专利名称：山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于食品及其生产领域。
技术背景目前，常见的山药制品有速冻山药泥、山药糊、山药滋补晶、活性山药粉、 山药露、山药糕、山药脯、山药奶、山药酸奶、山药蜜汁、山药枸杞果酱、山药 清水罐头、山药毛条、山药光条、脱水山药片等，其加工技术基本上都是清洗、 脱皮、打浆、切片、脱水、烘干、冷冻干燥、磨粉、蒸煮、榨汁、浓缩、过滤、 调配等简单常规的物理加工，技术水平非常落后，产品质量不稳定，产品附加值 低，不适应时代发展的需要。山药作为中药使用，具有补脾健胃、补肺止咳、滋阴壮阳、驻容延年、抗癌 症、防治糖尿病等功效，临床用于防治200余种疾病。山药作为食品，具有丰富 而独特的营养特性。但是，山药在生产过程中经常受到土:t裏、水肥、病虫害、栽 培管理手段等因素的影响，质量难以均一，即使后期加工炮制，由于采用的技术 手段比较落后，也难以保证产品质量稳定。本发明专利山药多糖复合免疫球蛋白 抗感染制剂真正体现了山药的药用价值和保健功能。 发明内容本发明专利的主要理论原理在现代分子生物学、现代分子免疫学和中医学相结合的基础上，利用分子间 氢键结构理论，把山药多糖和免疫球蛋白两者混合以后经过低温高速离心喷雾干 燥或真空冷冻干燥，使山药多糖通过氢键在免疫球蛋白外围形成多维网络空间假 性水化膜结构，从而复合生成均匀相物质一一山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制 剂。山药多糖是利用富含羟基的一种物质，它们相互间可以构建多维网络空间氢 键结构，在免疫球蛋白表面形成假性水化膜。氢键假性水化膜的存在直接影响了 免疫球蛋白分子的外表结构、构象、性质与功能等。通过这种多维网络空间氢键 假性水化膜实现山药多糖对免疫球蛋白的保护作用，主要体现在提高了免疫球蛋 白抵抗高温、紫外线等诱导变性的性能。本发明专利的主要技术方案和技术路线1 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 0.01-100.0 免疫球蛋白 1.00 - 100.0方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卯黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。 2、本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下 (1)、山药多糖制备① 、将山药切碎、洗净后，用冷水浸泡1-5小时至药心充分浸透，再加入 原料重量的6-12倍的水，加热至沸腾后在70—98。C的情况下煎煮，第一次煎煮 30—120分钟，倒出药液，然后再进行两次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的 5 —IO倍水，煎煮60-180分钟，然后将三次药液混合得到混合药液。② 、将①的混合药液经板框压滤或厢式压滤，再通过8000-16000转/分离 心15-30分钟，弃去沉淀物，获得上清液并经负压浓缩，使其形成干物质为20一40%的浓缩药液。③、将②的浓缩药液加2 — 8倍的85_99%的乙醇，静置过夜，3500转/分 离心10分钟，弃去乙醇上清液，沉淀物水浴加热除去乙醇或负压蒸馏除去乙醇， 然后加水溶解并通过100KD滤膜过滤，除去蛋白等大分子杂质，收集滤过液再通 过1KD纳滤膜过滤，除去有机小分子和无机分子及离子等杂质，被截留的物质稀 释后，加2—5倍量90—99%乙醇沉淀，搅拌，静置过夜，3000—5000转/分离心 15 —30分钟；沉淀物除去乙醇并经过冷冻干燥或喷雾干燥，即为中药多糖。(2) 、免疫球蛋白制备① 、选定健康家禽蛋黄经微生物学检测，产蛋家禽(鸡、鸭、鵝等)群体中未检出致病沙门氏杆 菌、高致病性禽流感，即可收集其禽蛋，贮存在16。C条件下备用。② 、免疫球蛋白提纯a. 将步骤①得到的禽蛋进行消毒，打碎禽蛋进行分离，得到卵清和卵黄， 其中卵清经喷雾干燥，制得卵清粉；b. 在(a)步卵黄中加入卵黄重量的4-16倍的无菌去离子水并用0. 1NHC1 , 使PH值至5. 0-6. 6，然后搅拌5-20分钟，在2-8。C的条件下，静置3-24小时之 后，以2500-15000转/分离心10-30分钟，得到上清液和沉淀物，沉淀物经喷雾 干燥，得到卵黄粉；c. 将(b)步的上清液经200KD滤膜过滤，除去上清中的卵黄凝t粒等杂质；其 滤过液再经过100KD滤膜过滤，除去低分子杂质，截留物经冷冻干燥或喷雾干燥， 即为卵黄免疫球蛋白。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成将(1)步制备的山药多糖和(2)步制备免疫球蛋白依据1项中山药多糖复合免 疫球蛋白抗感染制剂的配方山药多糖 0. 01 - 100. 0和免疫球蛋白1.00-100. 0混合溶于无菌去离子水中，使干物质浓度达30%左右，在高速乳化机中匀 质，过4号筛，在高速离心喷雾干燥机上喷雾干燥，制得山药多糖复合免疫球蛋 白抗感染制剂干粉。高速离心喷雾干燥机的工作条件为进口温度135-165°C，出 口温度65-75。C，喷雾头转速> 22000转/分，负压10-80帕。山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂干粉分装成袋，500克/袋，最后通过 (V。照射杀灭微生物，按《中国药典2005年版第一部》附录IC颗粒剂(6页) 项，检验合格后，即可投入使用。3、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准物理性状本品为棕黄色粉末。安全检验
取本制剂1000mg,用10毫升生理盐水还原稀释，选体重 18 — 22克小白鼠5只，各皮下注射本制剂稀释液0. 5毫升，体重l. 5_2. 0公斤 家兔2只，各皮下注射本制剂稀释液10毫升，体重350_—400克豚鼠2只，各 皮下注射本制剂稀释液3毫升，观测10日，均应健活。免疫球蛋白含量
取本品1000mg,精密称量，加蒸馏水10ml，再加氯 仿10ml,混匀，静置l小时，3000转/分离心20分钟，取上清作为供试品，照单向 琼脂免疫电泳法(刘玉斌主编，《动物免疫实验技术》，吉林科学技术出版社，1989 年10月第1版，第37页)测定，计算，即得。本品按干燥品计算，免疫球蛋白含量不少于0. 5°/。。作用和用途用于补益脾气，增强人体免疫力。用法和用量
将本制剂以0. 5_10. (W的剂量直接添加到食品或饮品中食用。本发明的主要优点和效果1. 本发明专利制剂是山药多糖和免疫球蛋白通过分子间力(主要是范德华 力及氢键等)有机结合的产物，是将免疫球蛋白的特异免疫性和山药多糖的非特 异免疫性以及它们对机体自身抗病能力的调理作用完美地结合起来的产物。免疫 球蛋白和中药多糖两者结构关联、功能互补，相得益彰。因此，山药多糖复合免 疫球蛋白抗感染制剂全面地体现了中医学理论和现代免疫学原理的结合，是一个 有效激发和调节机体免疫功能的全新高效的浓缩食品。2. 本发明专利制剂中，山药多糖除了自身具备的非特异性免疫功能外，对 制剂中的免疫球蛋白具有良好的保护作用。本发明专利所述山药多糖是利用富含 羟基的一种物质，它们相互间可以构建多维网络空间氢键结构，在免疫球蛋白表 面形成假性水化膜。氢键假性水化膜的存在直接影响了免疫球蛋白分子的外表结构、构象、性质与功能等。通过这种多维网络空间氩4建假性水化膜实现山药多糖对免疫球蛋白的保护作用，主要体现在提高了免疫球蛋白抵抗高温、紫外线等诱导变性的性能。山药多糖以氢键(hydrogen bonding ， 键能10—45KJ/mo1 )粘 结在一起形成多维网络空间，为免疫球蛋白搭建了大厦居所，免疫球蛋白以氢键 安置在多维网络空间内，这样形成了稳定、坚固的多维网络空间氢键假性水化膜， 很好地保护免疫球蛋白免受外界环境的破坏。当免疫球蛋白在加工制作、干燥和 贮运时，山药多糖形成的多维网络空间首先接受外界热能、光能等因子的作用而 无序地运动起来，但是由于多维网络空间的结构特点，致使山药多糖分子上的羟 基在失水时能即刻与免疫球蛋白表面的氨基和羟基等直接形成氢键，导致了整个 分子运动趋于零。这种多维网络空间氢键假性水化膜钝化了免疫球蛋白对外界热 能和微环境失水的感应，减轻了免疫球蛋白分子内部次生键的振动和肽链的延 伸，保持了免疫球蛋白的三位构象和生物活性。所以，山药多糖具有蛋白保护剂 的特征，在制剂的加工过程中维护了免疫球蛋白的四级立体结构形态，克服免疫 球蛋白必须在低温环境中保存、运输和使用的缺点，使免疫球蛋白活性在常温下 贮存达12-18个月以上。山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂是一个稳定性优良的浓缩保健食品。 具体实施例 实施例11 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 0. Ol公斤免疫球蛋白 100. 0公斤方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。 2、本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下 (1)、山药多糖制备① 、将山药切碎、洗净后，用冷水浸泡1-5小时至药心充分浸透，再加入 原料重量的6-12倍的水，加热至沸腾后在70—98。C的情况下煎煮，第一次煎煮 30—120分钟，倒出药液，然后再进行两次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的 5 — 10倍水，煎煮60-180分钟，然后将三次药液混合得到混合药液。② 、将①的混合药液经板框压滤或厢式压滤，再通过8000-16000转/分离 心15-30分钟，弃去沉淀物，获得上清液并经负压浓缩，使其形成千物质为20 一40%的浓缩药液。③、将②的浓缩药液加2 — 8倍的85 —99 %的乙醇，静置过夜，3500转/分 离心10分钟，弃去乙醇上清液，沉淀物水浴加热除去乙醇或负压蒸馏除去乙醇， 然后加水溶解并通过100KD滤膜过滤，除去蛋白等大分子杂质，收集滤过液再通 过1KD纳滤膜过滤，除去有机小分子和无机分子及离子等杂质，被截留的物质稀 释后，加2—5倍量90—99%乙醇沉淀，搅拌，静置过夜，3000—5000转/分离心 15 — 30分钟；沉淀物除去乙醇并经过冷冻干燥或喷雾干燥，即为山药多糖。(2) 、免疫球蛋白制备②、选定健康家禽蛋黄经微生物学检测，产蛋家禽(鸡、鸭、鹅等)群体中未检出致病沙门氏杆 菌、高致病性禽流感，即可收集其禽蛋，贮存在16t:条件下备用。 ②、免疫球蛋白提纯a. 将步骤①得到的禽蛋进行消毒，打碎禽蛋进行分离，得到卵清和卯黄， 其中卵清经喷雾干燥，制得卵清粉；b. 在(a)步卵黄中加入卵黄重量的4-16倍的无菌去离子水并用0. 1NHC1 , 使PH值至5. 0-6. 6，然后搅拌5-20分钟，在2-8。C的条件下，静置3-24小时之 后，以2500-15000转/分离心10-30分钟，得到上清液和沉淀物，沉淀物经喷雾 干燥，得到卵黄粉；c. 将(b)步的上清液经200KD滤膜过滤，除去上清中的卵黄微粒等杂质；其 滤过液再经过100KD滤膜过滤，除去低分子杂质，截留物经冷冻干燥或喷雾干燥， 即为卵黄免疫球蛋白。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成将(1)步制备的山药多糖和U)步制备免疫球蛋白依据1项山药多糖复合免疫 球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数混合溶于无菌去离子水中，使干物质浓度达 30°/。左右，在高速乳化机中匀质，过4号筛，在高速离心喷雾干燥机上喷雾干燥， 制得山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂干粉。高速离心喷雾干燥机的工作条件 为进口温度135-165°C,出口温度65-75。C,喷雾头转速》22000转/分，负压IO-80 帕。山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂干粉分装成袋，500克/袋，最后通过 C。"照射杀灭微生物，按《中国药典2005年版第一部》附录IC颗粒剂(6页) 项，检验合格后，即可投入使用。3、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准物理性状本品为棕黄色粉末。安全检验
取本制剂1000mg,用10毫升生理盐水还原稀释，选体重 18 — 22克小白鼠5只，各皮下注射本制剂稀释液O. 5毫升，体重1.5 — 2. 0公斤 家兔2只，各皮下注射本制剂稀释液10毫升，体重350_—400克豚鼠2只，各 皮下注射本制剂稀释液3毫升，观测10日，均应健活。免疫球蛋白含量
取本品1000mg,精密称量，加蒸馏水10ml，再加氯 仿10ml，混匀，静置l小时，3000转/分离心20分钟，取上清作为供试品，照单向 琼脂免疫电泳法(刘玉斌主编，《动物免疫实验技术》，吉林科学技术出版社，1989 年10月第1版，第37页)测定，计算，即得。本品按干燥品计算，免疫球蛋白含量不少于0. 5%。作用和用途用于补益脾气，增强人体免疫力。用法和用量将本制剂以0. 5 — 10. 0%的剂量直接添加到食品或饮品中食用。实施例21 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数:方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。2、 本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下(1) 、山药多糖制备 同实施例1。(2) 、免疫球蛋白制备 同实施例1。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成 同实施例1。3、 山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准 同实施例1。实施例31、 本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 25. 0公斤 免疫球蛋白 85. 0公斤 方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。2、 本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下(1) 、山药多糖制备 同实施例1。(2) 、免疫球蛋白制备 同实施例1。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成 同实施例1。3、 山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准 同实施例1。实施例41 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 75. 0公斤免疫球蛋白 15. 0公斤方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。 2、本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下(1) 、山药多糖制备 同实施例1。(2) 、免疫球蛋白制备山药多糖 免疫球蛋白100. 0公斤 1. 00公斤同实施例1。(3)、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成 同实施例1。3、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准 同实施例1。实施例51 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 100. 0公斤免疫球蛋白 100. 0公斤方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卯黄免疫球蛋白。2、 本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下(1) 、山药多糖制备 同实施例1。(2) 、免疫球蛋白制备 同实施例1。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成 同实施例1。3、 山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准 同实施例1。实施例61 、本专利山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的成分和重量份数 山药多糖 0. 05公斤免疫球蛋白 l.OO公斤 方中所述的山药多糖从山药中提取。方中所述的免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。2、 本实例的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备过程如下(1) 、山药多糖制备 同实施例1。(2) 、免疫球蛋白制备 同实施例1。(3) 、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的合成 同实施例1。3、 山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的质量标准 同实施例1。
权利要求
1、本发明专利所述的山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂，其特征在于组成成份及其重量份数山药多糖 0.01～100.0免疫球蛋白1.00～100.0。
2、 权利要求1所述的山药多糖从山药中提取。将山药经水煎， 浓缩，乙醇沉淀，洗涤沉淀物，通过浓缩或再经活性炭柱层析处理并 干燥，即制得山药多糖。
3、 权利要求l所述的免疫球蛋白也称抗体，利用水稀释法从禽 卵黄中制备。
4、山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂的制备，按照权利要求l 所述特征，将权利要求2制备的山药多糖和权利要求3制备的免疫球 蛋混合，加无菌去离子水稀释，勻浆，乳化，过滤，采用冷冻干燥或 喷雾干燥，即制备成功。
全文摘要
本发明公开了一种山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂及其制备方法，涉及食品及其生产领域。其成分和重量份数为山药多糖0.01-100.0，免疫球蛋白1.00-100.0。山药多糖从山药中提取，免疫球蛋白是禽蛋的卵黄中提纯制备的卵黄免疫球蛋白。将本制剂以0.5-10.0％的剂量直接添加到食品或饮品中食用，用于补益脾气，增强人体免疫力。山药多糖复合免疫球蛋白抗感染制剂全面地体现了中医学理论和现代免疫学原理的结合，是一个有效激发和调节机体免疫功能的全新高效的浓缩食品。
文档编号A61K39/395GK101214378SQ200810056120
公开日2008年7月9日 申请日期2008年1月14日 优先权日2008年1月14日
发明者张勇飞, 冰 赵, 高国栋 申请人:中国农业大学