专利名称：一种从黄连木饼粕中提取的多酚及其提取方法
技术领域：
本发明涉及一种从黄连木饼粕中提取的多酚及其提取方法，属于生物化学领域。
背景技术：
黄连木原产我国，分布很广，北自河北、由东，南至广东、广西，东到台湾， 西南至四川、石南，都有野生和栽培。近几年来由于石油价格的剧增，以及石油 能源对环境造成的严重污染，人类开始关注可再生替代能源的开发和应用。根据 我国最近3年的广泛调査研究，国家林业研究机构认为，黄连木是北方油料林木 的最佳树种。因此黄连木的研究也日益受到关注，而黄连木种子提油后的饼粕一 般用作为肥料。植物多酚在国内外的研究比较多，它具有抗氧化、止血消炎、解 毒抗病菌、抗龋齿抗过敏、抗突变、抗肿瘤和癌变、抗白内障、抗心脑血管疾病、 抗尼古丁、延缓衰老促进免疫、抗紫外线和防晒，美白保湿，抗皱和保持皮肤弹 性等一系列功效，因此大量的研究工作集中于寻找多酚的新来源和研究其生理 活性；而国内外资料对黄连木的生长环境研究的居多，如能发现并提取出黄连木 饼粕中的多酚必将大大提高提高了黄连木果实饼粕的附加值，同时又为多酚提供 新来源。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从黄连木饼粕中提取的多酚及其提取方法，该方 法简单有效，成本低，且用该方法提取多酚的得率较高。
实现本发明目的技术方案为一种从黄连木饼粕中提取多酚的方法，先将原料 黄连木饼粕进行预处理去除杂质，对原料黄连木饼粕进行预处理依次采用如下步 骤粉碎，过筛，用叔丁醇、甲苯、已烷、环己烷、二异丙醚、6号溶剂或石油
醚中的一种或几种混合物回流脱脂，干燥。然后提取所采用的具体步骤如下
(1)取黄连木饼粕原料，按l:3-l:200g/ml的料液比加入作为提取液的水、 有机溶剂水溶液、pH 1-6的酸性水溶液或pH 1-6的酸性有机溶剂水溶液， 然后在l-10(TC和搅拌速度为0 — 1000r/m条件下浸提lmin-7h后取出。(2)分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。 在上述技术方案的基础上，在步骤(1)中将黄连木饼粕加入提取液后浸提 的过程中，使其处于0—10000W功率的超声波或0—80000W功率的微波的作用下。 且其中作为提取液的有机溶剂水溶液包括甲醇、乙醇、丙醇等低碳醇及乙醚、 丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物的水溶液。
上述作为提取液的pH 1-6的酸性水溶液为盐酸、高氯酸、氯酸、次氯酸、 氢氟酸、硝酸、亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘酸、硫酸、磺酸、亚硫酸、 硼酸、植酸、三氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢 钠、磷酸氢钾、磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铰、硫酸铵、硫酸氢铵、羧酸、羧酸 酐、过氧化氢或磷酸二氢铵的水溶液，或者它们中两种或两种以上混合物的水溶 液。
上述作为提取液的pH 1-6酸性有机溶剂水溶液包括盐酸、高氯酸、氯酸、 次氯酸、氢氟酸、硝酸、亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘酸、硫酸、磺酸、 亚硫酸、硼酸、植酸、三氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸氢钠、 磷酸二氢钠、磷酸氢钾、磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铵、硫酸铵、硫酸氢铵、羧 酸、羧酸酐、过氧化氢或磷酸二氢铵，或者它们中两种或两种以上混合物与质量 百分比含量大于0且小于等于100%的有机溶剂水溶液混合制得，其中有机溶剂 水溶液中的有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇等低碳醇及乙醚、丙酮、乙酸乙酯中 的一种或几种混合物。
上述分离离心条件为2000 — 15000r/m， 1一40。C。
采用现有的多酚与三价铁盐反应成绿色或蓝色法对用本发明提供的技术方 案提取的物质进行定性分析，可说明本发明提取的是多酚。用Folin-Denis法对 得到的多酚进行含量进行测定，可知在该技术方案中提取液的pH值、提取温度、 提取时间和料液比这些条件对多酚得率影响显著。
由上述技术方案可知本发明采用溶液提取法，以常用的有机溶剂或水作为提 取液，提取条件简单方便，而且本发明还将超声或微波提取法作为辅助方法，通 过超声波或微波的作用更好地破碎细胞壁，使多酚更多更快的提取出来。因此本 发明提供的提取方法的多酚得率较高，能大大提高黄连木加工利用的附加值，在 工业上有很好的推广应用前景。
具体实施例方式
本发明首先将原料黄连木饼粕进行预处理，即依次粉碎、过筛、石油醚、甲 苯、已烷、环己烷、二异丙醚、6号溶剂或石油醚中的一种或几种混合物回流脱 脂，回流以去掉颗粒杂质、残余的油脂，晾干备用，将原料黄连木饼粕进行预处 理可以使提取效果更好， 一般情况下应对原料黄连木饼粕进行预处理；然后按 l:3-l:200g/ml的料液比加入作为提取液的水、有机溶剂水溶液或pH 1-6的酸 性有机溶剂水溶液，然后在1-10(TC浸提lmin-7h后取出，分离出溶液，脱出溶 液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。
为提高多酚得率，本发明在步骤(2)中将黄连木饼粕加入提取液后搅拌加 热浸提的过程中，使其处于0-10000W功率的超声波或0-80000W功率的微波的作 用下，通过超声波或微波的作用更好地破碎细胞壁，以使多酚更多更快的提取出 来。
以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。 实施例1
将2g预处理后的黄连木饼粕加入6ml水中，放入5(TC水浴中浸提，浸提3h 后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD 法测定此条件下多酚得率为0.72%。
实施例2
将2g预处理后的黄连木饼粕加入6ml质量百分比浓度为1%的甲醇、乙醇、 丙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物水溶液中，放入5(TC水浴 中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到 多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率为0.7y。以上(如1%丙酮作为提取 液时得率为0.82%)。
实施例3
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的质量百分比浓度为10%甲醇、乙 醇、丙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物溶液中，放入2(TC水 浴中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得 到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率为0.7%以上(如10%丙酮作为 提取液时得率为0.86%)。实施例4
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的质量百分比浓度为1%乙醇水溶液 中放入rC水浴中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真 空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率为0.64%。
实施例5
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18nil的pH为1乙醇质量百分比浓度为60% 的乙醇盐酸水溶液中放入5(TC水浴中浸提，浸提3小时后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为2.26%。
实施例6
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18mlpH为1的乙醇质量百分比浓度为60% 的乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提lmin后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为0.94%。
实施例7
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18mlpH为2的乙醇质量百分比浓度为60% 的乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提lmin后取出分离出溶液，脱 出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率 为2.34%。
实施例8
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18ml的pH为l乙醇质量百分比浓度为70% 的乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提lmin后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为1.94%。
实施例9
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的pH为2乙醇质量百分比浓度为 70%乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为2.74%。实施例10
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的pH为1乙醇质量百分比浓度为
70%乙醇盐酸水溶液中，放入rc水浴中浸提，浸提3小时后取出，分离出溶液，
脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为2.34%。 实施例11
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的pH为1乙醇质量百分比浓度为 70%乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为2.59%。
实施例12
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的pH为1乙醇质量百分比浓度为 70%的乙醇盐酸水溶液中，放入IO(TC水浴中浸提，浸提60min后取出，分离出 溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下 多酚得率为2.56%。实施例13
将2g预处理后的黄连木饼粕加入6ml的pH为1乙醇质量百分比浓度为70% 乙醇盐酸水溶液中，放入5(TC水浴中浸提，浸提60min后取出，分离出溶液， 脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得 率为1.43%。
实施例14
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18ml的pH为1乙醇质量百分比浓度为70% 乙醇盐酸水溶液中，放入50。C水浴中和搅拌速度为1000r/m浸提，浸提60min 后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD 法测定此条件下多酚得率为2. 39%。
实施例15
将2g预处理后的黄连木饼粕加入400ml的pH为6质量百分比浓度为70%甲 醇、乙醇、丙醇等低碳醇及乙醚、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物的有机 溶剂水溶液中放入5(TC水浴中，10000W功率的超声波作用下浸提60min后取出，在1一40。C下以2000 — 15000r/m分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥 得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率为4.0%以上(如70%乙醇作 为提取液时得率为4. 59%)。 实施例16
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18ml pH为2的盐酸、高氯酸、氯酸、次 氯酸、氢氟酸、硝酸、亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘酸、硫酸、磺酸、亚 硫酸、硼酸、植酸、三氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸氢钠、磷 酸二氢钠、磷酸氢钾、磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铵、硫酸铵、硫酸氢铵、羧酸、 羧酸酐、过氧化氢或磷酸二氢铵的乙醇溶液中放入50。C水浴中，80000W功率的 微波的作用下浸提7h后取出，在l一4(TC下以2000—15000r/m分离出溶液，脱 出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率 为4.0%以上(如其中的酸为盐酸时得率为4.73%)。
可将上述两种或多种酸与质量百分比含量为大于0且小于等于100%的有机 溶剂水溶液混合后加入预处理后的黄连木饼粕中，其中有机溶剂为甲醇、乙醇、 丙醇等低碳醇及乙醚、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物。
实施例17
将2g预处理后的黄连木饼粕加入18ml的pH为1的盐酸水溶液中，放入50 "水浴中在搅拌速度为0—1000r/m条件下浸提，浸提30min后取出，在1一40 。C下以2000 — 15000r/m分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚 粗提物。经FD法测定此条件下多酚得率为0.94%。
以上的盐酸水溶液中可用酸性水溶液替换，其中酸性水溶液中的酸性物质可 用高氯酸、氯酸、次氯酸、氢氟酸、硝酸、亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘 酸、硫酸、磺酸、亚硫酸、硼酸、植酸、三氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸 氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸氢钾、磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铵、硫酸 铵、硫酸氢铵、羧酸、羧酸酐、过氧化氢或磷酸二氢铵，或者它们中两种或两种 以上混合物。
权利要求
1.一种黄连木多酚，其特征在于采用以下步骤提取而得取黄连木饼粕原料，按1∶3-1∶200g/ml的料液比加入作为提取液的水、有机溶剂水溶液、pH1-6的酸性水溶液或者pH1-6的酸性有机溶剂水溶液，然后在1-100℃下浸提1min-7h后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。
2. —种权利要求1所述黄连木多酚的提取方法，其特征在于包括以下步骤取黄 连木饼粕原料，按l:3-l:200g/ml的料液比加入作为提取液的水、pH 1-6的酸 性水溶液或者pH 1-6的酸性有机溶剂水溶液，然后在l-10(TC下浸提lmin-7h 后取出，分离出溶液，脱出溶液中溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。
3. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于:在提取 步骤工艺前，先将原料黄连木饼粕进行预处理去除杂质，对原料黄连木饼粕进行 预处理依次采用如下步骤粉碎，过筛，用叔丁醇、甲苯、已烷、环己烷、二异 丙醚、6号溶剂或石油醚中的一种或几种混合物回流脱脂，干燥。
4. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于作为提取液的有机溶剂的水溶液包括甲醇、乙醇、丙醇等低碳醇及乙醚、丙酮、乙酸乙 酯中的 一种或几种混合物的水溶液。
5. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于作为提 取液的pH 1-6的酸性水溶液为盐酸、高氯酸、氯酸、次氯酸、氢氟酸、硝酸、 亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘酸、硫酸、磺酸、亚硫酸、硼酸、植酸、三 氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸氢钾、 磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铵、硫酸铵、硫酸氢铵、羧酸、羧酸酐、过氧化氢或 磷酸二氢铵的水溶液，或者它们中两种或两种以上混合物的水溶液。
6. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于作为提 取液的pH 1-6酸性有机溶剂水溶液为盐酸、高氯酸、氯酸、次氯酸、氢氟酸、 硝酸、亚硝酸、磷酸、氢溴酸、溴酸、高碘酸、硫酸、磺酸、亚硫酸、硼酸、植 酸、三氯乙酸、三氟乙酸、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸 氢钾、磷酸二氢钾、氯化铵、硝酸铵、硫酸铵、硫酸氢铵、羧酸、羧酸酐、过氧 化氢或磷酸二氢铵，或者它们中两种或两种以上混合物与质量百分比含量为大于 0且小于等于100%的有机溶剂水溶液混合制得，提取液为pH 1-6的酸性有机溶 剂水溶液时，将黄连木饼粕按1:3-l:200g/ml的料液比加入作为提取液的pH 1-6 的酸性有机溶剂水溶液，在l-10(TC和搅拌速度为0 — 1000r/m条件下浸提1分钟-7小时后取出。
7. 根据权利要求2或6所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于:其 中作为提取液的酸性有机溶剂水溶液中的有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇等低碳 醇及乙醚、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物。
8. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于:在1-100 。C下浸提时，以0-1000r/m的速度搅拌。
9. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于在黄连 木饼粕中加入提取液后浸提的过程中，使其处于0 — 10000W功率的超声波或0 — 80000W功率的微波的作用下。
10. 根据权利要求2所述快速高效的提取黄连木多酚的方法，其特征在于:分离离 心条件为2000 — 15000r/m， 1一40。C。
全文摘要
本发明公开了一种从黄连木粕中提取的多酚及其提取方法，该多酚是通过如下步骤提取取黄连木粕原料，按1∶3-1∶200g/ml的液料比加入作为提取液，然后在1-100℃和搅拌速度为0-1000r/m条件下浸提1分钟-7小时后取出；离心定容，减压浓蒸馏脱出有机溶剂，真空冷冻干燥得到多酚粗提物。本发明采用溶液提取法，以常用的水、酸性水溶液、有机溶剂-水溶液或酸性有机溶剂-水溶液作为提取液，提取条件简单方便，且本发明还将超声或微波提取作为辅助手段，因此该提取方法的多酚得率较高，能大大提高黄连木的加工利用的附加值，同时也得到一种新的多酚来源，因此在工业上有很好的推广应用前景。
文档编号A61K36/185GK101313923SQ200810048220
公开日2008年12月3日 申请日期2008年6月30日 优先权日2008年6月30日
发明者如 王, 王承明, 高洁芬 申请人:华中农业大学