嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物用于治疗全身性肥大细胞增多症的应用的制作方法

专利名称：嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物用于治疗全身性肥大细胞增多症的应用的制作方法
嘧淀基氨基苯甲酰胺衍生物用于治疗全身性肥大细胞增多症的应用 本发明的概述
本发明涉及嘧咬基氨基苯曱酰胺衍生物用于制备治疗全身性肥大细胞 增多症的药物的应用。本发明还涉及一种治疗全身性肥大细胞增多症的方 法。
背景技术：
全身性肥大细胞增多症(SM)可以被分类为惰性SM (几乎没有或者没 有器官功能受损的迹象)、侵袭性SM(存在器官功能受损)、伴有血液学非 肥大细胞疾病的SM (SM-AHNMD)和肥大细胞白血病。成人SM的临床表 现多种多样，包括皮肤病(通常为色素性荨麻渗)、肥大细胞介质-释放症状 (头痛、面红、头牽、牽厥、过敏反应等)、以及直接或间接的器官损害(由 溶解性骨损害、骨质疏松症或骨折引起的骨疼痛、肝脾大、由骨髓牵涉引 起的血细胞减少症)。此外，大约20。/。患有SM的患者可能表现出显著的并 且有时是孤立的血液嗜曙红细胞增多(Tefferi和Pardanani 2004)。
一般而言，肥大细胞白血病是存活以月计的末期疾病并且迄今为止没 有有效的治疗。无痛SM的自然史要好得多，具有以数十年计的平均存活 期并且极少发展为侵袭性SM和SM-AHNMD。 SM-AHNMD的结果是由 相关的AHNMD决定的并且其明显比没有AHNDM的SM更坏。对于惰 性SM和没有AHNMD的侵袭性SM而言，骨髓肥大细胞和嗜曙红细胞含 量增加、血清碱性磷酸酯酶升高、贫血和肝脾大都与不良预后有关(Tefferi 和Pardanani 2004)。当用Gleevec⑧进行治疗时，在伴有FIPlLl-PDGFRa 基因融合的SM患者体内获得了完全的组织学和临床緩解(Pardanani 2003a， Parda腿i 2003b)。
现在已经发现，嘧啶基氨基苯曱酰胺衍生物可有效对抗SM，尤其是 伴有FIPlLl-PDGFRa基因融合的SM。
本发明要解决的问题是提供可用于治疗尤其是全身性肥大细胞增多 症，尤其是伴有FIPlLl-PDGFRoc基因融合的SM的嗜咬基氨基苯甲酰胺 衍生物。
本发明的4既述
本发明涉及式(I)的嘧啶基氨基苯甲酰胺化合物(下文:"嘧啶基氨基苯 甲酰胺衍生物")以及该类化合物的N-氧化物或可药用的盐用于制备治疗全 身性肥大细胞增多症和伴有FIPlLl-PDGFRa基因融合的SM的药物组合 物的应用
Rn表示氢、低级烷基、低级烷氧基-低级烷基、酰氧基-低级烷基、羧 基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基或苯基-低级烷基；
R2表示氢、任选地被一个或多个相同或不同的基团R3取代的低级烷 基、环烷基、苯并环烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮 原子和零或一个氧原子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在 各种情况中未被取代或者被单-或多取代；并且
R3表示羟基、低级烷氧基、酰氧基、羧基、低级烷氧基羰基、氨基甲 酰基、N-单-或N，N-二取代的氨基曱酰基、氨基、单-或二取代的氨基、环 烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮原子和零或一个氧原 子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在各种情况中未被取代
其中
或者被单-或多取代；
或者其中Ri和R2—起表示任选地被低级烷基、环烷基、杂环基，苯 基、羟基、低级烷氧基、氨基、单-或二取代的氨基、氧代、吡咬基、吡嗪 基或嘧啶基单-或二取代的具有四、五或六个碳原子的亚烷基；具有四或五 个碳原子的苯亚烷基(benzalkylene);具有一个氧和三或四个碳原子的氧杂 亚烷基；或者具有一个氮和三或四个碳原子的氮杂亚烷基，其中的氮未被 取代或者被低级烷基、苯基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基、羧基-低级烷基、氨基甲酰基-低级烷基、N-单-或N，N-二取代的氨基曱酰基-低级 烷基、环烷基、低级烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡。定基、 嘧咬基或吡溱基所取代；
R4表示氢、低级烷基或卣素。
本发明还涉及式I的化合物用于治疗或预防全身性肥大细胞增多症的 应用。
除非另有说明，否则上下文所用的一般术语在本公开物中优选地具有 下面的含义
前缀"低级"表示一种具有高至并包括最多7个，尤其是高至并包括最 多4个碳原子的基团，所讨论的基团是直链的或者具有一个或多个分支的 支链。
在化合物、盐等使用复数的情况中，其也指单数化合物、盐等。 任何不对称碳原子都可以以(R)-、 (S)-或(R，S)-构型存在，优选地以(R)-或(S)-构型存在。因此，所述化合物可以以异构体混合物的形式存在或者可 以以纯异构体的形式存在，优选地以对映异构体纯的非对映异构体的形式 存在。
本发明还涉及式I化合物可能的互变异构体。
低级烷基优选地是具有1 (包括l)至高至7 (包括7)，优选1 (包括l)至 4 (包括4)个碳原子的直链或支链烷基；低级烷基优选地是丁基，如正-丁基、 仲-丁基、异丁基、叔-丁基、丙基，如正-丙基或异丙基、乙基或甲基。低 级烷基优选地是甲基、丙基或叔-丁基。
低级酰基优选地是甲酰基或低级烷基羰基，特别是乙酰基。 芳基是通过位于该基团的芳族环碳原子上的键被结合到所述分子上的
芳族基团。在一个优选的实施方案中，芳基是具有6至14个碳原子的芳族 基团，尤其是苯基、萘基、四氢萘基、芴基或菲基，并且未被取代或者被 一个或多个，优选高至三个，尤其是一或两个取代基所取代，所述取代基 尤其是选自氨基、单-或二取代的氨基、卣素、低级烷基、被取代的低级烷 基、低级链烯基、低级炔基、苯基、羟基、被醚化或酯化的羟基、硝基、 氰基、羧基、被酯化的羧基、烷酰基、苯甲酰基、氨基甲酰基、N-单-或 N，N-二取代的氨基曱酰基、脒基、胍基、脲基、巯基、磺基、低级烷硫基、 苯硫基、苯基-低级烷硫基、低级烷基苯硫基、低级烷基亚磺酰基、苯基亚 磺酰基、苯基-低级烷基亚磺酰基、低级烷基苯基亚磺酰基、低级烷基磺酰 基、苯基磺酰基、苯基-低级烷基磺酰基、低级烷基苯基磺酰基、卤代低级 烷基巯基、闺代低级烷基磺酰基，尤其是如三氟甲磺酰基、二羟基硼烷 (-B(OH)2)、杂环基、单-或二环杂芳基和被结合到该环的毗邻C-原子上的 低级亚烷基二氧基，如亚曱二氧基。芳基更优选地是苯基、萘基或四氢萘 基，其各自未被取代或者独立地被一个或两个选自卣素，尤其是氟、氯、
或溴；羟基；被低级烷基，例如被甲基、被卣代低级烷基，例如三氟甲基、
或被苯基醚化的羟基;结合到两个毗邻C-原子上的低级亚烷基二氧基，例 如亚甲二氧基、低级烷基，例如曱基或丙基；卣代低级烷基，例如三氟甲 基；羟基-低级烷基，例如羟基甲基或2-羟基-2-丙基；低级烷氧基-低级烷 基；例如曱氧基曱基或2-甲氧基乙基；低级烷氧基羰基-低级烷基，例如甲 氧基羰基曱基；低级炔基，如l-丙炔基；被酯化的羧基，尤其是低级烷氧 基羰基，例如甲氧基羰基、正-丙氧基羰基或异-丙氧基羰基；N-单-取代的 氨基曱酰基，特别是被低级烷基，例如甲基、正-丙基或异-丙基单取代的 氨基甲酰基；氨基；低级烷基氨基，例如甲基氨基；二-低级烷基氨基，例 如二甲基氨基或二乙基氨基；低级亚烷基-氨基，例如吡咯烷-l-基或哌啶-l-基；低级氧杂亚烷基-氨基，例如吗啉-4-基、低级氮杂亚烷基-氨基，例如
艰，秦-l-基、酰基氨基，例如乙酰基氨基或苯曱酰基氨基；低级烷基磺酰基， 例如曱基磺酰基；氨磺酰基；或苯基磺酰基的取代基所取代。
环烷基优选地是环丙基、环戊基、环己基或环庚基，并且可以未被取 代或者被一个或多个，尤其是一个或两个选自上面芳基取代基所定义基团 的取代基所取代，最优选地被低级烷基，如甲基、低级烷氧基，如曱氧基 或乙氧基、或羟基所取代，并且其还可以被氧代基团所取代或者与苯环稠 合，例如在苯并环戊基或苯并环己基的情况中。
被取代的烷基是如前面所定义的烷基，尤其是低级烷基，优选甲基； 在可以存在一个或多个，尤其是高至三个取代基的情况中，其取代基主要 选自卣素，尤其是氟、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、 N-低级烷酰基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基和苯基-低级烷氧 基羰基。尤其优选地是三氟甲基。
单-或二取代的氨基尤其是被一个或两个彼此独立地选自低级烷基，如
曱基；羟基-低级烷基，如2-羟基乙基；低级烷氧基低级烷基，如甲氧基乙 基；苯基-低级烷基，如节基或2-苯基乙基；低级烷酰基，如乙酰基；苯甲 酰基；被取代的苯甲酰基，其中的苯基尤其是被一个或多个，优选一个或 两个选自硝基、氨基、卣素、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级垸基氨基、羟 基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基和氨基甲酰基的取代基所 取代；和其中的苯基未被取代或者尤其是被一个或多个，优选一个或两个 选自硝基、氨基、卣素、N-低级烷基氨基、N,N-二-低级烷基氨基、羟基、 氰基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷酰基和氨基甲酰基的取代基所取代 的苯基-低级烷氧基羰基的取代基所取代的氨基；并且优选地是N-低级烷 基氨基，如N-曱基氨基、羟基-低级烷基氨基，如2-羟基乙基氨基或2-羟 基丙基、低级烷氧基低级烷基，如甲氧基乙基、苯基-低级烷基氨基，如节 基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、N-苯基-低级烷基-N-低级烷基氨基、N,N-二-低级烷基苯基氨基、低级烷酰基氨基，如乙酰基氨基，或是选自苯曱酰 基氨基和苯基-低级烷氧基羰基氨基的取代基(其中的苯基在各种情况中未 被取代或者尤其是被硝基或氨基所取代，或者还可以被卣素、氨基、N-低
级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基、 低级烷酰基、氨基曱酰基或氨基羰基氨基所取代)。二取代的氨基还可以是 低级亚烷基-氨基，例如吡咯烷-l-基、2-氧代吡咯烷-l-基或哌啶-l-基；低级 氧杂亚烷基-氨基，例如吗啉-4-基、或低级氮杂亚烷基-氨基，例如哌漆-l-基或N-取代的哌溱-l-基，如N-曱基哌嚷-l-基或N-甲氧基羰基哌溱-l-基。
卤素尤其是氟、氯、溴或碘，尤其是氟、氯或溴。
被醚化的羟基尤其是CVC2o烷氧基，如正-癸氧基；低级烷氧基(优选 的)，如甲氧基、乙氧基、异丙氧基或叔-丁氧基；苯基-低级垸氧基，如千 氧基；苯氧基；囟代低级烷氧基，如三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；或被包含一个或两个氮原子的单-或二环杂芳基所取代的低级 烷氧基，优选被咪唑基，如lH-咪唑-l-基、吡咯基、苯并咪唑基，如l-苯 并咪唑基、吡咬基，尤其是2-、 3-或4-吡啶基、嘧t基，尤其是2-嘧咬基、 吡嗪基、异喹啉基，尤其是3-异喹啉基、喹啉基、吲哚基或噻唑基所取代 的低级烷氧基。
被酯化的羟基尤其是低级烷酰氧基、苯曱酰氧基、低级烷氧基羰基氧 基，如叔-丁氧基羰基氧基、或苯基-低级烷氧基羰基氧基，如千氧基羰基氧基。
被酯化的羧基尤其是低级烷氧基羰基，如叔-丁氧基羰基、异-丙氧基 羰基、曱氧基羰基或乙氧基羰基、苯基-低级烷氧基羰基或苯氧基羰基。
烷酰基主要是烷基羰基，尤其是低级烷酰基，例如乙酰基。
N-单-或N，N-二取代的氨基曱酰基尤其是被一个或两个独立地选自低 级烷基、苯基-低级烷基和羟基-低级烷基、或低级亚烷基、氧杂-低级亚烷 基或任选地在末端氮原子上被取代的氮杂-低级亚烷基的取代基所取代。
包含零、一、二或三个环氮原子和零或一个氧原子和零或一个硫原子 的单_或二环杂芳基(这些基团在各种情况中未被取代或者被单_或多取代)
指的是一种在将该杂芳基结合到式I分子的剩余部分的环中是不饱和的杂 环部分并且优选地是一种其中在结合环中(但是还可任选地在任何稠合的 环中)至少有一个碳原子被选自氮、氧和硫的杂原子代替的环；其中所述结
合环优选地具有5至12个，更优选5或6个环原子；并且其可以未^皮取代 或者被一个或多个，尤其是一个或两个选自上面芳基取代基所定义基团的 取代基所取代，最优选地被低级烷基，如甲基、低级烷氧基，如甲氧基或 乙氧基、或羟基所取代。所述单-或二环杂芳基优选地选自2H-吡咯基、吡 咯基、咪唑基、苯并咪唑基、吡唑基、吲唑基、嘌呤基、吡咬基、吡溱基、 嘧啶基、峻唤基、4H-喹漆基、异会啉基、喹啉基、酞漆基、萘淀基、喹 喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、蝶啶基、吲嗪基、3H-吲哚基、吲哚基、异 吲味基、嚅唑基、异嚅唑基、噻唑基、异瘗唑基、三唑基、四唑基、呋咱 基、苯并问吡唑基、瘗吩基和呋喃基。所述单-或二环杂芳基更优选地选自 吡咯基、咪唑基，如lH-咪唑-l-基、苯并咪哇基，如l-苯并咪唑基、丐l唑 基，尤其是5-吲唑基、吡梵基，尤其是2-、 3-或4-吡《基、嘧咬基，尤其 是2-嘧淀基、吡嗪基、异喹啉基，尤其是3-异会啉基、会啉基，尤其是4-或8-会啉基、吲哚基，尤其是3-吲味基、噻唑基、苯并[d吡唑基、噻吩基 和呋喃基。在本发明一个优选的实施方案中，所述吡咬基在相对于其氮原子 而言的邻位上被羟基取代并且因此至少部分以相应的互变异构体(其是吡 啶-(lH)2-酮)的形式存在。在另一个优选的实施方案中，所述嘧咬基在2位 和4位上都被羟基取代，并且因此以数种互变异构形式存在，例如以嘧吱 -(IH， 3H)2，4-二酮的形式存在。
杂环基尤其是一种具有一个或两个选自氮、氧和^fL的杂原子的五、六 或七-员杂环系统，其可以是不饱和的或者完全或部分饱和的，并且未被取 代或者尤其是被低级烷基，如曱基、苯基-低级烷基，如千基、氧代或杂芳 基，如2-哌溱基所取代；杂环基尤其是2-或3-吡咯烷基、2-氧代-5-吡咯烷 基、哌啶基、N-节基-4-哌咬基、N-低级烷基-4-哌啶基、N-低级烷基-哌溱 基、吗啉基，例如2-或3-吗啉基、2-氧代-lH-氮杂革-3-基、2-四氢呋喃基 或2-甲基-l,3-二氧戊环-2-基。
盐尤其是式I化合物的可药用的盐。
该盐由具有碱性氮原子的式I化合物与有机或无机酸以酸加成盐的形 式形成，尤其是可药用的盐。适宜的无机酸有例如氢卣酸，如盐酸、硫酸
或磷酸。适宜的有机酸有例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、 丙酸、辛酸、癸酸、十二碳酸、羟基乙酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、己二 酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、氨基酸，如谷 氨酸或天门冬氨酸、马来酸、羟基马来酸、曱基马来酸、环己烷甲酸、金
刚烷甲酸、苯甲酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、邻苯二曱酸、苯乙酸、扁桃 酸、肉桂酸、曱烷-或乙烷-磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-l，2-二磺酸、M酸、 2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、2-、 3-或4-甲基苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、 十二烷基硫酸、N-环己基氨基磺酸、N-曱基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸 或其它有机质子酸，如抗坏血酸。
在存在荷负电基团如羧基或磺基的情况下，还可以与碱形成盐，例如 金属或铵盐，如碱金属或碱土金属盐，例如钠、钾、镁或钙盐，或者可以 与氨或适宜的有机胺如叔单胺，例如三乙胺或三(2-羟基乙基)胺或杂环碱， 例如N-乙基-哌咬或N,N'-二甲基哌，秦形成铵盐。
当在相同的分子中存在碱性基团和酸性基团时，式I的化合物也可以 形成内盐。
对于分离或纯化而言，还可以使用不可药用的盐，例如苦味酸盐或高 氯酸盐。对于治疗应用而言，仅使用可药用的盐或游离化合物(当以药物制 剂的形式应用时)，并且因此优选这些物质。
由于游离形式的新型化合物和其盐形式(包括可用作中间体，例如在所 述新型化合物的纯化或鉴定中作为中间体的盐)之间的密切联系，因此在上 下文中任何时候涉及游离化合物时，应当清楚的是，在适宜和方便时，其 也指相应的盐。
在于2004年1月15日公开的WO 04/005281中公开了一些式I范围 中的化合物以及其制备方法，该文献引入到本申请中作为参考。 一种优选 的化合物是式(II)的4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基氨基I-7V-[5-(4-甲基 -lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基l苯曱酰胺以及其可药用的盐 对于该嘧!^氨基苯甲酰胺衍生物化合物而言，在特定地给出引用专 利申请或科技出版物的各种情况中，这些公开物的终产物、药物制剂以及 其权利要求书的主题物质都被引入到本申请中作为参考。
用代号、通用名或商品名确定的活性剂的结构可以得自标准纲要"默克
索引(The Merck Index)"的现行版本或者得自数据库，例如Patents International (例如IMS World Publications)。其相应内容在这里被引入作 为参考。
现在已经令人吃惊地发现， 一些嘧咬基氨基苯甲酰胺衍生物具有治疗 性质，该性质特别是可使其用作PDGFRa (血小板衍生生长因子a，也被 缩写为PDGRA)的抑制剂，并且尤其是使其可用于治疗和预防 FIPlLl-PDGFRa-诱导的疾病如全身性肥大细胞增多症。
上下文所用的FIPlLl-PDGFRa是基因FIP1L1 (FIP1样l)与 PDGFRa的融合产物的命名。
因此，本发明涉及嘧啶基氨基苯曱酰胺衍生物用于制备治疗 FIPlLl-PDGFRa-诱导的全身性肥大细胞增多症、或者与FIPLl-PDGFRa 或活化PDGFRa的相似突变有关的其它疾病的药物的应用。
全身性肥大细胞增多症(SM)包括惰性SM、侵袭性SM、伴有血液学 非肥大细胞疾病的SM和肥大细胞白血病。
在另 一个实施方案中，本发明涉及嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物用于制 备治疗过敏性鼻炎、变应性皮炎、药物过敏或食物过敏、血管性水肿、荨 麻渗、婴儿猝死综合征、支气管肺曲霉病、多发性硬化或肥大细胞增多症，
尤其是用于治疗过敏性鼻炎、变应性皮炎、药物过敏或食物过敏、血管性 水肿、荨麻疹、婴儿猝死综合征、支气管肺曲霉病、多发性硬化或对伊马
替尼(imatinib)具有耐药性的肥大细胞增多症的药物组合物的应用。
这里所用的术语"过敏性鼻炎"指的是鼻粘膜的任何过敏反应。该类过 敏反应例如可以常年发生，例如春季结膜炎，或者可以季节性发生，例如 花粉热。
这里所用的术语"变应性皮炎，，尤其是指特应性皮炎、过敏性接触性皮 炎和湿渗性皮炎，但是也包括例如脂溢性皮炎、扁平莒藓、荨麻瘆和痤痴。 这里所定义的特应性皮炎是一种在具有对瘙氧的皮肤阈值降低的遗传因素 个体中观察到的慢性炎性皮肤病。其特征主要在于十分痒，从而导致了抓 和摩擦，其接下来又产生了典型的湿瘆损害。这里所定义的过敏性接触性 皮炎是一种由于对各种物质产生变应性致敏的皮炎形式，所述物质是在由 于之前与其接触而对变应原具有获得性超敏反应的患者的皮肤中产生炎性 反应的物质。
这里所用的术语"药物过敏或食物过敏"指的是由药物或摄取的抗原， 如，例如，草莓、牛奶或蛋类引起的过敏反应。
术语"支气管肺曲霉病"指的是肺的曲霉感染。
这里所用的术语"肥大细胞增多症，，指的是全身性肥大细胞增多症，例 如肥大细胞瘤，并且还指犬肥大细胞赘生物。肥大细胞增多症是一种具有 有限的治疗选择并且通常预后差的骨髓组织增生病症。已经将肥大细胞增 多症的发病机理归因于受体酪氨酸激酶KIT的组成活化。对于大部分肥大 细胞增多症患者而言，KIT的这种失控的酪氨酸激酶活性是由于带来体外 和体内伊马替尼或曱磺酸伊马替尼耐药性的蛋白(D^6V)的816密码子中 的突变产生的，甲磺酸伊马替尼以Gleevec⑧的名称在美国进行销售或者以 Glivec⑧的名称在其它地方进行销售。
肥大细胞在这里所述的变应性病症中以原发性效应器细胞的形式起着 重要作用。抗原-特异性IgE-介导的肥大细胞脱粒导致了随后化学介质和许
多细胞因子的释放和白三烯合成。此外，在多发性硬化的发病机理中也涉 及肥大细胞。
肥大细胞赘生物既发生于人又发生于动物。对于狗而言，肥大细胞赘
生物即所谓的肥大细胞瘤，并且这种疾病^L常见，占犬胂瘤的7%-21%。 必需注意人肥大细胞增多症和犬肥大细胞赘生物之间的区别，前者通常是 短暂的或惰性的，而后者的行为不可预知并且常常是侵袭性的和转移性的。 例如，人孤立性肥大细胞瘤常常不转移；相反，Hottendorf & Nielsen (1969) 在对用938条狗进行的46份公开的肿瘤报道进行评估后发现，有50 %的犬 肥大细胞瘤为恶性的。
宠物群体中的癌症是一种自发性疾病。宠物主人为了延长其动物生命 的质量，常常在私人连锁(referral)兽医医院和乡下的兽医教学医院寻求兽 医肿瘤学专家的特别护理和治疗。动物癌症患者的治疗方式与人相似，包 括手术、化疗、；故疗和生物疗法。估计在美国有四千二百万条狗和大约两 千万只猫。对癌症发生率进行粗略估计，对于狗而言，每年可以新诊断出 大约4百万例癌症，并且在猫中确诊的数字相似。
狗的皮肤肥大细胞肿瘤是一种常见的问题。大多数肥大细胞肿瘤是良 性的并且可以用简单的切除来治愈；但是，如果其复发或者转移至较远部 位，则治疗选择4艮有限。对复发损害而言，治疗选择可包括外部光束辐射 治疗。对于远端的转移瘤或散播性疾病而言，已经证明使用包含 Lomustine⑧和长春碱的化疗方案具有一些益处。肥大细胞肿瘤转移瘤的部 位包括皮肤、局部淋巴结、脾、肝和骨髓。
在许多肥大细胞系中探测到 一些导致KIT组成活化的观察结果表明在 肥大细胞增多症的发病机理中涉及KIT受体。例如，在长期人肥大细胞白 血病系(HMC-1)和两种啮齿动物肥大细胞系的相应密码子中出现了 一种造 成Val取代磷酸转移酶结构域中的Asp816和受体自活化的人c-KIT中的 点突变。此外，在一些人肥大细胞增多症病例中已经在原位鉴定出了这种 活化突变。在KIT的细胞内近膜(juxtamembrane)区域中已经发现了两种
其它活化突变，即人HMC-1肥大细胞系中的Val560Gly取代，和被成为 FMA3的啮齿动物肥大细胞系中的七个氨基酸缺失(Thr573-His579)。
本发明更特定地涉及嘧^&氨基苯曱酰胺衍生物用于制备治疗全身性 肥大细胞增多症的药物的应用。
在另 一个实施方案中，本发明提供了 一种治疗全身性肥大细胞增多症 的方法，其包括给需要该类治疗的哺乳动物施用治疗有效量的嘧^氨基 苯甲酰胺^f生物或其可药用的盐或前体药物。
本发明优选地提供了 一种对患有全身性肥大细胞增多症的哺乳动物， 尤其是人进行治疗的方法，其包括给需要该类治疗的哺乳动物施用 FIPlLl-PDGFRa抑制量的4-曱基-3-[4-(3-吡啶基)-2-嗜基氨 基_]\-[5-(4-曱基-lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺(化合物(II))或 其可药用的盐。
在本说明书中，术语"治疗"包括预防性或防止性处理以及治愈性或疾 病的抑制性处理，包括对有患病风险或者怀疑已经患病的患者进行的处理 以及对患病患者进行的处理。这种术语还包括进行延緩疾病进程的处理。
这里所用的术语"治愈，，指的是能够有效治疗正在进行的涉及全身性肥 大细胞增多症的疾病事件。
术语"预防性，，指的是防止涉及全身性肥大细胞增多症的疾病的发作或 复发。
这里所用的术语"延緩进程"指的是在待治疗疾病发作之前或发作的早 期给予患者活性化合物，其中，在所述患者中诊断出了例如相应疾病的前 期形式，或者所述患者正在进行一种医学治疗或者正在经历一种由意外事 件导致的情况，在这种情况下其可能形成相应的疾病。
这种无法预见的性质意味着嘧咬基氨基苯曱酰胺衍生物特别适用于制 造治疗全身性肥大细胞增多症的药物。
对于患有全身性肥大细胞增多症的患者而言，这种作用在临床上特别 相关。
为了证明所述嘧咬基氨基苯甲酰胺衍生物特别适用于治疗全身性肥大 细胞增多症并具有良好的治疗窗和其它优点，用本领域技术人员已知的方 式进行一些临床试验。
量取决于多种因素，包括所治疗的主体、所治疗病症的性质和严重程度、 给药方式。式I的化合物可以通过任何途径来进行给药，包括口服给药、 胃肠外给药，例如腹膜内、静脉内、肌内、皮下、瘤内或直肠给药、或肠
内给药。式I的化合物优选地被口服给药，优选地以1-300 mg/kg体重的 日剂量进行给药，或者对于大多数较大的灵长目动物而言，使用50-5000， 优选500-3000 mg的日剂量。优选的口服日剂量为1-75 mg/kg体重，或者， 对于大多数较大的灵长目动物而言，使用10-2000 mg的日剂量，其可以 以单剂量的形式进行给药或者可以被分割成多个剂量，例如可以每天给药 两次。
开始通常给予小剂量，然后逐渐增加剂量直至达到所确定的对于进行 治疗的主体而言最佳的剂量。剂量的上限受副作用的限制并且可以通过对 进行治疗的主体进行试验来确定。
式I的化合物可以与一种或多种可药用的载体和任选的一种或多种其 它常规药用助剂进行联合，并且可以以片剂、胶嚢、嚢片(caplets)等形式 被肠内给药，例如口服给药，或者可以以可注射的无菌溶液或混悬液形式 被胃肠外给药，例如腹膜内或静脉内给药。所述肠内和胃肠外组合物可以 用常规方法来进行制备。
所述嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物可以单独使用或者与至少一种用于这 些病状的其它药用活性化合物联合使用。这些活性化合物可以在相同的药 物制剂中进行联合或者可以以联合制剂的"套装药盒"的形式进行联合，在 该意义上，所述组合伴侣可以被独立给药或者可以通过使用具有不同数量 组合伴侣的不同固定组合来进行给药，即可以被同时给药或者在不同的时 间点进行给药。然后，所述套装药盒的各部分例如可以被同时给药或按时 间顺序交错给药，即可以在不同的时间点并以相等或不同的时间间隔将套
装药盒的任何一部分进行给药。所列举的用于与嘧咬基氨基苯曱酰胺4汙生 物联合使用的化合物的非限制性实例有细胞毒性的化疗药物，如阿糖胞苷、
柔红霉素、多柔比星、环磷酰胺、VP-16或伊马替尼等。此外，还可以将 嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物与预期将产生显著协同作用的其它信号转导抑 制剂或其它靶向于致癌基因的药物联合。
本发明还涉及用于治疗上文所述疾病和病症的上文所述的嘧"^氨基 苯甲酰胺衍生物与伊马替尼的组合。该类组合的给药可以同时进行，例如 可以以固定的联合药物组合物或制剂的形式进行，或者可以相继进行或者 按时间顺序交错进行。目前，嘧咬基氨基苯甲酰胺衍生物优选以上文所述 的剂型形式进4亍给药，伊马替尼优选以其GLEEVEC (在US)/GLIVEC (在欧洲)的市售形式进行给药，并且其剂量为这些剂型所建议的剂量。
用上述联合进行的全身性肥大细胞增多症的治疗可以是所谓的 一线治 疗，即在事先不进行任何化疗等的情况下对新确诊的疾病进行治疗，或者 其也可以是所谓的二线治疗，即根据疾病的严重程度或阶段以及患者的整 体情况等，在事先用伊马替尼或嘧啶基氨基苯曱酰胺衍生物进行治疗后对 所述疾病进4于治疗。
用下面实施例的结果来说明用于治疗全身性肥大细胞增多症的嘧咬基 氨基苯曱酰胺衍生物的效力。这些实施例说明了本发明，但并不以任何方 式限制本发明的范围
IL-3非依赖性细胞增殖试验
用得自Perkin Elmer Life Sciences (目录号6016947)的发光ATP检测 分析试剂盒ATPLite 根据供应商的指导来测定化合物对细胞活力和增殖 的影响。这种试验系统是以ATP与加入的荧光素酶和D-荧光素的反应所 产生的光(荧光)为基础的。
将在RPMI 1640 (Invitromex，登记号L0501) 、 10%肽牛血清 (Amimed，登记号2-01F86-I)、 2 mM L-谷酰胺(Gibco)混悬液中生长的 Ba/F3 FIP画PDGFRou Ba/F3 kit D-816-V、 Ba/F3 kit D-816-Y、 Ba/F3 kit
delVV、 Ba/F3 kit R-634-W细胞系以10000个细胞/孔的密度接种到黑色 96-孔组织培养板(Packard)中，每孔加入50 完全培养基，然后立即向 其中以50 nL/孔的数量加入2倍浓度的化合物的两倍系列稀释物(一式两 份)。用没有化合物的细胞作为对照并且用没有细胞的培养基来测定该试验 的背景信号。在将其培养70小时(37。C，5。/。C02)后，通过以每孔50pL的
其在轨道平板震荡器中在700rpm下振摇5分钟。随后，向其中加入50pL 底物溶液(荧光素酶和D-荧光素)并且在振摇5分钟和将该板在黑暗中适应 10分钟后，用Packard TopCount来测量光发射。
以细胞培养物的总生长抑制(TGI)的形式来测定所述化合物的活性并 且其计算如下:在减去背景信号后，将所得对照细胞的信号作为100%。将 化合物的作用表示为对照信号的降低百分比形式。通过图形外推法来由其 剂量响应曲线确定其TGI50值。
GIST882是一种表达活化KIT突变(外显子13， K-642-E)的人胃肠道间 质瘤(GIST)细胞系(Tuveson DA， Willis NA， Jacks T， Griffin JD， Singer S， Fletcher CD， Fletcher JA， Demetri GD，胃肠道间质瘤c-KIT癌蛋白的 STI571灭活生物学和临床含义(STI571 inactivation of the gastrointestinal stromal tumor c-KIT oncoprotein: biological and clinical implications), Oncogene, 2001 Aug 16; 20(36): 5054-8)。将这些GIST882细胞在补加了 15% FCS和2 mM谷酰胺(Gibco)的RPMI 1640 (Invitromex，目录号 L0501)中进行培养。在对这些细胞进行接种前，将细胞培养烧瓶和96孔组 织培养板用位于超纯水中的1.5 %明胶溶液在37 °C下处理30-60分钟以改 善粘附和细胞生长。在使用前，通过加热(高压灭菌器)对该明胶(BIORAD， EIA纯度试剂，# 170-6537)进行灭菌。
将GIST882细胞以10000个细胞/孔的密度接种到黑色96-孔组织培养 板(Packard)中的50 jtL完全培养基中并将其培养一天以使这些细胞附着。 一式两份地向其中加入2倍浓度的化合物的两倍系列稀释物(终体积: lOO^L/孔)。用没有化合物的细胞作为对照并且用没有细胞的培养基来测定
该试验的背景信号。在将其培养70小时(37。C， 5。/。C02)后，通过以每孔 50jaL的数量加入哺乳动物细胞溶解溶液(试剂盒中提供的)来使这些细胞溶 解并将其在轨道平板震荡器中在700 rpm下振摇5分钟。随后，向其中加 入50pL底物溶液(荧光素酶和D-荧光素)并且在振摇5分钟和将该板在黑 暗中适应IO分钟后，用Packard TopCoimt来测量光发射。
以细胞培养物的总生长抑制(TGI)的形式来测定所述化合物的活性并 且其计算如下:在减去背景信号后，将所得对照细胞的信号作为100%。将 化合物的作用表示为对照信号的降低百分比形式。通过图形外推法来由其 剂量响应曲线确定其TGI50值。
化合物(II)抑制GIST882细胞增殖的平均IC50值<200 nM。
用于测定对细胞中Kit自磷酸化作用的影响的试验
用捕获ELISA来测定得自细胞——未进行处理或用化合物进行了处 理的细胞——的溶胞产物中细胞耙点的磷酸化状态。使粘附细胞在96-孔平 底组织培养板中进行生长至接近融合。将在混悬液中进行生长的细胞以每 孔100000-150000个细胞的密度进行接种。在用化合物系列稀释液进行处 理后，将这些细l包用PBS洗涤一次，然后用100至150 溶解緩沖液 (50mM Tris/HCl， pH 7.4, 150 mM氯化钠，5 mM EDTA， 1 mM EGTA， 1 % NP-40， 2 mM原钒酸钠，1 mM PMSF， 50 pg/mL抑酶肽和80 jig/mL 亮肽素)使细胞溶解。立即使用该细胞溶解产物或者将其储存在-20。C下。 将50 pL该溶胞产物转移到之前用得自Diaclone (# 854.510.000)的单克隆 抗画CD117抗体涂布的黑色ELISA板(NUNC-Maxisorp,目录号Nr.437111) 中。为了进行涂布，将该抗体用PBS稀释并将其与所述板一起在4。C下培 养一夜(50 jiL/孔)。使用用碱性磷酸酯酶(AP)(得自Zymed的PY20 AP)标 记的商业化抗-P-Tyr Ab，以1:3000至1:10000 (0.1至0.33照/ml)的终浓度 来探测所捕获Kit的磷酸化。在取出所述细胞溶解产物后，向其中加入次 级Ab。最后，向其中加入卯^L/孔的化学发光AP底物(得自Applied Biosystems的具有Emerald II的CDPStar RTU (目录号T2388C))并将其
在室温下在黑暗中培养45分钟。将这些板用Packard TopSealTM-A板密 封器(目录号600S1SS)进行密封并通过用Packard Top Count微量培养板 闪烁计数器(Top Count)测量每秒的计数(CPS)来对器荧光进行定量。
计算用未进行处理的细胞的溶胞产物获得的ELISA-读数(CPS)和试验 -背景(全部组分，但是没有细胞溶解产物)读数之间的差异并且将其作为反 映存在于这些细胞中的组成磷酸化的Kit蛋白的100%形式。将这些化合 物对该Kit激酶活性的活性表示为Kit磷酸化降低百分比的形式。由其剂 量响应曲线通过图形外推法来测定其IC50和IC卯值。
实施例I
i殳计一种II期开放标记的研究来对以400 mg的剂量每天口服两次给 药的化合物(II)的安全性和效力进行评估。对符合特定疾病标准并具有进行 治疗的临床迹象的SM患者进行登记。这些结果是以这项研究中前23名患 者的初步数据为基础的。结果:其平均年龄为49 (范围为33-78)岁并且SM 确诊的平均时间为27 (范围为1至292)个月。对于具有有效数据的患者而 言，17名患者中有13名在骨髓细胞中具有一种c-kitD816V突变。与化合 物(II)的平均接触时间为144天。18名患者(78%)不间断地进行了治疗；5 名患者(22%)终止了治疗，其中3名患者(13%)因为不利事件而终止治疗， 2名患者(9%)赞成撤出。以血清类胰蛋白酶、骨髓肥大细胞计数和临床症 状的改善为基础，三名患者(13%)才艮告具有响应(2名不完全的减轻和1名 微小响应)。3名响应患者中的2名获得了基础突变数据并且显示了 c-kit D8WV突变。这些数据表明化合物(II)具有临床活性并且对于SM患者而 言具有可接受的安全性和耐受性。
权利要求
1.式(I)的嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物以及该类化合物的N-氧化物或可药用的盐用于制备治疗或预防全身性肥大细胞增多症的药物的应用其中R1表示氢、低级烷基、低级烷氧基-低级烷基、酰氧基-低级烷基、羧基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基或苯基-低级烷基；R2表示氢、任选地被一个或多个相同或不同的基团R3取代的低级烷基、环烷基、苯并环烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮原子和零或一个氧原子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在各种情况中未被取代或者被单-或多取代；并且R3表示羟基、低级烷氧基、酰氧基、羧基、低级烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰基、氨基、单-或二取代的氨基、环烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮原子和零或一个氧原子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在各种情况中未被取代或者被单-或多取代；或者其中R1和R2一起表示任选地被低级烷基、环烷基、杂环基、苯基、羟基、低级烷氧基、氨基、单-或二取代的氨基、氧代、吡啶基、吡嗪基或嘧啶基单-或二取代的具有四、五或六个碳原子的亚烷基；具有四或五个碳原子的苯亚烷基；具有一个氧和三或四个碳原子的氧杂亚烷基；或者具有一个氮和三或四个碳原子的氮杂亚烷基，其中的氮未被取代或者被低级烷基、苯基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基、羧基-低级烷基、氨基甲酰基-低级烷基、N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰基-低级烷基、环烷基、低级烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基所取代；R4表示氢、低级烷基或卤素。
2. 如权利要求l所述的应用，其中所述的全身性肥大细胞增多症对伊马替 尼具有耐药性。
3. 如权利要求1或2中任意一项所述的应用，其中所述的式(I)的化合物是 式(II)的4-曱基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基氨基卜7V-[5-(4-曱基-lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基I苯甲酰胺以及其N-氧化物或可药用的盐。
4. 如权利要求1-3中任意一项所述的应用，其中所述的全身性肥大细胞增多 症与FIPlLl-PDGFRa有关。
5. 选自式(I)化合物以及该类化合物的N-氧化物或可药用的盐的嘧咬基氨 基苯甲酰胺衍生物用于治疗或预防全身性肥大细胞增多症的应用 <formula>formula see original document page 4</formula>其中&表示氢、低级烷基、低级烷氧基-低级烷基、酰氧基-低级烷基、羧 基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基或苯基-低级烷基；R2表示氢、任选地被一个或多个相同或不同的基团R3取代的低级烷 基、环烷基、苯并环烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮 原子和零或一个氧原子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在 各种情况中未被取代或者被单-或多取代；并且Rs表示羟基、低级烷氧基、酰氧基、羧基、低级烷氧基羰基、氨基曱 酰基、N-单-或N，N-二取代的氨基曱酰基、氨基、单-或二取代的氨基、环 烷基、杂环基、芳基、或包含零、一、二或三个环氮原子和零或一个氧原 子和零或一个硫原子的单-或二环杂芳基，这些基团在各种情况中未被取代 或者被单-或多取代；或者其中&和R2—起表示任选地被低级烷基、环烷基、杂环基、苯 基、羟基、低级烷氧基、氨基、单-或二取代的氨基、氧代、吡咬基、吡溱 基或嘧啶基单-或二取代的具有四、五或六个碳原子的亚烷基；具有四或五 个碳原子的苯亚烷基；具有一个氧和三或四个碳原子的氧杂亚烷基；或者 具有一个氮和三或四个碳原子的氮杂亚烷基，其中的氮未被取代或者被低 级烷基、苯基-低级烷基、低级烷氧基羰基-低级烷基、羧基-低级烷基、氨 基曱酰基-低级烷基、N-单-或N，N-二取代的氨基甲酰基-低级烷基、环烷基、 低级烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡咬基、嘧咬基或吡溱基 所取代；R4表示氢、4氐级烷基或面素。
6.如权利要求4所述的应用，其中所述的嘧^^氨基苯甲酰胺衍生物是式 (II)的化合物或其N-氧化物或可药用的盐。
7. 用于治疗伴有FIPlLl-PDGFRa-基因融合的全身性肥大细胞增多症的如 权利要求5或6中任意一项所述的应用。
8. —种对患有全身性肥大细胞增多症的哺乳动物进行治疗的方法，其包括 给需要该类治疗的哺乳动物施用FIPlLl-PDGFRa-诱导抑制量的式(II)的 化合物或其N-氧化物或可药用的盐。
9.一种用于治疗FIPlLl-PDGFRa-诱导的全身性肥大细胞增多症的药物制 剂，其包含式(II)的化合物
10.—种对患有全身性肥大细胞增多症的包括人在内的哺乳动物进行治疗 的方法，其包括给需要该类治疗的哺乳动物施用式(II)的化合物或其N-氧化物或可药用的盐。
全文摘要
本发明涉及嘧啶基氨基苯甲酰胺衍生物用于制备治疗全身性肥大细胞增多症的药物的应用。
文档编号A61K31/506GK101171013SQ200680014943
公开日2008年4月30日 申请日期2006年5月1日 优先权日2005年5月2日
发明者D·法布罗, J·梅斯坦, L·埃兰德, P·W·曼雷 申请人:诺瓦提斯公司