专利名称：：一种益母草总生物碱提取物及其制备方法
技术领域：
：本发明属于制药
技术领域：
，具体涉及一种益母草提取物，更具体的说是涉及一种益母草总生物碱提取物及其制备方法。技术背景益母草(Herbaleonuri)为唇形科植物益母草(LeonurusjaponicusHoutt.)的新鲜或干燥地上部分，始载于《神农本草经》，别名益母艾、苦草、坤草等，其味辛、微苦、性微寒。归肝、心包经，具有活血调经，利尿消肿之功效。益母草具有以下的主要药理作用1、对子宫的作用。益母草具有较强的子宫兴奋作用，能增加子宫的收缩幅度、频率及张力；2、对心血管的作用。益母草可以治疗心肌缺血再灌注损伤；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液翻度和抗血液凝固作用；5、对肾脏的作用。益母草对急性肾小管坏死有一定的治疗作用；6、对T、B淋巴细胞的作用，能够增强机体的细胞免疫功能。益母萆在临床上廢于月经不调、产后淤痛、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。而益母草中的生物碱类有效成分，主要包括益母草碱和水苏碱，是其主要有效成分。对于益母草中的生物械有效成分的提取，文献[安伟建。中药益母草有效成分提取和测定方法的研究皿。天津药学，2003,15(3):68]报道的有1、罐组式动态逆流提取；2、超临界提取；3、超声波提取；4、不同溶剂提取等方法。部颁中药20册收录有益母草注射液，其制法为益母草水提醇沉，活性M色得到；申请号为CN02148608.5的专利文献公开了一种益母草总生物碱的制备方法，其制备方法为益母草浸骨溶于酸水后通过强酸性阳离子交换树脂，水洗，氨溶液和/或酸溶液洗脱，减压浓缩，真空千燥，即得益母草总生物碱，含量大于50%;申请号为CN02123967.3的专利申请文献公开了益母草总生物碱的制备方法及其药物新用途，其制备方法为益母草水提醇沉，酸液过阳离子交换树脂，水洗，酸液或碱液洗脱，浓缩，干燥即得，生物碱含量大于50%,水苏碱含量大于20%;申请号为CN03100594.2的专利文献公开类益母草总碱的提取工艺，其提取工艺为水提、醇沉、酸化上柱后，1-4%盐酸洗脱后用氢氧化钠中和/1-4%硫酸洗脱后用生石灰或氢氧化钙中和；申请号为CN03118828.1的专利文献公开了鲜益母草提取益母草总碱工艺及益母草总碱制剂，其提取工艺为取汁、醇沉、滤过、酸液过酸性阳离子交换树脂柱、水洗、酸洗或碱洗液调中性、浓缩千燥，用乙醇提取，浓缩，干燥，即得。最新公布的申请号为CN200510200346.7的专利文献公开了一种以益母草总生物械为主要药用成分的中药制剂，其中益母草总生物碱的纯度达到80%以上。该益母草总生物碱的提取方法为取益母草饮片，加水煎煮，煎液滤过，浓缩为清青，醇觉，滤过，沉淀以乙醇洗涤，加活性炭煮彿除杂，过强酸性阳离子交换树脂以去离子水冲洗；再用4%盐酸洗脱，收集洗脱液，加氩氧化钠调pH6-7,滤过，滤液浓缩至析出大量固体，减压干燥，干燥品加乙醇提取生物碱至完全，所得生物碱加用7JC溶解，用活性炭脱色至*1||"跌微孔滤膜滤过，灌装，灭菌，即得益母草总生物碱提取液。上迷制备方法普遍采用7JC提醇沉和强酸性阳离子交换树脂结合的方法对生物碱进行提取和纯化。由于益母草中生物碱的含量较低，所以通过以上简单的纯化步骤，其中的水苏碱和益母草碱的含量就更低。因此，制备出纯度更高，杂质含量更少的益母草提取物，仍是研发人员需要解决的问题。
发明内容针对现有技术的不足，本发明研究人员经过大量的实验，制备出了一种益母草总生物碱的重量百分含量大于或等于80%,水苏碱含量大于或等于60%、益母草碱含量大于或等于3。/。的益母草总生物4j^取物。本发明益母草总生物磁提取物的获得是通过将益母草提取液依次用弱酸性阳离子交换树脂、强酸性阳离子交换树脂、中性氧化铝纯化的方法得到的。本发明益母草总生物,取物中的益母草碱和水苏碱的含量均高于现有技术得到的益母草总生物碱提取物；而且本发明的制备方法科学，适于在工业中应用。得到的益母草总生物^取物可用于各种口服制剂和注射制剂的制备。比起现有技术得到的益母草总生物4^取物，所得制剂的副作用也大大降低。本发明所要解决的技术问题就是提供一种水苏碱和益母草碱含量更高的益母草总生物械提取物及其制备方法。上述的益母草总生物碱提取物，其中益母草总生物碱的重量百分含量大于或等于80%,水苏碱的重量百分含量大于或等于60%。优逸的，上述的益母草总生物碱提取物，其中水苏碱的重量百分含量为60%-75o/。。上述的益母草总生物碱提取物，其中益母草碱的重量百分含量大于或等于3.0%。优选的，上迷的益母草总生物碱提取物，其中益母草碱的重量百分舍量为3.0%-7.5%。本发明的益母草总生物4^取物在制备时所用的益母草药材必须符合《中闺药典》2005年版益母草药材项下的有关规定。上述的益母草总生物碱提取物的制备方法，包括依次用弱酸性阳离子交换树脂、强酸性阳离子交换树脂、中性氧化铝纯化。具体的说，上述的益母草总生物碱提取物的制备方法，包括以下步骤(1)弱酸性阳离子交换树脂纯化；将益母草提取液上弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用稀氨水洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A;(2)强酸性阳离子交换树脂纯化；将上述水洗备用液酸化后上强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用稀氨水或氨水乙醇液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B;(3)中性氧化铝柱纯化；将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95*/0乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓縮，干燥，即得益母萆总生物4^取物。更具体的说，上述的益母草总生物碱提取物的制备方法，包括以下步骤(1)弱酸性阳离子交换树脂魄化；.将義母草提取液上弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液务用；再用2%-5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A;(2)强酸性阳离于交换树脂纯化；将上迷水洗备用液酸化至pH值为1-3后上强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用2%-5%氨水溶液或氨水:乙醇(20:80)溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B;(3)中性氧化铝柱纯化；将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，即得益母草总生物g取物。上迷的益母萆提取液可以通过将益母草药材采用水提醇沉法或醇提水沉法或酸水提取法得到的。当然，上述的益母草提取液也可以通过已公开文献中的罐组式动态逆流提取法、超临界提取法、超声波提取等方法得到。更具体的说，上述的益母莩提取液可以采用下述任意一种方法制备(1)将益母草药材粉碎，用10-15倍量的60%-95%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次l-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材溶液为1:1，离心，上清液即为提取液；(2)将益母草药材粉碎，用10-15倍量的水煎煮提取1-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，加入乙醇使得醇浓度为70%-90%,静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，静置，上清液即为提取液；(3)将益母草药材粉碎，用10倍量的酸水煎煮提取1-3次，每次l-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,调pH值为中性后加入乙醇使醇浓度为70%-90%,静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,离心，上清液即为提取液；其中的酸水为盐酸或;危酸的水溶液，pH值为l-3。上述的弱酸性阳离子交换树脂可以是南开D151型、南开101型中的一种。上述的强酸性阳离子交换树脂可以是南开001xl型、南开001x2型、南开001x3型、南开001x14.5型、D151型、D018型、D019型、D020型、YWD12V型、核亚东732型中的一种。上述制备方法中，洗脱液A主要含有益母草碱。上述制备方法中，洗脱液B主要含有水苏碱。本发明的益母草总生物碱提取物，其中水苏碱的重量百分含量大于或等于60%,其中益母草碱的重量百分含量大于或等于3%，因而可以用于口服制剂和注射制剂的制备。本发明的益母革总生物碱提取物中含有益母草中主要的有效生物碱一一益母草碱和水苏碱，两者具有协同增效的作用，因而具有更好的治疗作用。本发明的益母萆总生物4(^取物具有以下的主要药理作用1、对子宫的作用。具有较强的子宫兴备作用，能增加子宫的收缩幅度、频率及张力；2、对心血管的作用。可以治疗心肌缺血再灌注损伤；3、抗血小板聚集作用；4、降低血液勦度和抗血液凝固作用；5、对肾脏的作用。对急性肾小管坏死有一定的治疗作用；6、对T、B淋巴细胞的作用，能够增强机体的细胞免疫功能。本发明的益母草总生物碱提取^在临威上用于月经不调、产后淤痛、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。不同益母草总生物g取物中水苏碱含量测定比较制备5批益母草总生物碱提取物，均采用市售的合格的益母革药材。1号益母草总生物碱提取物按照申请号为CN02148608.5的专利申请文献中的实施例1-4中的方法得到编号1-4的提取物，按照申请号为CN200510200346.7的专利申请文献中的实施例1中的方法得到编号5的提取物；2号益母草总生物^取物按照本发明下述实施例10-14中的方法得到5批提取物。采用下述的HPLC方法测定上述两种益母草总生物碱提取物中水苏碱的含量。仪器Agilent1100系列高效液相色镨仪及agilent化学工作站，DAD检测仪器。方法与结果色谦条件色谱柱阳离子交换树脂柱SUPELCOSIL(250mmx4.6mm,5脾)；流动相0.1mol/L磷酸二氢钠緩冲溶液(用0.1mol/L磷酸氩二钠调pH5.5);流速1.0mL/min;检测波长200nm;柱温30°C;进样量10^1。在此色谱条件下，盐酸水苏碱与其他成分能较好的分离；理论塔板数按盐酸水苏碱峰计算不低于5000。对照品溶液的制备精密称取千燥至恒重的盐酸水苏碱对照品约5.0mg，至于10mi容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。供试品溶液的制备取各提取物粉末约lg,精密称定，至于三角瓶中，加入20ml曱醇，称重；置超声提取器中超声振荡20min，放冷后加乙醇至原重量；取出2ml，高速离心(12000rpm)10min，上清液即为供试品溶液。线性关系考察精密吸取上述对照品溶液1、2、4、6、8、lOpl,注入液相色谱仪。以峰面积为纵坐标，以对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线，得出回归方程。样品测定取两种益母草总生物,取物的5批样品，按照上述方法制备成供试品溶液，分别吸取10jd注入色谦仪，记录峰面积。利用回归方程计算水苏碱含量，结果见表l。表l水苏碱含量测定比较<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由上迷含量测定结果可以看出本发明益母萆总生物4^:取物中的水苏碱的含量远远高于对照申请号为CN02148608.5的专利提取物中的水苏碱的含量，与申请号为CN2005102003艇.7的专利提取物相当。本发明益母萆总生物Alt取物中水苏碱的重量百分含量为60.0%-75.0%。不同益母革总生物4l^取物中益母草碱含量测定比较采用下述的HPLC方法测定上述两种益母草总生物碱提取物中益母草碱的含量。仪器Agilent1100系列高效液相色谱仪及agilent化学工作站，DAD检测仪器。方法与结果色谦条件色语柱Ci8柱(250mmx4.6mm);流动相乙腈-0.051加1凡磷酸二氬钾溶液(14:86);流速1.5mL/min;检测波长276nm;柱温30°C;进样量lOfil。在此色谦条件下，益母草碱与其他成分能较好的分离；理论塔板数按益母草碱峰计算不低于3000。对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的益母草碱对照品(自制，纯度为98.7%)约5.0mg,至于10hil容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。供试品溶液的制备取各提取物粉末约lg,精密称定，至于三角瓶中，加入20ml曱醇，称重；置超声提取器中超声振荡20min，放冷后加甲醇至原重量；取出2ml，高速离心(12000rpm)10min，上清液即为供试品溶液。线性关系考察精密吸取上述对照品溶液1、2、4、6、8、1(^1，注入液相色谱仪。以峰面积为纵坐标，以对照品进样量为橫坐标，绘制标准曲线，得出回归方程。样品测定取两种益母草总生物^取物的3批样品，按照上迷方法制备成供试品溶液，分别吸取10nl注入色镨仪，记录峰面积。利用回归方程计算益母草减含量，结果见表2。表2益母草碱含量测定比较<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注-表示未检测到。由上述含量测定结果可以看出本发明益母草总生物員取物中的益母草碱的含量远远高于对照提取物中的益母革碱的含量。本发明益母苹总生物《^取物中益母草碱的重量百分含量为3.0%-7.5%。为了验证本发明益母草总生物碱提取物中含有了一定量的益母草碱具有增效的作用，本发明研究人员对其进行了对大鼠子宫内膜异位症影响的药理学实验.阳性对照药为按照申请号为CN200510200346.7的专利文献中的方法制备而成的益母草总生物皿取物，其中主要含有水苏碱，几乎不含有益母草碱。本发明药物为上迷的5批益母草总生物碱提取物，其中含有益母草碱和水苏碱。给药剂量为总生物碱的含量相同。取雌牲SD大鼠，随机分组，每组10只。依次为正常组、模型组、阳性对照組、本发明l组(第1#||取物)、本发明2组(第2,取物)、本发明3组(第3批提取物)、本发明4組(第4批提取物)、本发明5組(第5批提取物)。除正常组外，其余各組动物棒动情期，建立EMT动物模型。将大鼠以3%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉，于下腹正中做一垂直切口，挑出右側子宫角，切除7mm的子宫，于生理盐水中分离子宫内膜，取3mmx3mm大小的子宫内膜片，令其表面上皮对着腹壁，将四角与腹壁肌肉缝合，并祷右侧断离之子宫对接缝合，常规关腹消毒，并注射青霉素1万单位/kg。假手术组仅切除子宫，并不将其异位。每日按剂量定时灌胃给药(0.5g/kg),连续给药1个月后，对大鼠眼眶后静务沐血，分离血清，用放射性免疫法测定E2水平，观察不同益母草总生物碱对子宫内膜异位症大鼠性激素E2的影响。结果见表3。表3益母草总生物碱对子宫内膜异位症大鼠性激素E2的影响组另寸动物数(只)E2(pg/ml)正常組1013.46±8.75模型组1552.38±28.66阳性药物组1533.65±17.28*本发明1组1518.76±10.06**本发明2組1524.24±13.75**本发明3组1519.94±10.56**本发明4組1520.55±11.37**本发明5组1522.74±12.08**注**表示和模型组比较P<0.01。由上述实验结果可以看出子宫内膜异位症大鼠的E2有明显的升高；阳性对照组和本发明l-5组在给药1个月后，对于E2的升高均有明显的降低作用；而且本发明l-5组对于E2的降低作用明显强于阳性对照组。说明本发明益母草总生物^H取物中含有一定量的益母草械后具有很好的增效作用，在相同的给药剂量下药理效果强于不含或含微量益母草碱的益母革总生物^取物对照组。具体实施例方式下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所迷实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。实施例1将益母草药材粉碎，用12倍量的70%的乙醇溶液回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材:溶液为1:1,离心，上清液即为益母草提取液。实施例2将益母草药材粉碎，用12倍量的95%的乙醇溶液回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，过滤；滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材:溶液为1:1，静置，上清液即为益母草提取液。实施例3将益母草药材粉碎，用12倍量的90%的乙醇溶液回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，过滤；滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材:溶液为1:1，离心，上清液即为益母草提取液，实施例4将益母草药材粉碎，用10倍量的水煎煮提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,加入乙醇4吏得醇浓度为70%，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，静置，上清液即为益母草提取液。实施例5将益母草药材粉碎，用15倍量的水煎煮提取1次，每次l小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,加入乙醇使得醇浓度为80%,静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,离心，上清液即为益母草提取液。实施例6将益母草药材粉碎，用12倍量的水煎煮提取2次，每次1.5小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,加入乙醇使得醇浓度为卯％，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,静置，上清液即为益母草提取液。实施例7将益母草药材粉碎，用io倍量的pH3.0的盐酸酸水煎煮提取1次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，调pH值为中性后加入乙醇使醇浓度为卯％，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,离心，上清液即为益母草提取液。实施例8将益母草药材^^碎，用io倍量的pHl.O盐酸酸水煎煮提取2次，每次1.5小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,调pH值为中性后加入乙醇使醇浓度为70。/。，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,静置，上清液即为益母草提取液。实施例9将益母草药材粉碎，用10倍量的pH2.0硫酸酸水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,调pH值为中性后加入乙醇使醇浓度为80%，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,离心，上清液即为益母草提取液。实施例10将益母草提取液上南开D151型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A。将上述备用液酸化至pH值为1后上南开OOlx2型强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用3.5%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上迷洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得益母草总生物碱提取物。实施例11将益母草提取液上南开101型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用2%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A。将上迷备用液酸化至pH值为2后上D151型强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用4.5%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上迷洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氣化箱柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得益母萆总生物碱提取物。实施例12将益母草提取液上南开101型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用3%氨水溶液洗覲，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A,将上迷备用液酸化至pH值为3后上D018型强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用2.5%氨水溶波洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得益母草总生物4^取物。实施例13将益母草提取液上南开D151型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用4%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A。将上述备用液酸化至pH值为3后上YWD12V型强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用氨水:乙醇(20:80)溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得益母草总生物《^取物。实施例14将益母草提取液上南开D151型弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用3.5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A。将上迷备用液酸化至pH值为3后上核亚东732型强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用氨水:乙醇(20:80)溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B。将上迷洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓缩，干燥，用95%乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得益母草总生物>^取物。权利要求1.一种益母草总生物碱提取物，其特征在于，其中益母草总生物碱的重量百分含量大于或等于80％，水苏碱的重量百分含量大于或等于60％，益母草碱的重量百分含量大于或等于3％。2、根据权利要求1所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，其中水苏碱的重量百分含量为60%-75%,其中益母草碱的重量百分含量为3%-7.5%。3、根据权利要求1或2所述的益母草总生物取物，其特征在于，其制备方法包括依次用弱酸性阳离子交换树脂、强酸性阳离子交换树脂、中性氧化铝纯化益母草提取液。4、根据权利要求3所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，其制备方法包括以下步骤(1)弱酸性阳离子交换树脂純化；将益母草辑取液上弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用稀氨水洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A;(2)强酸性阳离子交换树脂純化;将上述水洗备用液酸化后上强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用稀氨水或氨水乙醇液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B;(3)中性氧化铝柱纯化；将上述洗塔液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓縮，干燥，用95°/。乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓縮，干燥，即得益母草总生物碱提取物。5、根据权利要求4所述,的益母草总生物離取物，其特征在于，其制备方法包括以下步骤(1)弱酸性阳离子交换树脂li先；将益母草提取液上弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，收集水洗液备用；再用2%-5%氨水溶液洗脱，收集氨水洗脱液，合并，得到洗脱液A;(2)强酸性阳离子交换树脂镶兆;将上述水洗备用液酸化至pH值为1-3后上强酸性阳离子交换树脂柱，水洗至无色后，弃去；再用2%-5%氨水溶液或氨水:乙醇(20:80)溶液洗脱，收集洗脱液，合并，得到洗脱液B;(3)中性氧化铝柱純祐;将上述洗脱液A和洗脱液B合并，调节pH值为中性，浓縮，干燥，用95°/。乙醇溶解，过中性氧化铝柱，用95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，千燥，即得益母草总生物碱提取物。6、根据权利要求3-5之一所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，所述的制备方法中的弱酸性阳离子交换树脂选自南开D151型、南开101型中的一种。7、根据权利要求3-5之一所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，所迷的制备方法中的强酸性阳离子交换树脂选自南开001xi型、南开001x2型、南开001x3型、南开001xl4.5型、D151型、D018型、D019型、D020型、YWD12V型、核亚东732型中的一种。8、根椐权利要求3-5之一所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，所述的益母草提取液通过将益母草药材采用水提醇沉法或醇提水沉法或酸7m取法得到。9、根据权利要求8所述的益母草总生物碱提取物，其特征在于，所述的益母草提取液可以采用下述任意一种方法制备(1)将益母草药材粉碎，用10-15倍量的60%-95%的乙醇溶液回流提取1-3次，每次l-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至无醇味后，加入水至药材:溶液为l:l，离心，上清液即为提取液；(2)将益母草药材粉碎，用10-15倍量的水煎煮提取1-3次，每次l-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，加入乙醇使得醇浓度为70%-90%，静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，静置，上清液即为提取液；(3)将益母草药材粉碎，用IO倍量的酸水煎煮提取1-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1,调pH值为中性后加入乙醇使醇浓度为70%-90%,静置，过滤，滤液减压浓缩至药材:溶液为1:1，离心，上清液即为提取液；其中的酸水为盐酸或石克酸的水溶液，pH值为1-3。全文摘要本发明属于制药
技术领域：
，具体公开了一种益母草总生物碱提取物，其中益母草总生物碱的重量百分含量大于或等于80％，水苏碱的重量百分含量大于或等于60％，益母草碱的重量百分含量大于或等于3％，均高于现有技术得到的提取物，在药效上体现出增效作用。文档编号A61P15/00GK101244121SQ20071008024公开日2008年8月20日申请日期2007年2月15日优先权日2007年2月15日发明者魏海关申请人:北京天新园医药科技开发有限公司