一种含有续断和三七活性提取组合物的制剂质量控制方法

专利名称：：一种含有续断和三七活性提取组合物的制剂质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及天然药物的质量控制领域，具体涉及一种含有续断和三七的活性提取组合物的复方制剂的质量控制方法。
背景技术：
：-续断和三七活性提取组合物是指续断和三七的活性成分续断总皂苷和三七总皂苷的组合物。续断为川续断科植物川续断DipsacusasperoidesC.YChengetT.M.Ai干燥根。具补肝肾，强筋骨，续折伤，止崩漏之功效。用于腰膝酸软，风湿痹痛，跌扑损伤等症。现代研究表明续断的补肾壮骨活性成分为续断总皂苷。三七为五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。具散瘀止血，消肿定痛之功效。用于咯血，吐血，衄血，外伤出血，跌扑肿痛等症。三七为金疮要药，常用作跌扑损伤药的君药，且单味，复方均可入药，其有效成分为三七总皂苷。由上述可见，续断长于补肾壮骨，三七长于散瘀消肿定痛，二药合用，特别是二药的有效成分合用，可达活血化瘀，消肿止痛，补骨壮骨之功效，且该组方精简，有效成分明确，互补单味药之不足。本发明是在我们的前期发明专利ZL03112869.6"续断和三七的活性提取组合物及其在医药上应用"基础上，进一步深入研究，将续断和三七的活性提取组合物制备成能够运用于临床的药物制剂一胶囊、片剂。中国药典2005版一部收载了续断及三七单味药材，三七总皂苷也有国家标准。在文献报道中，没有与续断和三七复方制剂质量研究相关的内容。因此针对该组合物特点，建立一种行之有效的质量控制方法，具有很大意义。
发明内容本发明的目的在于建立一种含有续断和三七的活性提取组合物的制剂质量控制方法。本发明是这样实现的我们制备了该提取组合物的胶囊剂、片剂，按照天然药物制剂质量标准要求对续断和三七的活性提取组合物中的主要成分建立了质量控制方法。本发明的具体技术方案如下含有续断和三七的活性提取组合物的复方制剂的质量控制方法，包括以下步骤鉴别，溶出度测定，总皂苷含量测定，特征成分含量测定(木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rg卜人参皂苷Rb》，其特征是(1)鉴别方法为薄层鉴别法以氯仿(13份)_甲醇(12份)一正丁醇(24份)一水(2-4份)的下层溶液为展开剂展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(1—10，体积比)，立即于在10011(TC加热至斑点显色清晰。其中对照品为木通皂苷D、三七皂苷R!、人参皂苷Rg!、人参皂苷Rbi，用甲醇溶解分别配制成含3mg/ml、0.5mg/ml、2mg/ml、2mg/ml的对照品溶液；供试品溶液制备方法为取样品粉末300mg500mg，，置10ml量瓶中，加甲醇定容，超声提取5分钟，过滤，取续滤液，即得。吸取上述木通皂苷D对照品溶液2^1，供试品溶液、三七皂苷Ri、人参皂苷Rg卜人参皂苷Rb,对照品溶液各4pl分别点于同一硅胶G薄层板上。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)溶出度测定包括以下步骤进行溶出度实验，用高效液相色谱法测定溶出量，其特征是溶出度实验方法取样品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XD第三法)，以水100ml为溶出介质，转速为每分钟150转，依法操作，经60min，取溶液10ml经滤过，取续滤液作为供试品溶液；其中对照溶液的制备方法为胶囊取10粒(或片剂取10片)，测定胶囊平均装量(或平均片重，去薄膜衣)，按此重量称取样品粉末置100ml量瓶中，用甲醇定容，超声处理5分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液作为对照溶液。其中高效液相色谱法条件同(4)项中的色谱条件，上述溶液进样量为20W。采用自身对照法计算制剂中木通皂苷D,三七皂苷R,，人参皂苷Rgi,人参皂苷Rbi的溶出量。(3)总皂苷含量测定包括以下步骤分别制备供试品溶液和对照品溶液，用硫酸-香草醛比色法测定，其特征是测定方法为分别精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0ml，置10ml具塞试管中，在80IO(TC水浴蒸干，放至室温；冰水浴冷却下，加入8。/。香草醛乙醇溶液0.40.6ml，再加入77°/0硫酸4.06.0ml，混匀后6080。C水浴加热2040min，取出立即放冰水浴中冷却15min;精密量取甲醇1.0ml，同法显色，作为空白对照液；显色后，在531537nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得；其中供试品溶液的制备方法为精密称取样品粉末1520mg置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，超声提取5分钟，冷却至室温，摇匀，滤过，即得；其中对照品溶液的制备方法为对照品为人参皂苷Rgn木通皂苷D中的任意一个；精密称取对照品人参皂苷Rg,或者木通皂苷D，加甲醇溶解定容，浓度范围分別为24.68吗/ml98.72吗/ml，43.32)xg/ml144.40|xg/ml。(4)木通皂苷D、三七皂苷Ri、人参皂苷Rg,、人参皂苷Rb,含量测定包括以下步骤分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征是色谱条件为以十八烷基键合硅胶为填充剂；乙腈-水为流动相，其中A为乙腈，B为水，A+B=100%，采用梯度洗脱；020分钟，80%60%B，2021分钟，60%80%B，维持5min，流速O.81.0ml/min;检测波长为203210nm;对照品为木通皂苷D，三七皂苷R,，人参皂苷Rg,,人参皂苷Rb1;其中对照品的制备方法为分别精密称取对照品木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rgh人参皂苷Rb,，用甲醇溶解定容，作为对照品贮备液；分别精密量取对照品贮备液适量，置同一容量瓶中，加甲醇定容，制成混合对照品溶液，浓度范围分别为0.052851.057mg/ml，0.0188mg/ml0.0564mg/ml，0.099mg/ml0.178mg/ml，0.0976mg/ml0.1627mg/ml;其中供试品溶液的制备方法为精密称取样品粉末150210mg，置50ml量瓶中，加甲醇适量振摇，稀释至刻度，超声处理5min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。上述溶液进样量为20pl。本发明的质量控制方法，其中复方制剂为含有续断和三七的活性提取组合物的胶囊剂、片剂。本发明的质量控制方法，其中鉴别采用薄层色谱法，本展开系统专属性强，能够有效鉴别三七皂苷R'，人参皂苷Rg,，人参皂苷Rh，木通皂苷D。本发明的质量控制方法，其中溶出度测定采用高效液相色谱法，其色谱条件同(4)测定的色谱条件。计算采用自身对照法，能够准确反映各个批号的制剂(胶囊，片剂)中四个特征成分-三七皂苷R,，人参皂苷Rgp人参皂苷Rbp木通皂苷D的溶出度。本发明的质量控制方法，其中总皂苷的测定采用硫酸-香草醛比色法，该指标的设定，能够有效控制作为三七和续断活性成分-三萜皂苷类的总量。本发明的质量控制方法，采用高效液相色谱法同时测定三七皂苷&，人参皂苷Rg!，人参皂苷Rb,，木通皂苷D四个有效成分，分离度好，线性关系，重现性，精密度，稳定性，回收率均较好。本发明的质量控制方法，包含了药物制剂质量研究的基本内容，具有良好的重现性和可靠性，能够有效、全面控制产品的质量。图1是实施例1中的复方胶囊薄层色谱图。图2是实施例1中的复方片剂薄层色谱图。图3是实施例2中的复方胶囊溶出度高效液相色谱图。图4是实施例2中的复方片剂溶出度高效液相色谱图。图5是实施例3中的复方胶囊比色法扫描光谱图。图6是实施例3中的复方片剂比色法扫描光谱图。图7是实施例4中的复方胶囊高效液相色谱图。图8是实施例4中的复方片剂高效液相色谱图。图1，图2中各数字表示的是13.供试品，4.人参皂苷Rgl.5.木通皂苷D，6.三七皂苷R,.7.人参皂苷Rb,。图5，图6中横坐标为波长(nm)，纵坐标为吸光度，各数字表示的是l.人参皂苷Rg!，2.供试品。以上高效液相色谱图中各数字表示的是1.三七皂苷R!，2.人参皂苷Rg,，3.木通皂苷D，4.人参皂苷Rb,。具体实施例方式由于该复方胶囊和片剂的质量控制方法基本相同，以下实施例中的"方法学考察"项就以胶囊为主进行阐述。试药复方胶囊(0杨05批、040609批、0楊13批、0儲7批、040721批、040725批、050307批)和复方片剂(040604批、040608批、040612批、040716批、040720批、040724批、05(B08批)均由江苏省药物研究所制剂室提供。对照品木通皂苷D由江苏省药物研究所植化室提供；三七皂苷R^人参皂苷Rb,、人参皂苷Rg,由中国药品生物制品检定所提供。实施例11.1展开条件固定相硅胶G板(100^200mm，厚度0.20-0.25mm，青岛海洋化工厂分厂)。展开剂以氯仿一甲醇一正丁醇一水(2:1:3:3)的下层溶液为展开剂，饱和时间30分钟，在不低于20'C展开。显色喷以硫酸乙醇溶液(1—10),立即于100110'C加热至斑点显色清晰。1.2溶液制备供试品溶液的制备取复方胶囊内容物380mg，置10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声5min，摇匀，过滤，即得。木通皂苷D对照品溶液的配制取木通皂苷D30mg置10ml的量瓶中，加甲醇溶解，稀释，定容，摇匀，即得。.人参皂苷Rh对照溶液的配制取人参皂苷Rb,10mg置5ml的量瓶中，加甲醇溶解，稀释，定容，摇匀，即得。人参皂苷Rgl对照溶液的配制取人参皂苷Rgl10mg置5ml的量瓶中，加甲醇溶解，稀释，定容，摇匀，即得。三七皂苷R,对照溶液的配制取人参皂苷R,5mg置10ml的量瓶中，加甲醇溶解，稀释，定容，摇匀，即得。1.3测定法及测定结果精密吸取木通皂苷D对照溶液2pl，人参皂苷Rb卜人参皂苷Rg,、三七皂苷Ri对照溶液、供试品溶液各4nl分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，立即于在10011(TC加热至斑点显色清晰。结果见图l。复方片剂的鉴别除了供试品的称样量为500mg(除去薄膜衣)夕卜，其余内容同上。见图2。1.4专属性试验经阴性对照试验，表明三七活性提取物对木通皂苷D鉴别无干扰，续断活性提取物对人参皂苷RM、人参皂苷Rgl、二七皂苷R1无干扰，空白辅料对各特征成分无干扰。表明该鉴别方法专属性较强。实施例21.仪器和材料AgilentIIOO型系列高效液相色谱仪，包括二元梯度泵、柱温箱，紫外检测器；HW色谱工作站(上海千谱)；ZRS-8G药物溶出仪(天津大学无线电厂)；KQ2200DE型医用数控超声波清洗器；针式滤器(水膜)0.45nm，德国MENBRANA公司甲醇(分析纯)，乙睛(色谱纯，德国Merk公司)，蒸馏水(自制)。2.色谱条件色谱柱Kromasildg柱(250mmx4.6mm,5um):乙腈-水为流动相，其中A为乙腈，B为水，A+B=100%，采用梯度洗脱；020分钟，80°/。60%B，2021分钟，60%80%B，维持5min，记录色谱图。流速0.8ml/min;检测波长为203nm。3.实验方法3.1溶液制备供试品溶液的制备取复方胶囊(或片剂)，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XD第三法)，以水100ml为溶出介质，转速为每分钟150转，依法操作，经60分钟，取溶液10ml经0.45nm膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照溶液的制备另取复方胶囊(或片剂)10粒(片)，精密称定平均装量(片剂去薄膜衣测平均片重)，研细，按照平均装量(或平均片重)，精密称取粉末置100ml量瓶中，加甲醇适量，超声助溶5min,放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为对照溶液。3.2测定方法和结果分别精密量取上述两种溶液2(V注入液相色谱仪测定。7批样品测定结果见表1。见图3。表1复方胶囊溶出度测定结果(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>复方片剂的溶出度测定方法同上，7批样品测定结果见表2。见图4。表2复方片剂溶出度测定结果(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>4.方法学考察4.1测定方法的确定实验表明，木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rg卜人参皂苷Rh在甲醇中的响应值(f，)和在水中的响应值(f》是一致的，故可以甲醇为溶剂配制溶出度测定所需对照溶液。4.2线性关系精密称取对照品木通皂苷D、三七皂苷R卜人参皂苷Rg卜人参皂苷Rb,适量，用水稀释成一系列不同浓度的溶液，在上述色谱条件下测定，以样品峰面积(y)对浓度(x,mg，ml")进行线性回归，得到回归方程，见表3。表3线性关系结果对照品回归方程相关系数线性范围(mgTnr1)木通皂苷Dy=5.99xl06x+7.39><1040.99980.06930.9702三七皂苷R,y=5.25xl06x+7.30>(1020.99990.007480.05984人参皂苷Rgiy=6.16xl06x+1.01>0.99980.03640.2184人参皂苷Rb!y=4.52xl06x+2.89>(1040.99920.04750.2854.3进样精密度取溶出度供试品溶液l份，重复进样5次。结果表明木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rg卜人参皂苷Rbt峰面积RSD分别为1.10%，0.27%，0.59%，0.79%，表明仪器精密度良好。实施例31.仪器和试剂仪器岛津UV-2401分光光度计；岛津MPS-2000分光光度计；BRANSON200超声波清洗器(ULTRASONICCLEANER,50-60HZ);WH-1微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂)试剂甲醇(分析纯，南京化学试剂厂)；77%硫酸沐硫酸为优级纯，23ml蒸馏水加硫酸77ml);8。/。香草醛(vanimn)乙醇溶液(分析纯，800mg香草醛溶解于10ml无水乙醇中，临用前配制)。2.试验方法2.1溶液制备供试品溶液的制备精密称取复方胶囊供试品粉末15mg置100ml量瓶中，加甲醇定容，超声助溶5分钟，放至室温，摇匀，滤过，即得。对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg,对照品18.5mg置20ml量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，定容，摇匀，精密量取lml至20ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.2测定法及结果分别精密量取供试品溶液和对照品溶液lml，置10ml具塞试管中，IOO'C水浴蒸干，放至室温。冰水浴冷却下，加入8。/。香草醛乙醇溶液0.5ml，再加入77。/。硫酸5.0ml，混匀后70'C水浴加热30min,立即取出放冰水浴中冷却15min。精密量取甲醇lml，同法显色后作为空白对照液，在535nm的波长处分别测定吸光度。测定结果见表4，见图5。表4复方胶囊总皂苷测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>称取复方片剂供试品粉末(除去薄膜衣)20mg，其余方法同上。测定结果见表5，见图6。表5复方片剂总皂苷测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>3.方法学考察3.1对照品的选择分别称取本品、木通皂苷D(经五氧化二磷减压干燥至恒重)三七皂苷R,、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb,对照品适量，配制溶液，照"实验方法"项下方法显色后，分别在400650nm扫描，结果表明，人参皂苷Rg卜木通皂苷D与供试品的最大吸收波长较一致。人参皂苷Rg,价格便宜，易得，故优选人参皂苷Rgi为对照品。3.2显色稳定性的考察依照"实验方法"项下制备供试品液、对照品溶液、空白溶液，在从冰水浴取出后在0120min，每隔10min在400650nm扫描，结果表明，在从冰浴拿出后的0120min内，最大吸收波长在535士3nm范围，各扫描时间点吸光度RSD<1.2%，所以测定可在从冰浴拿出后的120min内进行。3.3线性关系精密称取对照品人参皂苷Rgi12.34mg,置100ml量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度作为储备液。精密量取储备液0.2ml、0.3ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml分别置10ml具塞试管中，各加甲醇至lml。按照"实验方法"项下方法试验，测定吸光度。以吸光度(y)对样品量(x，吗)进行线性回归，得到回归方程为y=0.1485x—0.01，r=0.9991;线性范围为24.68吗98.72吗。精密称取对照品木通皂苷D适量，操作同上，得到回归方程为y=5.09xlO-3x+1.37=<l(r4，r=0.9992;线性范围为43.32吗144.40吗。3.4加样回收率试验分别精密称取已知总皂苷含量的胶囊内容物粉末(7.5mg)共6份，分别加入对照品人参皂苷Rg,2.28mg，置100ml量瓶中，用甲醇稀释定容至刻度，超声5min，放至室温，摇匀，滤过。照"实验方法"项下方法测定吸光度。结果得到平均回收率为102.2%，RSD=2.95%，符合测定要求。3.5重复性试验精密称取同一批号(040605批)样品6份，按照"实验方法"项下方法测定，结果6份样品含量的RSD为3.56。/。，符合比色法测定要求。实施例41.1仪器与试剂Agilent1100型系列高效液相色谱仪，包括二元梯度泵、柱温箱，紫外检测器；HW色谱工作站(上海千谱)；BRANSON200超声波清洗器(ULTRASONICCLEANER,50-60HZ)。甲醇(分析纯)，乙睛(色谱纯，德国Merk公司)，重蒸水(自制)。2.实验方法2.1色谱条件色谱柱KromasilC18色谱柱(4.6x250mmlD,5pm);以乙腈为流动相A;以水为流动相B，进行梯度洗脱020分钟，流动相8的比例从80%减至60%;2021分钟，流动相B的比例从60%增至80%;维持5分钟，记录色谱图。流速1.0ml/min;柱温25'C;检测波长为203nm。2.2溶液的制备对照品溶液的制备分别精密称取木通皂苷D、三七皂苷&、人参皂苷Rgb人参皂苷Rb,对照品适量，加甲醇溶解稀释成每lml含木通皂苷D0.5mg、三七皂苷R!0.04mg、人参皂苷Rgl0.15mg、人参皂苷Rb,0.15mg的混合溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备精密称取本品内容物159mg置50ml量瓶中，加甲醇适量振摇，稀释至刻度，超声提取5分钟，放冷，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。2.3测定法及结果精密量取供试品溶液和对照品溶液各2(^1注入液相色谱仪测定。结果见表6。见图7。表6复方胶囊含量测定结果(mg/粒)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>称取复方片剂的供试品粉末207mg(除去薄膜衣)，其余方法同上。测定结果见表7。见表7复方片剂含量测定结果(mg/片)批号木通皂苷D三七皂苷R,人参皂苷Rg,人参皂苷R^0德04批48.613.2513.2314.59040608批49.093.4113.8615.50040612批49.713.4713.6415.29040716批51.933.4613.8315.08040720批52.633.4813.6114.96040724批49.223.4913.7315.05Q50308批53.223.4513.6616.123.方法学考察3.1线性关系精密称取木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rg,、人参皂苷Rb,适量，用甲醇稀释成一系列不同浓度的溶液，在上述色谱条件下测定，以样品峰面积(y)对浓度(x，mg'ml")进行线性回归，得到回归方程，见表8。表8线性关系结果对照品回归方程相关系数线性范围(mg-ml")木通皂苷Dy=5.92xl06C+7.99><1030.99980.052851.057三七皂苷R,y=5.63xl06C+1.30><1030.99930.01880.0564人参皂苷Rg!y=6.54xl06C+8.97><1030.99940.0990.178人参皂苷Rbiy=4.99xl06C-4.09>:1040.99980.09760.16273.2加样回收率试验精密称取已知木通皂苷D、三七皂苷R,、人参皂苷Rgi、人参皂苷Rbi含量的胶囊内容物粉末(159mg))6份，分别加入上述四个对照品24.0mg，1.77mg，6.0mg，7.0mg，按照"实验方法"项下方法制备溶液，测定峰面积，计算回收率，结果见表9。表9回收率试验结果平均回收率(％)RSD(o/cO木通皇苷D跳22.84三七皂苷R,101.41.38人参皂苷Rg,100.91.45人参皂苷Rb,97.131.46;3.3样品溶液稳定性试验取按"实验方法"项下制备的供试品溶液1份(040605批)，分别在O、1、2、4、8小时测定，结果表明4个化合物峰面积RSD分别为0.41%，2.20%，0.31%，0.89%。重复进样5次的4个化合物峰面积RSD分别为0.75%，1.34%,1.40%，0.67%,表明仪器精密度良好。3.4重复性试验精密称取同一批号(040605批)样品6份，按照"实验方法"项下方法测定。结果6份样品中4个化合物含量的RSD分别为2.48%,2.33°/。，2.89%,2.17%。权利要求1.一种含有续断和三七活性提取组合物的复方制剂的质量控制方法，包括以下步骤鉴别，溶出度测定，总皂苷含量测定，特征成分含量测定(木通皂苷D、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1)，其特征是(1)鉴别方法为薄层鉴别法以氯仿(1～3份)-甲醇(1～2份)-正丁醇(2～4份)-水(2～4份)的下层溶液为展开剂展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(1→10，体积比)，立即于在100～110℃加热至斑点显色清晰；其中对照品为木通皂苷D、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1，用甲醇溶解分别配制成含3mg/ml、0.5mg/ml、2mg/ml、2mg/ml的对照品溶液；供试品溶液制备方法为取样品粉末300～500mg，置10ml量瓶中，加甲醇定容，超声提取5分钟，过滤，取续滤液，即得；(2)溶出度测定包括以下步骤分别进行溶出度实验，制备对照溶液，用高效液相色谱法测定，其特征是溶出度实验方法取样品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XD第三法)，以水100ml为溶出介质，转速为每分钟150转，依法操作，经60min，取溶液10ml经滤过，取续滤液作为供试品溶液；其中对照溶液的制备方法为胶囊取10粒(或片剂取10片)，测定胶囊平均装量(或平均片重，去薄膜衣)，按此重量称取样品粉末置100ml量瓶中，用甲醇定容，超声处理5分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；其中色谱条件为以十八烷基键合硅胶为填充剂；乙腈-水为流动相，其中A为乙腈，B为水，A+B＝100％，采用梯度洗脱；0～20分钟，80％～60％B，20～21分钟，60％～80％B，维持5min，流速0.8～1.0ml/min；检测波长为203～210nm；上述溶液进样量为20μl；采用自身对照法计算制剂中木通皂苷D、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的溶出量；(3)总皂苷含量测定包括以下步骤分别制备供试品溶液和对照品溶液，用硫酸-香草醛比色法测定，其特征是测定方法为分别精密量取供试品溶液和对照品溶液各1.0ml，置10ml具塞试管中，在80～100℃水浴蒸干，放至室温；冰水浴冷却下，加入8％香草醛乙醇溶液0.4～0.6ml，再加入77％硫酸4.0～6.0ml，混匀后60～80℃水浴加热20～40min，取出立即放冰水浴中冷却15min；精密量取甲醇1.0ml，同法显色，作为空白对照液；显色后，在531～537nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得；其中供试品溶液的制备方法为精密称取样品粉末15～20mg置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，超声提取5分钟，冷却至室温，摇匀，滤过，即得；其中对照品溶液的制备方法为对照品为人参皂苷Rg1，木通皂苷D中的任意一个；精密称取对照品人参皂苷Rg1或者木通皂苷D，加甲醇溶解定容，浓度范围分别为24.68μg/ml～98.72μg/ml，43.32μg/ml～144.40μg/ml；(4)木通皂苷D、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量测定包括以下步骤分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征是色谱条件为以十八烷基键合硅胶为填充剂；乙腈-水为流动相，其中A为乙腈，B为水，A+B＝100％，采用梯度洗脱；0～20分钟，80％～60％B，20～21分钟，60％～80％B，维持5min，流速0.8～1.0ml/min；检测波长为203～210nm；对照品为三七皂苷R1，人参皂苷Rg1，人参皂苷Rb1，木通皂苷D；其中对照品的制备方法为分别精密称取对照品木通皂苷D、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1，用甲醇溶解定容，作为对照品贮备液；分别精密量取对照品贮备液适量，置同一容量瓶中，加甲醇定容，制成混合对照品溶液，浓度范围分别为0.05285～1.057mg/ml，0.0188mg/ml～0.0564mg/ml，0.099mg/ml～0.178mg/ml，0.0976mg/ml～0.1627mg/ml；其中供试品溶液的制备方法为精密称取样品粉末150～210mg，置50ml量瓶中，加甲醇适量振摇，稀释至刻度，超声处理5min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于复方制剂是指胶囊剂、片剂。3.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于步骤(1)中，吸取木通皂苷D对照溶液2W，供试品溶液、三七皂苷R,、人参皂苷Rgi、人参皂苷对照溶液各4^1分别点于同一硅胶G薄层板上，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。4.根据权利要求l所述的质量控制方法，其特征在于步骤(4)中，高效液相色谱的进样量为20|al。全文摘要本发明涉及中药质量检测领域，具体来说涉及一种含有续断和三七的活性提取组合物的复方制剂的质量控制方法。本发明对含有续断和三七的活性提取组合物的胶囊和片剂建立了质量控制方法，包括鉴别，溶出度，总皂苷含量测定，木通皂苷D、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁含量测定。本方法具有良好的重现性和可靠性，可用于含有续断和三七的活性提取组合物复方胶囊和复方片剂的质量控制。文档编号A61K9/48GK101249120SQ20081002469公开日2008年8月27日申请日期2008年4月2日优先权日2008年4月2日发明者静王,军陆,陆步实,宁陈,韦英杰申请人:南京工业大学