加入0.665g氯甲酸4-硝基苯基酯，然后滴加0.27ml吡啶。将全部混合物在室温搅拌3.5h。然后加入0.625g N-Boc-苯二胺，将混合物用10ml二氯甲烷冲洗，滴加1.02ml N-乙基二异丙基胺。将澄清的暗色溶液在室温搅拌2h。抽吸滤出所沉积的沉淀，用CH2Cl2然后用石油醚充分洗涤，得到610mg白色固体物质；HPLC-MS[M+H]+426。
1.2 1-(4-氨基苯基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制备向0.61g上述化合物加入14ml 2M HCl的二烷溶液。生成实际上澄清的溶液。约20min后，生成沉淀。将混合物在室温搅拌过夜。抽吸滤出固体，用石油醚冲洗，得到500mg所需化合物。
1.3 1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制备将0.139g 2-氨基氰基乙酰胺与20ml乙腈和0.25ml原甲酸三乙酯合并，使混合物回流2h。将澄清的溶液冷却至室温，加入在1.2下制备的0.571g化合物和0.21ml三乙胺。使混合物回流过夜。除去溶剂，得到0.91g粗产物。使残余物从CH2Cl2和少量MeOH中结晶，再次用石油醚洗涤，最终得到510mg所需化合物“A1”；APCI-MS[M+H]+435。
类似合成所有下列化合物。
如果必要的话借助色谱或制备型HPLC进行纯化，条件是色谱柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25洗脱剂A98H2O，2 CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm流速 10ml/min经过制备型HPLC纯化得到化合物，一般为TFA盐。
实施例2类似地得到下列化合物1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+436；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+439；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+405；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+351；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+415；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(吗啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲酰基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 实施例35-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺的制备类似于下列流程进行
1、将1.60g N-Boc-1，4-苯二胺与100ml DMF和1-97g 2-氯-1-甲基吡啶碘化物合并，在50℃加热2h。生成澄清的黄-褐色溶液，向其中加入1.76g 2-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸和13ml N-乙基二异丙基胺。将全部混合物在室温搅拌过夜。在旋转蒸发器中蒸发溶剂至干。向剩余的油加入70ml乙酸乙酯和70ml水。水相再次用50ml乙酸乙酯萃取。合并有机相，用100ml饱和NaCl溶液萃取。将溶液用Na2SO4干燥，随后过滤，蒸发，得到2.64g[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯。该物质经过快速色谱纯化，用CH2Cl2/MeOH 97∶3洗脱(30ml级分)，得到0.54g纯化产物。
2、将0.54g上述产物溶于25ml 2M HCl/二烷。将全部混合物在室温搅拌过夜。抽吸滤出沉淀产物，用石油醚冲洗，风干，得到0.3g N-(4-氨基苯基)-2-氟-5-三氟甲基苯甲酰胺。
3、将0.089g 2-氨基氰基乙酰胺与20ml乙腈和0.18ml原甲酸三乙酯合并，回流2h。使澄清的溶液冷却至室温。加入0.3g上述苯甲酰胺和0.15ml三乙胺，使混合物回流过夜。将混合物冷却至室温，在旋转蒸发器中蒸发至干，得到0.49g粗产物。该粗产物借助制备型HPLC纯化
色谱柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25(Art.No.151494)洗脱剂A98H2O，2CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm；1个量程流速 10ml/min(1个级分＝1分钟)梯度 0min 25％ B5min 25％ B50min 90％ B70min 95％ B合并所需级分，蒸发，冷冻干燥，得到58mg所需化合物 APCI-MS[M+H]+408。
实施例4类似于实施例1，随后使游离氨基咪唑化合物与当量的酸反应，得到下列盐形式1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+435；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+405；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲甲磺酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲樟脑磺酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲柠檬酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲硫酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+437；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-叔丁基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+393；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+421；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲对甲苯磺酸盐，APCI-MS(M+H)+435。
下列实施例涉及药品实施例A注射小瓶将100g式I活性成分与5g磷酸氢二钠的3L重蒸馏水溶液用2N盐酸调至pH6.5，无菌过滤，转移至注射小瓶，在无菌条件下冻干，在无菌条件下密封。每支注射小瓶含有5mg活性成分。
实施例B栓剂将20g式I活性成分与100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具内，冷却。每支栓剂含有20mg活性成分。
实施例C溶液制备1g式I活性成分、9.38g NaH2PO42H2O、28.48g Na2HPO412H2O与0.1g苯扎氯铵在940ml重蒸馏水中的溶液。调节pH至6.8，将溶液加至1L，照射灭菌。该溶液可以用作滴眼剂。
实施例D软膏剂将500mg式I活性成分与99.5g凡士林在无菌条件下混合。
实施例E片剂将1kg式I活性成分、4kg乳糖、1.2kg马铃薯淀粉、0.2kg滑石与0.1kg硬脂酸镁的混合物按常规方式压制成片，以便每片含有10mg活性成分。
实施例F糖衣丸(dragee)类似于实施例E压制片剂，随后按常规方式用蔗糖、马铃薯淀粉、滑石、黄蓍胶与染剂的包衣料包衣。
实施例G胶囊剂将2kg式I活性成分按常规方式装入硬明胶胶囊内，以便每粒胶囊含有20mg活性成分。
实施例H安瓿剂将1kg式I活性成分在60L重蒸馏水中的溶液无菌过滤，转移至安瓿内，在无菌条件下冷冻干燥，在无菌条件下密封。每支安瓿含有10mg活性成分。
权利要求
1.式I化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、链烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亚烷基-Het、-O-亚烷基-NR10R11或CONR10R11，选自R1、R2、R3、R4、R5的两个相邻基团一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此独立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此独立地表示H或A，Het表示单环或二环的饱和、不饱和或芳族杂环，具有1至4个N、O和/或S原子，该环可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)单-、二-或三-取代，A表示具有1至10个C原子的烷基，另外，其中1-7个H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此独立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
2.根据权利要求1的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
3.根据权利要求1或2的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
4.根据权利要求1-3一项或多项的化合物，其中Het表示单环的饱和杂环，具有1至3个N、O和/或S原子，该环是未取代的或者可以被COOA单取代，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
5.根据权利要求1-4一项或多项的化合物，其中R6、R7表示H，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
6.根据权利要求1-5一项或多项的化合物，其中R8表示CONH2或CN，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
7.根据权利要求1-6一项或多项的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，Het表示单环的饱和杂环，具有1至3个N、O和/或S原子，该环是未取代的或者可以被COOA单取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
8.根据权利要求1-7一项或多项的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们各自是未取代的或者被COOA单取代，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
9.根据权利要求1-8一项或多项的化合物，其中X、X’各自彼此独立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此独立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亚烷基-Het或-O-亚烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此独立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们各自是未取代的或者被COOA单取代，A表示具有1至10个C原子的烷基，另外，其中1-7个H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
10.根据权利要求1的化合物，选自下组1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(吗啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲酰基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-酰胺，及其药学可用衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括其任意比例的混合物。
11.制备根据权利要求1-10的式I化合物及其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体的方法，其特征在于a)关于制备其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如权利要求1所示含义，与式III化合物反应， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，或者b)关于制备其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，与氯甲酸酯衍生物反应，得到中间体氨基甲酸酯衍生物，随后使其与式II化合物反应，或者c)关于制备式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如权利要求1所示含义，与式VI化合物反应，R8-CH(NH2)-CNVI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并与式VII化合物反应，CR9(OA’)3VII其中R9具有如权利要求1所示含义，A’表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，或者d)关于制备其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物与式VIII化合物反应， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如权利要求1所示含义，L表示Cl、Br、I或者游离或经过反应性官能修饰的OH基团，或者e)将其中R10、R11表示H的式I化合物通过烷基化转化为其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或将式I的碱或酸转化为它的盐之一。
12.药品，包含至少一种根据权利要求1的式I化合物和/或其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体、包括其任意比例的混合物，以及可选地赋形剂和/或助剂。
13.根据权利要求1的化合物及其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体、包括其任意比例的混合物的用途，用于制备治疗激酶信号转导的抑制、调节和/或调控在其中扮演角色的疾病的药品。
14.根据权利要求13的用途，其中该激酶选自酪氨酸激酶和Raf激酶。
15.根据权利要求14的用途，其中该酪氨酸激酶是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
16.根据权利要求14的根据权利要求1的化合物及其药学可用衍生物、盐、溶剂合物和立体异构体、包括其任意比例的混合物的用途，用于制备治疗受到根据权利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影响的疾病的药品。
17.根据权利要求16的用途，用于制备治疗受到根据权利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影响的疾病的药品。
18.根据权利要求16或17的用途，其中所要治疗的疾病是实体肿瘤。
19.根据权利要求18的用途，其中该实体肿瘤发源于鳞状上皮、膀胱、胃、肾、头颈、食道、子宫颈、甲状腺、肠、肝、脑、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系统、胃、喉和/或肺的肿瘤。
20.根据权利要求18的用途，其中该实体肿瘤发源于单核细胞性白血病、肺腺癌、小细胞性肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤和乳腺癌。
21.根据权利要求18的用途，其中该实体肿瘤发源于肺腺癌、小细胞性肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、结肠癌和乳腺癌。
22.根据权利要求16或17的用途，其中所要治疗的疾病是血液和免疫系统的肿瘤。
23.根据权利要求22的用途，其中该肿瘤发源于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
24.根据权利要求16或17的用途，用于治疗其中牵连有血管生成的疾病。
25.根据权利要求24的用途，其中该疾病是眼部疾病。
26.根据权利要求16或17的用途，用于治疗视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、衰老-诱发的黄斑变性和/或炎性疾病。
27.根据权利要求26的用途，其中该炎性疾病发源于类风湿性关节炎、银屑病、接触性皮炎和迟发型过敏反应。
28.根据权利要求16或17的用途，用于治疗骨病变，其中该骨病变发源于骨肉瘤、骨关节炎和佝偻病。
29.根据权利要求1的式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗实体肿瘤的药品，其中治疗有效量的式I化合物与选自如下的化合物联合给予1)雌激素受体调控剂，2)雄激素受体调控剂，3)类视色素受体调控剂，4)细胞毒性剂，5)抗增殖剂，6)异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)另外的血管生成抑制剂。
30.根据权利要求1的式I化合物和/或其生理学可接受盐和溶剂合物的用途，用于制备治疗实体肿瘤的药品，其中治疗有效量的式I化合物与放疗和选自如下的化合物联合给予1)雌激素受体调控剂，2)雄激素受体调控剂，3)类视色素受体调控剂，4)细胞毒性剂，5)抗增殖剂，6)异戊二烯基-蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)另外的血管生成抑制剂。
31.根据权利要求16或17的用途，用于制备治疗基于TIE-2活性紊乱的疾病的药品，其中联合给予治疗有效量的根据权利要求1的化合物与生长因子受体抑制剂。
32.根据权利要求13或14的式I化合物的用途，用于制备治疗由Raf激酶所导致、介导和/或传播的疾病的药品。
33.根据权利要求32的用途，其中该Raf激酶选自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
34.根据权利要求32的用途，其中该疾病选自过度增殖性和非过度增殖性疾病。
35.根据权利要求32或34的用途，其中该疾病是癌症。
36.根据权利要求32或34的用途，其中该疾病是非癌性的。
37.根据权利要求32、34或36的用途，其中该非癌性疾病选自银屑病、关节炎、炎症、子宫内膜异位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫学疾病、自体免疫疾病和免疫缺陷疾病。
38.根据权利要求32、34或35的用途，其中该疾病选自脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、肾癌、结肠直肠癌、乳腺癌、头癌、颈癌、食道癌、妇科癌症、甲状腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，其中R
文档编号A61K31/4164GK1938282SQ200580010619
公开日2007年3月28日 申请日期2005年3月15日 优先权日2004年3月29日
发明者G·赫尔策曼, H·格拉西尔, A·约恩齐克, W·施特勒, A·苏特, W·劳滕贝格, F·米蒂亚斯, E·罗泽尔－维韦斯, J·阿丹, M·索莱尔列拉 申请人:默克专利有限公司