新的蒽醌、其制备方法及其使用方法

专利名称：：新的蒽醌、其制备方法及其使用方法新的蒽醌、其制备方法及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求美国临时申请序列号60/570109(2004年5月11日提交)和临时申请序列号60/650552(2005年2月7日提交)的优先权。联邦资助研发声明本发明得到NationalInstitutesofHealthCooperativeAgreement(国家健康研究院合作协议)U01-A1153877-02(MK)NIHR21TW0662501的资助。美国政府对本发明有一定权益。政府权利声明未申请
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：(1)发明领域本发明涉及新的羟基取代的蒽醌，以及这些化合物的制备方法。这种蒽醌也可以用曱氧基代替羟基来取代。这些化合物对于治疗痴疾、血吸虫病和象皮病(丝虫病)蠕虫和其他寄生虫病尤其有用。描述了某些新的蒽醌。相关技术描述有许.多寄生虫病。尤其是淋巴管丝虫病(象皮病)是由Wuchereriabancrofti和布鲁线虫属malayispp.引起的破坏性疾病。世界卫生组织估计，全球有1.2亿人感染，其中至少4000万人身心俱残。这是对非洲、亚洲、西太平洋地区和美洲带来社会经济冲击的主要公共健康问题之一(Ottesen，E.A.，Trop.Med.Int.Hlth.5，591-594(2000))。大约卯％的这些感染是由Wuchereriabancrofti引起的，其他由布鲁线虫属spp引起。人类是W.bancrofti的唯一宿主(Anonymous,TheGlobalAlliancefortheEliminationofLymphaticFilariasis-epidemiology。Http:〃www.filariasis.org/2002)。包括二羟基-和三羟基蒽醌的许多醌广泛分布于植物王国，并有助于植物色素形成(Thomson,R.H.，NaturallyOccurringQuinonones，AcademicPress,pp367-535，London(1971"。据报道，萱草kwanzakaempfer(黄花菜)根含有几种蒽醌^f生物、萘苷和黄酮(Cichewicz，R.H.等，Tetrahedron58，8597-8606(2002))。在我们的早期研究中，发现从黄花菜根中分离出的某些蒽醌对曼氏血吸虫具有活性，这是导致血吸虫病的血吸虫属spp.寄生虫的一种(Cichewicz，R.H.等，Tetrahedron58，8597-8606(2002))。血吸虫病也是由折磨了全世界2亿人的血吸虫属的寄生吸虫引起的一种衰弱疾病。这些来自黄花菜根的活性蒽醌对丝虫寄生虫(布鲁线虫属malayi)进行了化验，发现它们具有活性。这些活性蒽醌在黄花菜根中的含量很低。挖掘这些活性蒽醌及其类似物作为寄生虫疾病的预防和/或治疗剂的可能应用也很重要。因此，需要合成这些蒽醌，以进一步评价其在体内的效力并测定其毒性，以确定其作为丝虫病和血吸虫病的治疗药物的潜力。已报导了通过从煤焦中获得的蒽的催化氧化来制备蒽醌(Nanba，Y.等，US3870655(1975)和Rodriguez,F.等，SeparationScienceandTechnology24275-289(1989))。它还通过狄尔斯-阿德耳环加成作用和采用合适试剂的弗瑞德-克来福特酰化反应制备。通过1，4-萘醌与1,3-二烯间的狄尔斯-阿德耳反应后将所得三环加合物脱氢得到蒽醌(Boisvert,L.，J.Org.Chem.534052-4059(1988))。然而，1，4-萘醌和1，3-二烯的制备很复杂也很昂贵。弗瑞德-克来福特酰化反应是合成有机化学中最常用的反应之一，它通过诸如AlCl3、BF3、FeCb、TiCl4和Sc(OTf)3的路易斯酸催化(Olah，G.A.,Friedel-Craftsandrelatedreactions,WileyInterscience，NY，第II巻，第I部分(1964);Be腦ri，A.等，Synthesis267-271(2003);Kotsuki，H.等，Synthesis603-606(1999);和Kobayashi,S.，Eur.J.Org.Chem.15-27(1999))。其机理涉及通过羧酸衍生物和酸催化剂之间的反应产生的酰基离子中间体的形成。报导了用等分子数量的HF和BF3作为催化剂，通过邻苯二曱酸酐与苯的缩合，制备蒽醌的另一种方法。然后通过用浓硫酸加热或其他环化措施，将得到的邻苯甲酰苯甲酸转化成相应的蒽醌。这种方法的缺点是从粗制反应混合物提纯邻苯曱酰苯甲酸、收率低和磺化产物的形成(Devic，M.，US437卯92(1983))。为了避免这些缺点，可尝试在气相下经诸如硅铝酸盐(Yang，P.等，HuaxueShijie34258-260(1993))或氧化钛(Akazawa，Y.，JP61100543(1986))的固体催化剂反应。然而，这些方法要求高温和昂贵的装置。目的因此本发明目的是提供新的羟基取代的蒽醌或其甲氧基衍生物。此外，本发明目的是提供用羟基取代的蒽醌或衍生物治疗各种疾病的新方法。此外，本发明目的是提供这种化合物的制备方法。这些和其他目的将通过参考以下描述变得更清楚。附图简述图1、2、4和5表示通过本发明的方法制备的蒽醌，以及用于该方法的中间体。图3是制备3-羟基邻苯二甲酸酑的示意图。图6是H&E染色的普通对照成年雌性布鲁线虫属malayi的横截面图。普通复制子宫内结构含有尚未从子宫排出的许多良好成形的微丝呦幼虫。放大400倍。图6-9中的校正标记表示IOO微米。图7是普通成年雄性B.malayi的纵截面图。截面图表明表皮深部良好组织的核。放大40倍。图8是已被5ppm化合物B杀死的成年雌性B.malayi的形态学的剖面图。注意随着子宫内微丝呦的分裂，稳定的表皮和皮下区域的破坏。放大400倍。图9是被5卯m化合物B杀死的成年雄性B.malayi的纵剖面图。注意皮下和深部结构中细胞结构的明显损耗。放大400倍。发明概述插入权利要求本发明涉及蒽醌的制备方法，包括(a)在路易斯酸与碱金属卣化物盐的熔融无水混合物中，在反应混合物中加热摩尔过量的邻苯二甲酸酐和羟基取代的苯酚，使其反应；(b)冷却步骤(a)的反应混合物；(c)在步骤(b)的反应混合物中加入含水酸，制备酰化蒽醌；(d)回流步骤(c)的反应混合物，制备蒽豭；和(e)从反应混合物中分离蒽醌。路易斯酸如上所述是公知的。优选无水氯化铝。优选的盐是氯化钠；但也可用其他卣化物(Br、1)。该反应用基本上无水的试剂无水进行。反应混合物优选在约165"-185匸下加热约4-5小时。含水酸优选含水盐酸。蒽醌优选通过溶剂萃取在步骤(e)中从反应混合物中分离。溶剂优选乙酸乙酯或二乙醚。优选蒽醌的分离通过色镨法进行。本发明还涉及曱基化羟基取代的蒽醌制备甲氧基取代的蒽醌的方法，包括(a)在反应混合物中，使羟基取代的蒽醌与N-亚硝基-N-甲基脲和氢氧化钾在二乙醚中反应；和(b)从反应混合物中分离甲氧基取代的蒽醌。甲基取代的蒽醌优选一曱氧基取代的蒽醌。步骤(a)中的反应混合物优选在冰浴中冷却。二乙醚优选从反应混合物中蒸发，曱氧基取代的蒽醌通过溶剂萃取并进一步通过色谱法分离。溶剂优选选自乙酸乙酯和己烷。与二羟基蒽醌反应的干溶剂中的硫酸二甲酯也可用于制备二甲氧基蒽醌。然后除去溶剂。优选溶剂是丙酮。优选实施方案的描述本发明的化合物用于抑制寄生虫的方法中，包括将寄生虫暴露在抑制用量的羟基取代的蒽醌中。US专利6800615和6835443(已转让给共同受让人)描述了驱蠕虫的蒽醌D美国专利申请顺序号10723671(已转让给共同受让人)是US专利6800615(已转让给共同受让人)的分案申请。2004年1月20日提交的顺序号10/761071也是一个分案申请。寄生线虫(线虫)、扁虫(绦虫)和吸虫(吸虫)造成全世界数十亿人、植物和动物感染。有关的寄生虫是如农业灾害的主要经济损8失的原因。人类寄生线虫连同其他属一道包括导致诸如河盲(riverblindness)和淋巴管丝虫病的数亿人类疾病病例的丝虫属寄生虫(例如吴策线虫属Wuchereriabancrofti、Onchocercavolvulus、布鲁线虫属malayi、布鲁线虫属timori等)。防止或治疗由丝虫属寄生虫恶丝虫属immitis(例如犬心虫)引起的动物疾病的尝试仅在美国就是数百万美元的工业。许多其他人类或兽医价值的线虫物种包括造成缺铁性贫血、生长迟緩、肠吸收障碍和/或阻塞的钩虫、鞭虫和螨虫。人类吸虫感染包括由肝片吸虫、大片吸虫以及血吸虫病的病原体(日本血吸虫、曼氏血吸虫、住血血吸虫和湄公血吸虫)引起的感染，而且这些吸虫会引起从肝炎和溃疡到胆管闭塞，以及到肝、肾、膀胱和肠的肉芽胂病的临床病症。人类吸虫感染包括各种生物，包括棘球绦虫属、牛肉绦虫属和T.Solium、阔节二叶槽虫，以及各种其他"绦虫，，属。由吸虫引起的疾病从嚢病到肠吸收障碍和维生素缺乏。布鲁线虫属malayispp.是造成淋巴管吸虫病或疟疾的寄生虫。发现它们可通过羟基蒽醌抑制。这种寄生虫可在体外抑制。这种寄生虫也可在体内抑制。羟基取代的蒽醌也可以是曱氧基取代的。蒽醌还用于治疗肿瘤。这在2004年5月10日提交的申请顺序号10/355483(已转让给共同受让人)中有描述。蒽醌类似物(A-N)的单步合成通过所选择的邻苯二甲酸酐与取代的苯酚在AlCb/NaCl存在下反应实现(图l和4)。邻苯二甲酸酐与诸如儿茶酚、1，4-氢醌和焦酚的取代的苯酚之间的反应分别制备了1,2-二羟基-(A)、1，4-二羟基-(E)和1，2，3-三羟基蒽醌(F)，而与间苯二酚反应提供了1，3-二羟基蒽醌(D)和3，，6，-二羟基fluoran(Dl)。然而，与3-曱基儿茶酚的反应得到了分别作为主产品和次产品的1,2-二羟基-3-曱基蒽醌(B)和l-曱基-2，3-二羟基蒽醌(C)。将产物的收率与各种基材比较很有趣。邻苯二曱酸肝与儿茶酚的反应得到50%的A，而与3-曱基儿茶酚反应却得到收率分别为60%和15%的B和C。此外，与1，4-氢醌和焦酚的反应得到80%的E和75°/。的F，而与间苯二酚反应得到50%的D和20%的Dl。收率不同可能是由于在正位和对位上对羟基的酰化。由于在1，4-氢醌中没有游离的对位，因此在正位对羟基酰化，得到高产率产物E。在焦酚与邻苯二甲酸酐的反应中，酰基离子或者在正位取代1-羟基或3-羟基，或者在对位取代2-羟基，得到单一产物F。然而，在与3-甲基儿茶酚的反应中，酰基离子可能的取代既可在正位或对位对羟基，也可在正位对甲基进行，得到产率不同的两种产物B和C。在邻苯二甲酸酐与间苯二酚的反应中，酰基离子潜在的取代在2、4和6位上。该反应由于位阻引起的高电子密度而不会在2位发生，但在4和6位发生得到D。然而，过量间苯二酚会得到另一种副产物D1。有趣的是，儿茶酚由于3和6位的取代而仅得到产物A。很清楚的是，即使酰基离子在儿茶酚的4或5位反应，由于3或6位的闭环作用，A也会是唯一的产物。还研究了在各种溶剂存在下与AlCl3的弗里德-克来福特正双酰化反应(图2)。虽然可选择苯、曱苯和硝基苯溶剂用于酰化反应(Huffman,J.W.等，J.Org.Chem.，37487-490(1972)，但我们研究发现硝基苯是对弗里德-克来福特"正酰化"反应唯一有效的溶剂。比较AlCl3/C6HsN02和AlCl3/NaCl熔体间的反应性和产物收率很重要。即使收率很低，A1C13/C6H5N02体系也需要较长时间(>4小时)和诸如215X:以上的高温，以完成反应。该反应也可用邻苯二甲酰氯la代替邻苯二甲酸酐进^f亍。邻苯二甲酰氯la通过用过量亚硫酰氯在801C下处理邻苯二曱酸2小时来制备。该反应在相同条件下用A1C13/C6H5N02进行。产物收率没有提高。然而，如果用16S"C的AlCl3/NaCl熔体，反应进行的更快，并得到高得多的收率(图2)。由于酚化合物潜在的分解，也可能在较高温度下获得低收率。蒽醌J是黄花菜根中天然存在的对曼氏血吸虫具有明显活性的蒽醌之一(Cichewicz，R.H.等，Tetrahedron598597-8606(2002))。还发现它对人类线虫寄生虫B.malayi也具有活性。因此，J及其类似物一般用3-羟基邻苯二曱酸酐和3-曱基儿茶酚以及羟基苯酚通过弗瑞德-克来福特反应合成。虽然3-羟基邻苯二曱酸酐可商购，但其对于大规模合成及作为治疗药物的评价用作合成纤维非常昂贵。报导了通过马来酸酐与2-三乙基曱硅烷氧基呋喃反应，然后将所得环状加合物芳构化，以差收率制备3-羟基邻苯二曱酸酐的狄尔斯-阿德耳方法(Asaoka，M.等，Chem.Lett.167-170(1977))。它还可通过用3-氨基邻苯二甲酸酐(Eliel，E.L.等，J.Am.Chem.Soc"77，5092-5095(1955))或3,6-二碘代邻苯二曱酸酐(Pratt,D.S.等，J.Am.Chem.Soc.40219-214(1918))作为合成纤维制备，但其收率非常低。报导了较高收率的3-羟基邻苯二曱酸酐(Nasman，J-H.N.，synthesis788-789(1985))，用商购的较便宜的原料2-氧代-2,5-二氢呋喃制备3-羟基邻苯二甲酸酐。因此，我们用较便宜的商购3-羟基丁内酯作原料合成了3-羟基邻苯二曱酸酐，如图3所示。在催化用量的浓硫酸存在下，在O"C下用乙酸酐处理3-羟基丁内酯(3)，然后处理到IOOTC，得到超过90%的5-氩吹喃-2-酮(4)。然后在三乙胺存在下，在01C下使化合物4与三甲基乙酰氯反应，得到2，2-二曱基丙酸2-呋喃酯(5)。然后室温搅拌5和马来酸酐的混合物过夜，形成狄尔斯-阿德耳环状加合物6(1-(2，2-二甲基丙酰基)-4，10-二氧杂三环[5.2.1.02，6]癸-8-烯-3，5-二酮)。然后在-lSlC下用浓硫酸将所得产物芳构化，得到3-羟基邻苯二甲酸酐(7)。3-羟基邻苯二曱酸酐与儿茶酚的反应得到1，2，8-三羟基-、1，2，5-三羟基-和2，3，8-三羟基蒽醌(分别为I、H和G)三种产物。然而，3-曱基儿茶酚得到1，2，8-三羟基-3-甲基蒽醌(J)和l-甲基-2，3，8-三羟基蒽醌(K)两种产物。另外，3-羟基邻苯二曱酸酐与诸如间苯二酚、1,4-氢醌和焦酚的其他苯酚的反应分别制备了1，3，5-三羟基-(L)、1,4,8-三羟基-(M)和1，2，3，5-四羟基蒽醌(N)。有意思的是反应混合物中过量的间苯二酚会得到一种副产物4，3，,6，-三羟基fluoran(Ll)。邻苯二曱酸酐与儿茶酚的反应得到30%的G和各10"/。的H和I。同样，3-曱基儿茶酚与邻苯二甲酸酐分别得到收率30%和15%的J和K。同样，邻苯二曱酸酐与间苯二酚、1，4-氢醌和焦酚的反应分别得到35%的L、55%的M和50%的N。然而，过量的儿茶酚会得到40%的L和20。/n的Ll。收率的变化表明了正位和对位上对羟基的酰基离子取代。在1，4-氢醌中没有游离的对位，因此酰基离子取代仅在正位上对羟基进行，得到单一产物M。在焦酚中，酰基离子在正位既取代l-鞋基，也取代3-羟基，得到产物N。然而，在3-甲基儿茶酚中，可能的酰基离子取代要么在正位和对位上对羟基，要么在正位上对曱基进行，从而得到两种不同产物J和K。邻苯二甲酸肝与间苯二酚的反应表明在2、4和6位上的取代。由于在2位上的位阻(尽管它有很高的电子密度)，该反应也不会在该位上进行，而是在4和6位上进行，得到正位和/或对位羟基的L。然而，反应混合物中过量的间苯二酚会得到副产物L1。为了研究结构-活性之间的关系，制备了蒽醌的甲基和曱氧基衍ii生物。羟基通过曱基化而被护。蒽醌B和J在2-羟基处的选择性一甲基化用醚中的重氮曱烷在室温下进行，得到l-羟基-2-甲氧基-3-曱基蒽醌(O)和l，8-二羟基-2-甲氧基-3-甲基蒽醌(Q)。蒽醌K与CH2N2的类似甲基化得到二甲基化产物l-曱基-2，3-二曱氧基-8-羟基蒽醌(S)。然而，蒽醌B、J和K与丙酮中的二甲基硫酸盐/K2C03在室温下分别得到1，2-二曱氧基-3-曱基蒽醌(P)、1，2-二甲氧基-8-羟基-3-甲基蒽醌(R)和l-甲基-2，3-二曱氧基-8-羟基蒽醌(S)。化合物C、K、N、R和S是新的。试验邻苯二曱酸酐和3-羟基邻苯二曱酸酐(可购买或合成)、儿茶酚、3-曱基儿茶盼、间苯二酚、1，4-蒽醌、焦酚、无水AlCl3和NaCl均从Sigma-Aldrich购买。在VarianVRX仪器是记录500MHz处的和13CNMR(DMSO-d6或CDC13)。DMSO-d6和CDC13从CambridgeIsotopeLaboratories,Inc.,Andover,MA购买。用Shimatzu(UV-260)分光光度计记录CH3OH的UV-VIS光i普。C-18硅胶(32-63|um)从FisherScientific,PA获得。5-氢-呋喃-2-酮(4)的制备在RB中混合3-羟基丁内酯(3)(lOmmol，0.779ml)和乙酸酐(lOmmol，0.95ml)，并在01C下加入2滴浓H2S04。浅黄色溶液变成深黄色。搅拌反应混合物15分钟。加入DMAP以中和H2S04，并在100TC油浴中加热3小时。常压下蒸馏反应混合物除去乙酸，随后真空蒸馏得到所需产物4(90%收率)。&NMR(CDC13):54.83(m，2H)、6.06(m，lH)、7.56(m,lH)。13CNMR(CDC13):72.11、121.00、153.22、173.76。2，2-二甲基丙酸2-呋喃基酯(5)的制备将三乙胺(6mmo1，0.83ml)的乙腈(5ml)溶液滴加到5-氬-吹喃-2画酮(5mmo1，0.35ml)和三曱基乙酰氯(6mmo1，0.74ml)的乙腈(20ml)溶液中，并在601C下搅拌4小时。过滤形成的沉淀三乙胺氬氯酸盐。用10%碳酸钠冲洗滤液，经MgS04干燥，蒸馏掉乙腈并真空蒸馏所得产物得到产物5(80%)。1-(2，2-二甲基腸丙酰基)國4，10-二氧杂三环[5.2丄02,6]癸-8曙烯陽3，5-二酮(6)的制备将2,2-二甲基丙酸2-呋喃基酯(5mmo1，840mg)和马来酸酐(5mmo1，0.4卯g)溶解在醚(lml/mmo1的5)中并搅拌过夜。过滤沉淀(即产物6)并从氯仿结晶(75%收率)。力NMR(DMSO):S1.32(s，9H)、3.39(d，lH，J=7.0)、3.78(d，lH，J=7.0)、5.33(d，lH，J=2.0)、6.70(m,2H);13C匪R(DMSO):176.68、169.43、166.10、138.16、137.33、111.76、52.87、52.84、48.92、48.15、48.09、39.33、27.10。3-鞋基邻苯二曱酸酐(7)的制备将化合物6(lmmol，266mg)分小份加入151C的98%H2S04(2ml)中。搅拌膏状着色混合物5分钟，然后流过碎水。过滤沉淀物，用冰冷的水冲洗并在干燥器中干燥得到产物7(73%)。力NMR(CD3OD):S7.40(d，lH，J=8.1)、7.62(d，lH，J=6.9)、7.85(t，lH，J=7.8)。蒽醌的一般制备方法在油浴中加热(1101C)无水AlCb(5mmol，0.667g)和预先烘烤过的NaCl(2.5mmol，0.145g)的混合物直至熔^f匕。4吏邻苯二曱酸酐(lmmol)和取代的苯酚(lmmol)的均匀混合物与AlCl3/NaCl熔体反应。緩慢升温并在165X:下保持4小时。将反应混合物冷却到OTC，加入10mllO。/oHCl，在0"C下搅拌15分钟，在IOO"C下回流30分钟。将反应混合物冷却到室温并用乙酸乙酯萃取。通过用乙腈:水(1:1)作为流动相的C18MPLC柱提纯所得产物。一甲基化蒽醌的一般制备方法通过N-亚硝基-N-甲脲与KOH在醚中反应制备重氮曱烷。将蒽醌(O.lmmol)分别溶解在2ml干醚中，在水浴中冷却，并在醚中过量加入重氮曱烷。将反应混合物放置几小时，减压蒸发溶剂，并通过用己烷中的30%乙酸乙酯作为流动相的氧化硅MPLC提纯所得产物。二甲基化蒽醌的一般制备方法将蒽醌(O.lmmol)与无水丙酮(2ml)和K2C03(O.lmmol，0.014g)搅拌。在水浴中冷却反应混合物。加入硫酸二甲酯(0.2mmol)并在室温下搅拌几小时。真空蒸发溶剂，将残余物溶解在水中，并用乙酸乙酯萃取。通过用己烷中的2(T/。乙酸乙酯作为流动相的氧化硅MPLC提纯所得残余物。1，2-二羟基蒽醌(A)UV入隨(CH3OH)(loge):205(4.47),246(4.6),275(4.4),431(3.7).4,R(DMSO):57.27(d,1H,J=8.5),7.70(d,1H,0=8.5),7.95(m,2H),8.23(m,2H).13CNMR(DMSO):190.25,182.03,154.2,152.28,136-57,135.51,135-04,134.16,128-59,127.95,125.26,122.70,122.31,117.73.收率55%。1,2-二羟基-3-曱基蒽醌(B)UV入醒(CH3OH)(loge):206(4.46),245(4.36),270(4.39),280(4.39),417(3.57);工HNMR(DMSO):62.32(s,3H),7.61(s,1H),7-94(m,2H),8.21(m,2H).13CNMR(DMSO):189.87,182.17,151-61,151.11,136-47,135-48,134-99,134-29,133-48,128.18,127-82,124.57,124.02,1H收率60%。l-曱基-2，3-二雍基蒽醌(C)工HNMR(DMSO):52.63(S,3H),7.61(s,1H)'7.85(m,2H).,8.10(dd,1H,J-7.0,1.5),8.14(dd1H,.5);13CJ-7.5,149.39,134-65,126.55,125.74,收率60%。NMR(DMSO):183.76,182.07,149.64,133-89,132.24,128.00,127.48,124.90,111.12,110.96,13.61.1，3-二鞋基蒽醌(D)UVAmax(CH3OH)(loge):(3-89),311(3.69),410(3.41);4(s,1H),6.59(s,1H),7.72(t,1H,J=7.5),8.07(d,1H,收率75%。211(4.18),282NMR(DMSO):65.731H,J=7.5),7.83(t,8.13(d,1H,J=8.0).1，4-二羟基蒽醌(E)UV入腿(CH3OH)(loge):206(4.51),223,(4.54)248(4.64),278(4.20),479(4.02);工HNMR(DMSO):67.47(s,2H),8-01(m,2H),8-30(m,2H);13CNMR(DMSO):187.40,157.40,135.77,133.61,133.04,127.38,113.40.收率80%。1，2，3-三羟基蒽醌(F)UVAmax(CH3OH)(loge):207(4-59),243(4-39),283(4.49),410(3.71);4NMR(DMSO):57.29(s,1H),7.91(m,2H),8.18(m,2H);13CNMR(DMSO):187-63,181*67,152-72,152-48,139,65,135.22,134*79,133-94,133-77,127*30,126-94,125-37,111.03,109.52.收率75。/0。2，3，5-三羟基蒽醌(G)工HNMR(DMSO):57-28(dd,1H,J=8.0,1.0),7.47(s,1H),7.51(s,1H),7.61(dd,1H,J=7.5,1.0),7.71(t,1H,J=8.0).13CNMR(DMSO):187.69,181-05,161-32,152-45,151-71,13"3,133-46,127.14,126-15,123.66,118-72,115.78,113.21,112.66.收率30%。1，2，5-三羟基蒽醌(H)工HNMR(DMSO):57.28(d,(dd,1H,J-8.5,1.5),7.54(d,lk,1H,J=7.5,1-5),7.83(t,1H,J=8)188.04,186.57,161.70,153.61,133.14,124-63,123-16,121.48,116.20,115.92-收率10%。'1H,J=8.5〉，7.41J=8.5),7.79(dd,13CNMR(DMSO):151.14,136.66,120.74,118-83,161，2，8-三羟基蒽載(1)iHNMR(DMSO):57.26(d,1H,J=8.5),7，57(dd,1H,J"-8-5,1),7.68(d,1H,J=8),7.21(dd,J=7.5,1),7.83(t,1H,J:=8).13CNMR(DMSO):192.59,180.07,161.34,152.93,150.57,137.49,133.83,122.78,123.73,121.42,120.98,119.04,116.18,116.09.收率10%1，2，8-三羟基-3-甲基蒽醌(J)4NMR(DMSO):6Hz),7.54(1H,s),7.13CNMR123.11,J=8.(t,1H,J=7-5)119.05,122-87,137.40,149.38,150-27,收率30%。2.24(3H,67(d,1H,(DMSO):123.73,161.26,s),7.32(d,1H,J=7.5Hz),7.74114.35,115.94,132.32,132.75,180.19,192.26.1-曱基-2，3，8-三羟基蒽醌(K)工HNMR(DMSO):&2.65(3H,s),7.19(d,1H,J=8.5Hz),7.60(1H,s),7.63(d,1H,J=7-5Hz),7.73(t,1H,J=8).13CNMR(DMSO):111.38,116.73,117.88,123:74,124-12,127-71,128.67,132.68,.135-87,149.63,150.15,161.25,181.41,190.31.收率15%。1，3，5-三羟基蒽醌(L)^NMR(DMSO):56.58(d,'1H,2.5Hz),7.14(d,1H,2.5Hz),7.33(dd,1H,J=8.5(dd,1H,J=7-5Hz,JJ=1Hz),8.077.78(t,1H,J=8.0).13CNMR(DMSO):109.23,115.67,118.68,124-0,133-2,161.65,164.87,185.09,187.34.收率,JJ-1Hz),7.68(d,1H,J=7.5),108.07,108.37,134.64,137.33,:35%。1，4，8-三羟基蒽醌(M)工HNMR(DMSO):67.41(dd,1H,J=8.0,1.5Hz),7.80(dd,1H,J=7.5,1.0Hz),7.84(t,1H,J=8.0).收率55%。1，2,3，5-四羟基蒽醌(N).HNMR(DMSO):56.58(d,1H,2.5Hz),7.14(d,1H,2.5Hz),7.33(dd,1H,J=8.5,jj二1Hz),7.68(dd,1H,J=7.5Hz,JJ=1Hz),8.07(d,1H,J=7.5),7.78(t,1H,J=8.0).13CNMR(DMSO):108..07,108.37,109.23,115.67,118.68,124-0,133.2,134,.64,137.33,161.65,164.87,185.09,187.34.收率50%l-羟基-2-曱氧基-3-曱基蒽醌(O)工HNMR(CDC13):58.27(m,2H),7.797.67(s,1H),4.02(s,3H),2.39(s,3H);(CDC13):17.03,60.64,115.91,122.55,127..02,127.85,133.58,133-93,134-17,134.85,140.22,155.84,182.30,188.99.收率80%。(m,2H)13CNMR127.61,152.14,，2-二甲氧基-3-曱基蒽醌(P)丄HNMR(CDC13):58.26(m,2H),7.777.99(s,1H),4.06(s,SH),2.41'(s,3H);(CDC13):17.03,61.00,61.54,125.85,126.19,127.33,129.98,132.98,133.67,134.22,135.21,153.74,158.33,182.74,183.05.收率了50/。。(m,2H)13CNMR126.89,139.42,1，8-二羟基-2-曱氧基-3-曱基蒽醌(Q)工丽MR(CDC13):57.827.68(t,1H,J=8.0)7.30(dd,1H,3H),2.39(s,3H)收率75%。(dd,1H,J-7.5,1.0),J-8.0,1.0),4.04(s,l-羟基-2,8-二曱氧基-3-甲基蒽醌(R)工HNMR(CDC13):6丄HNMR(CDC13):S7.77(s1H,),7.61(dd,1H,J=8.4,0.9)7.58(t,1H,J=7.8)7.27(dd,1H,J=8.1,1.2),4.05(S,3H),3.87(s,3H)2.76(s,3H).收率80%。1-曱基-2,3-二曱氧基-8-羟基蒽醌(S)工HNMR(CDC13):67.77(s,1H,),7.58(dd,1H,J-7.5,1.0)7.60(t,1H,<J=8.0),7.27(dd,1H,J=8.5,1.0),4.05(s,3H),3.87(s,3H),2.77(s,3H);13CNMR(CDC13):14.71,56.43,60.88,108.90,117.38,118.98,124-77,125-91,132-61,133.02,135.83,137-23,152.69157.32,162.55,182.82,190.58.收率-"75%n表1表示异构的合成蒽醌的C9和CIO碳的13CNMR的化学位移、颜色和熔点。19表l<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表2表示本发明的化合物A至S的熔点和HRMS数据。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>抗丝虫测定实施例1通过从佐治亚大学的JohnMcCall博士处的NIH分包合同获得100个成年雌性布鲁线虫属malayi标本，以便测试蒽醌作为抗丝虫剂的效力。将每孔3个蠕虫转移到装有新鲜RPMI1640培养介质的6孔板中，并用L-谷氨酰胺和青霉素/链霉素补充。将蒽醌以4mg/ml的浓度溶解在100%DMSO中，并用RPMI介质稀释，得到50ppm的最终浓度。复制含有2%DMSO或无DMSO的对照组。除去介质，每48小时用DMSO中有药或没有药的新鲜RPMI代替。每24小时监测一次成虫的运动和生命力，一直监测10天。对照孔中的B.malayi蠕虫直到10天结束还完全能活动，而用蒽醌处理过的蠕虫已死亡。实施例2对随机选取的蒽醌A、B、D、E、F、J、Q和R测定雌性丝虫(布鲁线虫属malayi)成虫的死亡率和活动抑制。在5ppm蒽醌下进4亍测定，结果示于表3。结果表明，蒽醌B和R对24小时内使B.malayi达到100%死亡率最有效。化合物J也表现得很有效，并在2天内显示出100%的死亡率。其他被测蒽醌在3-IO天之间达到100°/。死亡率(表3)。表3、蒽醌在5ppm下对B.malayi成虫的抗丝虫活性<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>用DMSO溶剂处理的对照物即使在20天后的死亡率或活动性抑制也为0。用蒽醌B、F、J和R重复该试验，因为它们与其他受测试的蒽醌比较能快速杀死蠕虫。从50-3.12卯m的剂量响应研究表明，100%的死亡率对于3.125ppm的化合物B为6天、对3.125卯m的化合物F为5天、对6.25ppm的化合物J为5天，而对6.25ppm的化合物R为8天(表4)。表4、活性蒽醌B、F、J和R对B.malayi成虫的剂量响应<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>实施例3从JohnMcCall，UniversityofGeorgia,Athens,GA获得活的成年雄性和雌性B.malayi(NIH子合同)。将成虫转移到装有用L-谷氨酰胺和青霉素/链霉素补充的新鲜RPMI1640培养介质的6孔板中(每个孔3条雄性或雌性蠕虫)。将蒽醌分别溶解在100%DMSO(4mg/ml)中，并用RPMI介质稀释，得到5卯m的最终浓度。复制含2.5%DMSO或不含DMSO的对照物组。每48小时从每个孔中除去介质，并用在DMSO中含或不含药物的新鲜RPMI代替。每24小时监测丝虫的运动和死亡率，监测20天。对照物孔中的所有B.malayi蠕虫在整个研究中都是活的，而用蒽醌处理的蠕虫死亡。结果示于表5。表5、5ppm蒽醌对B.malayi雌性和雄性成虫和微丝呦的抗丝虫活性<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>以上描述仅用于说明本发明，本发明仅受以下附属权利要求限定。权利要求1、蒽醌的制备方法，包括(a)在路易斯酸与碱金属卤化物盐的熔融无水混合物中，在反应混合物中加热摩尔过量的邻苯二甲酸酐和羟基取代的苯酚，使其反应；(b)冷却步骤(a)的反应混合物；(c)在步骤(b)的反应混合物中加入含水酸，制备酰化蒽醌；(d)回流步骤(c)的反应混合物，制备蒽醌；和(e)从反应混合物中分离蒽醌。2、权利要求l的方法，其中路易斯酸是无水氯化铝。3、权利要求1或2的方法，其中碱金属盐是干氯化钠。4、权利要求1或2的方法，其中将反应混合物在约165TC-1851C下加热约4-5小时。5、权利要求1或2的方法，其中含水酸是含水盐酸。6、权利要求1或2的方法，其中蒽醌在步骤(e)中通过溶剂萃取从反应混合物中分离。7、权利要求6的方法，其中溶剂选自乙酸乙酯、二乙醚以及它们的混合物。8、权利要求1或2的方法，其中步骤(e)中的蒽醌通过色谱法分离。9、权利要求1或2的方法，其中蒽醌是化合物C(l-曱基-2，3-二羟基蒽醌)。10、权利要求1或2的方法，其中蒽醌是化合物K(l-曱基-2，3，8-三羟基蒽醌)。11、权利要求1或2的方法，其中蒽醌是化合物N(l，2，3，5-四羟基蒽醌)。12、甲基化二羟基取代的蒽醌制备曱氧基取代的蒽醌的方法，包括使二羟基蒽醌与甲基化试剂在无水有机溶剂中反应，制备曱氧基取代的蒽醌。13、甲基化羟基取代的蒽醌制备曱氧基取代的蒽醌的方法，包括(a)在反应混合物中，使羟基取代的蒽醌与N-亚硝基-N-曱基脲和氢氧化钾在二乙醚中反应，制备甲氧基取代的蒽醌；和(b)从反应混合物中分离曱氧基取代的蒽醌。14、权利要求13的方法，其中甲基取代的蒽醌是一甲氧基取代的蒽醌。15、权利要求13的方法，其中在冰浴中冷却步骤(a)中的反应混合物。16、权利要求13的方法，其中从反应混合物中蒸发掉二乙醚，甲氧基取代的蒽醌通过溶剂萃取分离并进一步通过色谱法分离。17、权利要求16的方法，其中溶剂选自乙酸乙酯和己烷。18、权利要求13的方法，其中曱氧基蒽醌是S(l-曱基-2，3-二曱氧基-8-羟基蒽醌)。19、曱基化二羟基取代的蒽醌，制备二甲氧基取代的蒽醌的方法，包括(a)在室温或更低温度下，使无水溶剂中的二羟基蒽醌与二曱基硫酸盐在反应混合物中反应；和(b)从反应混合物中分离二曱氧基取代的蒽醌。20、权利要求19的方法，其中溶剂是丙酮。21、权利要求19或20的方法，其中二甲氧基取代的蒽醌是R。22、抑制线虫寄生虫的方法，包括将寄生虫暴露在抑制量的羟基取代的蒽醌中。23、权利要求22的方法，其中寄生虫是引起淋巴管丝虫病的布鲁线虫属malayispp或引起疟疾的寄生虫。24、权利要求22或23的方法，其中寄生虫在体外被抑制。25、权利要求22或23的方法，其中寄生虫在体内被抑制。26、权利要求22的方法，其中羟基取代的蒽醌也是曱氧基取代的。27、权利要求22的方法，其中蒽醌选自C、K、N、R和S。28、选自化合物l-曱基-2，3-二羟基蒽醌(C)、l-曱基-2，3,8-三羟基蒽醌(K)、1，2，3,5-四羟基蒽醌(N)、l-羟基-2，8-二曱氧基-3-曱基蒽醌(R)和l-曱基-2，3-二甲氧基-8-羟基蒽醌(S)的蒽醌。29、权利要求28的蒽醌治疗寄生虫疾病、肿瘤和癌症的用途。30、一种蒽醌其中RbR2、R3、R4、Rs和R6选自H、OH、CH3和CH30，且其中至少一个RhR2、R3、R4和Rs是CH30。全文摘要描述了羟基取代的蒽醌的制备方法。该方法将邻苯二甲酸酐(取代或未取代的)与用至少两个羟基取代的苯环部分偶合。剩下的羟基在某些蒽醌中转化成甲氧基。该化合物对治疗寄生虫疾病特别有效。还描述了用蒽醌治疗或防止疟疾、丝虫病、血吸虫病和其他寄生虫疾病的方法。文档编号A61K31/70GK101426506SQ200580014965公开日2009年5月6日申请日期2005年5月11日优先权日2004年5月11日发明者M·A·克伦,M·G·奈尔,M·R·哈南耶彦,Y·米莱夫申请人:密执安州大学