专利名称：一种益母草生物碱组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体的说是涉及一种益母草生物碱组合物。 技术背景益母草(Herba leonuri)为唇形科植物益母草(Leonuras japonicus Houtt.)的新 鲜或干燥地上部分，始载于《神农本草经》，别名益母艾、苦草、坤草等，其味辛、 微苦、性微寒。归肝、心包经，具有活血调经，利尿消胂之功效。益母草具有以下的主要药理作用i、对子宫的作用。益母草具有较强的子宫 兴奋作用，能增加子宫的收缩幅度、频率及张力；2、对心血管的作用。益母草可 以治疗心肌缺血再灌注损伤；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液黏度和抗血液凝 固作用；5、对肾脏的作用。益母草对急性肾小管坏死有一定的治疗作用；6、对T、 B淋巴细胞的作用，能够增强机体的细胞免疫功能。益母草在临床上用于月经不调、产后淤痛、心脑血管疾病、血液病等疾病的治 疗。而益母草中的生物碱类有效成分，主要包括益母草碱和水苏碱，是其主要有效 成分。对于益母草中的生物碱有效成分的提取，文献[安伟建。中药益母草有效成分提 取和测定方法的研究进展。天津药学，2003, 15 (3 ): 68]报道的有1、罐组式动 态逆流提取；2、超临界提取；3、超声波提取；4、不同溶剂提取等方法。部颁中药20册收录有益母草注射液，其制法为益母草7jc提醇沉，活性炭脱 色得到；申请号为CN02148608.5的专利文献公开了 一种益母草总生物碱的制备方 法，其制备方法为益母草浸骨溶于酸水后通过强酸性阳离子交换树脂，水洗，氨 溶液和/或酸溶液洗脱，减压浓缩，真空干燥，即得益母草总生物碱，含量大于50%; 申请号为CN02117432.6的专利文献公开了益母草总碱的提取工艺及其用途，其提 取工艺为益母草水提醇沉，酸液过强酸性阳离子交换树脂，水洗，酸洗液调pH 值，浓缩物用高浓度乙醇提取，即得益母草总生物碱；申请号为CN02123967.3的 专利申请文献公开了益母草总生物碱的制备方法及其药物新用途，其制备方法为 益母草水提醇沉，酸液过阳离子交换树脂，水洗，酸液或碱液洗脱，浓缩，干燥即 得，生物碱含量大于50%,水苏碱含量大于20%;申请号为CN03100594.2的专利 文献公开类益母草总碱的提取工艺，其提取工艺为水提、醇沉、酸化上柱后，1-4% 盐酸洗脱后用氢氧化钠中和/1-4%疏酸洗脱后用生石灰或氢氧化钙中和；申请号为 CN03118828.1的专利文献公开类鲜益母草提取益母草总碱工艺及益母草总碱制剂， 其提取工艺为取汁、醇沉、滤过、酸液过酸性阳离子交换树脂柱、水洗、酸洗或 碱洗液调中性、浓缩千燥，用乙醇提取，浓缩，干燥，即得。上述制备方法普遍采用水提醇沉和强酸性阳离子交换树脂结合的方法对生物 碱进行提取和纯化。益母草^A碱性很强的生物碱，直接用强酸性阳离子交换树脂 纯化益母草总生物械，对于碱性强的益母草碱是不可逆的死吸附，根本洗脱不下来，使得最终的益母草总生物碱中只含有少量甚至不含有益母草碱。 发明内容针对现有技术的不足，本发明研究人员经过大量的实验，制备出了含有水苏碱 与益母草碱的益母草生物碱组合物。本发明的益母草生物碱组合物中的水苏碱和益母草碱的重量份比为10-20:1,两者具有很好的协同增效作用。得到的益母草生物碱 组合物可用于各种口服制剂和注射制剂的制备。本发明所要解决的技术问题就是提供一种含有水苏碱与益母草碱的益母草生 物碱组合物。本发明的益母草生物碱组合物，其中的水苏碱和益母草碱的重量份比为10-20:1 时，具有很好的协同增效作用。优选的，上述的益母草生物碱组合物，其中的水苏碱和益母草碱的重量份比为 12-16:1时协同增效作用明显；水苏碱和益母草碱的重量份比为15:1时，具有更好 的协同增效作用。将按照现有技术制备成的纯度较高的益母草碱和水苏碱，按照水苏碱和益母草 碱的重量份比为10-20:1配制成混合物，也具有很好的协同增效作用。优选的，将按照现有技术制备成的纯度较高的益母草碱和水苏碱，按照水苏碱 和益母草碱的重量份比为12-16:1,更优选为15:1配制成混合物，具有更好的协同 增效作用。水苏碱的纯品可以按照文献[何黎琴，王效山。水苏碱的合成工艺研究。华西药 学杂志。2005, 20 ( 1 ): 50-51]中的方法合成。益母草碱的纯品可以按照申请号为CN02138364.2专利文献中的方法合成。所述的益母草生物碱组合物，可以制备成口服制剂和注射制剂；其中口服制剂 包括片剂、胶囊剂、丸剂、糖浆剂、颗粒剂、口服溶液剂、口服混悬剂或口服乳剂， 注射制剂包括小容量注射剂、大容量注射剂、粉针剂和冻干粉针剂。所述的益母草生物碱组合物的药物制剂中还含有药学上可以接受的药用辅料。用于调节渗透压的等渗调节剂，常用于静脉注射剂和大输液，例如，氯化钠、 氯化钾、氯化镁、氯化钩、乳酸钠、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖酐等，优选 为氯化钠和/或葡萄糖。粉针中可以加入赋形剂，例如，甘露醇、葡萄糖等。在片剂中可以根据需要加入填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。填 充剂可以是淀粉、微晶纤维素、预胶化淀粉等。润湿剂可以是水和/或乙醇。粘合剂 可以是聚维酮、淀粉浆、纤维素等。崩解剂可以是交联聚维酮、CC-Na、淀粉或 CMC-Na等。润滑剂可以是滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁钙、硬脂酸镁等。在颗粒剂中可以根据需要加入填充剂、润湿剂、粘合剂等。溶液型液体剂中可以加入防腐剂、矫味剂。糖浆剂中还应加入浓蔗糖水溶液。混悬剂中可以根据需要加入助悬剂、润湿剂、絮凝剂等。助悬剂可以是阿拉伯 胶、海藻酸钠、琼脂、聚维酮、纤维素类、卡波普、丙烯酸钠。 口服乳剂中可以加入乳化剂、防腐剂、矫味剂等.。本发明的益母革生物碱组合物在制备时所用的益母草药材必须符合《中国药 典》2005年版益母草药材项下的有关规定。上迷的益母草生物碱组合物还可以采用依次用弱酸性阳离子交换树脂、强酸性 阳离子交换树脂、中性氧化铝纯化益母草提取液的制备方法获得。具体的说，上述的益母草生物碱組合物的制备方法，包括以下步骤(1 )弱酸性阳离子交换树脂纯化；将益母草提取液上弱酸性阳离子交换树脂 柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用2%-5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱 液，合并，得到洗脱液A;(2)强酸性阳离子交换树脂纯化；将上述备用液酸化至pH值为l-3后上强酸 性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用2%-5%氨水溶液或氨水:乙醇 (20:80)溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B;(3 )中性氧化铝柱纯化；将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中 性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱 液，浓缩，干燥，即得益母草生物碱组合物。上述的益母草提取液可以通过将益母草药材采用水提醇沉法或醇提水沉法或 酸水提取法得到的。当然，上述的益母草提取液也可以通过已公开文献中的罐组式动态逆流提取 法、超临界提取法、超声波提取等方法得到。更具体的说，上述的益母草提取液可以采用下述任意一种方法制备(1) 将益母草药材粉碎，用10-15倍量的60%-95%的乙醇溶液回流提取1-3 次，每次l-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材 溶液为1:1,离心，上清液即为提取液；(2) 将益母草药材粉碎，用10-15倍量的水煎煮提取1-3次，每次1-2小时， 合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,加入乙醇使得醇浓度为 70%-90%,静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,静置，上清液即为提取 液；(3 )将益母草药材粉碎，用10倍量的酸水煎煮提取1-3次，每次1-2小时， 合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，调pH值为中性后加入乙醇 使醇浓度为70%-90o/。，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，离心，上清 液即为提取液；其中的酸水为盐酸或^E危酸的水溶液，pH值为l-3。上述的弱酸性阳离子交换树脂可以是南开D151型、南开101型中的一种。上述的强酸性阳离子交换树脂可以是南开001 x 1型、南开001 x2型、南开001 x3型、南开001 x 14.5型、D151型、D018型、D019型、D020型、YWD12V型、 核亚东732型中的一种。本发明的益母萆生物碱组合物中含有益母草中主要的有效生物碱——益母草 碱和水苏碱，两者具有协同增效的作用，因而具有更好的治疗作用。本发明的益母草生物碱组合物具有以下的主要药理作用1、对子宫的作用。 具有较强的子宫兴奋作用，能增加子宫的收缩幅度、频率及张力；2、对心血管的 作用。可以治疗心肌缺血再灌注损伤；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液翻度和 抗血液凝固作用；5、对肾脏的作用。对急性肾小管坏死有一定的治疗作用；6、对 T、 B淋巴细胞的作用，能够增强机体的细胞免疫功能。本发明的益母草生物碱组合物在临床上用于月经不调、产后淤痛、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。为了验证本发明益母草生物碱組合物中的水苏碱和益母草碱具有协同增效的 作用，本发明研究人员对其进行f对大鼠子宫内膜异位症影响的药理学实验。阳性对照药为按照文献[何黎琴，王效山。水苏碱的合成工艺研究。华西药学杂 志。2005， 20 ( 1 ): 50-51]中的方法合成水苏碱，純度为97.4%;按照申^号为 CN02138364.2专利文献中的方法合成益母草碱，纯度为99.2%。本发明药物为实施 例1-5所迷的组合物。取雌性SD大鼠，随机分组，每组10只。依次为正常组、模型组、阳性对照 组、本发明l组-5组。除正常组外，其余各组动物择动情期，建立EMT动物模型。 将大鼠以3 %戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉，于下腹正中做一垂直切口 ，挑出 右侧子宫角，切除7mm的子宫，于生理盐水中分离子宫内膜，取3mmx3mm大小 的子宫内膜片，令其表面上皮对着腹壁，将四角与腹壁肌肉缝合，并将右側断离之 子宫对接缝合，常规关腹消毒，并注射青霉素1万单位/kg。假手术组仅切除子宫， 并不将其异位。每日按剂量定时灌胃给药(0.5g/kg),连续给药1个月后，对大鼠 眼眶后静脉取血，分离血清，用放射性免疫法测定E2水平，观察不同益母草总生物 碱对子宫内膜异位症大鼠性激素E2的影响。结果见表3 。表3益母草生物碱组合物对子宫内膜异位症大鼠性激素E2的影响组另'J动物数(只)E2 (pg/ml)正常组1013.46 ±8.75模型组1552.38 ±28.66阳性药物组(水苏碱)1533.65 ± 17.28*阳性药物组(益母草碱)1530.50 ± 14.82*本发明1组1517.26 ±9.58**本发明2组1525.43 ± 12.33**本发明3组1518.63 ± 10.26**本发明4组1520.32 ± 11.38**本发明5组1523.74 ± 11.37"注**表示和模型组比较P<0.01。由上述实验结果可以看出子宫内膜异位症大鼠的E2有明显的升高；阳性对照 组和本发明l-5组在给药l个月后，对于E2的升高均有明显的降低作用；而且本发 明l-5组对于E2的降4氐作用明显强于阳性对照组，尤其以本发明l组的效果最好。 说明本发明益母草生物碱组合物中的水苏碱和益母草碱具有很好的协同增效的作 用，在相同的给药剂量下药理效果强于水苏碱；而且当本发明益母草生物碱组合物 中的水苏碱和益母草碱的重量份配比为15:1时，效果最好。
具体实施方式
下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解， 但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。实施例1-5按照文献[何黎琴，王效山。水苏碱的合成工艺研究。华西药学杂志。2005, 20 (1): 50-51]中的方法合成水苏碱，纯度为97.4%。按照申请号为CN02138364.2专 利文献中的方法合成益母草碱，纯度为99.2%。实施例水苏碱和益母草碱的重量份配比实施例115: 1实施例220: 1实施例316: 1实施例412: 1实施例510: 1实施例6将益母草药材粉碎，用12倍量的70%的乙醇溶液回流提取3次，每次1.5小时， 合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材:溶液为1:1,离心， 上清液即为益母草提取液。将益母草提取液上南开D151型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色， 收集水洗液备用；再用5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A。将上述备用液酸化至pH值为1后上南开001 x 2型强酸性阳离子交换树脂柱， 水洗至无色后，弃去；再用3.5%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，千燥，用95%乙 醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得。
权利要求
1. 一种益母草生物碱组合物，其特征在于，其中的水苏碱和益母草碱的重量份比为10-20∶1。
2、 根据权利要求1所述的益母草生物碱组合物，其特征在于，其中的水苏碱 和益母草碱的重量份比为12-16:1。
3、 根据权利要求2所述的益母草生物碱组合物，其特征在于，其中的水苏碱 和益母草碱的重量份比为15:1。
4、 根据权利要求1-3之一所述的益母草生物碱组合物，其特征在于，可以制 备成口服制剂和注射制剂；其中口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、糖浆剂、颗粒 剂、口服溶液剂、口服混悬剂或口服乳剂，注射制剂包括小容量注射剂、大容量注 射剂、粉针剂和冻干粉针剂。
5、 根据权利要求所述的益母草生物碱组合物，其特征在于，所述的药物制剂 中还含有药学上可以接受的药用辅料。
全文摘要
本发明属于制药技术领域，具体公开了一种益母草生物碱组合物，其中的水苏碱和益母草碱的重量份比为10-20∶1，两者具有协同增效的作用，具有更好的药理效果。
文档编号A61P13/12GK101244060SQ200710080240
公开日2008年8月20日 申请日期2007年2月15日 优先权日2007年2月15日
发明者魏海关 申请人:北京天新园医药科技开发有限公司