专利名称：一种含三七叶提取物的药物组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及三七叶提取物及其药物组合物。
背景技术：
癫痫又俗称羊羔风，是由于脑细胞过度放电所引起的反复发作的突然而短暂的脑功能失调，表现为运动、感觉、意识、植物神经、精神等不同障碍，或可兼而有之。临床上以突然意识丧失，发则仆倒、四肢抽搐、口吐涎沫或口中怪叫，苏醒时一如常人为主要表现。
癫痫系多发病之一，在我国发病率约为37/10万，患病率为3‰～7‰。我国现有癫痫患者近600万，且以27万/年的速率增长。本病常在儿童期和青春期发病，因病程长，给患者带来的痛苦很大。
一般认为，癫痫的发病率和年龄有关。主要是少年时代发病，随年龄增长发病人数逐年减少，30岁以前发病者占66％，50岁以上发病者不及15％。癫痫不同发作类型的发病率有年龄依赖性。有学者研究发现，幼年期的高发病率主要是由于产伤、新生儿窒息、先天畸形等多种原因所致。成年及中年人大约稳定在20～40/10万人的水平。不同年龄阶段其发作类型也不一样，如婴儿痉挛仅见于婴儿期癫痫。典型失神发作虽然反映了可能是持续终身的原发性全身性癫痫，但超出儿童期和青春期是很少见的。
目前，市场上主要的抗癫痫药物副作用比较多，常见的主要是对血液细胞的抑制，包括白细胞下降，血小板下降或者是贫血；对内脏的影响，常常是肝、肾功能的改变。还有中枢神经系统的改变、消化道的刺激，以及新生儿无论在死亡率和发病率都有增加，也包括先天性畸形的发病率等。会出现嗜睡乏力、视力模糊以及记忆力受损等副作用，而且还存在停药反跳、耐药、依赖等现象，给疾病的治疗带来不利的影响。
发明内容
本发明的目的是提供一种含三七叶提取物的药物组合物，用于治疗或预防癫痫症，所述药物以三七叶提取物为主要成分，含三七叶总皀苷，以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为40mg～330mg。其中人参皀苷Rb3(C53H90O22)的优选含量为50mg或100mg。
本发明所述及的药物能治疗或预防癫痫症的发生，且在服用时不会引起嗜睡、精神不振或精神亢奋等副作用，该药物可加入常规辅料，根据任何常规方法制备成治疗癫痫症的药物，亦可采用缓控释技术将其制成缓控释制剂。
说明书附1是全细胞膜片钳的神经元钠电流记录图。(正常的钠电流)。
图2是全细胞膜片钳的神经元钠电流记录图。(加入三七总皂苷后的钠电流)。
图3是全细胞膜片钳的神经元钠电流记录图。(洗去三七总皂苷后的钠电流)。
图4是动作电位的平均时程(HZ)和平均幅度(PA)图。(对照组)。
图5是动作电位的平均时程(HZ)和平均幅度(PA)图。(三七叶提取物片剂作用10min)。
图6是动作电位的平均时程(HZ)和平均幅度(PA)图。(三七叶提取物片剂作用15min)。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1取三七叶提取物[含三七叶总皀苷，以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为50g]。先将磷酸氢钙36g、淀粉58g、糊精58g、微粉硅胶58g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，包衣，即得片剂。
实施例2取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为100g]。先将磷酸氢钙30g、淀粉50g、糊精50g、微粉硅胶50g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，包衣，即得片剂。
实施例3取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为50g]。先将淀粉30g、糊精30g、微粉硅胶60g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，填充胶囊，即得胶囊剂。
实施例4取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为100g]。先将淀粉10g、糊精10g、微粉硅胶50g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，填充胶囊，即得胶囊剂。
实施例5取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为50g]。先将乳糖36g、淀粉58g、交联聚维酮58g、微粉硅胶58g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，即得分散片。
实施例6取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为100g]。先将乳糖30g、淀粉30g、交联聚维酮50g、微粉硅胶50g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，即得分散片。
实施例7取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为50g或100g]。先将甘露醇、糊精、甜菊素(1∶2∶0.03)混匀，再加入三七叶提取物制粒，干燥，整粒，分装，即得颗粒剂。
实施例8取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为300g]。先将羟丙甲纤维素100g、乳糖50g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，包衣，即得缓释片。
实施例9取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为300g]。先将聚乙二醇120g、乳糖30g混匀，再加入三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片，包衣，即得缓释片。
实施例10取三七叶提取物[含三七叶总皀苷以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为300g]。先将羟丙甲纤维素100g、乳糖50g混匀，再加入部分三七叶提取物混匀，再加入羟丙甲纤维素浆，制丸，干燥，喷入剩余三七叶提取物及羟丙甲纤维素，干燥，整粒，填充胶囊，即得缓释小丸胶囊。
实施例11相关药效实验(一)最大电休克实验(MES)1材料1.1实验动物 清洁级昆明小鼠，雌雄各半，体重18-24g，动物均购自中山大学医学院实验动物中心。
1.2仪器与药品BL-420E生物机能实验系统(成都泰盟电子有限公司)；自制角膜电极；苯巴比妥1.3药液制备 取三七总皂苷粉末溶于生理盐水，配制成30mg/ml三七总皂苷溶液(低浓度)和60mg/ml三七总皂苷溶液(高浓度)1.4实验方法 实验前先筛选合格的老鼠，将角膜电极以生理盐水浸湿后，紧密贴紧小鼠眼球，给予电刺激参数频率50Hz、波宽10ms、强度45V、串长15个的直流电串刺激，以前肢屈曲、后肢强直性伸直为惊厥指标。选出达到指标的小鼠40只，雌雄各半，随机分四组，每组10只模型组(生理盐水)，三七总皂苷低浓度组(300mg/kg)，三七总皂苷高浓度组(600mg/kg)，阳性药苯巴比妥组(50mg/kg)。灌胃给药7d。第8d末次给药30min后，进行MES实验，记录小鼠出现后肢强直的个数。正常组10只，自由摄食。
1.5统计学方法 实验数据用SPSS 11.0软件和Excel2003进行统计，进行配对t检验。
2.实验结果三七总皂苷有抗电休克小鼠惊厥的作用三七总皂苷低浓度组和三七总皂苷高浓度组均有抗电休克小鼠惊厥的作用，能显著减少发生后肢发生强直的小鼠个数，见表1。
表1 三七总皂苷对电休克小鼠惊厥的作用(n＝10)
注与模型组相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(二)皮鲁卡品癫痫模型实验1材料1.1实验动物 清洁级昆明小鼠，雌雄各半，体重18-24g，动物均购自中山大学医学院实验动物中心。
1.2仪器与药品 皮鲁卡品，苯巴比妥1.3药液制备 取三七总皂苷粉末溶于生理盐水，配制成30mg/ml三七总皂苷溶液(低浓度)和60mg/ml三七总皂苷溶液(高浓度)1.4实验方法 小鼠35只，雌雄各半，随机分五组，每组7只正常组自由摄食，模型组(生理盐水)，三七总皂苷低浓度组(300mg/kg)，三七总皂苷高浓度组(600mg/kg)，阳性药苯巴比妥组(50mg/kg)。灌胃给药7d。第8d末次给药30min后，除正常组外，其余四组腹腔注射皮鲁卡品350mg/kg，进行行为学观察，依据Racine的痫性发作分级标准判断动物是否痫性发作，4级和5级发作为全身性惊厥或大发作。记录1小时内的发作等级，惊厥潜伏期(第一次出现4级以上痫性发作的时间)，发作次数(1小时内的4级以上痫性发作的次数)，1小时内的死亡个数。
1.5统计学方法 实验数据用SPSS 11.0软件和Excel2003进行统计，进行配对t检验。
2.实验结果三七总皂苷有抗皮鲁卡品小鼠惊厥的作用三七总皂苷低浓度组和三七总皂苷高浓度组均有抗皮鲁卡品致小鼠惊厥的作用，能显著减少发作等级，发作次数，死亡个数；增大惊厥潜伏期，见表2。
表2三七总皂苷对皮鲁卡品小鼠惊厥的作用(n＝7)
注与模型组相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(三)自发活动实验1材料1.1实验动物 清洁级昆明小鼠，雌雄各半，体重16-24g，动物均购自中山大学医学院实验动物中心1.2仪器与药品 动物活动箱用无色有机玻璃制成的25cm×20cm×15cm长方形箱，其底部上放入木屑垫料；秒表1.3药液制备 取三七总皂苷粉末溶于生理盐水，配制成30mg/ml三七总皂苷溶液(低浓度)和60mg/ml三七总皂苷溶液(高浓度)1.4实验方法 小鼠24只，雌雄各半，随机分三组，每组8只正常组自由摄食，三七总皂苷低浓度组(300mg/kg)， 三七总皂苷高浓度组(600mg/kg)，灌胃给药7d。第8d末次给药30min后，把小鼠投入用无色有机玻璃制成的25cm×20cm×15cm长方形活动箱中适应3分钟，然后记录2分钟内小鼠走动时间以及双前肢向上抬举次数。
1.5统计学方法 实验数据用SPSS 11.0软件和Excel2003进行统计，进行配对t检验。
2.实验结果三七总皂苷有抗小鼠自发活动的作用三七总皂苷低浓度组和三七总皂苷高浓度组均有抗小鼠自发活动的作用，能显著减少走动时间，前肢向上抬举次数，见表3。
表3 三七总皂苷对小鼠自发活动的作用(n＝8，x±SD)
注与正常组相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(四)培养大脑皮层神经元细胞实验1材料1.1实验动物 出生5-6天的SD乳鼠，清洁级，雌雄不限，购自中山大学医学院实验动物中心1.2实验步骤 将乳鼠断头取脑，取大脑皮层神经元进行细胞培养，取培养了6-10天的大脑皮层神经元进行全细胞膜片钳技术，记录正常条件下神经元钠通道电流的幅度和失活时间，加入62.5μg/ml的三七总皂苷，记录神经元钠通道电流的幅度和失活时间，洗脱三七总皂苷后，记录神经元钠通道电流的幅度和失活时间。
3.实验结果3.1三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道最大激活电流峰值的影响三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道最大激活电流峰值有极为显著的抑制作用。洗脱后钠通道最大激活电流峰值恢复到接近正常水平，与control相比没有显著性差异。见表4。
表4三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道最大激活电流峰值的影响
注与正常组相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.013.2三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道失活时间的影响三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道失活时间有极为显著的延长作用。洗脱后钠通道失活时间恢复到接近正常水平，与control相比没有显著性差异。见表5。
表5三七总皂苷对大鼠大脑皮层神经元钠通道失活时间的影响
注与正常组相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01全细胞膜片钳的神经元钠电流记录图如
图1、图2和图3所示。
(五)大鼠脑片实验1材料与方法1.1、研究对象Sprague-Dawley(SD)大鼠，出生16-19天，由中山大学北校区实验动物中心提供。
1.2、化学试剂KCl，NaCl，CaCl2，MgCl2，NaHCO3，NaH2PO4，D-Glucouse分析纯级，购自广州化学制剂厂。
1.3、溶液需配置人工脑脊液，灌流用正常脑脊液、电极内液，切片脑脊液。
1.4、仪器设备分析化学常用仪器(玻璃器皿、电子秤)，膜片钳设备，玻璃微电极拉制装置生理学常用手术器材(动物)，振动切片机，脑片孵育杯，5％CO2+95％O2混合气体供应装置。
1.5方法本实验采用全细胞膜片钳技术，记录大鼠脑片神经元细胞在正常脑脊液和加入药物时的放电情况。在高阻封接下，通过负反馈系统将细胞膜的静息电位钳制在-65mV。此时向电极内施加脉冲试负压，破坏电极内细胞膜，打通细胞内环境与电极内液，此时形成大约100MΩ-500MΩ左右的阻抗。在电流钳的模式下测量记录细胞的动作电位。
2.实验结果2.1动作电位的平均时程(HZ)和平均幅度(PA)图，如图4、图5及图6所示。
表6三七总皂苷对动作电位平均幅度的影响(n＝6)
注与正常组相比，“*”表示P＜0.05表7三七总皂苷对动作电位平均时程的影响(n＝6)
注与正常组相比，“*”表示P＜0.05当给刺激电流300pA时，对照组和加药15min组之间动作电位振幅的P值有显著性差异，表明加入三七总皂苷后15min时能显著抑制动作电位的振幅。对照组和加药15min组之间动作电位时程的P值有显著性差异，表明加入三七总皂苷后15min时能显著延长动作电位的时程。
当给刺激电流200pA时，对照组和加药10min组，加药15min组之间动作电位振幅的P值有显著性差异，表明加入三七总皂苷后10min时和15min时均能显著抑制动作电位的振幅。对照组和加药10，15min组之间动作电位时程的P值有显著性差异，表明加入三七总皂苷后能显著延长动作电位的时程。
权利要求
1.一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于所述药物以三七叶提取物为主要成分，含三七叶总皀苷，以人参皀苷Rb3(C53H90O22)计为40mg～330mg。
2.根据权利要求1所述的一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于人参皀苷Rb3(C53H90O22)的优选含量为50mg或100mg。
3.根据权利要求2所述的一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于其单次服用剂量为40～330mg。
4.根据权利要求3所述的一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于其单次服用最优剂量为50mg或100mg。
5.根据权利要求1至4之一所述的一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于其辅料为含淀粉、乳糖、甘露醇、磷酸氢钙、羧甲基淀粉或其盐及基团取代物、糊精、壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚维酮、纤维素类及其衍生物、聚乙二醇类，其中淀粉为淀粉、木薯淀粉、玉米淀粉、可溶性淀粉、预胶化淀粉；纤维素类可为甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、微晶纤维素；聚乙二醇类为聚乙二醇200～20000。
6.根据权利要求1至4之一所述的一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于将三七叶提取物采用药剂学上的制剂技术或缓控释技术制备成治疗癫痫症的普通制剂或缓控释制剂。
7.权利要求1所述的一种含三七叶提取物的药物组合物的用途是用于治疗或预防癫痫症。
全文摘要
本发明涉及一种含三七叶提取物的药物组合物，其特征在于所述药物以三七叶提取物为主要成分，含三七叶总皀苷，以人参皀苷Rb
文档编号A61P25/00GK101066288SQ20071002736
公开日2007年11月7日 申请日期2007年4月2日 优先权日2007年4月2日
发明者向飞军, 项辉, 杨斌, 徐铁峰, 黄掌欣, 朱颖虹, 郭静, 陆启春, 宁瑞仪, 傅咏梅 申请人:广东环球制药有限公司, 中山大学