小分子的细胞因子活性调节剂的制作方法

专利名称：小分子的细胞因子活性调节剂的制作方法
技术领域：
本申请案主张优先于在2004年9月28日提出申请的临时申请案第60/613,740号及在2005年4月27日提出申请的临时申请案第60/675,241号的权利，这两个案件的全文以引用的方式并入本文中。
政府支持此项工作部分受到美国政府的支持，由国立卫生研究院公共卫生服务部(thePublic Health Service，National Institutes of Health)授予以1R43CA096077。美国政府可对本发明拥有一定的权利。
背景技术：
分散因子(SF，也称作肝细胞生长因子[HGF]，且在下文中称作且缩写为HGF/SF)为刺激细胞生长、细胞运动、形态发生和血管生成的多效性生长因子。HGF/SF是作为非活性单体(～100kDa)产生，其经蛋白水解转化成其活性形式。活性HGF/SF为由62kDa α链和34kDa β链组成的肝素结合异二聚体蛋白质。HGF/SF为实质性肝、上皮及内皮细胞的有效促细胞分裂剂(Matsumoto，K.和Nakamura，T.，1997，Hepatocytegrowth factor(HGF)as a tissue organizer for organogenesis and regeneration.Biochem.Biophys.Res.Commun.239，639-44；Boros，P.和Miller，CM.，1995，Hepatocyte growthfactora multifunctional cytokine.Lancet 345，293-5)。其刺激内皮细胞生长且又充当对抗内皮细胞死亡的存活因子(Morishita，R，Nakamura，S，Nakamura，Y，Aoki，M，Moriguchi，A，Kida，I，Yo，Y，Matsumoto，K，Nakamura，T，Higaki，J，Ogihara，T，1997，Potential role of an endothelium-specific growth factor，hepatocyte growth factor，onendothelial damage in diabetes.Diabetes 46138-42)。通过在体外血管平滑肌细胞刺激内皮细胞增殖、迁移和分化进入类毛细管来合成并分泌HGF/SF(Grant，D，S，Kleinman，H.K.，Goldberg，I.D.，Bhargava，M.M.，Nickoloff，B.J.，Kinsella，J.L.，Polverini，P.，Rosen，E.M.，1993，Scatter factor induces blood vessel formation in vivo.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 901937-41；Morishita，R.，Nakamura，S.，Hayashi，S.，Taniyama，Y.，Moriguchi，A.，Nagano，T.，Taiji，M.，Noguchi，H.，Takeshita，S.，Matsumoto，K.，Nakamura，T.，Higaki，J.，Ogihara，T.，1999，Therapeutic angiogenesis induced by human recombinant hepatocytegrowth factor in rabbit hind limb ischemia model as cytokine supplement therapy.Hypertension 331379-84)。小鼠皮下组织和大鼠角膜内的含HGF/SF植入物诱导周围组织的新血管生长。HGF/SF蛋白在肿瘤中所含新血管形成部位表达(Jeffers，M.，Rong，S.，Woude，G.F.，1996，Hepatocyte growth factor/scatter factor-Met signaling intumorigenicity and invasion/metastasis.J.Mol.Med.74505-13；Moriyama，T.，Kataoka，H.，Koono，M.，Wakisaka，S.，1999，Expression of Hepatocyte growth factor/scatter factor andits receptor c-met in brain tumorsevidence for a role in progression of astrocytic tumors Int.J.Mol.Med.3531-6)。这些发现表明HGF/SF在生理和病理条件下的血管形成和修复中起重要作用。关于血管生成蛋白的进一步讨论可见于美国专利第6,011,009号和第5,997,868号，这两个案件的全文以引用的方式并入本文中。在某些实施例中，本发明涉及确定呈现HGF/SF活性且因此适用于治疗或预防其中需要HGF/SF活性的病况或疾病的有机小分子。
本申请案中所有引文的全文均以引用的方式并入本文中。本文中任何参考案的引文均不应解释为其承认此参考案作为“现有技术”适用于本申请案。

发明内容
如上所述，仍需要开发能够模拟或调节HGF/SF活性的新颖治疗剂。本发明涉及能够模拟或调节各种细胞因子活性的新颖治疗剂，所述细胞因子的非限制性实例包括但不限于肝细胞生长因子(HGF；亦称作分散因子(SF))、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)及神经生长因子(NGF)或至少提供一或多种与上述示例性但非限制性细胞因子相同的生物活性的因子。而且，本发明化合物能够激活、激发或诱导各种受体酪氨酸激酶(包括但不限于HGF/SF受体(c-met)、EGF受体、VEGF受体及NGF受体)的磷酸化和/或直接激活这些受体酪氨酸激酶的信号传导路径。
一般来说，本发明的某些新颖化合物具有下式(I)所示结构 其中m、p、R1及R4如本文概括地及于各类别及细类中所定义；其互变异构体、其医药组合物，所述化合物用作HGF/SF活性的调节剂以及其它受体酪氨酸激酶的调节剂。
在某些其它实施例中，本发明提供式(IIA)化合物
其中m、p、R1及R4如本文概括地及于各类别及细类中所定义；其互变异构体、其医药组合物，所述化合物用作HGF/SF活性的调节剂以及其它受体酪氨酸激酶的调节剂。
另一方面，本发明涉及包含本文所揭示任何化合物的组合物。
另一方面，本发明提供使用本文所揭示的任何化合物以调节患者或生物试样的HGF/SF活性、尤其提供抗纤维化及抗细胞凋亡活性的方法。本发明化合物和医药组合物具有HGF/SF特性且适用于治疗其中预防性或治疗性投与HGF/SF将有用的任何疾病、病症或病况。
另一方面，本发明提供使用本文所揭示的任何化合物来治疗或减轻与HGF/SF或其它细胞因子活性相关的疾病、病症或病况的严重程度的方法。
又一方面，本发明提供预防或治疗其中需要促进或模拟细胞因子活性(或者由激活、激发或诱导c-met或其它受体酪氨酸激酶的磷酸化产生的生物活性)的病况和疾病的方法。在一较佳实施例中，所述活性为诱导内皮细胞增殖或血管生成。在另一实施例中，所述活性为诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞等其它细胞的增殖。在又一实施例中，所述活性为诱导神经轴突生长。在再一实施例中，所述活性为诱导髓磷脂生成。在再一实施例中，所述活性为保护细胞免于凋亡。在再一实施例中，所述活性是抗纤维化。本文所述化合物可治疗如下病况及疾病其中诱导内皮细胞增殖或治疗性血管生成是有益的，其中诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞及少突神经胶质细胞等细胞的增殖是有益的，其中诱导轴突生长是有益的，其中诱导髓磷脂生成是有益的，其中保护细胞免于凋亡是有益的，其中抗纤维化是有益的，或其中所有或某些上述活性是有益的；所述病况及疾病包括但不限于纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化、多发性硬化或各种神经退化性疾病。在某些实施例中，所述方法用于治疗一选自下列的疾病或病况或者减轻所述疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病(Wilson′s disease)、血色素沉着病和α-1抗胰蛋白酶缺乏)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风；外伤性脑部损伤、脊髓损伤、及其它脑血管疾病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；其它心血管疾病；糖尿病；肾衰竭；肾纤维化、肺纤维化和特发性肺纤维化；多发性硬化；及神经退化性疾病，所述神经退化性疾病为(例如但不限于)异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病(Refsum′s disease)、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病(Krabbe′s disease)、苯丙酮尿症、卡纳万病(Krabbe′s disease)、佩-梅二氏病(Pelizaeus-Merzbacher disease)及亚历山大氏病(Alexander′s disease)。在某些示例性实施例中，所述方法是用于治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾或者其它组织或器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注变得正常；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；治疗纤维化疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤及移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。还可使用所述化合物预防(prophylaxis或preventing)个体(且尤其是可能会呈现上述疾病和病况风险因素的个体)患有疾病。在上述病况中尤其常见的是，通过促进内皮细胞生长、血管生成或新血管形成而在其中产生益处。另外，本发明化合物有益于提供自激活、激发、磷酸化HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶或者以任何其它方式激活HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶的信号传导路径而产生的生物活性。
说明应了解，本文所述化合物可用任何数量的取代基或官能部分取代。一般而言，术语“取代”(无论其前是否有词语“视情况”)及本发明化学式中所含取代基是指用一规定取代基替代给定结构中的氢基。当任何给定结构中的一个以上位置被选自一规定群组的一个以上取代基取代时，每一位置处的取代基可相同或不同。本文所用术语“取代”意欲包括有机化合物的所有容许的取代基。广义上，容许的取代基包括有机化合物的非环状及环状、支链及非支链、碳环及杂环、芳基及非芳基、碳及杂原子取代基。出于本发明目的，诸如氮等杂原子可具有满足所述杂原子化合价要求的氢取代基和/或本文所述的任何容许的有机化合物取代基。而且，本发明并不意欲以任何方式受限于有机化合物的容许取代基。本发明所预想取代基和变量的组合较佳为那些可形成用于治疗及预防(例如)概述于上文中疾病的稳定化合物者。取代基的实例包括但不限于脂族基；杂脂族基；脂环族基；杂环基；芳基、杂芳基；芳基；杂芳基；烷基芳基；烷基杂芳基；烷氧基；芳氧基；杂烷氧基；杂芳氧基；烷硫基；芳硫基；杂烷硫基；杂芳硫基；F；Cl；Br；I；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；或-GRG1，其中G为-O-、-S-、-NRG2-、-C(＝O)-、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NRG2-、-OC(＝O)-、-NRG2C(＝O)-、-OC(＝O)O-、-OC(＝O)NRG2-、-NRG2C(＝O)O-、-NRG2C(＝O)NRG2-、-C(＝S)-、-C(＝S)S-、-SC(＝S)-、-SC(＝S)S-、-C(＝NRG2)-、-C(＝NRG2)O-、-C(＝NRG2)NRG3-、-OC(＝NRG2)-、-NRG2C(＝NRG3)-、-NRG2SO2-、-NRG2SO2NRG3-或-SO2NRG2-，其中RG1、RG2及RG3在每次出现时独立地包括但不限于氢、卤素或视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基、杂芳基、芳基、杂芳基、烷基芳基、或烷基杂芳基部分。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
本文所用术语“稳定”较佳是指以下化合物，所述化合物具有足以容许制造的稳定性并可在足够长的待检测时期内及较佳在对本文所详述目的而言有用的足够长时期内保持化合物完整性。
本文中所用的术语“脂族”包括由IUPAC所界定的饱和及不饱和、直链(即无分枝)或支链脂族烃，其视情况经一个或多个官能基取代。本文所定义“脂族基”意欲包括视情况经取代的烷基、烯基和炔基部分。因此，本文中所用术语“烷基”包括直链及支链烷基。一类似惯例用于诸如“烯基”、“炔基”及类似基团等其它通称。此外，本文中所用术语“烷基”、“烯基”、“炔基”和类似基团包括经取代及未经取代的基团。在某些实施例中，本文中所用的“低碳烷基”是用于表示那些具有约1-6个碳原子的烷基(经取代、未经取代、分枝或无分枝)。
在某些实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-20、2-20、3-20、4-20、5-20、6-20、7-20或8-20个脂族碳原子。在某些其它实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-10、2-10、3-10、4-10、5-10、6-20、7-20或8-20个脂族碳原子。在其它实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-8、2-8、3-8、4-8、5-8、6-20或7-8个脂族碳原子。在又一些实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-6、2-6、3-6、4-6或5-6个脂族碳原子。在其它实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-4、2-4或3-4个碳原子。因此，说明性脂族基团包括但不限于(例如)甲基、乙基、正丙基、异丙基、烯丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、异戊基、叔戊基、正己基、仲己基部分和类似基团，其还可具有一个或多个取代基。烯基包括但不限于(例如)乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基和类似基团。代表性炔基包括但不限于乙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丙炔基及类似基团。
本文中所用的术语“脂环族”是指结合了脂族与环状化合物之特性的化合物且其包括(但不限于)单环或多环状脂族基烃和桥接环烷基化合物，其视情况经一个或多个官能基取代。所属领域的一般技术人员应了解“脂环族”在本文中意欲包括(但不限于)环烷基、环烯基和环炔基部分，其视情况经一个或多个官能基取代。因此，说明性脂环基包括(但不限于)环丙基、-CH2-环丙基、环丁基、-CH2-环丁基、环戊基、-CH2-环戊基-n、环己基、-CH2-环己基、环己烯基乙基、环己基乙基、降莰烷基部分和类似基团，其还可具有一个或多个取代基。
本文所用术语“环烷基”是指环状烷基，尤其是指具有3至7个(较佳3至10个)碳原子的基团。适宜的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基及类似基团，若在脂族基、杂脂族基或杂环基部分中，则其可视情况经取代。一类似惯例可用于诸如“环烯基”、“环炔基”及类似基团等其它通称。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
本文所用的术语“杂脂族基”是指其中主链中一个或多个碳原子经一杂原子取代的脂族部分。因此，杂脂族基是指在脂族主链中碳原子位置上含有一个或多个氧、硫、氮、磷或硅原子的脂族链。杂脂族基部分可为支链或直线型非支链。在某些实施例中，杂脂族基部分上的一或多个氢原子可独立地经一或多个包括但不限于下列的部分取代脂族基；杂脂族基；脂环族基；杂环基；芳基、杂芳基；芳基；杂芳基；烷基芳基；烷基杂芳基；烷氧基；芳氧基；杂烷氧基；杂芳氧基；烷硫基；芳硫基；杂烷硫基；杂芳硫基；F；Cl；Br；I；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；或-GRG1，其中G为-O-、-S-、-NRG2-、-C(＝O)、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NRG2-、-OC(＝O)-、-NRG2C(＝O)-、-OC(＝O)O-、-OC(＝O)NRG2-、-NRG2C(＝O)O-、-NRG2C(＝O)NRG2-、-C(＝S)-、-C(＝S)S-、-SC(＝S)-、-SC(＝S)S-、-C(＝NRG2)-、-C(＝NRG2)O-、-C(＝NRG2)NRG3-、-OC(＝NRG2)-、-NRG2C(＝NRG3)-、-NRG2SO2-、-NRG2SO2NRG3-或-SO2NR-，其中RG1、RG2及RG3在每次出现时独立地包括但不限于氢、卤素或视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基、杂芳基、芳基、杂芳基、烷基芳基或烷基杂芳基部分。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
本文所用的术语“杂脂环基”、“杂环烷基”或“杂环基”是指组合了杂脂族基与环状化合物的特性的化合物，且其包括(但不限于)具有5-16个原子的饱和及不饱和单环或多环状环系统，其中至少一个环原子为选自O、S和N的杂原子(其中氮和硫杂原子视情况可经氧化)，其中所述环系统视情况经一个或多个如本文中所定义的官能基取代。在某些实施例中，术语“杂环基”是指一非芳族5-、6-或7-元环或一多环基团，其包括(但不限于)二环或三环基团，所述基团包含具有1至3个独立选自氧、硫及氮的杂原子的稠合六元环，其中(i)每一5元环具有0至2个双键且每一6元环具有0至2个双键，(ii)氮及硫杂原子视情况可经氧化，(iii)氮杂原子视情况可经季铵化，及(iv)任一上述杂环基可稠合至一芳基或杂芳基环。代表性杂环包括但不限于吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、恶唑烷基、异恶唑烷基、吗啉基、噻唑烷基、异噻唑烷基及四氢呋喃基。在某些实施例中，使用一“经取代的杂环烷基或杂环”基团且本文所用经取代的杂环烷基或杂环基团是指一其上的一或多个氢原子独立地经下列基团取代的如上文所定义环烷基或杂环基团脂族基；杂脂族基；脂环族基；杂环基；芳基；杂芳基；芳基；杂芳基；烷基芳基；烷基杂芳基；烷氧基；芳氧基；杂烷氧基；杂芳氧基；烷硫基；芳硫基；杂烷硫基；杂芳硫基；F；Cl；Br；I；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；或-GRG1，其中G为-O-、-S-、-NRG2-、-C(＝O)、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NRG2-、-OC(＝O)-、-NRG2C(＝O)-、-OC(＝O)O-、-OC(＝O)NRG2-、-NRG2C(＝O)O-、-NRG2C(＝O)NRG2-、-C(＝S)-、-C(＝S)S-、-SC(＝S)-、-SC(＝S)S-、-C(＝NRG2)-、-C(＝NRG2)O-、-C(＝NRG2)NRG3-、-OC(＝NRG2)-、-NRG2C(＝NRG3)-、-NRG2SO2-、-NRG2SO2NRG3-或-SO2NR-，其中RG1、RG2及RG3在每次出现时独立地包括但不限于氢、卤素或视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基、杂芳基、芳基、杂芳基、烷基芳基或烷基杂芳基部分。由本文中所述的实例中所示特定实施例说明其它实例或通常适用的取代基。另外，应了解任何上述或本文中所述的脂环基或杂环基部分可包含与其稠合的芳基或杂芳基部分。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
一般而言，本文所用的术语“芳族部分”是指具有3-14个碳原子的稳定的单环或多环不饱和部分，所述碳原子各自可经取代或未经取代。在某些实施例中，术语“芳族部分”是指以下平面环其在每个环原子上均具有垂直于环平面的p轨道且满足其中所述环中π电子的数目为(4n+2)的休克尔规则(其中n为整数)。不满足一个或所有此等芳香性标准的单环或多环不饱和部分在本文中被定义为“非芳族”且包括在术语“脂环族”中。芳基部分的实例包括但不限于苯基、二氢茚基、茚基、萘基、菲基及蒽基。
一般而言，本文所用术语“杂芳基部分”是指较佳具有3-14个碳原子的稳定的经取代或未经取代的不饱和单杂环基或多杂环基部分，其包含至少一个如下环在每个环原子上均具有垂直于环平面的p轨道且满足其中所述环中π电子的数目为(4n+2)的休克尔规则(其中n为整数)。杂芳基部分的实例包括但不限于吡啶基、喹啉基、二氢喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、二氢喹唑基及四氢喹唑基。
还应理解本文所定义芳基和杂芳基部分可通过脂族基(例如，烷基)或杂脂族基(例如，杂烷基)部分连接，因此其还包括诸如下列等部分-(脂族基)芳基、-(杂脂族基)芳基、-(脂族基)杂芳基、-(杂脂族基)杂芳基、-(烷基)芳基、-(杂烷基)芳基、(烷基)杂芳基及-(杂烷基)杂芳基部分。因此，本文所用短语“芳基或杂芳基部分”及“芳基、杂芳基、-(烷基)芳基、-(杂烷基)芳基、-(杂烷基)杂芳基和-(杂烷基)杂芳基”可互换使用。取代基包括(但不限于)任何先前所述的取代基，即所述用于脂族部分或本文中所揭示的其它部分的取代基，从而导致形成稳定的化合物。
一般而言，术语“芳基”是指如上所述的芳基部分，除了那些通过脂族基(例如，烷基)或杂脂族基(例如，杂烷基)部分连接者以外。在本发明的某些实施例中，“芳基”是指具有一或两个其芳香性满足休克尔规则的环的单或二环碳环系统，其包括但不限于苯基、萘基、四氢萘基、二氢茚基、茚基及类似基团。
类似地，术语“杂芳基”是指如上文所述的杂芳基部分，除了那些通过脂族基(例如，烷基)或杂脂族基(例如，杂烷基)部分连接者以外。在本发明的某些实施例中，本文所用术语“杂芳基”是指具有约5个至约10个环原子的环状不饱和基团，其中一个环原子选自S、O及N；0、1或2个环原子为独立地选自S、O及N的额外杂原子；且其余环原子为碳，所述基团通过任何环原子连接至另一分子，例如，吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、恶唑基、异恶唑基、噻二唑基、恶二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基及类似基团。
本文所定义“芳基”及“杂芳基”基团(包括双环状芳基)可未经取代或经取代，其中所述基团上的一或多个氢原子独立地被任何上述取代基(即，脂族基部分或本文所揭示其它部分所引用的取代基)取代以形成一稳定的化合物。举例而言，芳基及杂芳基基团(包括双环状芳基)可未经取代或经取代，其中所述基团上的一或多个氢原子独立地被任何一或多个下列部分取代(包括但不限于)脂族基；杂脂族基；脂环族基；杂环基；芳基、杂芳基；芳基；杂芳基；烷基芳基；烷基杂芳基；烷氧基；芳氧基；杂烷氧基；杂芳氧基；烷硫基；芳硫基；杂烷硫基；杂芳硫基；F；Cl；Br；I；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；或-GRG1，其中G为-O-、-S-、-NRG2-、-C(＝O)-、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NRRG2-、-OC(＝O)-、-NRG2C(＝O)-、-OC(＝O)O-、-OC(＝O)NRG2-、-NRG2C(＝O)O-、-NRG2C(＝O)NRG2-、-C(＝S)-、-C(＝S)S-、-SC(＝S)-、-SC(＝S)S-、-C(＝NRG2)-、-C(＝NRG2)O-、-C(＝NRG2)NRG3-、-OC(＝NRG2)-、-NRG2C(＝NRG3)-、-NRG2SO2-、-NRG2SO2NRG3-或-SO2NRG2-，其中RG1、RG2及RG3在每次出现时独立地包括但不限于氢、卤素或视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基、杂芳基、芳基、杂芳基、烷基芳基、或烷基杂芳基部分。另外，应了解任何两个相邻基团一起可代表4、5、6或7元经取代或未经取代的脂环族或杂环基部分。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
本文中所用的术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指通过氧原子与母体分子部分连接的饱和(即，O-烷基)或不饱和(即，O-烯基和O-炔基)基团。在某些实施例中，所述烷基含有1-20、2-20、3-20、4-20、5-20、6-20、7-20或8-20个脂族碳原子。在某些其它实施例中，所述烷基含有1-10、2-10、3-10、4-10、5-10、6-10、7-10或8-10个脂族碳原子。在其它实施例中，本发明所用的烷基、烯基和炔基含有1-8、2-8、3-8、4-8、5-8、6-20或7-8个脂族碳原子。在又一些实施例中，所述烷基含有1-6、2-6、3-6、4-6或5-6个脂族碳原子。在另一些实施例中，所述烷基含有1-4、2-4或3-4个脂族碳原子。烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、新戊氧基、正己氧基和类似基团。
本文中所用的术语“硫代烷基”是指通过硫原子与母体分子部分连接的饱和(即S-烷基)或不饱和(即S-烯基和S-炔基)基团。在某些实施例中，所述烷基包含1至20个脂族碳原子。在某些其它实施例中，所述烷基包含1至10个脂族碳原子。在另外一些实施例中，本发明所用烷基、烯基和炔基包含1至8个脂族基碳原子。在另外实施例中，所述烷基包含1至6个脂族碳原子。在再一些实施例中，所述烷基包含1至4个脂族碳原子。烷硫基的实例包括但不限于甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、正-丁硫基及类似基团。
术语“烷基氨基”是指具有结构-NHR’的基团，其中R’为本文中所定义的脂族基或脂环族基。术语“氨基烷基”是指具有结构NH2R’-的基团，其中R’为本文中所定义的脂族基或脂环族基。在某些实施例中，所述脂族基或脂环族基包含1-20个脂族碳原子。在某些其它实施例中，脂族或脂环族基团含1-10个脂族碳原子。在其它实施例中，脂族或脂环族基团包含1-6个脂族碳原子。在其它实施例中，脂族或脂环族基团包含1-4个脂族碳原子。在其它实施例中，R’为含有1-8个脂族碳原子的烷基、烯基或炔基。烷基氨基的实例包括但不限于甲氨基、乙氨基、异丙氨基及类似基团。
本发明化合物的上述脂族基(及其它)部分的取代基的某些实例包括但不限于脂族基；脂环族基；杂脂族基；杂环基；芳基；杂芳基；芳基；杂芳基；烷基芳基；杂烷基芳基；烷基杂芳基；杂烷基杂芳基；烷氧基；芳基氧基；杂烷氧基；杂芳基氧基；烷硫基；芳硫基；杂烷硫基；杂芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(＝O)Rx；-CO2(Rx)；-C(＝O)N(Rx)2；-OC(＝O)Rx；-OCO2Rx；-OC(＝O)N(Rx)2；-N(RX)2；-ORx；-SRX；-S(O)Rx；-S(O)2Rx；-NRx(CO)Rx；-N(Rx)CO2Rx；-N(Rx)S(O)2Rx；-N(Rx)C(＝O)N(Rx)2；-S(O)2N(Rx)2；其中Rx在每次出现时独立地包括但不限于脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基、烷基芳基、烷基杂芳基、杂烷基芳基或杂烷基杂芳基，其中上文及本文所述的任何脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、烷基芳基或烷基杂芳基取代基皆可为经取代或未经取代、有支链或无支链、饱和或不饱和，且其中上文及本文所述的任何芳基或杂芳基取代基可经取代或未经取代。通常可用取代基的其它实例由本文所述实例中所示的特定实施例阐述。
本文所用术语“卤代”及“卤素”是指选自氟、氯、溴及碘的原子。
术语“卤代烷基”指上文所定义的具有1、2或3个与其连接的卤素原子的烷基且可由诸如氯甲基、溴乙基、三氟甲基及类似基团等基团示例。
本文中所用的术语“氨基”是指伯胺(-NH2)、仲胺(-NHRx)、叔胺(-NRxRy)或季胺(-N+RxRyRz)，其中Rx、Ry和Rz独立地为如本文所定义的脂族、脂环族、杂脂族基、杂环基族、芳族或杂芳族部分。氨基的实例包括但不限于甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、二乙氨基羰基、甲基乙氨基、异丙氨基、哌啶基、三甲氨基和丙氨基。
本文中所用的术语“酰基”是指具有通式-C(＝O)R的基团，其中R为如本文所定义的脂族、脂环族、杂脂族、杂环基、芳族或杂芳族部分。
本文中所用的术语“C2-6亚烯基”是指仅仅由碳和氢原子组成的经取代或未经取代的直线型或支链不饱和二价基团，其具有2至6个碳原子，在基团两端均具有自由价“-”，且其中不饱和是仅作为双键存在且其中双键可存在于链的第一个碳与分子的其余部分之间。
本文中所用的术语“脂族基”、“杂脂族基”、“烷基”、“烯基”、“炔基”、“杂烷基”、“杂烯基”、“杂炔基”和类似基团包括经取代和未经取代、饱和及不饱和、及直线型和支链基团。类似地，术语“脂环族基”、“杂环基”、“杂环烷基”、“杂环基”和类似基团包括经取代和未经取代、及饱和和不饱和基团。另外，术语“环烷基”、“环烯基”、“环炔基”、“杂环烷基”、“杂环烯基”、“杂环炔基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基”、“杂芳基”和类似基团包括经取代及未经取代的基团。
本文所用短语“医药上可接受的衍生物”表示所述化合物的任何医药上可接受的盐、酯或所述酯的盐，或任何投与一患者时能够提供(直接或间接)本文另外所述化合物或其代谢物或残余物的其它加合物或衍生物。因此，医药上可接受的衍生物尤其包括前药。前药为一化合物的衍生物，通常具有显著降低的药理活性，其含有易于在体内被去除从而产生如药理活性物质的母体分子的额外部分。前药的实例为酯，其在体内解离以产生相关化合物。另一实例为化合物的N-甲基衍生物，其可能发生氧化代谢生成N-去甲基化物。各种化合物的前药和用于衍生母体化合物以产生前药的材料及方法是已知的且可能适于本发明。下文将更详细地阐述某些示例性医药组合物及医药上可接受的衍生物。
术语“互变异构作用”是指分子的一个原子的质子移位到另一个原子上的现象。参见Jerry March，Advanced Organic ChemistryReactions，Mechanisms and Structures，第4版，John Wiley & Sons，第69-74页(1992)。本文中所用的术语“互变异构体”是指由质子移位所产生的化合物。
本文所用术语“保护基团”意指可暂时封阻其以便反应可选择性地在多官能化合物的另一反应位置处进行的特定官能部分(例如，O、S或N)。在较佳实施例中，保护基团}以良好产量有选择地反应以生成对预计反应稳定的经保护基质；所述保护基团必须由容易获得的、较佳为不侵袭其它官能基的无毒性试剂以良好产量有选择地加以去除；所述保护基团形成容易分离的衍生物(更佳地不产生新的手性中心)；且所述保护基团具有最小的额外官能度以避免其它的反应位点。如本文中详细论述，可使用氧、硫、氮和碳保护基团。举例而言，在某些实施例中，如本文中详细论述，使用某些示例性氧保护基团。这些氧保护基团包括(但不限于)甲醚类、经取代的甲醚类(举例而言，如MOM(甲氧基甲醚)、MTM(甲硫基甲醚)、BOM(苯甲氧基甲醚)、PMBM或MPM(对-甲氧基苯甲氧基甲醚))、经取代的乙醚类、经取代的苯甲醚类、甲硅烷基醚类(举例而言，如TMS(三甲基甲硅烷基醚)、TES(三乙基甲硅烷基醚)、TIPS(三异丙基甲硅烷基醚)、TBDMS(叔丁基二甲基甲硅烷基醚)、三苄基甲硅烷基醚、TBDPS(叔丁基二苯基甲硅烷基醚))、酯类(举例而言，如甲酸酯、乙酸酯、苯甲酸酯(Bz)、三氟乙酸酯、二氯乙酸酯)、碳酸酯类、环状缩醛类和缩酮类。在某些其它示例性实施例中，使用氮保护基团。举例而言，这些氮保护基团包括(但不限于)氨基甲酸酯类(举例而言，包括氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯和经取代的氨基甲酸乙酯(例如Troc))、酰胺类、环状酰亚胺衍生物、N-烷基胺及N-芳基胺、亚胺衍生物和烯胺衍生物。某些其它示例性保护基团详细论述于本文中，然而，应了解本发明不意欲受限于这些保护基团，相反地，使用以上标准可容易地鉴别各种其它的等效保护基团且其用于本发明中。另外，各种保护基陈述于“Protective Groups in Organic Synthesis”，第三版，Greene，T.W.和Wuts，P.G.，Eds.，John Wiley & Sons，New York1999，所述文件的全部内容以引用的方式并入本文中。
本文所用的术语“经分离”当应用于本发明化合物时，其是指如下化合物(i)其是从在性质上与其相关或在制造时与其相关的至少某些组份分离而来和/或(ii)是由人工生产、制备或制造。
本文所用的术语“生物试样”包括(但不限于)细胞培养物或其提取物；自动物(例如，哺乳动物)获得的活组织检查材料或其提取物；及血液、唾液、尿、粪便、精液、眼泪或其它体液或其提取物；或其经纯化的变体。举例而言，术语“生物试样”是指自任何活有机体获得的、由其排泄的或由其分泌的任何固体或液体试样，所述活有机体包括单细胞微生物(诸如细菌和酵母)和多细胞有机体(诸如植物和动物，例如脊椎动物或哺乳动物，且具体而言为受有待诊断或调查的病症或疾病影响的健康或表面健康的人类个体或人类患者)。生物试样可呈任何形式，包括诸如组织、细胞、细胞颗粒、细胞提取物、细胞均浆或细胞片段等固体材料；或活组织检查切片、或生物流体。生物流体可自任何部位(例如血液、唾液(或含口腔细胞的漱口剂)、眼泪、血浆、血清、尿、胆汁、精液、脑脊髓液、羊水、腹膜液和胸膜液、或来自其中的细胞、房水或玻璃体液或任何身体分泌物)、渗出液、流出物(例如，自脓肿或任何其它感染或发炎部位获得的流体)或自关节(例如，正常关节或受诸如风湿性关节炎、骨关节炎、痛风或脓毒性关节炎等疾病影响的关节)获得的流体。生物试样可自任何器官或组织(包括活组织检查或尸体解剖标本)获得，或者可包含细胞(初级细胞或经培养细胞)或由任何细胞、组织或器官调节的介质。生物试样也可包括组织切片，诸如用于组织学目的的冷冻切片。生物试样也可包括生物分子的混合物，包括由细胞或组织均浆的部分或完全分馏作用所产生的蛋白质、脂质、碳水化合物和核酸。尽管所述试样较佳自人类个体获取，但生物试样可来自任何动物、植物、细菌、病毒、酵母等。本文所用术语“动物”是指处于任何发育阶段的人类和非人类动物，包括(例如)哺乳动物类、鸟类、爬行动物类、两栖类、鱼类、虫类和单细胞动物。细胞培养物和活组织试样被认为是动物多样性。在某些示例性实施例中，非人动物为哺乳动物(例如，啮齿动物、小鼠、大鼠、兔、猴、狗、猫、羊、牛、灵长类或猪)。动物可为基因转录的动物或人克隆。如果需要，则生物试样可经受初步处理，包括初步分离技术。


图1A-D显示本发明化合物与对照和HGF相比可使HUVEC增殖增加(A)及使用3种本发明化合物绘示的剂量反应曲线(B-D)。
图2A-C显示本发明化合物可保护HUVEC免于分别由血清饥饿(A)、过氧化氢(B)及CRP(C)引起的细胞凋亡。
图3显示本发明化合物可增强施万细胞中HGF/SF受体、c-met的磷酸化。
图4A-C显示本发明化合物可刺激施万细胞(A)和PC 12神经细胞(B)的增殖并通过施万细胞刺激髓磷脂生成(C)。
图5显示受2种本发明化合物刺激的寡树突胶质细胞增殖。
图6A-D显示2种本发明化合物在体外对轴突生长的影响。
图7显示本发明化合物在后肢局部缺血大鼠模型中可增强受影响肢体的血液流动。
图8显示对已患中风大鼠投与本发明化合物会减小梗塞面积。
图9A-B显示本发明化合物可减小ApoE基因剔除小鼠动脉的斑块面积。
图10显示本发明化合物在体外可改良缺血-再灌注后的心脏功能。
图11显示使用本发明化合物治疗TGF β1-诱导的肾纤维化可减少其中的α-SMARNA表达。
图12A-D通过下列显示本发明化合物对小鼠的博来霉素(bleomycin)-诱导的肺纤维化的影响存活率(A)、肺胶原蛋白-1基因表达(B)、由羟基脯氨酸(C)测量的肺胶原蛋白含量和纤维化得分(D)。
图13A-C借助BUN(A)、血清肌酸酐(B)和早期纤维化得分(C)显示本发明化合物对受多柔比星(多柔比星)诱导的模型的肾纤维化的影响。
图14A-F显示本发明化合物对由TAA诱导的肝纤维化的影响。图14A-C在导入TAA时开始治疗，表现为羟基脯氨酸含量(A)、α-SMA水平(B)和胶原蛋白-1基因表达(C)。延迟性经口治疗，图14D-F表现为羟基脯氨酸(D)、门脉压力(E)和纤维化得分(F)。
图15显示本发明化合物可减轻经链脲霉素(streptozotocin)治疗(患有糖尿病)的小鼠的高血糖症。
图16显示本发明化合物可改良发生在EAE多发性硬化小鼠模型中的运动系统缺陷。
图17显示本发明化合物可减少单核细胞迁移。
具体实施例方式
本发明化合物能够模拟或调节诸如下列等细胞因子的活性肝细胞生长因子(HGF；亦称作分散因子(SF))、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)和神经生长因子(NGF)；或者提供一或多种与上述示例性但非限制性细胞因子相同的生物活性。而且，本发明化合物能够激活、激发或诱导各种受体酪氨酸激酶(包括但不限于HGF/SF受体(c-met)、EGF受体、VEGF受体或NGF受体)的磷酸化和/或直接激活这些受体酪氨酸激酶的信号传导路径。本发明化合物还可诱导c-met磷酸化或者激发、激活或磷酸化其它受体酪氨酸激酶(例如，但不限于那些上文所述者)。在较佳实施例中，本发明化合物为小分子HGF/SF模拟物或促效剂。不欲受缚于任何特定理论，在某些其它实施例中，本发明的小分子化合物调节HGF/SF受体(c-met)的活性。在其它实施例中，本发明化合物与c-met结合。
视情况可以医药组合物提供的具有这些生物活性的本发明化合物可用于预防或治疗如下病况和疾病其中尤其需要促进或模拟上述细胞因子活性或者呈现可由激活、激发或诱导c-met或其它受体酪氨酸激酶的磷酸化产生的生物活性。在一较佳实施例中，所述活性为诱导内皮细胞增殖或血管生成。在另一实施例中，所述活性为诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞等其它细胞的增殖。在又一实施例中，所述活性为诱导神经轴突生长。在再一实施例中，所述活性为诱导髓磷脂生成。在再一实施例中，所述活性为保护细胞免于凋亡。在再一实施例中，所述活性为抗纤维化。
本发明化合物可用于治疗如下病况和疾病其中诱导内皮细胞增殖或治疗性血管生成是有益的，其中诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞等细胞增殖是有益的，其中诱导轴突生长是有益的，其中诱导髓磷脂生成是有益的，其中保护细胞免于凋亡是有益的，其中抗纤维化是有益的，或其中全部或某些所述活性是有益的；所述病况和疾病包括但不限于纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化。在某些实施例中，所述方法是用于治疗选自下列的疾病或病况或减轻这些疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1抗胰蛋白酶缺乏)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风、外伤性头部损伤、脊髓损伤及其它脑血管疾病；糖尿病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；其它心血管疾病；肾衰竭；肾纤维化和特发性肺纤维化。在某些示例性实施例中，所述方法是用于治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾和其它组织及器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注变得正常；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；治疗纤维化疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤及移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。
适应用本发明化合物和组合物治疗的另一疾病为多发性硬化(MS)。MS通常发生在20岁与50岁之间的年龄段上。目前，估计全世界有约2,500,000人患有MS，在美国有250,000至350,000例，在加拿大有50,000例，在德国有130,000例，在英国有85,000例，在法国有75,000例，在意大利有50,000例，在瑞士有11,000例。MS侵袭中枢神经系统(CNS)的白质。在其典型的表现(所有病例的90％)中，其特征为复发/缓解期交替出现，其中缓解持续时间随时间逐渐变短。其症状包括痉挛性下肢轻瘫、不稳定步态、复视和失禁的任何组合。
还可适应用本文治疗的另一类疾病为遗传性神经退化性疾病。此类疾病包括8种经鉴定有脑白质营养不良的疾病异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病、苯丙酮尿症、卡纳万病、佩-梅二氏病和亚历山大氏病。前6种为贮积病(storage disorder)。一种酶的缺乏或功能失常会形成一种有毒的化学物质。在佩-梅二氏病中，由于产生CNS髓磷脂碱性蛋白质的基因发生突变，因此不会形成髓磷脂(脫髓鞘作用)。众人仍不知亚历山大氏病的病因学。遗传性脫髓鞘病(通常易于在婴儿或幼童中出现)的临床过程是悲剧性的。先前正常的儿童在看、听、说和行方面进步缓慢。他们的结局同样是悲剧性的在几年内死亡。
使用所述化合物可预防个体(且尤其是可能呈现上述疾病和病况风险因素的个体)患病。在上述病况中尤其常见的是，通过促进内皮细胞生长、血管生成或新血管形成可于其中产生益处。这些仅为本发明化合物的示例性生物活性。
本发明化合物包括那些上文通常所述者和本文具体陈述者，且部分地由本文中所揭示的各种类别、亚属和种加以说明。
另外，本发明提供本发明化合物的医药上可接受的衍生物和使用这些化合物、其医药组合物或两者中的任一种与一种或多种额外治疗剂的组合来治疗个体的方法。
1)本发明化合物的概述在某些实施例中，本发明化合物包括进一步定义如下的通式(I)的化合物 或其医药上可接受的衍生物；其中m为1至4的整数；p为1至6的整数；R1和R4在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(C＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时独立地选自由氢及视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分组成的群组；Rb和Rc在每次出现时独立地选自由氢；羟基；SO2Rd；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时独立选自由氢；-N(Re)2；脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时独立地为氢或脂族基。在某些其它实施例中，将式(I)化合物定义如下m为1至4的整数；p为1至6的整数；RR为R1及R4在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；
Ra在每次出现时独立地为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时独立地为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re在每次出现时独立地为氢或烷基。
另一方面，本发明提供式(II)化合物 或其医药上可接受的衍生物；m为1至4的整数；R1在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；R2和R3独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基或酰基部分；或者R2和R3连同与二者连接的氮原子形成视情况经取代的杂芳基或杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外，所述杂芳基或杂环基包含4-10个环成员及0-3个选自由O、N和S组成的群组的额外杂原子，所述杂芳基或杂环基视情况进一步经一或多个视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基取代。
Ra在每次出现时为氢或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时独立地为氢、羟基、SO2Rd或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时独立地为氢、-N(Re)2或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；且Re在每次出现时独立地为氢或脂族基。
在某些其它实施例中，式(II)化合物定义如下
m为1至4的整数；R1在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；R2和R3独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；或者R2和R3连同和二者连接的氮可形成视情况经取代的杂芳基或杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外，所述杂芳基或杂环基包含4-10个环成员和0-3个选自由O、N和S组成的群组的额外杂原子，所述杂芳基或杂环基视情况进一步经一或多个视情况经取代的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基取代；其中Ra在每次出现时独立地为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时独立地为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re在每次出现时独立地为氢或烷基。
在某些实施例中，本发明定义特别受关注的某些化合物类别。举例而言，特别受关注的一类化合物包括那些具有结构式(IIA)者，其中所述化合物具有如下结构 其中m、p、R1和R4如本文各类别和细类中所定义；且Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外。
另一类特别受关注的化合物包括那些具有结构式(IIB)者，其中所述化合物具有如下结构
其中m、p、R1和R4如本文各类别和细类中所定义；且q为选自1、2或4的整数。
在某些实施例中，对于具有如下结构的式(IIA)化合物 -Cy-(R4)P不为一个下列结构 在某些实施例中，对于式(IIA)化合物，按照定义，下列基团不会同时出现m为1；R1为H且-Cy-(R4)p为一个下列结构 其中R4A为氢、甲基、甲氧基、氯或-NO2且p和R4如上文所定义。
各个上述类别的式(I)和式(II)化合物的许多重要细类需要分开提及，这些细类包括上述类别的细类，其中i)R1在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；其中Ra如在下列子集lxvi)中所定义；ii)出现的R1至少有一个为氢；iii)出现的R1至少有一个为-NO2；iv)出现的R1至少有一个为-NH2；v)出现的R1至少有一个为-COOH、-C(＝O)OCH3、-COCH3、-CONH2、-SO2OH、-SO2CH3、-SO2CF3、-OPO2OH、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHSO2CH3或-NHSO2CF3。
vi)出现的R1至少有一个为卤素；vii)出现的R1至少有一个为视情况经取代的连接有N的杂环基；viii)出现的R1至少有一个为视情况经取代的N-吡咯基；ix)出现的R1至少有一个为脂族基部分；x)出现的R1至少有一个为烷基部分；xi)出现的R1至少有一个为低碳烷基部分；xii)m为1且出现的R1至少有一个为键结至酞嗪酮环的邻位基；xiii)m为1且出现的R1至少有一个为键结至酞嗪酮环的间位基；xiv)R1在每次出现时独立地为氢、-NO2、-NH2、-COOH、-C(＝O)OCH3、-COCH3、-CONH2、-SO2OH、-SO2CH3、-SO2CF3、-OPO2OH、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHSO2CH3、-NHSO2CF3、卤素、视情况经取代的连接有N的杂环基或脂族基部分；xv)R1在每次出现时独立地为氢、-NO2、-NH2、-COOH、-C(＝O)OCH3、-COCH3、-CONH2、-SO2OH、-SO2CH3、-SO2CF3、-OPO2OH、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHSO2CH3、-NHSO2CF3、卤素、视情况经取代的N-吡咯基或低碳烷基部分；xvi)R2和R3独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；或者R2和R3连同与二者连接的氮原子形成视情况经取代的杂芳基或杂环基，高哌啶基除外，所述杂芳基或杂环基包括4-10个环成员及0-3个选自由O、N及S组成的群组的额外杂原子；所述杂芳基或杂环基视情况进一步经一或多个视情况经取代的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基取代；其中Ra如在下列子集lxvi)中所定义；xvii)R2和R3独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；其中Ra如在下列子集lxvi)中所定义；xviii)R2和R3独立地为氢、低碳烷基或芳基；xix)R2和R3独立地为氢或低碳烷基；xx)R2和R3独立地为疏水基团；
xxi)R2和R3独立地为脂族基；xxii)R2和R3独立地为一未经取代脂族基；xxiii)R2和R3独立地为一环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基；xxiv)R2和R3独立地为一未经取代环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基；xxv)R2和R3独立地为-(烷基)芳基；xxvi)R2和R3独立地为一未经取代的-(烷基)芳基；xxvii)R2和R3连同与二者连接的氮原子形成视情况经取代的杂芳基或杂环基，高哌啶基除外，所述杂芳基或杂环基包括4-10个环成员及0-3个选自由O、N及S组成的群组的额外杂原子；所述杂芳基或杂环基视情况进一步经一或多个视情况经取代的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基取代；xxviii)R2和R3连同与二者连接的氮原子形成视情况经取代的吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、吡唑基、吡唑烷基、1，2，3-三唑基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、哌嗪基、吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、二氢吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基或嘌呤基部分；xxix)R2和R3连同与二者连接的氮原子形成包含0-3个选自由O、N及S组成群组的额外杂原子并视情况经取代的6-元杂环基；xxx)R2和R3一起代表视情况经取代的连接有N环的疏水部分；xxxi)R2和R3一起代表经疏水基团(例如，一或多个脂族基)取代的连接有N环的疏水部分；xxxii)R2和R3一起代表视情况经取代的哌啶基环的疏水部分；xxxiii)R2和R3一起代表经疏水基团(例如，一或多个脂族基)取代的哌啶基环的疏水部分；xxxiv)R4在每次出现时独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；其中Ra、Rb、Rc和Rd如在下列子集lxvi)、lxvii)和lxviii)中所定义；xxxv)出现的R4至少有一个为氢；xxxvi)出现的R4至少有一个为疏水基团；xxxvii)出现的R4至少有一个为视情况经取代的脂族基；xxxviii)出现的R4至少有一个为未经取代脂族基；xxxix)出现的R4至少有一个为视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基；xl)出现的R4至少有一个是未经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基、或C6-12炔基；
xli)出现的R4至少有一个为视情况经取代的-(烷基)芳基；xlii)出现的R4至少有一个是未经取代的-(烷基)芳基；xliii)出现的R4至少有一个为-NRbRc；xliv)出现的R4至少有一个是-NH2；xlv)出现的R4至少有一个是C(＝O)ORa；其中Ra如在下列子集lxvi)中所定义；xlvi)出现的R4至少有一个为-CO2H；xlvii)p为≥3且R4在每次出现时独立地为环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基、C6-12炔基或-(C1-6烷基)芳基；xlviii)p为≥3且R4在每次出现时独立地为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、i-丙基或苄基；xlixi)R4在每次出现时独立地为氢、卤素、视情况经取代的脂族基、-NRbRc或-C(＝O)ORa，其中Ra、Rb和Rc如在下列子集lxvi)和lxvii)中所定义；l)R4在每次出现时独立地为氢、卤素、视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基、视情况经取代的-(烷基)芳基、-NH2或-CO2H；li)m是0；lii)m是1；liii)m是2；liv)m是3；lv)m是4；lvi)p是0；lvii)p是1；lviii)p是2；lix)p是3；lx)p是4；lxi)p是5；lxii)p是6；lxiii)q是1；lxiv)q是2；xlv)q是4；lxvi)Ra在每次出现时独立地为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分；lxvii)Rb和Rc在每次出现时独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；lxviii)Rd在每次出现时独立地为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；lxix)Re在每次出现时独立地为氢或烷基；和/或
lx)Cy为一个下列基团 其中q为1、2或4且p和R4如本文各类别和细类中所定义，且R4A是氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；其中Rd如本文各类别和细类中所定义。应理解对于上文及本文所述每个类别和细类，诸如脂族基、杂脂族基、烷基、杂烷基等基团在任何一次或多次出现时可为经取代或未经取代、直线型或支链、饱和或不饱和；脂环族基、杂环基、环烷基、芳基、杂芳基、环脂族基、环杂脂族基在任何一次或多次出现时可为经取代或未经取代。
读者还应了解以上i)到lx)中所述的变体(其中例如，R1-R4、m、p和q)的所有可能的组合都被视作本发明的一部分。因此，本发明涵盖通过采取可产生稳定化合物的下列变量的任何可能排列所获得的任何及所有式I化合物及其细类在以上i)到lx)中所述的R1-R4、m、p和q及进一步针对R1-R4定义的其它变量/取代基(例如，Ra-e等)。
读者应理解特别相关的化合物尤其包括那些可同时形成一或多种上述细类者。借助下列各类化合物说明某些所述细类I)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中p、R1和R4如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
II)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物)
其中p和R4如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个是亲水性基团。
III)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中p和R4如本文各类别和细类中所定义；在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
IV)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中p和R4如本文各类别和细类中所定义；在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
V)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中m、R1和Ra如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，Ra为氢。在某些实施例中，Ra为低碳烷基。在某些实施例中，Ra是亲水性基团。在某些实施例中，Ra为视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。在某些实施例中，Ra为视情况经取代的-(烷基)芳基。
VI)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中m、R1、Rb和Rc如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，Rb和Rc独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，Rb和Rc独立地为亲水性基团。在某些实施例中，Rb和Rc独立地为视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。在某些实施例中，Rb和Rc独立地为视情况经取代的-(烷基)芳基。
VII)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中Cy、p、R1和R4如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
VIII)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中Cy、p和R4如本文各类别和细类中所定义；限制条件为-Cy-(R4)P不为一个下列结构 在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
IX)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物)
其中Cy、p和R4如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
X)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中Cy、p和R4如本文各类别和细类中所定义，限制条件为Cy-(R4)P不为一个下列结构 其中R4A为氢、甲基、甲氧基、氯或-NO2且p和R4如本文各类别和细类中所定义。
在某些实施例中，p为1-4且R4在每次出现时独立地为氢或低碳烷基。在某些实施例中，出现的R4至少有一个为亲水性基团。
XI)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物) 其中Cy、m、R1和Ra如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，Ra为氢。
在某些实施例中，Ra为低碳烷基。
XII)具有下式的化合物(及其医药上可接受的衍生物)
其中Cy、m、R1、Rb和Rc如本文各类别和细类中所定义。在某些实施例中，Rb和Rc独立地为氢或低碳烷基。
在某些实施例中，对于以上化合物类别I-XII，出现的R4至少有一个为疏水基团。在某些实施例中，R4在每次出现时独立地为疏水基团。在某些实施例中，所述疏水基团是脂族基。在某些实施例中，所述疏水基团是未经取代的脂族基。在某些实施例中，所述疏水基团是环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。在某些实施例中，所述疏水基团是未经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。在某些实施例中，所述疏水基团是-(烷基)芳基。在某些实施例中，所述疏水基团是未经取代的-(烷基)芳基。
在某些实施例中，对于以上化合物类别V和VI，m为0-2。在某些实施例中，m为0。在某些实施例中，m为1。
在某些实施例中，对于以上化合物类别I-XII，p为0-2。在某些实施例中，p为0。在某些实施例中，p为1。
本发明式(I)化合物的非限制性实例包括
其中R2和R3没有形成一环的式(II)化合物的实例包括
在某些实施例中，式(II)化合物不具有下列结构 其中-NR2R3部分形成一环(视情况进一步经取代)的式(II)化合物的非限制性实例包括下列化合物
在某些实施例中，式(II)化合物不包括下列化合物
其中R4A为氢、甲基、甲 其中p和R4如本文各类氧基、氯或-NO2别和细类中所定义。
在某些实施例中，式(II)化合物不包括下列化合物，但本发明涵盖这些化合物的组合物和用途 某些上述化合物可包含一个或多个不对称中心，且因此可以各种异构形式存在，例如，立体异构体和/或非对映异构体。因此，本发明化合物和其医药组合物可呈单独的对映异构体、非对映异构体或几何异构体形式，或者可呈立体异构体的混合物形式。在某些实施例中，本发明化合物为对映异构纯化合物。在某些其它实施例中，提供立体异构体或非对映异构体的混合物。此外，本文中所述的某些化合物可具有一个或多个双键，除非另外指出，否则其可作为Z或E异构体存在。本发明另外涵盖呈实质上不含其它异构体的单一异构体形式或者呈各种异构体的混合物(例如，立体异构体的外消旋混合物)形式的化合物。除了上述化合物本身以外，本发明还包括这些化合物的医药上可接受的衍生物和包含一种或多种本发明化合物及一种或多种医药上可接受的赋形剂或添加剂的组合物。
本发明化合物可通过在不同条件下结晶式(I)化合物来制备，且可作为形成本发明一部分的通式(I)化合物的多晶型体的一种或其组合而存在。举例而言，使用用于重结晶的不同溶剂或不同溶剂混合物、通过在不同温度下进行结晶、或通过在结晶过程中使用各种冷却模式(范围在非常迅速到非常缓慢的冷却)可鉴别和/或制备不同的多晶型体。还可通过加热或熔融化合物且随后逐渐或快速冷却来获得多晶型体。可借助固体探针NMR光谱、IR光谱、差示扫描热测量定法、粉末X射线绕射图和/或其它技术测定多晶型体的存在。因此，本发明包括本发明化合物、其衍生物、其互变异构形式、其立体异构体、其多晶型体、其医药上可接受的盐、其医药上可接受的溶剂化物和含有它们的医药上可接受的组合物。
如上文所述，本发明提供具有各种生物性质的新颖化合物。本发明的较佳化合物具有与其中增强HGF/SF活性可为有益的疾病、病况或病症治疗相关的生物活性。
本发明化合物包括那些上文具体陈述及本文所阐述的化合物，且部分地由本文其它地方所揭示的各类、亚属及物种来加以说明。
另外，本发明提供本发明化合物的医药上可接受的衍生物和使用这些化合物、其医药组合物或两者中的任一种与一种或多种额外治疗剂的组合来治疗个体的方法。本发明的某些化合物更详细地陈述于下文中。出于本发明目的，化学元素根据元素周期表(CAS版，化学及物理手册(Handbook of Chemistry and Physics)，第75版，内封面)确定，且特定官能基通常如本文所定义。另外，有机化学的通用原理及特定官能部分陈述于“Organic Chemistry”，Thomas Sorrell，University Science Books，Sausalito1999中，所述文件的全部内容以引用的方式并入本文中。而且，所属领域的普通技术人员应了解，本文所述的合成方法可使用各种保护基团。应了解，本文所述化合物可用任何数量的取代基或官能部分取代。还应理解本发明的某些化合物可以游离治疗用形式或视情况以其医药上可接受的衍生物形式存在。根据本发明，医药上可接受的衍生物包括但不限于医药上可接受的盐、酯或所述酯的盐或前药或投与一有此需要的患者时能够提供(直接或间接)本文另外所述化合物或其代谢物或残余物的本发明化合物的其它加合物或衍生物。
2)医药组合物如上文所述，本发明提供具有治疗其中细胞因子(例如，但不限于HGF/SF、EGF、VEGF或NGF)或其活性具有治疗用途的许多病况或疾病中任一种所用的生物学特性的化合物。
因此，本发明的另一方面提供包含任何一种或多种本文所述化合物(或其前药、医药上可接受的盐或其它医药上可接受的衍生物)且视情况包含医药上可接受的载剂的医药组合物。在某些实施例中，这些组合物视情况进一步包含一或多种额外治疗药剂。或者，本发明化合物可配合一种或多种其它治疗剂的投药而投与给有此需要的患者。举例而言，用于与本发明化合物联合投药或内含于医药组合物中的额外治疗剂可为治疗相同或相关适应症的经批准药剂，或者其可为正在经受食品和药物管理局审批且最终获得批准以用于治疗与HGF/SF活性相关的任何失调症的多种药剂中的任一种。还应了解某些本发明化合物可以治疗用游离形式存在，或适当时作为其医药上可接受的衍生物。根据本发明，医药上可接受的衍生物包括(但不限于)本发明化合物的医药上可接受的盐类、酯类、这些酯类的盐或前药或当投与有需要的患者时其能够直接或间接提供本文中另外所述的化合物或其代谢物或残余物的本发明化合物的其它加合物或衍生物。
一方面，本发明涉及包含包括至少一种式(I)化合物的医药组合物的组合物。
在再一实施例中，本发明涉及包含包括式(II)化合物的医药组合物的组合物。在某些实施例中，本发明不包括包含下列化合物的组合物 在再一实施例中，发明涉及包含包括式(IIA)化合物的医药组合物的组合物。在某些实施例中，本发明不包括包含下列化合物的组合物
其中R4A为氢、甲基、甲其中p和R4如本文各类氧基、氯或-NO2别和细类中所定义。
在再一实施例中，发明涉及包含包括式(IIB)化合物的医药组合物的组合物。在某些实施例中，本发明不包括包含下列化合物的组合物 本文所用术语“医药上可接受的盐”指那些在合理的医学判断范围内适于接触人类及低级动物的组织而不会产生过度毒性、刺激、过敏反应及类似反应且具有合理效益/风险比的盐。医药上可接受的胺盐、羧酸及其它类别的化合物为此项技术所熟知。举例而言，S.M.Berge等人在以引用方式并入本文的J.Pharmaceutical Sciences，661-19，1977中详细地阐述了医药上可接受的盐。所述盐可在本发明化合物的最终分离和纯化过程中当场制备，或者可通过将游离碱或游离酸官能基与下文通常所述的合适试剂反应来分别制备。举例而言，游离碱官能基可与合适的酸反应。此外，当本发明化合物带有酸性部分时，其合适的医药上可接受的盐可包括诸如碱金属盐等金属盐，例如钠盐或钾盐；和碱土金属盐，例如钙盐或镁盐。医药上可接受的无毒性酸加成盐的实例是与无机酸(例如，盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸)或与有机酸(例如，醋酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)或借助此项技术中所用其它方法(例如，离子交换)与氨基形成的盐。其它医药上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天东氨酸盐、苯并磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐和类似物质。代表性碱金属盐或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁和类似金属的盐。适当时，其它医药上可接受的盐包括无毒性铵、季铵和使用诸如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、磺酸低碳数烷酯和磺酸芳酯等抗衡离子所形成的胺阳离子。
此外，本文所用术语“医药上可接受的酯”是指在体内水解的酯且包括那些在人体内易于分解获得母体化合物或其盐的酯。适宜的酯基团包括(例如)那些衍生自医药上可接受的脂族基羧酸的酯基，尤其是衍生自链烷酸、链烯酸、环烷酸及烷二酸的酯基，其中每一烷基或烯基部分较佳具有不超过6个碳原子。特定酯的实例包括甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯及琥珀酸乙酯。
而且，本文所用术语“医药上可接受的前药”指本发明化合物的那些在合理的医学判断范围内适合用于接触人类及低等动物的组织而不具有过度毒性、刺激、过敏反应等，具有合理效益/风险比且对其预期用途有效的前药及本发明化合物可能的两性离子形式。术语“前药”是指在活体内迅速转化以生成上述式的母体化合物的化合物，例如通过血液内的水解作用或本发明化合物的N-脱甲基作用。全面论述提供于T.Higuchi和V.Stella，Prodrugs as Novel Delivery Systems，V.14 of the A.C.S.SymposiumSeries及Edward B.Roche编写的Bioreversible Carriers in Drug Design，AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press，1987中，这两个文献以引用的方式并入本文中。如上所述，本发明的医药组合物另外包含医药上可接受的载剂，本文所用医药上可接受的载剂包括适于所期望特定剂型的任一及所有溶剂、稀释剂、或其它液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠或乳化剂、防腐剂、固体粘结剂、润滑剂及类似物。Remington′s Pharmaceutical Sciences(第16版，E.W.Martin，MackPublishing Co.，Easton，Pa.，1980)揭示各种用于调配医药组合物的载剂及用于制备其的已知技术。除非任何常规载剂介质与本发明化合物不相容(例如通过产生任何不需要的生物效应或另外以有害方式与医药组合物的任何其它组份互相作用)，否则认为其使用属于本发明的范畴内。可用作医药上可接受的载剂的材料的某些实例包括(但不限于)糖类，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，诸如可可油和栓剂蜡；油类，诸如花生油、棉子油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，诸如丙二醇；酯类，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格溶液(Ringer’s solution)；乙醇和磷酸盐缓冲溶液以及其它无毒性的相容性润滑剂，诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、涂布剂、甜味剂、调味剂和芳香剂，根据调配者的判断防腐剂和抗氧化剂也可存在于所述组合物中。
用于经口投药的液体剂型包括但不限于医药上可接受的乳剂、微型乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除该些活性化合物之外，所述液体剂型可包含此项技术中常用的惰性稀释剂，例如，水或其它溶剂、增溶剂及乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇及山梨糖醇酐脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀释剂之外，所述口服组合物还可包括佐剂，例如，润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂及加香剂。
可根据已知技术使用适宜分散剂或增湿剂和悬浮剂来调配注射制剂，例如无菌注射水悬浮液或油悬浮液。所述无菌注射制剂还可为存于医药上可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液、悬浮液或乳液，举例而言，存于1，3-丁二醇的溶液。所述可使用的可接受媒剂和溶剂尤其为水、林格氏溶液、U.S.P.及等渗氯化钠溶液。此外，通常，可使用无菌固定油作为一溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用包括合成单甘油酯或二甘油酯的任何温和的固定油。此外，在可注射制剂中可使用诸如油酸等脂肪酸。
所述可注射调配物可(例如)通过经由细菌截留过滤器过滤或通过纳入杀菌剂来灭菌，所述杀菌剂呈可在使用前溶于或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式。
为了延长药物的作用，通常需要自皮下或肌肉注射来减缓药物的吸收。这个目的可通过使用液体悬浮液或具有弱水溶性的结晶或非晶形物质来达成。那么药物的吸收速率取决于其溶解速率，而此溶解速率又取决于晶体尺寸和结晶形式。或者，非经肠投与药物形式的延迟吸收可通过将所述药物溶解或悬浮于一油性媒剂中来实现。可通过在生物可降解聚合物(例如，聚交酯-聚乙醇酸交酯)中形成药物的微囊基质来制备可注射储积形式。根据药物与聚合物的比例及所用具体聚合物的特性可控制药物释放率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)或聚(酐)。注射用储积调配物还通过将药物包裹入与身体组织相容的脂质体或微型乳液中来制备。
用于直肠或阴道投药的组合物较佳为栓剂，其可通过将本发明化合物与适宜无刺激性赋形剂或载剂(例如，可可油、聚乙二醇或栓剂蜡)进行混合来制备，所述赋形剂或载剂在环境温度下为固体但在体温下为液体，因而其可在直肠或阴道腔内融化并释放所述活性化合物。
用于经口投药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒。在所述固体剂型中，活性化合物与至少一种医药上可接受的惰性赋形剂或载剂(例如，柠檬酸钠或磷酸氢钙)和/或下列混合a)填充剂或扩充剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘结剂，例如，羧甲基酸纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖及阿拉伯胶，c)保湿剂，例如甘油，d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐及碳酸钠，e)溶液阻滞剂，例如，石蜡，f)吸收促进剂，例如，季铵化合物，g)润湿剂，例如，鲸蜡醇及甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂，例如，高岭土及膨润土，及i)润滑剂，例如，滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，及其混合物。在胶囊、片剂及丸剂情况下，所述剂型还可包含缓冲剂。
在使用诸如乳糖(lactose或milk sugar)及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质及硬质填充明胶胶囊中，还可使用类似类型的固体成份作为填充剂。固体剂型的片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂及颗粒可用包膜及包壳制备，例如肠溶包膜及医药调配技术中熟知的其它包膜。其视情况可含有遮光剂且也可具有视情况以延迟方式仅释放活性成份或优选地在肠道的某部分中释放活性成份的组成。可使用的包埋用组份的实例包括聚合物质和蜡。在使用诸如乳糖(lactose或milk sugar)及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质及硬质填充明胶胶囊中，还可使用类似类型的固体组份作为填充剂。
所述活性化合物还可为含有一或多种上述赋形剂的微囊形式。可使用诸如肠溶包膜、控制释放包膜及医药调配技术中熟知的其它包膜等包膜和包壳制备固体剂型片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒。在这些固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀释剂(例如，蔗糖、乳糖和淀粉)混合。在正常实践中这些剂型还可包含除惰性稀释剂以外的其它物质，例如制片润滑剂和诸如硬脂酸镁和微晶纤维素等其它制片助剂。如果为胶囊、片剂和丸剂，则所述剂型还可包括缓冲剂。其可视情况含有遮光剂，且也可具有视情况以延迟方式仅释放活性成份或优选地在肠道的某部分中释放活性成份的组成。可使用的包埋用组份的实例包括聚合物质及蜡。
本发明包括本发明化合物的医药上可接受的局部用调配物。本文中所用的术语“医药上可接受的局部用调配物”意指对于通过向表皮投与调配物来皮下投与本发明化合物而言，在医药上可接受的任何调配物。在本发明的某些实施例中，局部用调配物包含一载剂系统。医药上有效的载剂包括(但不限于)溶剂(例如，醇类、多元醇类、水)、乳油、洗剂、软膏、油、硬膏、脂质体、粉剂、乳剂、微型乳剂和缓冲溶液(例如，低渗或缓冲盐水)或此技术领域中已知的用于局部投与药物的任何其它载剂。参照此项技术中的标准参考文本可更全面地列举此项技术已知的载剂，举例而言，由Mack Publishing公司(Easton，Pa.)出版的Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16版(1980)及第17版(1985)，这两个文本的揭示内容全部以引用的方式并入本文中。在某些其它实施例中，本发明的局部用调配物可含有赋形剂。此项技术中已知的任何医药上可接受的赋形剂可用于制备本发明的医药上可接受的局部用调配物。可包括于本发明的局部用调配物中的赋形剂的实例包括(但不限于)防腐剂、抗氧化剂、保湿剂、软化剂、缓冲剂、增溶剂、其它渗透剂、皮肤防护剂、表面活性剂和推进剂和/或与本发明化合物组合使用的其它治疗剂。适宜的防腐剂包括(但不限于)醇类、季胺类、有机酸类、对羟基苯甲酸类和酚类。适宜的抗氧化剂包括(但不限于)抗坏血酸和其酯、硫酸氢钠、丁基化羟基甲苯、丁基化羟基苯甲醚、生育酚及诸如EDTA和柠檬酸等螯合剂。适宜的保湿剂包括(但不限于)甘油、山梨醇、聚乙二醇、脲和丙二醇。用于本发明的适宜缓冲剂包括(但不限于)柠檬酸、盐酸和乳酸缓冲剂。适宜的增溶剂包括(但不限于)盐酸季铵、环糊精、苯甲酸苄基酯、卵磷脂和聚山梨醇酯。可用于本发明的局部用调配物中的适宜皮肤防护剂包括(但不限于)维生素E油、尿囊素、二甲硅油、甘油、矿脂和氧化锌。
在某些实施例中，本发明的医药上可接受的局部用调配物至少包含本发明化合物和渗透增强剂。局部用调配物的选择将取决于若干因素，包括待治疗的病况、本发明化合物和所存在的其它赋形剂的物理化学特征、其在调配物中的稳定性、可用的制造设备和成本限制。本文中所用的术语“渗透增强剂”意指能够输送药理活性化合物通过角质层并进入表皮或真皮的药剂，较佳为有少量的全身吸收或没有全身吸收。已评估了多种化合物增强药物通过皮肤的渗透速率的有效性。参见(例如)PercutaneousPenetration Enhancers，Maibach H.I.和Smith H.E.(编)，CRC Press，Inc.，Boca Raton，Fla.(1995)(其研究各种皮肤渗透增强剂的使用和测试)和Buyuktimkin等人，ChemicalMeans of Transdermal Drug Permeation Enhancement in Transdermal and Topical DrugDelivery Systems，Gosh T.K.，Pfister W.R.，Yum S.I.(编)，Interpharm Press Inc.，BuffaloGrove，111.(1997)。在某些示例性实施例中，用于本发明的渗透剂包括但不限于甘油三酯(例如，豆油)、芦荟组合物(例如，芦荟凝胶)、乙醇、异丙醇、辛基苯基聚乙二醇、油酸、聚乙二醇400、丙二醇、N-癸基甲基亚砜、脂肪酸酯(例如，肉豆蔻酸异丙酯、月桂酸甲酯、单油酸甘油酯和丙二醇单油酸酯)和N-甲基吡咯烷酮。
在某些实施例中，组合物可呈软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾、吸入剂或贴片形式。在某些示例性实施例中，本发明组合物的调配物为乳膏，其可进一步含有饱和或不饱和脂肪酸，诸如硬脂酸、棕榈酸、油酸、棕榈油酸、十六醇或油醇，其中硬脂酸是尤佳的。本发明的乳膏还可含有非离子型表面活性剂，例如，聚氧-40-硬脂酸盐。在某些实施例中，在无菌条件下将活性组份与医药上可接受的载剂和可能需要的任何必需防腐剂或缓冲剂混合。眼用调配物、滴眼剂和眼用滴剂也属于本发明的范围。本发明还包括用于眼内投药的调配物。此外，本发明涵盖使用透皮贴片，其具有以控制方式将一化合物递送至身体的附加优点。通过将化合物溶解或分散于适当介质中来制造这些剂型。如上所述，还可使用渗透增强剂增加化合物穿过皮肤的通量。可通过提供速率控制膜或通过将所述化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制所述速率。
还应了解可调配本发明化合物和医药组合物且其可用于组合治疗中，也就是说所述化合物和医药组合物可与一种或多种其它所需要治疗剂或医学程序一起调配或与其同时、在其之前或在其之后投与。拟在组合方案中使用的特定治疗(治疗剂或程序)组合需考虑期望治疗和/或程序的相容性及待达成的期望治疗作用。还应了解所用疗法对相同病症可达成所需效应(举例而言，本发明化合物可与一消炎剂同时投与)，或者其可达成不同效应(例如，控制任何不利效应)。在非限制性实例中，一种或多种本发明化合物可与至少一种细胞因子、生长因子或其它生物制品(诸如干扰素，例如α干扰素)一起调配，或者至少与另一小分子化合物一起调配。在治疗上可与本发明化合物组合使用的医药剂的非限制性实例包括抗病毒剂和抗纤维化剂，例如干扰素α，干扰素α与利巴韦林(ribavirin)、拉米夫定(Lamivudine)、阿德福韦酯(AdefovirDipivoxil)的组合；干扰素γ；抗凝剂，例如，肝素和华法林；抗血小板剂，例如阿司匹林、噻氯匹定(ticlopidine)和氯吡格雷(clopidogrel)；参与增殖的其它生长因子，例如，VEGF和FGF及这些生长因子的类似物；抗细胞凋亡剂；及运动和形态发生剂。
在某些实施例中，本发明的医药组合物进一步包含一种或多种额外的治疗活性成份(例如，消炎剂和/或姑息剂)。出于本发明的目的，术语“姑息剂”是指集中在减轻疾病症状和/或治疗方案的副作用的治疗，但不是治愈性的。举例而言，姑息治疗包括止痛剂、止吐药物和抗恶心药物。
3)研究应用、临床应用、医药学应用和治疗方法研究应用根据本发明，可在用于鉴定化合物具有下列能力的此项技术中已知的任何可行测试中测试本发明化合物(1)诱导内皮细胞生长及血管生成，(2)诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞及少突神经胶质细胞等其它细胞增殖，(3)诱导轴突生长，(4)诱导髓磷脂生成，(5)抑制细胞凋亡，(6)减少纤维化，(7)激活HGF信号传导路径，或(8)呈现某些或所有这些活性。举例而言，所述检定可为细胞性或非细胞性、活体内或活体外、高产量或低产量模式等。
因此，一方面，尤其受关注的本发明化合物包括那些具有类HGF/SF活性的化合物，其呈现HGF/SF活性；呈现模拟或激发HGF/SF活性或HGF/SF受体c-met的能力；刺激细胞增殖，且尤其是内皮细胞增殖；呈现血管生成活性、促进新血管形成；诱导少突神经胶质细胞增殖及轴突生长；诱导髓磷脂生成；保护细胞免于凋亡；及减少纤维化。另一方面，尤其受关注的本发明化合物包括那些具有模拟其它细胞因子(包括但不限于EGF、VEGF和NGF)的活性、激活其受体、激活其受体的信号传导路径及呈现多种生物活性的化合物。
本发明化合物的临床应用又一方面，本发明提供使用式(I)化合物或包含式(I)化合物的组合物预防或治疗如下病况和疾病的方法其中需要促进或模拟细胞因子的活性或者可由激活、激发或诱导c-met或其它受体酪氨酸激酶发生磷酸化产生的生物活性。在一较佳实施例中，所述活性为诱导内皮细胞增殖或血管生成。在另一实施例中，所述活性为诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞等其它细胞增殖。在又一实施例中，所述活性为诱导神经轴突生长。在再一实施例中，所述活性为诱导髓磷脂生成。在再一实施例中，所述活性为保护细胞免于凋亡。
在再一实施例中，所述活性为抗纤维化。本文所述化合物可用于治疗如下病况和疾病其中诱导内皮细胞增殖或治疗性血管生成是有益的，其中诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞及少突神经胶质细胞等细胞增殖是有益的，其中诱导轴突生长是有益的，其中诱导髓磷脂生成是有益的，其中保护细胞免于凋亡是有益的，其中抗纤维化是有益的或其中所有或某些上述活性是有益的；所述病况和疾病包括但不限于纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化、多发性硬化或各种神经退化性疾病。在某些实施例中，所述方法用于治疗选自下列的疾病或病况或减轻这些疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1抗胰蛋白酶缺乏)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风；外伤性脑部损伤、脊髓损伤、及其它脑血管疾病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；其它心血管疾病；糖尿病；肾衰竭；肾纤维化、肾纤维化或特发性肺纤维化；多发性硬化；及神经退化性疾病，所述神经退化性疾病为(例如但不限于)异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病、苯丙酮尿症、卡纳万病、佩-梅二氏病及亚历山大氏病。在某些示例性实施例中，所述方法是用于治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾和其它组织或器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注变得正常；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；治疗纤维化性疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤及移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。还可使用所述化合物预防(prophylaxis或preventing)个体(且尤其是可能会呈现上述疾病和病况风险因素的个体)患疾病。在上述病况中尤其常见的是，通过促进内皮细胞生长、血管生成或新血管形成于其中产生益处。另外，本发明化合物有益于提供由激活、激发、磷酸化HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶或以任何其它方式激活HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶的信号传导路径而产生的生物活性。
又一方面，本发明提供使用式(II)化合物或包含式(II)化合物的组合物预防或治疗如下病况和疾病的方法其中需要促进或模拟细胞因子的活性或者可由激活、激发或诱导c-met或其它受体酪氨酸激酶发生磷酸化而产生的生物活性。在一较佳实施例中，所述活性是诱导内皮细胞增殖或血管生成。在另一实施例中，所述活性是诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞等其它细胞增殖。在又一实施例中，所述活性是诱导神经轴突生长。在再一实施例中，所述活性为诱导髓磷脂生成。在再一实施例中，所述活性为保护细胞免于凋亡。在再一实施例中，所述活性是抗纤维化。本文所述化合物可用于治疗如下病况和疾病其中诱导内皮细胞增殖或治疗性血管生成是有益的，其中诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞及少突神经胶质细胞等细胞增殖是有益的，其中诱导轴突生长是有益的，其中诱导髓磷脂生成是有益的，其中保护细胞免于凋亡是有益的，其中抗纤维化是有益的或其中所有或某些上述活性是有益的；所述病况和疾病包括但不限于纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化、多发性硬化或各种神经退化性疾病。.在某些实施例中，所述方法是用于治疗选自下列的疾病或病况或减轻这些疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1抗胰蛋白酶缺乏)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风；外伤性脑部损伤、脊髓损伤、及其它脑血管疾病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；其它心血管疾病；糖尿病；肾衰竭；肾纤维化、肾纤维化或特发性肺纤维化；多发性硬化；及神经退化性疾病，所述神经退化性疾病为(例如但不限于)异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病、苯丙酮尿症、卡纳万病、佩-梅二氏病及亚历山大氏病。在某些示例性实施例中，所述方法是用于治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾和其它组织及器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注变得正常；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；治疗纤维化性疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤及移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。还可使用所述化合物预防(prophylaxis或preventing)个体(且尤其是可能会呈现上述疾病和病况风险因素的个体)患疾病。在上述病况中尤其常见的是，通过促进内皮细胞生长、血管生成或新血管形成于其中产生益处。另外，本发明化合物有益于提供可由激活、激发、磷酸化HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶或以任何其它方式激活HGF/SF受体、c-met或其它受体酪氨酸激酶的信号传导路径而产生的生物活性。
1.纤维化肝病肝纤维化是肝对慢性肝损伤的结疤反应；当纤维化发展为硬化时，可产生病态并发症。实际上，晚期肝纤维化或硬化在美国为第七大死亡主导原因，且在全世界范围内困扰几亿人；在美国因晚期肝病导致的死亡被认为在接下来的10-15年内将翻三倍，主要是由于C型肝炎流行病1。除C型肝炎病毒以外，许多其它慢性肝损伤形式也导致晚期肝病和硬化，包括诸如B型肝炎和δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1抗胰蛋白酶缺乏)等其它病毒。
肝纤维化的治疗迄今为止已集中于消除初级损伤。就肝外阻塞而言，胆减压为推荐治疗模式，而患有威尔森氏病的患者是用乙酸锌治疗。在慢性C型肝炎感染中，已经使用干扰素作为具有有限反应的抗病毒治疗当单独使用时，有约20％出现反应或者当与利巴韦林组合使用时有约50％出现反应。除低水平的反应以外，具有或不具有利巴韦林的干扰素治疗均与多种严重的副作用相关，包括嗜中性白细胞减少、血小板减少、贫血、抑郁、全身疲劳和类流感症状，其十分显著以至于需要终止治疗。对诸如B型肝炎、自身免疫性肝炎和威尔森氏病等其它慢性肝病的治疗还与许多副作用相关，而原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎和非酒精性脂肪肝疾病除肝移植以外无有效治疗。
治疗纤维化而不是仅仅治疗潜伏病因的优势在于抗纤维化治疗应广泛适用于全范围的慢性肝病。虽然移植为当前最有效的肝纤维化的治愈方法，但支持证据表明不仅纤维化、而且硬化都是可逆的。不幸地是，当诸如抗病毒剂等许多疗法由于其副作用概况而不再能够安全使用时，患者通常会患晚期纤维化和硬化。这些患者将极大程度地受益于有效的抗纤维化治疗，因为削弱或逆转纤维化可预防诸如感染、腹水和肝功能丧失等许多晚期并发症并排除肝移植需要。本发明化合物有益于上述病况的治疗，且通常为这个病况和其它器官或组织的血管生成和刺激内皮细胞增殖。
2.肝缺血-再灌注损伤目前，移植是肝纤维化的最有效的治疗策略。然而，虽然过去十年中在临床结果上存在显著改良，但肝功能不足或衰竭仍然为移植手术后的显著临床问题。对肝的缺血-再灌注(IR)损伤为主要的影响移植结果的非同种抗原依赖性组份，从而引起高达10％的早期器官衰竭且导致更高的急性及慢性排斥发生率。此外，假定对于移植而言存在显著的器官短缺，则手术必须考虑尸体或脂肪变性的移植物或其它勉强够格的肝脏，其对再灌注损伤具有较高的敏感性。除移植手术以外，肝IR损伤表现在诸如组织切除(普林格操作)和出血性休克等临床情形中。
对缺血后肝脏的损害代表肝细胞损伤中达到顶点的一系列过程。缺血可激活库普弗细胞(Kupffer cell)，其为初始再灌注时期中血管反应性氧物质(ROS)形成的主要来源。除了由库普弗细胞诱导的氧化剂应力以外，随着缺血事件时间增长，由黄嘌呤氧化酶且具体而言由线粒体在细胞内产生ROS也可有助于再灌注中的肝功能不足和细胞损伤。诸如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽、α生育酚和β胡萝卜素等内源性抗氧化剂化合物可全部限制氧化剂损伤的效应，但这些系统可变得被大量ROS迅速压倒。Lemasters和同事的工作已表明除形成ROS以外，细胞内钙稳态失衡是肝IR损伤的关键贡献者。这个背景中的肝细胞和内皮细胞的细胞死亡的特征为细胞和其细胞器膨胀、细胞内容物释放、嗜曙红细胞增多、核溶解和炎症(肿胀样坏死的特征)诱导。更近的报导表明肝细胞还通过细胞凋亡而死亡，其形态学特征为细胞收缩、具有完整细胞器的细胞凋亡体形成和发炎反应不存在。
实际上，使IR损伤的副作用降至最小可显著增加可成功地经受肝移植的患者数目。减少细胞死亡和/或增强器官再生的药理学干预代表改良肝移植、在血管隔离下的肝手术和创伤中的临床结果的治疗手段，且因此可降低接受者/患者发病率和死亡率。本发明化合物有益于上述病况的治疗。
3.脑梗塞中风和脑血管疾病在美国是发病和死亡的主导原因每年至少有600,000名美国人发展成中风且其中有约160,000名死亡。对中风的病理生理基础的研究已产生了用于预防和治疗的新型范例，但将这些手段转化成改良的临床结果已经被证实是令人痛苦地缓慢。预防策略主要集中于降低或控制诸如糖尿病、高血压、心血管疾病和生活方式等风险因素；在患有严重狭窄的患者中，可指定颈动脉内膜切除术。在研究上使用大脑血管成形术，但在冠脉血管成形术之后所观察到的高再狭窄率表明这种手段可对许多患者具有不可接受的风险。治疗策略主要集中于用于减少缺血半暗区(围绕梗塞的可逆受损组织的区域)中损伤的急性治疗。已显示血栓溶解治疗可改良对缺血半暗区的灌注，但其必须在梗塞发作3小时内投与。若干种可阻断特定组织对缺血的反应的神经保护剂是有前途的，但没有一种经证实可用于临床应用。虽然这些治疗手段限制缺血半暗区中的损害，但它们不针对归因于封闭动脉的不足供血的潜在问题。另一策略是诱导缺血区中形成侧血管；此自然发生于慢性缺血病况中，但通过治疗性血管生成刺激血管化作用具有潜在的治疗益处。
在显像方面的最近进展已证实了进展性中风的临床观察的病理药理基础。对动脉阻塞区域中受损脑血流量(CBF)的分析证实了如下假设非常低的CBF的中心区域(缺血核心)是不可逆地被损害，但其中CBF降低较少的周围或混合区域(缺血半暗区)中的损害可受及时的再灌注所限制。Plate最近回顾了表明治疗性血管生成可适用于治疗或预防中风的证据。首先，对中风患者的脑血管系统的分析显示血管密度与存活率之间有很强的相关性及较与对侧区域相比，缺血半球中具有较高的微血管密度。其次，大脑缺血的实验模型中的研究表明在缺血大脑组织中可快速诱导诸如血管内皮生长因子(VEGF)或HGF/SF等血管生成生长因子的表达。第三，投与VEGF或HGF/SF可减少动物模型内的神经元损害和梗塞体积。类似证据提供了发展用于治疗周边及心肌缺血的治疗性血管生成的基本原理，已显示其在人的早期研究中产生临床改良。本发明化合物有益于上述病况的治疗。
4.缺血性心脏病在美国为发病和死亡的主导原因，其每年以预期超过3000亿美元/年的花费困扰数百万的美国人。正在研发众多药理学及干预手段以改良缺血性心脏病的治疗，包括减少可变更的风险因素、改良的血管再形成程序和用于终止发展和/或诱导动脉粥样硬化复发的治疗。最激动人心的治疗心肌缺血的研究领域之一为治疗性血管生成。最近的研究证实以下观念通过基因传递或作为重组蛋白来投与血管生成生长因子可通过新血管形成而增加营养物灌注。新近发展的补充侧血管构成经封闭自然动脉周围的内源性旁通管，从而改良对缺血性组织的灌注。某些经最好研究的具有血管生成活性的细胞因子为血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝细胞生长因子/分散因子(HGF/SF)。本发明化合物有益于上述病况的治疗。
而且，可通过在作为血管成形术程序一部分的留置装置(例如，插入冠状动脉中以保持其开放的血管内支架)中或其上纳入化合物来发挥本发明化合物在心脏病领域中的抗纤维化活性优势。所述装置可涂布有含一或多种本发明化合物的受控释放调配物(视情况含有其它药剂)以防止或阻止所述装置纤维化和动脉再狭窄。本发明化合物的抗纤维化活性同样可以类似方式用于体内其它地方所用装置。
5.肾病慢性肾功能不足是一种最终会导致急性肾衰竭且需要透析作为干预和肾移植作为唯一有效治愈方法的渐进衰退性病症。肾功能不足的引发性病症包括缺血、糖尿病、潜伏性心血管疾病或与某些化学治疗剂、抗生素和放射性对比剂相关的肾毒性。大多数的晚期病理变化包括大范围的纤维素生成、上皮萎缩和发炎细胞渗入肾中。
急性肾衰竭通常为包括糖尿病或肾缺血的疾病的并发症，诸如单侧肾切除术等程序的并发症，或作为用于治疗疾病所投与治疗剂的副作用。举例而言，广泛开作处方的抗肿瘤药物顺-二胺二氯铂(顺铂)具有副作用(包括肾毒性及肾功能不足的高发病率)，主要形式为导致受损肾小球过滤作用的肾小管损害。投与庆大霉素(一种氨基糖苷抗生素)或环孢霉素A(一种有效的免疫抑制化合物)可引起类似的肾毒性。这些有效药物的严重副作用限制其应用。对于在投与肾毒性药物后保护肾功能且增强肾再生作用的药剂的开发将对众多患者，特别是那些恶性肿瘤患者具有实质益处，且可能允许实现这些药物最大的治疗潜力。本发明化合物有益于上述肾病的治疗。
6.肺纤维化特发性肺纤维化(IPF)是大部分慢性间质性肺病的原因，且其经估算的发病率为每年100,000人中有10.7例，经估算的死亡率为50-70％。IPF的特征为胶原蛋白在具有未知病因的肺中的异常沉积作用。尽管致病后遗症的精确序列是未知的，但疾病发展涉及上皮损伤及激活、有区别的上皮下侧成纤维细胞/成肌纤维细胞病灶的形成和过度的细胞外基质积聚。在这个病理过程的发展之前是通常受巨噬细胞和淋巴细胞支配的发炎反应，其是由趋化粘附因子的局部释放和细胞表面黏着分子的上调来调节。肺损伤导致血管舒张和血浆蛋白泄漏入间质及肺泡空间，以及激活凝血级联系统且沉积纤维蛋白。成纤维细胞迁移入这个临时的纤维蛋白基质中，于其中它们合成细胞外基质分子。在非病原性病况中，过量的纤维蛋白通常由血纤维蛋白溶酶降解，所述血纤维蛋白溶酶为在基质金属蛋白酶(MMP)的激活作用中也起作用的蛋白酶。经激活的MMP降解细胞外基质且参与纤维蛋白去除，从而导致清除肺泡空间且最终恢复受损组织。然而，在病理病症中，这些过程可导致肺结构中渐进的及不可逆的变化，从而导致渐进性呼吸机能不全和相对短的时期内几乎普遍的终端结果。纤维化为各种肺病症的最终常见路径，且在本文中肺纤维化的诊断表明识别出复杂的异常修复过程的发展晚期。虽然许多研究已集中于引发纤维化化反应的发炎机制，但细胞外基质的合成和降解代表疾病的中心事件。这个过程呈现治疗性干预的非常有吸引力的部位。
IPF过程的特征为渐进性呼吸机能不全，从而导致在病症发作3到8年内死亡。一般而言，对间质性肺病且具体而言对特发性肺纤维化的治疗是困难的、不可预知的且令人不满意的。已尝试使用消炎治疗以逆转炎症、减缓、终止疾病发展及延长生存。皮质类固醇为最频繁使用的消炎剂且作为IPF治疗的主要支持已经历了超过40年，但这种手段的功效是未经证实的且毒性是实质性的。尚未有研究将匹配的患者中皮质类固醇治疗的不同剂量或持续时间进行比较。包括异类的患者群体、包含具有组织实体而不是通常的间质性肺炎的患者、客观缺乏、经确认的终点和不同的“反应”标准在内的若干因素使得治疗功效的解释很模糊。诸如硫唑嘌呤(Azathioprine)和环磷酰胺等细胞毒素药物也已与低剂量口服皮质类固醇组合使用。这些治疗的结果在无改良到显著延长生存之间变化。总而言之，当前可用的用于肺纤维化的治疗为次最佳的。在肺纤维化动物模型的使用和发炎反应的细胞及分子生物学的最新进展中出现了有效的新型疗法。这些治疗涉及使用在纤维化反应中精心设计的细胞因子、氧化剂和生长因子。虽然使用较新的治疗策略，但对于间质性肺病患者的总体预后不具有可以计量的变化，且群体幸存率在过去30年保持不变。γ干扰素(IFN)在某些患者的IPF治疗中可能是有效的，但其作用是有争议的。文献表明IFN-γ可涉及硅肺的气道窄小病。其它文献显示γ干扰素可调节由博莱霉素(bleomycin)诱导的肺部炎症及纤维化。最近，肝细胞生长因子(HGF)(也称作分散因子(SF))已作为发展抗纤维化剂的引人注意的对象出现。在其它纤维化疾病中，本发明化合物有益于上述病况的治疗。
7.脊髓损伤据估计脊髓损伤(SCI)的年发病率(不包括那些死于这种病的人)约为11,000新例/每年。据估计2003年12月，美国患有SCI的人口数量约为243,000人。在初期损伤后，那些患病者中约有一半将仍然在脊髓损坏位置以下完全瘫痪。另一半，所述损坏为“不完全”且某些患者可运动和/或有感觉。那些伤者中仅有17％的机能恢复到足够重新行走。脊髓损坏部位越靠上，则发展为瘫痪的可能性越大且死亡率越高。受调查的脊髓损伤者中有一半是四肢麻痹的(四肢全部瘫痪)且一半为截瘫的(两条腿瘫痪)。本发明化合物有希望作为一种新颖手段用于SCI的临床管理，这是因为这些化合物可减少神经细胞死亡、促进神经细胞增殖、分散、轴突生长及SCI后功能恢复。
8.促进血管生成成功地治疗上述疾病的基础是诱导内皮细胞增殖及形成新血管以恢复缺血和纤维化组织中的血管。如上所述，最近的研究证实以下观念通过基因传递或作为重组蛋白来投与血管生成生长因子可通过新血管形成而增加营养物灌注。新近发展的补充侧血管构成经封闭自然动脉周围的内源性旁通管，从而改良对缺血性组织的灌注。某些经最好研究的具有血管生成活性的细胞因子为血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝细胞生长因子/分散因子(HGF/SF)。本发明化合物有益于上述病况的治疗。
9.多发性硬化这些疾病中最常见的是多发性硬化(MS)，其通常在生命的第20年与第50年之间时呈现。当前估计全世界有约2,500,000人患有MS，其中在美国有250,000至350,000例，在加拿大有50,000例，在德国有130,000例，在大不列颠有85,000例，在法国有75,000例，在意大利有50,000例，在瑞士有11,000例。
MS侵袭中枢神经系统(CNS)的白质。在其典型的表现(所有病例的90％)中，其特征为复发/缓解期交替出现，其中缓解期持续时间随时间变短。其症状包括痉挛性下肢轻瘫、不稳定步态、复视和失禁的任何组合。本发明化合物可用于治疗MS。
10.遗传性神经退化性疾病此类疾病包括8种经鉴定有脑白质营养不良的疾病异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病、苯丙酮尿症、卡纳万病、佩-梅二氏病和亚历山大氏病。前6种为贮积病。一种酶的缺乏或功能失常会形成一种有毒的化学物质。在佩-梅二氏病中，由于产生CNS髓磷脂碱性蛋白质的基因发生突变，因此不会形成髓磷脂(髓磷脂形成障碍)。众人仍不知亚历山大氏病的病因学。
遗传性髓磷脂形成障碍(通常易于在婴儿或幼童中出现)的临床过程是悲剧性的。先前正常的儿童在看、听、说和行方面进步缓慢。他们的结局同样是悲剧性的在几年内死亡。
11.周边血管疾病周边血管疾病(PVD)是一种有可能造成丧失肢体或甚至是丧失生命的近似流行病况。PVD表现为由原有的动脉粥样硬化(可能很快就增加有栓塞或血栓)造成的组织灌注不足。许多患有PVD的人可正常地生活；然而，在诸如急性肢体缺血的背景中，这种大流行疾病可威胁生命并可能需要紧急干预以最小化发病率和死亡率。
PVD(亦称作闭塞性动脉硬化症)主要是由动脉粥样硬化引起的。粥样斑是由与蛋白质结合的胆固醇核心与纤维性血管内覆盖物构成。动脉粥样硬化的过程可逐渐发展到完全阻塞中等或大动脉。所述疾病通常为阶段性的，患者与患者之间有明显的不同。当血栓、栓塞或急性创伤危及灌注时，可迅速表现出血管疾病。
血栓形成通常具有动脉粥样性质且与上肢相比其更经常地发生于下肢中。许多因素使患者易患血栓。这些因素包括败血症、低血压、低排血、动脉瘤、主动脉壁夹层形成、旁路移植物和动脉腔管的潜在动脉粥样硬化狭窄。
本发明化合物可用于治疗PVD。
示例性测试可于各种研究中证实本发明化合物对上述病症和疾病的功效或有益于其预防或治疗的潜力，其范围为在体内所评估的生化效应和对培养中细胞的效应到疾病的活体内模型，其中可观察且测量疾病的直接临床表现，或者其中发生经确定涉及疾病的引发或发展的早期结构和/或功能事件。本发明化合物对于多种疾病和病症的正面效应已在各种这些测试和模型中得以证实。按照本文所述指导，所属领域的人可容易地确定本发明化合物是细胞因子模拟物且其可以与细胞因子相同的方式用于治疗。
1.细胞增殖、髓磷脂生成和轴突生长的体外刺激a.细胞增殖的刺激.本发明化合物可诱导人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)、猴子支气管上皮细胞、神经细胞、施万细胞和少突神经胶质细胞增殖，如使用(例如)[3H]-胸苷纳入方法测量得。
b.轴突生长的刺激.在烧瓶中的完全培养基(含有10％血清)中播种人类皮质神经细胞(HCN-2来自ATCC)并将其培育24小时。将所述培养基变成一含有1％血清的培养基并加入化合物。用所述化合物将所述细胞培育72小时，继而观测轴突生长。
c.髓磷脂生成的刺激.本发明化合物在体外可通过施万细胞诱导髓磷脂生成。通过用氟髓磷脂染色来评定髓磷脂生成。
2.细胞信号传导a.受体和信号传导蛋白的磷酸化.在人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)、猴子支气管上皮细胞、MDCK细胞和施万细胞中，本发明化合物可诱导c-met和其它受体的磷酸化。通过西方点渍分析使用对靶蛋白有特异性的抗体进行测试。
b.受本发明化合物诱导的细胞内信号传导.在细胞中，所述化合物可诱导细胞外受体激酶(ERK)发生磷酸化，如通过西方点渍分析所测得。
3.基因表达a.减少纤维化标记的表达。化合物在大鼠肾脏成纤维细胞中抑制αSMA的表达。
4.细胞凋亡.
a.血清饥饿、过氧化氢、多柔比星或乙醇可导致内皮细胞和其它细胞凋亡，当使用所述化合物处理所述细胞时。通过annexin V染色测量细胞凋亡程度和所述化合物的保护效应。
5.血管生成a.主动脉环测试.将来自大鼠的胸动脉环内埋于Matrigel中并于存在或不存在本发明化合物的情况下生长5天。用本发明化合物处理可造成所述环的长出物增加。
b.活体内Matrigel测试.将混合有本发明化合物或媒剂的Matrigel注入C57BL/6小鼠的腹部皮下组织中。10天后收集时，发现所述化合物诱导血管形成Matrigel塞，表明所述化合物可在体内发挥其血管生成效应。
6.对细胞迁移的影响测试表明本发明化合物对细胞迁移有下列效应a.诱导内皮细胞迁移.
b.增加施万细胞迁移c.减少单核细胞迁移7.肝病模型a.肝星状细胞内的抗纤维化活性.相对于显著的抗纤维化活性，经HGF/SF或本发明化合物处理的血清饥饿性(激活)LX2细胞(永生化人肝星状细胞系)显示胶原蛋白ImRNA表达以及其它纤维化性标记基因表达的减少。
b.肝病终点。硫代乙酰胺(TAA)-诱导的纤维化大鼠模型及纤维化大鼠胆管结扎模型在许多功能和组织测试中皆显示受本发明化合物的改良总体形状、质量、门脉压力、腹水压力、酶(AST、ALT)、胶原蛋白含量、间质性纤维化及诸如胶原蛋白1、α-平滑肌肌动蛋白和MMP-2等纤维化标记基因的表达。
8.防止肾功能不足a.临床模型动脉阻塞。在患有暂时性单侧肾动脉阻塞的小鼠模型中，本发明化合物显示可恢复受损肾脏的功能。
b.防止由HgCl2诱导的肾脏损伤.在此模型中，用高剂量的HgCl2对小鼠进行注射并将其分成若干个治疗小组。测量血清肌酸酐、BUN和肾小管坏死的发展以指示正面临床活性。
c.防止输尿管阻塞.在暂时性单侧肾动脉阻塞的小鼠模型中检查本发明化合物对于输尿管阻塞继发性肾损伤的效应。对粘连蛋白、增殖细胞核抗原和TUNEL(用于细胞凋亡的评定)进行免疫组织化学染色。还进行三色染色以评定作为间质性纤维化指标的胶原蛋白形成程度。
d.保护大鼠免于多柔比星-诱导的肾纤维化。本发明化合物在此模型中可减弱肾功能不足并减少间质胶原蛋白积聚。
9.脑梗塞/中风模型a.脑组织中的神经保护效应.以中大脑动脉阻塞(MCAO)诱导大鼠的脑梗塞，24小时。以腹腔注射投与测试化合物或媒剂。然后通过用四唑盐化合物染色来测试大脑部分的细胞死亡。正常的大鼠脑呈现归因于TTC减少的红色染色，而含死亡细胞的区域是白色的。通过使用激光都卜勒成像仪(laser Doppler imager)测量血液流动来测定诱导新血管形成的效应。
10.新血管疾病模型a.Apo E基因剔除小鼠的动脉粥样硬化.观测血管中菌斑和脂质含量减少程度以及此模型的毛发损失和皮肤受损减少。
b.缺血/再灌注。本发明化合物已显示对缺血/再灌注模型(例如，经分离的灌注心脏模型)有效。
11.移植和器官保留为进行移植而收集及传送的器官和组织的生存力目前是通过在诸如威斯康辛大学(UW)冷储存溶液(100mM KH2PO4，5mM MgSO4，100mM乳糖酸钾，1mM别嘌呤醇，3mM谷胱甘肽，5mM腺苷，30mM棉子糖，50克/升羟乙基淀粉，40单位/升胰岛素，16mg/升地塞米松，200,000单位/升盘尼西林，pH 7.4；320-330mOsM)等储存溶液中浸浴和传送而得以最佳地保持(Ploeg RJ，Goossens D，Vreugdenhil P，McAnulty JF，Southard JH，Belzer FO.Successful 72-hour cold storage kidney preservationwith UW solution.Transplant Proc.1988 Feb；20(1 Suppl 1)935-8)。为了进一步增强经移植器官和组织的生存力、抑制细胞凋亡且促进其血管形成，可在收集之前将一种或多种本发明化合物包括于这种或任何其它储存溶液中以及灌注入供体或供体器官中，且全身性和/或局部性地投与接受者并进入经移植器官或移植部位。
12.肺纤维化模型a.博来霉素-诱导的肺损伤.使用具有博来霉素-诱导的肺损伤的习用小鼠模型评定本发明化合物对肺纤维化的效应。使用Ashcroft尺度获得数字纤维化记分，其中每个标本是由两个组织学家独立地记分，且其各自分值的平均值被视作纤维化分值。另外，肺中羟基脯氨酸含量减少还可用于评定所述化合物在减少肺纤维化方面的功效。
13.糖尿病a.高血糖症.评价本发明化合物对链尿霉素诱导的糖尿病中血糖的效应。本发明化合物降低血液葡萄糖水平。
14.多发性硬化和神经退化性疾病a.对施万细胞的效应。如在以上部分(1)中所述，本发明化合物可促进轴突生长。如将在下列实例中所示，本发明化合物还可借此增加髓磷脂生成。
b.如上文所述，本发明化合物在施万细胞中可诱导c-Met发生强磷酸化。
c.多发性硬化的小鼠模型。如下列实例中所示，通过用在含有1mg/ml结核杆菌的CFA中乳化的MOG 35-55对雌性小鼠进行免疫接种来诱导实验性自体免疫性脑脊髓炎(EAE)。在第二次注射肽之后，即刻开始投药。在盲评中，由两位科学家按照标准等级监测疾病严重程度。在此动物模型中，来自发展MS的结果显示明显恢复效应。
15.血管生成/周边缺血模型a.小鼠及大鼠后肢缺血模型。在小鼠后肢缺血模型中，以本发明化合物进行处理会产生更大的后肢血流恢复(通过激光多普勒成像进行测量)。改良的通量与缺血肌肉内增多的毛细管数目相关。在大鼠模型中具有类似发现。
b.非肥胖糖尿病(NOD)小鼠内的后肢缺血。在经受后肢缺血的雌性NOD小鼠中，后肢血流(使用激光多普勒成像进行测量)表明通过投与本发明化合物进行恢复。
c.全厚度皮肤伤口内的血管生成。在猪的全厚度皮肤伤口内，用本发明化合物进行处理后观测到毛细管数量明显增加。
如本文说明所详述，在测定化合物刺激细胞生长、髓磷脂生成和轴突生长、诱导血管生成、保护细胞免于凋亡及减少纤维化的能力的测试中，某些本发明化合物呈现ED50值≤50μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤40μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤30μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤20μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤10μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤7.5μM。在某些实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤5μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤2.5μM。在某些实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤1μM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤750nM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤500nM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤250nM。在某些其它实施例中，本发明化合物呈现ED50值≤100nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤75nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤50nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤40nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤30nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤20nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤10nM。在其它实施例中，示例性化合物呈现ED50值≤5nM。
医药应用和治疗方法如上文所论述，本文所述某些化合物可诱导内皮细胞增殖或治疗性血管生成，诱导诸如上皮细胞、神经细胞、施万细胞及少突神经胶质细胞等细胞增殖，诱导轴突生长，诱导髓磷脂生成，保护细胞免于细胞凋亡，呈现抗纤维化活性，或呈现全部或某些所述活性。因此，本发明化合物可用于治疗这些有益活性将具有有益作用的任何病况、疾病或病症。因此，在本发明的另一方面中，提供用于治疗与HGF/SF活性或其它细胞因子活性相关的病症的方法，其包含将治疗有效量的如本文所述的本发明化合物投与有需要的个体。在某些实施例中，提供用于治疗与这些活性相关的病症的方法，其包括以达成期望结果所需的总量和持续时间将治疗有效量的本发明化合物或包含本发明化合物的医药组合物投与有需要的个体。
在某些实施例中，所述方法包括将治疗有效量的所述化合物或其医药上可接受的衍生物投与有需要的个体(包括但不限于人或动物)。意欲因投与本发明化合物而受益的个体除人以外还包括家畜、家养、动物园和伴侣动物。
如上文所论述，本发明提供具有有益活性的新颖化合物。在某些实施例中，本发明化合物用于治疗伤口以加速愈合(可通过促进细胞增殖、尤其是血管细胞的增殖来加速伤口愈合)、使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注变得正常、发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；治疗纤维化性疾病、包括纤维化和硬化的肝病、肺纤维化、肾衰竭、肾纤维化、脑梗塞(中风)、糖尿病、和使经移接或移植的组织或器官形成血管。可证实本发明化合物有用的肾病况包括造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤及移植症候；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭。
应了解，根据本发明的方法，可使用有效地治疗其中细胞因子(例如但不限于HGF/SF、VEGF、EGF或NGF)或其活性具有治疗用途的病况或疾病的任何量和任何投药途径来投与所述化合物和组合物。因此，本文中所用的表达“有效量”是指呈现这些活性调节细胞因子活性(例如，模拟细胞因子活性)及呈现治疗效应的足量药剂。所需的确切量在个体之间将有所不同，取决于物种、年龄和个体的一般状况、感染严重程度、特定治疗剂、其投药模式和/或途径及类似条件。本发明化合物较佳以便于投与及均匀给药的单位剂型调配。本文中所用的表达“单位剂型”是指适于待治疗患者的治疗剂的物理分散单位。然而，应了解本发明化合物和组合物的总日用量可由会诊医生在合理的医学判断范围内确定。任一具体患者或有机体的特定治疗有效剂量水平应根据各种因素而定，包括所治疗病症及所述病症的严重程度；所用特定化合物的活性；所用特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别及饮食；所用特定化合物的投与时间、投与途径及排泄速度；治疗持续时间；与所用特定化合物组合或同时使用的药物；及医疗技术中熟知的类似因素。此外，以期望剂量与一适当医药上可接受的载剂调配后，根据所治疗疾病或病症的严重程度，本发明的医药组合物可以下列方式投与人类及其它动物经口、经直肠、非经肠、脑池内、阴道内、腹膜腔内、经皮下、经皮内、经眼内、外敷(以粉剂、软膏或滴剂形式)、经口腔(以经口或鼻喷雾形式)、或类似方式投与。在某些实施例中，本发明化合物可以如下日剂量水平投与以获得期望治疗效果对于非经肠投与而言，为约0.001mg/Kg至约50mg/Kg，较佳为自约0.1mg/Kg至约10mg/Kg；或者对于经口投与而言，较佳为自约1mg/Kg至约50mg/Kg，更佳为自约10mg/Kg至约50mg/Kg个体体重。还应了解小于0.001mg/Kg或大于50mg/Kg(例如50-100mg/Kg)的剂量可投与个体。在某些实施例中，化合物是经口或非经肠投与。
此外，包含一种或多种本发明化合物的医药组合物还可含有其它化合物或药剂，其与本发明化合物共同投与时在治疗上是有利的。由于许多医药药剂被用于治疗本发明化合物也具有益处的疾病和病症，因此任何药剂均可一起调配以用于投药。本文中还涵盖协同调配物，其中至少一种本发明化合物与至少一种其它化合物的组合比其各自单独使用时更有益地发挥作用。可在治疗时与本发明化合物组合的医药剂的非限制性实例包括(可使用此组合治疗的疾病或病况的非限制性实例在原括号中说明)抗病毒剂和抗纤维化剂，例如干扰素α(B型肝炎和C型肝炎)、干扰素α和利巴韦林的组合(C型肝炎)、拉米夫定(B型肝炎)、阿德福韦酯(B型肝炎)、干扰素γ(特发性肺纤维化、肝纤维化和其它器官的纤维化)；抗凝剂，例如肝素和华法林(缺血性中风)；抗血小板剂，例如阿司匹林、噻氯匹定和氯吡格雷(缺血性中风)；参与增殖的其它生长因子，例如VEGF和FGF及这些生长因子的模拟物；抗细胞凋亡剂；及运动和形态发生剂。
治疗套组在其它实施例中，本发明涉及用于便利及有效地实施本发明方法的套组。一般而言，医药封装或套组包含一个或多个填充有一或多种本发明医药组合物的成份的容器。所述套组特别适于传递诸如片剂或胶囊等固体经口服用形式。所述套组较佳包括多个单位剂量，且还可包括使所述剂量以其所期应用的次序定向的卡片。若需要，可以(例如)数字、字母、或其他标记的形式或用一日程插入件提供一记忆帮助，指明在所述治疗方案中可投与所述剂量的天数。或者，可以与医药组合物剂量类似或不同的形式包括安慰剂剂量或钙饮食补充品以提供其中每天摄取剂量的套组。视需要，所述容器可附带有一监管医药产品制造、使用及销售的政府机构所规定形式的公告，所述公告反映出政府机构已批准所述药物的制造、使用或销售用于人类。
等效物随后的代表性实例意欲帮助说明本发明，且不意欲或不应理解为限制本发明的范畴。实际上，本发明的各种变更形式和除了那些本文中所示及所述者以外的其许多其它实施例自本文献的全部内容(包括随后的实例和本文中所引用的科学及专利文献的参考文献)对那些所属领域技术人员将变得明显。应进一步了解以引用方式并入本文中的那些引用参考文献的内容将帮助说明此技术领域的状况。
以下实例含有可适于在本发明的各种实施例和其等效物中实践本发明的重要额外信息、例证和指导。
例证由说明某些制备或使用这些化合物的过程的实例可进一步了解本发明化合物和其制备。然而，应了解这些实例不限制本发明。目前已知的或进一步开发的本发明变体被视作属于如本文中所述且如下文中所主张的本发明范畴内。
1)合成方法的一般描述从业者可利用习用的小分子化学参考文献及其中所含的信息来指导用于合成本发明化合物的合成方案、保护基团及其他材料和方法。
本文所引用的各种参考文献提供关于制备类似于本文所述本发明化合物的化合物或相关中间体的有益背景信息，以及关于可能受关注的所述化合物的调配、使用和投药的信息。
此外，专业人员涉及此文献中所提供的涉及各种示例性化合物和其中间体的特定指导和实例。
由说明制备或使用这些化合物的某些过程的实例可进一步了解本发明化合物和其制备。然而，应了解这些实例不限制本发明。目前已知的或可进一步开发的本发明变体被视作属于如本文中所述及如下文中所主张的本发明范畴内。
根据本发明，任何可用技术均可用于制造或制备本发明化合物或包括其的组合物。举例而言，可使用多种溶液相合成方法，诸如那些下文所详细论述者。或者或另外地，可使用此技术领域中已知的多种组合技术、平行合成法和/或固相合成方法的任一种来制备本发明化合物。
应了解，如下所述，可根据本文所述的方法合成多种本发明化合物。用于制备这些化合物的起始材料和试剂可自诸如Aldrich化学公司(Milwaukee，WI)、Bachem(Torrance，CA)、Sigma(St.Louis，MO)等商业供应商获得，或者遵循诸如下列等文献中所述的程序由所属领域一般技术人员所熟知的方法来制备Fieser和Fieser 1991，“Reagents for Organic Synthesis”，第1-17卷，John Wiley和Sons，New York，NY，1991；Rodd 1989“Chemistry of Carbon Compounds”，第1-5卷和增刊，Elsevier SciencePublishers，1989；“Organic Reactions”，第1-40卷，John Wiley和Sons，New York，NY，1991；March 2001，“Advanced Organic Chemistry”，第5版，John Wiley和Sons，NewYork，NY；和Larock 1990，“Comprehensive Organic TransformationsA Guide toFunctional Group Preparations”，第2版，VCH Publishers。这些反应图仅说明可合成本发明化合物的某些方法，且可对这些反应图进行各种变更且将被建议给涉及此揭示内容的所属领域一般技术人员。
可使用常规技术分离和纯化起始材料、中间体和本发明化合物，所述技术包括过滤、蒸馏、结晶、层析和类似技术。使用常规方法可表示其特征，包括物理常数和光谱资料。
一般反应程序除非特别说明，否则使用磁力驱动式搅拌棒搅拌反应混合物。惰性气氛是指干燥氩或干燥氮。通过对经适当处理的反应混合物试样进行薄层层析、质子核磁共振(NMR)或高压液相层析(HPLC)来监测反应。
一般处理程序除非特别说明，否则将反应混合物冷却到室温或低于室温，接着在需要时以水或饱和氯化铵水溶液骤冷。通过在水与合适的水混溶性溶剂(例如乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚)之间分配来提取所需产物。以水随后以饱和盐水溶液适当地洗涤含提取物的所需产物。在认为含提取物的产物含有残留氧化剂的情况下，在上述洗涤程序之前以亚硫酸钠于饱和碳酸氢钠水溶液中的10％溶液洗涤提取物。在认为含提取物的产物含有残留酸的情况下，在上述洗涤程序之前以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤提取物(其中所需产物自身具有酸性特征的那些情形除外)。在认为含提取物的产物含有残留碱的情况下，在上述洗涤程序之前以10％柠檬酸水溶液洗涤提取物(其中所需产物自身具有碱性特征的那些情形除外)。洗涤过后，将含提取物的所需产物经无水硫酸镁干燥，随后过滤。随后通过在适当温度(一般低于45℃)下于减压下旋转蒸发去除溶剂来分离粗制产物。
一般纯化程序除非另外说明，否则层析纯化是指使用单一溶剂或混合溶剂作为洗提剂的快速硅胶柱层析。将经适宜纯化的含洗提物的期望产物混合并在减压下于适当温度(通常，低于45℃)下浓缩至恒定质量。将最终化合物溶于50％乙腈水溶液，过滤并转移到小瓶中，然后在高真空下冻干，随后对其进行生物测试。
1)示例性化合物的合成本发明的式(I)和式(II)化合物可按照下文所示反应图1-4制备。
4-[3-硝基-4-(1-高哌啶基)苯基-1-(2H)-酞嗪酮的制备步骤1.2-(4′-氯-3′-硝基苯甲酰基)苯甲酸的制备。如下列反应图1所示，将2-(4-氯苯甲酰基)苯甲酸(80克，0.37摩尔)加入98％硫酸(210ml)中，保持温度低于10℃。随后加入另一体积的硫酸(60ml)。将所述混合物搅拌2小时直至完全溶解。边冷却并搅拌边向浓硫酸(50ml)中加入90％硝酸(21ml)。将所述硝化混合物逐滴加入苯甲酸溶液中，保持温度低于15℃。当完成添加时，将所述混合物在5-10℃下搅拌1小时，随后将所述混合物注入碎冰(2.5升)上并使所述冰熔化。过滤所得白色固体，用水(1.5升)洗涤并干燥。产率为92.7克(98％)。通过在乙酸乙酯(1.5升)中于70℃下搅拌并添加IMS(约90ml)来重结晶来自2轮以上反应的合并产物以获得呈请溶液。加入戊烷(1.5升)以产生白色晶状固体(142.3克)。
反应图1
步骤2.2-(4-(高哌啶-1-基)-3-硝基苯甲酰基)苯甲酸的制备(反应图2)。向2-(4′-氯-3′-硝基苯甲酰基)苯甲酸(在步骤1中制得；142克，0.465摩尔)存于乙腈(1400ml)的溶液中加入高哌啶(138克，1.39摩尔，3当量)。将所述混合物加热至80℃，4小时。随后，使所述反应混合物浓缩至约500ml并用水稀释至2.5升。用浓HCl溶液使所述水溶液呈酸性并用醚/乙酸乙酯(1∶1)混合物提取。自水分离提取物，干燥(MgSO4)、过滤并在低压下蒸发至干燥以生成橙色粘性油状物。依次用小体积的醚，己烷研磨此油状物以产生黄色固体。
反应图2 步骤3.4-[3-硝基-4-(1-高哌啶基)苯基]-1-(2H)-酞嗪酮的制备(反应图3)。向2-(4-(高哌啶-1-基)-3-硝基苯甲酰基)苯甲酸(在步骤2中制得；80克，0.217摩尔)存于乙醇(450ml)的悬浮液中加入水合肼(98％，21.74克，0.435摩尔，2当量)。在回流1.5小时之后，再次加入水合肼(8ml)。使其再回流2小时。将所述反应混合物冷却至约15℃并过滤出橙色晶体，在干燥之前依次用IMS，醚洗涤。产率为66.88克(83.9％)。熔点为187-189℃。
反应图3 作为一实例，可按照反应图4制备其中m为1且R1为硝基的式(I)和式(II)化合物。
反应图4
这些化合物可进一步经衍生生成对应的氨基衍生物(即，m＝1且R1＝NH2)。可按照下文所示反应反应图制备其中R1为氢的本发明式(I)和式(II)化合物。4-[4-(1-高哌啶基)苯基]-1-(2H)-酞嗪酮的制备反应图5 步骤1.2-(4-(高哌啶-1-基)苯甲酰基)苯甲酸的制备(反应图1)。向2-(4′-氯苯甲酰基)苯甲酸存于乙腈的溶液中加入高哌啶。将所述混合物加热至80℃，4小时。随后浓缩反应混合物并用水稀释。用浓HCl溶液使水溶液呈酸性并用醚/乙酸乙酯(1∶1)混合物提取。自水分离提取物，干燥(MgSO4)、过滤并在低压下蒸发至干燥以生成产物。
反应图6 步骤2.4-[4-(1-高哌啶基)苯基]-1-(2H)-酞嗪酮的制备(反应图3)。向2-(4-(高哌啶-1-基)苯甲酰基)苯甲酸存于乙醇的悬浮液中加入水合肼。在回流1.5小时之后，再次加入水合肼。使其再回流2小时。将所述反应混合物冷却至约15℃并过滤出产物，依次用IMS和醚洗涤，然后干燥。
应了解在反应图5中使用经取代的高哌啶可制备对应的经取高哌啶基对应物
一般而言，按照反应图7可制备其中m为1且R1为氢的式(I)和式(II)化合物。
反应图7 反应图4和反应图7中所示用于制备本发明化合物的R2R3NH试剂的非限制性实例包括二甲基胺、二乙基胺、二丙基胺、二-叔-丁基胺、高哌啶、3-氨基高哌啶、2-甲基高哌啶、3-甲基高哌啶、哌啶、2-甲基哌啶、3-甲基哌啶、二乙基胺、2，2，6，6，-四甲基哌啶、4-苄基哌啶、硫吗啉、4-甲基哌嗪、4-苯基哌嗪、4-乙基磺酰基哌嗪和吡咯烷酮等。
可按照下文反应图8和9中所示反应图制备本发明的式(I)和式(II)化合物。
反应图8 其中r为1-4且R0采取对R1的定义”经适当取代的酞酐与芳基亲核剂(例如，格氏试剂或芳基锂物质)反应将提供2-酰基苯甲酸中间体。用肼处理可提供环闭合生成期望酞嗪酮类似物。用于此转化的合成方法陈述于Yamaguchi，M.等人的J.Med.Chem.1993，36，4052中。当存在一硝基基团时，使用标准方法还原所述硝基基团可提供对应的一级胺。随后可用羧酸/酰卤、异氰酸酯或异硫氰酸酯酰化此胺以分别形成酰胺、脲和硫脲。
反应图9 B＝O、SR＝烷基、芳基、NH-烷基、NH-芳基等上述反应图仅示例本发明化合物的合成途径。可容易地变更或改变这些反应图以制备各种本发明化合物。
本发明涵盖酞嗪酮环经取代的本文所述化合物。
本发明的上述化合物、组合物和方法由以下实例加以说明，其仅示例本发明的方面且不具限制性。
2)生物活性1.本发明化合物诱导内皮细胞增殖和迁移a.增殖.进行下列测试以评定本发明化合物在细胞增殖方面的活性。将内皮细胞(HUVEC)以每孔10,000个细胞的密度播种于正常生长培养基(EGM-2-Clonetics)内的96孔板中，所述培养基含有2％胎牛血清、FGF、VEGF、IGF、抗坏血酸、EGF、GA、肝素和氢化可的松(hydrocortisone)。细胞在37℃和5％CO2下于所述生长培养基中正常生长24小时。随后用RPMI-1％BSA冲洗所述细胞且使其挨饿1-2小时。制造DMSO中浓度为10mg/ml的本发明化合物的储存溶液，且于RPMI-1％BSA中稀释成0.001μM到50μM的最终浓度。随后洗涤所述细胞并用所述化合物处理且在37℃下再培育20小时。然后向所述细胞中加入3H胸苷(0.5微克/ml存于RPMI-BSA中)并在37℃下培育4小时。通过以1×PBS洗涤细胞4次将未并入的胸苷去除。然后用0.5M NaOH将细胞溶解30分钟且在β计数器中计数放射性。也采用使用猴子支气管上皮细胞(4MBR-5)和少突神经胶质细胞的类似增殖测试。
如图1A中所示，本发明化合物诱导HIVEC增殖明显增加，如通过胸苷纳入方法所测得。通常，本发明化合物与对照相比显示可使HUVEC增殖增加8至20倍，而HGF(图中所示)或其他分子不具有此增加作用。
3种本发明化合物的剂量反应曲线示于图1B-D中且其在约5-10uM的ED50(给出50％刺激时的有效剂量)下显示刺激HUVEC(内皮细胞)增殖。化合物还以协同方式刺激HUVEC增殖及血管生成细胞因子HGF、FGF、EGF和VEGF。
下列化合物分别以表1和表2中所示ED50诱导HUVEC和少突神经胶质细胞增殖表1化合物HUVEC ED50
表2化合物少突神经胶质细胞ED50 2.本发明化合物可保护HUVEC细胞免于细胞凋亡.本发明化合物还可保护HUVEC免于由血清饥饿、过氧化氢或CRP引起的细胞凋亡(程式性细胞死亡)。内皮细胞(EC)凋亡是动脉粥样硬化发病的引发事件。实际上，已知C-反应性蛋白(CRP，其在动脉粥样硬化患者中升高)可诱导内皮细胞凋亡。其可确定本发明化合物是否可保护EC免于由血清饥饿、H2O2(氧化应激)或CRP引起的细胞凋亡。使HUVEC(Cambrex，CA)在6-孔板的完全血清培养基中生长至80％铺满状态。然后用RPMI-1％BSA洗涤细胞并用媒剂、化合物(10uM)或SF/HGF(50ng/ml)处理且将其培育24小时。细胞凋亡是由血清饥饿或添加H2O2(100uM)或添加CRP(10ug/ml)引起的。使用Vybrant Assay Kit(Molecular Probes，OR)可鉴定凋亡细胞。如在图2A、2B和2C中所见，本发明化合物减弱分别由血清饥饿、H2O2和CRP引起的EC细胞凋亡。
3.本发明化合物可激活HGF/SF信号传导路径.
本发明化合物活性的一种可能作用机制(申请者没有责任揭示其且申请者并不受限于其)是激活HGF受体，c-Met。因为HGF的生物活性是通过其受体c-met的磷酸化作用来调节，因此测试本发明化合物磷酸化c-met的能力。
a.在施万细胞中c-met的磷酸化.通过磷酸化和激活其受体c-Met可调节SF/HGF生物活性。自ATCC，VA购买施万细胞并以10uM浓度用SF/HGF(50ng/ml)或本发明化合物将其在不含血清的培养基中培育1小时。通过使用来自Cell Signaling的phosphor met抗体依次实施SDS PAGE和西方点渍分析来测定C-Met磷酸化。如图3中所示，本发明化合物诱导c-Met的强烈磷酸化，表明激活SF/HGF/c-Met路径。
b.在HUVEC和MDCK细胞中c-met的磷酸化。用HGF(80ng)或本发明化合物(10uM)将HUVEC和MDCK细胞培育1小时，接下来进行西方点渍分析。本发明化合物在这些细胞中磷酸化c-Met。
c.受化合物和HGF诱导的细胞内信号传导.为测定由化合物调节的c-met磷酸化是否像HGF一样诱导相同的细胞内信号传导级联系统，用发明化合物刺激内皮细胞并然后通过西方点渍分析测试细胞外受体激酶(ERK)磷酸化作用。然后通过使用在磷酸化形式与非磷酸化形式之间不存在明显差别的抗体探测总的ERK来进行西方点渍分析；然后剥去膜并用仅可识别磷酸化ERK的抗体再次探测。未受刺激的细胞含有少量磷酸化ERK。然而，在相同的细胞培养条件下，本发明化合物显著提高磷酸化ERK的细胞内水平，而总ERK不受影响。这些结果类似于在HGF存在下所观察到的磷酸化ERK水平。
4.施万细胞、神经细胞和少突神经胶质细胞增殖、迁移和髓磷脂生成a.施万细胞增殖.在96-孔板(104个细胞/孔)中的无血清培养基中播种大鼠神经施万细胞(RSC96来自ATCC)，16小时。然后用不同浓度的本发明化合物或HGF(阳性对照)将细胞再处理16小时。向所述培养基中加入3H-胸苷并再持续培育4-5小时。用PBS洗涤所述细胞，收获并测定作为增殖量度的3H-胸苷纳入程度。本发明化合物可刺激[3H]-胸苷纳入，表明刺激施万细胞增殖(图4A)。
b.PC 12神经细胞的增殖在一与上述测试类似的测试中，显示本发明化合物可刺激PC 12细胞(一种神经细胞)增殖(图4B)。
c.施万细胞迁移.在细胞迁移测试(Boyden Chamber，BD Bioscience)中，于0.4％或10％FBS存在下，于本发明合物存在下将50000个施万细胞种于内室中并保持22小时。按照荧光读数使用4.5mg/ml钙黄绿素定量细胞数量。本发明化合物在此测试中刺激施万细胞迁移。
d.由施万细胞生成的髓磷脂.本发明化合物在体外诱导施万细胞生成髓磷脂。以50,000个细胞/孔的密度将施万细胞播种在3-孔室玻片的无血清培养基中，24小时.向所述培养基中加入测试化合物(5uM)或HGF/SF(50ng/ml)并再继续培育4小时。洗涤细胞并向每个孔中加入氟髓磷脂(Molecular Probes)。使用一共焦显微镜获得图像。本发明化合物诱导髓磷脂生成增加3倍以上，类似于HGF/SF诱导的程度(图4C)。
e.刺激少突神经胶质细胞增殖.以5000个细胞/孔将小鼠原代少突神经胶质细胞(Celprogen，CA)播种于96-孔板的无血清培养基中，16小时。用测试化合物或HGF/SF(阳性对照)处理细胞，16-24小时。向少突神经胶质细胞中加入WST1细胞增殖试剂(Roche，NJ)并再持续培育4-5小时。使用平板读数器在490奈米OD下读取含有WST1试剂的细胞。化合物和HGF/SF对细胞增殖产生类似的效应(图5)。
5.轴突生长.
自美国典型培养物保藏中心(Manassas，VA)获得人类HCN-2神经细胞和施万细胞。在杜贝克氏改良鹰氏培养基(Dulbecco′s modified Eagle′s medium)中培养细胞，所述培养基具有4mM L-谷氨酰胺，调整至含有1.5克/升碳酸氢钠和4.5克/升葡萄糖并补充有0.2mg/mlG 418和0.001mg/ml嘌呤霉素，90％，胎牛血清10％。通过移除培养基，用0.25％胰蛋白酶、0.03％EDTA溶液冲洗，然后添加新鲜的培养基对细胞进行继代培养并置于经聚-1-赖氨酸涂布的培养瓶中。
将人类神经细胞(HCN-2)播种于6个孔板中(1000个细胞/孔)并在具有HGF/SF(50ng/ml)或本发明化合物(10uM)的1％FBS中持续培育48小时。如图6A-D中所示，本发明化合物可促进轴突生长。当存在施万细胞时，所述化合物刺激轴突生长至更大程度。
6.周边缺血模型小鼠和大鼠后肢缺血(周边血管供血不足)模型中的治疗性血管生成.
a.大鼠。为了测定本发明化合物在增强远端血流方面的时间依赖性效应，使雄性Sprague-Dawley大鼠(275-300克)经受左后肢缺血并用媒剂或化合物(2mg/Kg，腹膜腔内注射)处理直至在第14天宰杀。在进行外科手术之前和之后使用激光都卜勒扫描(Moor Instruments公司)获得远端血流测量结果并归一化成缺血前流量。在扫描中，使低功率激光在光栅图案中穿过组织表面以构成2维图像。根据多普勒原则，移动的血细胞改变入射光频率。侦测器中的反向散射光导致来自移动血流的偏移光与来自静态组织的非偏移光的建设性及破坏性混合。处理强度波动以给出通量参数，其与组织血流成比例。接着在左侧缺血后肢与右侧不缺血后肢之间比较后肢中所关注区域的通量值，且表示为分数(缺血/不缺血)，其中数值1代表正常流动。如在图7中所示，与经媒剂处理的群组相比，经本发明化合物处理的动物呈现增强的血流恢复。
7.中风模型.
以中大脑动脉阻塞(MCAO)诱导大鼠内的局部缺血24小时。在形成梗塞之后的第1-2及20小时或以延迟方式在第4小时及第20小时以静脉内注射方式投与2mg/公斤本发明化合物或安慰剂(盐水)。通过用线粒体活性指示剂氯化2，3，5-三苯基四唑盐(TTC)染色脑切片来测定脑梗塞程度。如图8中所示，大部分未经处理的大鼠脑展现脑梗塞，而本发明化合物可保护大鼠免于此损伤。另外，所述化合物在第7天和在第14天时还可增加受损区域的血液流动，如借助激光多普勒成像所测定，表明其可促进损伤后新血管形成。
8.心血管疾病模型.
a.动脉粥样硬化即刻治疗.以高脂肪饮食处理雌性缺乏载脂蛋白E(apoE)的C57BL/6J小鼠，16周。每日经腹膜腔内投与媒剂(n＝15)或本发明化合物(2mg/公斤)(n＝15)，始于高脂肪饮食开始时。宰杀动物(第16周)并对主动脉根进行动脉粥样硬化测试。借助H&E染色评定横向主动脉部分中的菌斑形成；Oil-Red-O染色用于鉴定表面上的脂质沉积。在死亡时收集血样并分析血浆胆固醇水平。具有常规饮食的ApoE缺乏小鼠用作标准对照。
在宰杀时，经高脂肪处理的群组的血浆胆固醇水平没有差别(1200-1600mg/分升)。用本发明化合物处理可显著减少这些经高脂肪处理的小鼠的菌斑形成(p＜0.05对媒剂)和脂质沉积(p＜0.05对媒剂)(图9)。
b.延迟治疗.在此系列中，用高脂肪饮食喂养小鼠10周。然后，饮食变为常规饮食并每日经腹腔注射对动物投与媒剂或本发明化合物(2mg/Kg)，8周。在宰杀时(在进入延迟治疗后8周)，收集血液及主动脉部分以用于分析。脂质概况在经媒剂处理的群组与经所述化合物处理的群组之间没有不同。用本发明化合物进行延迟治疗导致菌斑形成和脂质沉积明显减少。
c.心肌缺血/再灌注.以Langendorrf Mode在常压下灌注来自雌性Sprague-Dawley大鼠的心脏。使常温等容收缩心脏处于全心缺血状态30分钟并对其进行再灌注90分钟。在缺血之前将心脏处理5分钟并用媒剂或本发明化合物将其再灌注5分钟。如图10中所示，将再灌注期间左心室扩张压力和心率的结果归一化成缺血前数值。
9.纤维化a.体外的抗纤维化效应纤维化级联系统的引发对于动脉粥样硬化菌斑形成至关重要。因此，抗纤维化治疗可用于抵抗动脉粥样硬化菌斑形成以及肾和肺纤维化疾病。在大鼠肾脏成纤维细胞中，评定本发明化合物对TGFβ1-诱导的α-平滑肌肌动蛋白(αSMA，纤维性标记)表达的影响。通过以2ng/ml用TGFβ1处理2天来激活大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F来自ATCC)。加入本发明化合物并培育相同的时间。分离出总细胞RNA并通过逆转录-实时聚合酶链反应(RT-PCR)测量α平滑肌肌动蛋白(αSMA)mRNA。αSMA在成纤维细胞激活期间上调且其是纤维化的标记。测试化合物抑制αSMA水平，表明其具有抗纤维化能力(图11)。
b.活体内抗纤维化效应-肺-博来霉素模型不同组织中的纤维形成具有相同的特征和作用机制，包括形成受TGFβ-刺激的病理细胞外基质。本发明化合物在其它纤维化模型中的活性有助于理解动脉粥样硬化菌斑退化中的纤维化病况。测试本发明化合物在广泛使用的肺纤维化(即，博来霉素-诱导的肺纤维化)模型中的抗纤维化活性。简而言之，对C57BL/6小鼠进行麻醉然后经支气管内投与一含有盐酸博来霉素(Sigma；0.1U/20gm体重)的溶液(100微升)。然后将小鼠分成经媒剂或化合物(2mg/公斤，每日经腹腔注射)处理的群族。记录这些小鼠的存活率。在2周后，宰杀存活小鼠并收获肺以测定羟基脯氨酸(一纤维化的重要指标)。经本发明化合物(I)处理的小鼠与经博来霉素处理的小鼠相比，存活率提高(图12A)，肺胶原蛋白表达减少(通过RT-PCT测量)(图12B)及肺胶原蛋白含量减少(通过在羟基脯氨酸测试中测量)(图12C)。组织学分析定量证实用本发明化合物处理可有效地防止在经博来霉素+媒剂处理的动物中所见的纤维化损伤(图12D)。
c.活体内抗纤维化效应-肾脏-多柔比星模型.多柔比星投与可导致进行性肾功能不足和间质胶原蛋白累积。此为慢性肾衰竭和纤维化的模型。对雄性Sprague-Dawley大鼠(约300克)投与多柔比星(10mg/Kg，静脉注射)。开始24小时以后，每日用媒剂或本发明化合物(2mg/Kg，腹腔注射，n＝8只/群组)处理动物。3周以后，宰杀动物以评定肾功能和组织病理学。如图13中所见，用化合物处理可减弱在经媒剂处理小组中所观测得肾功能不全，如由BUN(图13A)、血清肌酸酐(图13B)和纤维化得分(图13C)测量得。另外，减少间质胶原蛋白积聚(马森三色染剂(Masson′s trichrome stain))。
d.抗纤维化效应肝脏.由于不同组织中的纤维形成具有相同的特征和作用机制，包括形成受TGFβ1-刺激的病理细胞外基质，因此在硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝纤维化模型中检查本发明化合物。以200mg/Kg、腹腔注射、每周3次的方式用TAA处理Sprague Dawley大鼠，8周以诱导肝纤维化。在用TAA处理时，还通过腹腔注射途径用本发明化合物处理大鼠，用药量为一天2mg/Kg体重或媒剂(PEG300)，用药频次为每周给药5次，共持续4周，，然后宰杀。在共同治疗的群组中，测量一组纤维化标记，包括胶原蛋白含量(羟基脯氨酸，图14A)和αSMA(图14B)及胶原蛋白-1基因表达(RT-PCR；图14C)。
在另一大鼠群组中，经口投与化合物(25mg/Kg)，在TAA开始后延迟8周开始治疗。测量羟基脯氨酸、门脉压力和纤维化分值以通过羟基脯氨酸含量(图14D)、门脉压力(图14E)和纤维化分值(图14F)来测定本发明化合物在减少肝纤维化方面口服功效。纤维化分值为4表示有严重的纤维化而分值为0表示没有纤维化。
10.肾缺血.
a.在暂时性单侧肾动脉阻塞的小鼠模型中，麻醉雄性ICR小鼠且以微血管钳阻塞左侧肾动脉。30分钟后，去除所述钳且对肾进行再灌注。再灌注10分钟，切除不缺血的对侧肾。以媒剂或本发明化合物(2mg/Kg，腹腔注射)每天处理动物直到宰杀日。在缺血后第1、4和7天测量的血清肌酸酐、BUN和尿蛋白水平被用于判定本发明化合物恢复对于受损肾的脏功能的能力。为了创建更严重的肾损伤，使动物经受45分钟的缺血。
b.防止由HgCl2诱导的肾损伤.在研究中以高剂量的HgCl2(7mg/Kg，皮下注射)注射小鼠且将小鼠分成若干治疗组。第一组内的动物在毒素注射日接受媒剂或本发明化合物(2mg/Kg，腹腔注射)且在其后每天接受持续3天，在第4天实施安乐死。在第2天和第4天分析先于HgCl2注射所收集血样的血清肌酸酐。在第二组中，以媒剂或化合物进行的治疗在毒素注射之后的第一天开始(即延迟24小时的治疗)，且在其后每天治疗直到第6天。在第7天对小鼠实施安乐死。在第4天和第7天分析先于HgCl2注射所收集血样的血清肌酸酐和BUN。测量血清肌酸酐、BUN和肾小管坏死的发展以指示正面临床活性。
c.防止输尿管阻塞.在暂时性单侧肾动脉阻塞的小鼠模型中检查本发明化合物对于输尿管阻塞继发性肾损伤的效应。对来自经受单侧输尿管阻塞2周的小鼠的肾检查其损伤的组织学证据和化合物治疗的保护作用。对粘连蛋白、增殖细胞核抗原和TUNEL(用于细胞凋亡的评定)进行免疫组织化学染色。还进行三色染色以评定作为间质性纤维化指标的胶原蛋白的形成程度。
11.糖尿病.
以每日一次，腹腔注射之方式对正常的CD-1小鼠依次投与100mg/Kg链尿霉素(STZ)及2mg/Kg本发明化合物，7天。第7天时，收获血样并测定血糖。STZ处理导致高血糖症(高血液葡萄糖)。用本发明化合物处理可减轻糖尿病小鼠的高血糖症(图15)。
12.多发性硬化的小鼠模型.通过在第1天和第7天时于后胁腹中以皮下注射方式用200微克MOG 35-55(在含有5mg/ml结核杆菌(Difco，MI)的在弗氏完全佐剂(CFA)中乳化)免疫化雄性C57 BL6小鼠来诱导EAE，如Ford，M.L.和B.D.Evavold，Specificity，magnitude，and kinetics of MOG-specific CD8+ T cell responses duringexperimental autoimmune encephalomyelitis.Eur.J.Immunol 35，76-85，2005中所述。每日以腹腔注射方式投与本发明化合物(2mg/Kg)或媒剂，3周。在第7天时开始投与化合物和媒剂，在第二次注射MOG 35-55后即刻投与。在3周治疗期末期由两位科学家按照下列等级在盲评中根据运动障碍监测疾病严重程度0，没有疾病；1，尾巴运动迟缓；2，后肢衰弱；3，后肢瘫痪；4，前肢衰弱；5，濒临死亡。如图16中所述，所述测试化合物减少运动障碍。
13.本发明化合物可减少单核细胞迁移.
a.化合物处理可减少单核细胞迁移及与EC的结合.升高的CRP已经显示通过增加单核细胞趋化蛋白(MCP-1)分泌和降低一氧化氮生物活性说明对血管细胞施加预先致动脉粥样硬化效应；及诱导诸如血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)等分子粘附；及增加结合/迁移至内皮细胞的单核细胞。用CRP(25ug/ml)、CRP以及测试化合物(10uM)或HGF(50ng/ml)培育HUVEC。用溶胞缓冲液处理细胞提取物并通过西方点渍分析来分析VCAM-1和MCP-1表达。对于单核细胞结合和迁移实验，用荧光染料VybrantDid(Molecular Probes)标记单核细胞并按照上文处理HUVEC的方法处理之。用测试化合物处理可减少单核细胞迁移及与EC结合，如图17中所示。测试化合物和HGF处理还可减少VCAM-1表达和MCP-1表达及减少单核细胞迁移和与内皮细胞结合。
14.由化合物调节的治疗性血管生成.
本发明化合物诱导体内的血管生成，从而提供化合物可通过诱导c-met磷酸化且激活特定的细胞内信号传导级联系统来至少调节类HGF生物活性的明显证据。为测试这种活性是否可用于治疗性优势，在活体内测试化合物诱导血管生长的能力。在这个测试中，将化合物或媒剂(对照，RPMI培养基+1％BSA)与Matrigel(重组基底膜的基质)混合。将试样经皮下注入小鼠内。10天后，宰杀小鼠以进行Matrigel塞的组织学及形态度量学分析。含化合物的塞显示较大的细胞密度。这些结果类似于上述研究，证实在此体内测试中HGF以剂量依赖方式增加血管面积。这些发现还可应用于其它细胞因子且所述观测通常可用于诸如但不限于那些上文所述者等其它细胞因子。
权利要求
1.一种具有如下结构的经分离化合物 或其医药上可接受的衍生物；其中m为1至4的整数；p为1至6的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均独立地选自由氢和视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分组成的群组；Rb和Rc在每次出现时均独立地选自由氢；羟基；SO2Rd；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时均独立地选自由氢；-N(Re)2；脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时独立地为氢或脂族基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中m为1至4的整数；p为1至6的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均独立地为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时均独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时均独立地为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re在每次出现时均独立地为氢或烷基。
3.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中p、R1和R4如在权利要求2中所定义。
4.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中p和R4如在权利要求2中所定义。
5.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中p和R4如在权利要求2中所定义。
6.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中p和R4如在权利要求2中所定义。
7.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中m、R1和Ra如在权利要求2中所定义。
8.如权利要求2所述的化合物，其具有如下结构 其中m、R1、Rb和Rc如在权利要求2中所定义。
9.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-NO2。
10.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-NH2。
11.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-COOH、-C(＝O)OCH3、-COCH3、-CONH2、-SO2OH、-SO2CH3、-SO2CF3、-OPO2OH、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHSO2CH3或-NHSO2CF3。
12.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为卤素。
13.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为视情况经取代的连接有N的杂环基。
14.如权利要求13所述的化合物，其中所述连接有N的杂环基为视情况经取代的N-吡咯基。
15.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为脂族基部分。
16.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为低碳烷基部分。
17.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为疏水基团。
18.如权利要求1所述的化合物，其中R4在每次出现时均独立地为疏水基团。
19.如权利要求18所述的化合物，其中所述疏水基团为脂族基。
20.如权利要求18所述的化合物，其中所述疏水基团为视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。
21.如权利要求18所述的化合物，其中所述疏水基团为视情况经取代的-(烷基)芳基。
22.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-NRbRc；其中Rb和Rc独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re为氢或烷基。
23.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-NH2。
24.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-C(＝O)ORa；其中Ra为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分。
25.如权利要求1所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-CO2H。
26.如权利要求1所述的化合物，其中m为0或1。
27.如权利要求1所述的化合物，其中p为0或1。
28.如权利要求1所述的化合物，其中Cy为下列中的一个 其中q为1、2或4且p、R4和Rb如在权利要求1或10中所定义。
29.如权利要求1所述的化合物，其具有下列结构中的一个
30.一种医药组合物，其包含医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂；和如权利要求1所述的化合物。
31.一种在个体中实现下列的方法激发HGF/SF活性；激发c-met刺激细胞增殖；促进血管生成活性，促进新血管形成；诱导上皮细胞、神经细胞、施万(Schwann)细胞或少突神经胶质细胞增殖；促进轴突生长；诱导髓磷脂生成；减少纤维化；和/或保护免于细胞凋亡；所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的如权利要求1所述的化合物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与。
32.一种治疗个体下列疾病或减轻所述疾病严重程度的方法纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化、多发性硬化或神经退化性疾病，所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的如权利要求1所述的化合物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与。
33.如权利要求32所述的方法，其中所述神经退化性疾病为异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病(Refsum’s disease)、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病(Krabbe’sdisease)、苯丙酮尿症、卡纳万病(Canavan disease)、佩-梅二氏病(Pelizaeus-Merzbacherdisease)或亚历山大氏病(Alexander’s disease)。
34.如权利要求32所述的方法，其中所述方法是治疗选自下列的疾病或病况或减轻所述疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病(Wilson’s disease)、血色素沉着病和α-1-抗胰蛋白酶不足)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风、外伤性头部损伤、脊髓损伤和其它脑血管疾病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；心血管疾病；糖尿病；肾衰竭；肾纤维化、肺纤维化或特发性肺纤维化；和多发性硬化。
35.如权利要求32所述的方法，其中所述方法是治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾或其它组织或器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注正常化；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；纤维化性疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤和移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。
36.如权利要求31或32所述的方法，其中所述化合物具有下列结构中的一个
37.一种具有下列结构的经分离化合物 或其医药上可接受的衍生物；其中Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外；m为1至4的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均为氢或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时均独立地为氢、羟基、SO2Rd或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时均独立地为氢、-N(Re)2、或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基；限制条件为所述化合物不具有下列结构中的一个 其中p和R4如上文所定义， 其中R4A为氢、甲基、甲氧基、氯或-NO2。
38.如权利要求37所述的化合物，其中m为1至4的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；其中Ra在每次出现时均独立地为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时均独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时均独立地为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re在每次出现时均独立地为氢或烷基。
39.如权利要求37所述的化合物，其具有如下结构 其中m、p、R1和R4如本文各类别和细类中所定义；且q为选自1、2或4的整数。
40.如权利要求37所述的化合物，其具有下列结构中的一个
41.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-NO2。
42.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-NH2。
43.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为-COOH、-C(＝O)OCH3、-COCH3、-CONH2、-SO2OH、-SO2CH3、-SO2CF3、-OPO2OH、-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CF3、-NHSO2CH3或-NHSO2CF3。
44.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为卤素。
45.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为视情况经取代的连接有N的杂环基。
46.如权利要求45所述的化合物，其中所述连接有N的杂环基为视情况经取代的N-吡咯基。
47.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为脂族基部分。
48.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R1至少有一个为低碳烷基部分。
49.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为疏水基团。
50.如权利要求37所述的化合物，其中R4在每次出现时均独立地为疏水基团。
51.如权利要求50所述的化合物，其中所述疏水基团为脂族基。
52.如权利要求50所述的化合物，其中所述疏水基团为视情况经取代的环状或非环状C6-12烷基、C6-12烯基或C6-12炔基。
53.如权利要求50所述的化合物，其中所述疏水基团为视情况经取代的-(烷基)芳基。
54.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-NRbRc；其中Rb和Rc独立地为氢、羟基、SO2Rd或烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd为氢、-N(Re)2、烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；且Re为氢或烷基。
55.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-NH2。
56.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-C(＝O)ORa；其中Ra为氢或视情况经取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基部分。
57.如权利要求37所述的化合物，其中出现的R4至少有一个为-CO2H。
58.如权利要求37所述的化合物，其中m为0或1。
59.如权利要求37所述的化合物，其中p为0或1。
60.如权利要求37所述的化合物，其中Cy为下列基团中的一个 其中q为1、2或4且p、R4和Rb如在权利要求1或10中所定义。
61.一种医药组合物，其包含医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂；和具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物；其中m为1至4的整数；p为1至6的整数；Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nR、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均独立地选自由氢和视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分组成的群组；Rb和Rc在每次出现时均独立地选自由氢；羟基；SO2R；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时均独立选自由氢；-N(Re)2；脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基；限制条件为所述化合物不具有下列结构中的一个 其中R4A为氢、甲基、甲氧基、氯或-NO2；其中p和R4如上文所定义。
62.一种在个体中实现下列的方法激发HGF/SF活性；激发c-met；刺激细胞增殖；促进血管生成活性，促进新血管形成；诱导上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞增殖；促进轴突生长；诱导髓磷脂生成；和/或减少纤维化；所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与；其中Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外；m为1至4的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均为氢或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时均独立地为氢、羟基、SO2Rd或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时均独立地为氢、-N(Re)2或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基。
63.一种保护个体免于细胞凋亡的方法，所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与；其中Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外；m为1至4的整数；R1和R4在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均为氢或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；Rb和Rc在每次出现时均独立地为氢、羟基、SO2Rd或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；Rd在每次出现时均独立地为氢、-N(Re)2或视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基；限制条件为所述化合物不具有下列结构
64.一种在个体中实现下列的方法激发HGF/SF活性；激发c-met；刺激细胞增殖；促进血管生成活性，促进新血管形成；诱导上皮细胞、神经细胞、施万细胞或少突神经胶质细胞增殖；促进轴突生长；诱导髓磷脂生成；和/或减少纤维化；所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与；其中m为1至4的整数；R1在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；R2和R3均独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均独立地选自由氢和视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分组成的群组；Rb和Rc在每次出现时均独立地选自由氢；羟基；SO2Rd；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时均独立选自由氢、-N(Re)2、脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基。
65.一种保护个体免于细胞凋亡的方法，所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物；其中m为1至4的整数；R1在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；R2和R3均独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基或酰基部分；Ra在每次出现时均独立地选自由氢和视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分组成的群组；Rb和Rc在每次出现时均独立地选自由氢；羟基；SO2Rd；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时均独立选自由氢；-N(Re)2；脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基；限制条件为所述化合物不具有下列结构中的一个
66.一种治疗个体下列疾病或减轻所述疾病的严重程度的方法纤维化肝病、肝缺血-再灌注损伤、脑梗塞、缺血性心脏病、肾病或肺纤维化、多发性硬化或神经退化性疾病；所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物 或其医药上可接受的衍生物，视情况与医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂一起投与；其中m为1至4的整数；R1在每次出现时均独立地为氢、卤素、羟基、-NO2、-NH2、-CN、视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra、-OPO2ORa或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分；R2和R3均独立地为氢、羟基、-NH2、视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基部分、-ORR、-S(＝O)nRd、-NRbRc、-C(＝O)Ra或-C(＝O)ORa；其中n为0-2，RR为视情况经取代的脂族基、杂脂族基、脂环族基、杂环基、芳基或杂芳基或酰基部分；或R2和R3连同二者所连接的氮一起形成视情况经取代的杂芳基或杂环基，视情况经取代高哌啶基除外，所述杂芳基或杂环基包括4-10个环成员和0-3个选自由O、N和S组成的群组的额外杂原子；所述杂芳基或杂环基视情况进一步经一或多个视情况经取代的脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基取代；Rb和Rc在每次出现时均独立地选自由氢；羟基；SO2Rd；和脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基、杂芳基或酰基部分组成的群组；Rd在每次出现时均独立选自由氢、-N(Re)2、脂族基、脂环族基、杂脂族基、杂环基、芳基或杂芳基组成的群组；且Re在每次出现时均独立地为氢或脂族基；限制条件为所述化合物不具有下列结构中的一个
67.如权利要求66所述的方法，其中所述神经退化性疾病为异染性脑白质营养不良、雷弗素姆氏病、肾上腺脑白质营养不良、克腊比氏病、苯丙酮尿症、卡纳万病、佩-梅二氏病或亚历山大氏病。
68.如权利要求66所述的方法，其中所述方法是治疗选自下列的疾病或病况或者减轻所述疾病或病况的严重程度与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1-抗胰蛋白酶不足)相关的肝纤维化；器官、植入体或移植物受损和/或缺血；缺血/再灌注损伤；中风、外伤性头部损伤、脊髓损伤和其它脑血管疾病；心肌缺血；动脉粥样硬化；周边血管疾病；心血管疾病；糖尿病；肾衰竭；肾纤维化、肺纤维化或特发性肺纤维化；和多发性硬化。
69.如权利要求66所述的方法，其中所述方法是治疗伤口以加速愈合；促进受损和/或缺血的器官、植入体或移植物形成血管；改善大脑、心脏、肝脏、肾和其它组织和器官中的缺血/再灌注损伤；使由慢性心脏缺血或心肌梗塞引起的心肌灌注正常化；发展或增加血管阻塞之后的或通往缺血组织或器官的侧枝血管形成；纤维化性疾病；包括纤维化和硬化的肝病；肺纤维化；造影剂肾病；肾阻塞的继发性纤维化；肾创伤和移植；慢性糖尿病和/或高血压的继发性肾衰竭；和/或糖尿病。
70.如权利要求66所述的方法，其中所述化合物具有下列结构 其中Cy为视情况经取代的连接有N的5-至10-元杂环基，视情况经取代的高哌啶基除外。
71.一种治疗下列疾病或减轻所述疾病的严重程度的方法肝病、肺病、纤维化疾病、肾纤维化、肾阻塞的继发性肾纤维化、肾创伤、肝纤维化、肺纤维化、特发性肺纤维化、造影剂肾病，促进器官形成血管，周边血管疾病、与C型肝炎、B型肝炎、δ型肝炎、慢性酒精中毒、非酒精性脂肪性肝炎、肝外阻塞(胆管结石)、胆管病变(原发性胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎)、自身免疫性肝病和遗传性代谢失调症(威尔森氏病、血色素沉着病和α-1-抗胰蛋白酶不足)相关的肝纤维化；所述方法包括对需要的个体投与治疗有效量的具有如下结构的化合物
全文摘要
本发明提供具有式(I)或式(II)的化合物式(I)、式(II)和其医药上可接受的衍生物，其中m、p、R
文档编号A61P35/00GK101039918SQ200580032410
公开日2007年9月19日 申请日期2005年9月28日 优先权日2004年9月28日
发明者戴维·E·泽姆鲍尔, 贾斯比尔·辛格, 拉马·K·米什拉 申请人:安吉翁生物医药有限公司