专利名称：一种白藜芦醇柔性脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明属于化妆品领域，尤其涉及白藜芦醇柔性脂质体及其制备方法。
背景技术：
白藜芦醇(1^^吐站1~01)，又称芪三酚，化学名称为3，4，5-三羟基二苯乙烯(3，4， 5-trihydrolystilbence)，主要存在于葡萄、虎杖、花生、苜蓿、桑椹、买麻藤、朝鲜槐等植物 中，是含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，具有顺、反两种结构，在自然界中主要是以反 式存在。研究证明，白藜芦醇具有优良的抗衰老作用，被列为“ 100种最有效的抗衰老物质 之一”，其作用机理在于它能够清除体内自由基，活化体内功能因子，促进并保持体内新陈 代谢的顺畅，使内外分泌协调。白藜芦醇的自由基清除作用使其成为一种优良的天然抗氧 化剂的，并可用作抗衰老剂。另外白藜芦醇的消炎和杀菌作用非常适合治疗和祛除皮肤粉 刺、包疹等。除此之外，白藜芦醇还具良好的皮肤保湿与防止紫外辐射的作用。因此，白藜 芦醇在化妆品领域具有非常广泛的用途。但是，白藜芦醇微溶于水，生物相溶性差，不易透 过皮肤，不适于制成亲水性化妆品。另外，白藜芦醇还极易光解。白藜芦醇的上述性质，限 制了其在化妆品领域中的应用。本发明人经过长期的研究，发现将白藜芦醇制成柔性脂质体可以明显提高白藜芦 醇的皮肤穿透性，进而提高皮肤对白藜芦醇的吸收。同时，将白藜芦醇制成柔性脂质体也可 以降低白藜芦醇的光解，提高其稳定性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有良好透皮吸收性能的白藜芦醇柔性 脂质体。本发明的白藜芦醇柔性脂质体，以脂质体的重量计，含有以下重量百分比的组分 白藜芦醇0. 1 10%，磷脂0. 5 10%，柔性剂0. 1 30%。优选地，白藜芦醇的百分含量为0. 1 7%，磷脂的百分含量为0. 5 8%，柔性剂 的百分含量为0. 1 20%。更优选地，白藜芦醇的百分含量为0. 5 5%，磷脂的百分含量为1 5%，柔性剂 的百分含量为1 10%。本发明的白藜芦醇柔性脂质体还可以含有适量的抗氧剂、防腐剂和稳定剂。本领 域的技术人员可以根据所选择的抗氧剂、防腐剂和稳定剂的具体种类容易地确定所述“适
量”的具体重量。优选地，稳定剂的含量大于0、小于等于15%，抗氧剂的含量为0. 005 0. 5%，防 腐剂的含量为0. 005 0.5%。更优选地，稳定剂的百分含量为大于0，小于等于10%。本发明柔性脂质体中所用的磷脂可以选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱中的一种或几种，优选大豆卵磷 脂和蛋黄卵磷脂中的一种或几种；柔性剂选自聚山梨酯80、胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、脂肪酸山梨坦80、聚氧乙烯 (2)鲸蜡醇醚、丙二醇和无水乙醇中的一种或几种，优选胆酸钠、聚山梨酯80、丙二醇和无 水乙醇中的一种或几种；稳定剂选自二鲸蜡磷酸酯、豆留醇、谷留醇、神经酰胺、油酸、油酸钠、单油酸甘油 酯、辛酸甘油酯、癸酸甘油酯、辛癸酸甘油酯和泊洛沙姆中的一种或几种，优选二鲸蜡磷酸 酯、辛癸酸甘油酯和泊洛沙姆中的一种或几种；抗氧剂选自维生素E、丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、没食子酸丙酯、抗坏血酸、焦 亚硫酸钠和乙二胺四乙酸中的一种或几种，优选维生素E、抗坏血酸和焦亚硫酸钠的一种或 几种；防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和苯扎氯胺中的一种或几种， 优选对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯中的一种或几种。本发明还提供了一种制备白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次含有以下步骤(1)制备脂质溶液取药物活性成分白藜芦醇、磷脂和脂溶性的柔性剂混合，加入 到适当的有机溶剂中，在50 100°C下加热溶解；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液置于旋转蒸发器中，在50 85°C下经旋转 薄膜蒸发挥发有机溶剂，直到容器底部形成一层脂质薄膜，然后加水，水化形成脂质水化混 悬液；(3)脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处理后，即可得到白 藜芦醇柔性脂质体。上述制备方法可以进一步包含，在步骤(2)制备脂质水化混悬液时，容器底部形 成脂质薄膜后，加入含有水溶性柔性剂的水溶液，水化形成脂质水化混悬液。本发明的另一种制备本发明白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次含有以下步骤(1)制备脂质溶液取药物活性成分白藜芦醇和磷脂混合，加入到适当的有机溶 剂中，在50 100°C下加热溶解；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液置于旋转蒸发器中，在50 85°C下经旋转 薄膜蒸发挥发有机溶剂，直到容器底部形成一层脂质薄膜，然后加入含有水溶性柔性剂的 水溶液，水化形成脂质水化混悬液；(3)脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种常规技术处理后，即可得 到白藜芦醇柔性脂质体。本发明提供的另一种制备白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次含有以下步骤(1)制备脂质溶液取药物活性成分白藜芦醇、磷脂和脂溶性的柔性剂混合，在 50 100°C下加热熔融；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液直接注入50 85°C的水中，分散形成脂质 水化混悬液。(3)脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处理后，即可得到白 藜芦醇柔性脂质体。上述制备方法可以进一步包含，在步骤(2)制备脂质水化混悬液时，将脂质溶液直接注入50 85°C含有水溶性柔性剂的水溶液中，水化形成脂质水化混悬液。本发明提供的另一种制备本发明白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次含有以下步 骤(1)制备脂质溶液取药物活性成分白藜芦醇和磷脂混合，在50 100°C下加热熔 融；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液直接注入50 85°C含有水溶性柔性剂的水 溶液中，分散形成脂质水化混悬液。(3)脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处理后，即可得到白 藜芦醇柔性脂质体。前述制备方法中所述的“适当的有机溶剂”是指任何能够溶解步骤(1)得到的混 合物的有机溶剂。本领域技术人员可以根据步骤(1)中所选择的物质来确定具体的有机溶 剂。所述“适当的有机溶剂”优选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚和甲醇中的一种或几种。前述提到的所有制备柔性脂质体的方法，都可以进一步包含以下步骤在步骤(1)制备脂质溶液时，将稳定剂、抗氧剂和防腐剂中的一种或多种脂溶性 组分，与白藜芦醇和磷脂，或白藜芦醇、磷脂和脂溶性的柔性剂混合制成脂质溶液；和/或在步骤(2)制备脂质水化混悬液时，将稳定剂、抗氧剂和防腐剂中的一种或多种 水溶性组分，与水或含有水溶性柔性剂的水溶液一起加入形成脂质水化混悬液。前述进一步包含的步骤是指根据所选择的稳定剂、抗氧剂和防腐剂的溶解性，将 其中的脂溶性组分在步骤(1)制备脂质溶液时加入，将其中的水溶性组分在步骤(2)制备 脂质水化混悬液时加入。本发明的白藜芦醇柔性脂质体可以作为化妆品配方的一部分，制备成任何适当形 式的化妆品，例如，乳液、膏霜、油剂、水剂、棒、凝胶及气雾剂等，并按常规的方法施加到皮 肤表面。本发明的白藜芦醇柔性脂质体除了具有一般白藜芦醇脂质体的优点之外，其还具 高度柔韧性和高效渗透的性质，从而提高活性成分的透皮吸收。研究表明，本发明的白藜芦醇柔性脂质体的变形能力可比普通白藜芦醇脂质体大 5个数量级。例如，平均粒径为500nm的白藜芦醇柔性脂质体可以穿过为其自身大小1/5的 小孔，而其直径在此前后几乎不变。白藜芦醇柔性脂质体的这一性质源于类脂膜的不均勻 性，因为类脂膜中存在着具有表面活性作用的柔性剂，而柔性剂易在高曲折区聚集。所以在 变形过程中需克服的表面能(弹性能)大大降低，从而赋予白藜芦醇柔性脂质体高度的变 形能力。此外，本发明的白藜芦醇柔性脂质体还具有高度的亲水性，使其可以顺着水合梯 度穿透皮肤。白藜芦醇柔性脂质体由于具有高度的变形性，故在受到足够大的应力时，可发 生高效渗透，自如地穿过比其自身小数倍的孔道。当白藜芦醇柔性脂质体混悬液涂于皮肤 表面时，随着溶剂的不断蒸发，高度的亲水性使其可以依靠由皮肤表层到深层组织依次增 加的水合梯度(皮肤自身特有性质)渗透入皮肤。其高度的变形能力可保证穿透的顺利进 行。而普通白藜芦醇脂质体由于缺乏变形性，故仍滞留于皮肤表面，直至脱水融合。
图1是本发明的柔性脂质体和普通脂质体的单位面积累计透过量曲线(X，n = 6)。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明作进一步的说明，实施例不以任何方式限制本发明。实施例1取1. 2g白黎芦醇、3g大豆卵磷脂、0. Olg维生素E，置茄形瓶中，混合，用30ml氯仿 在45°C下加热溶解，得到脂质溶液；55°C下旋转挥发有机溶剂，形成脂质薄膜；加入60°C的 溶解有0. 2g胆酸钠、1. 8g丙二醇、0. 015g对羟基苯甲酸丙酯的94. 5g蒸馏水中，水化，形成 脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例2取0. 3g白黎芦醇、0. 8g大豆卵磷脂、0. Olg 丁羟基茴香醚、1. 0g单油酸甘油酯，置 茄形瓶中，混合，100°c加热熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在80°C溶解了 0. 4g聚 山梨酯80、0. 015g焦亚硫酸钠、0. Olg对羟基苯甲酸乙酯的97. 4g的蒸馏水中，形成脂质水 化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例3取1.2g白黎芦醇、3g大豆卵磷脂、12g丙二醇、10g辛癸酸甘油酯、3g 二鲸蜡磷酸 酯、0. 02g 丁羟基甲苯，混合，95°C加热熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在含有12g 聚山梨酯80、0. 008g乙二胺四乙酸、0. 005g苯扎氯胺的58. 8g的80°C蒸馏水中，形成脂质 水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例4取2g白黎芦醇、4g蛋黄卵磷脂、3g豆留醇、0. 006g没食子酸丙酯，混合，用8ml无 水乙醇60°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在60°C含有0. 2g胆酸钠、0. 8g丙 二醇、0.015g对羟基苯甲酸乙酯、0. Olg对羟基苯甲酸丙酯的82. 7g蒸馏水中，形成脂质水 化混悬液；该水化混悬液经剪切和高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例5取3g白黎芦醇、3g大豆卵磷脂、2g蛋黄卵磷脂、4g脂肪酸山梨坦80、2. 7g聚氧 乙烯(2)鲸蜡醇醚、0. 3g胆酸、6g谷留醇、0.008g维生素E，混合，78°C加热熔融；加入含有 0. 03g焦亚硫酸钠、0. 015g对羟基苯甲酸乙酯的78. 96g的60°C蒸馏水，水化，形成脂质水化 混悬液；将该水化混悬液超声乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例6取白黎芦醇4g、二硬脂酰磷脂酰胆碱1. 6g、二棕榈酰磷脂酰胆碱4g、胆酸0. lg、无 水乙醇3. 9g、辛酸甘油酯9g，置茄形瓶中，混合，85°C加热熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶 液分散在85°C含有6g聚山梨酯80、0. 03g焦亚硫酸钠、0. 005g苯扎氯胺的71. 36g蒸馏水 中，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液剪切乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例7取白黎芦醇4. 7g、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱9g、胆酸6g、癸酸甘油酯4g、二鲸蜡磷酸 酯3g、维生素E 0. 015g，混合，用5ml无水乙醇75°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶 液分散在75°C含有0. 015g对羟基苯甲酸丙酯的70. 27g蒸馏水中，水化形成脂质水化混悬液；该水化混悬液经高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例8取白黎芦醇6g、蛋黄卵磷脂7. 2g、谷甾醇3g、神经酰胺3. 8g、油酸1. 2g，混合，用 10ml无水乙醇80°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在80°C含有1. 3g脱氧胆 酸钠、3. 7g丙二醇、0. 005g抗坏血酸、0. 04焦亚硫酸钠、0. 006g苯扎氯胺的73. 8g蒸馏水 中，水化形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例9取白黎芦醇7g、大豆卵磷脂8g、胆酸4g、聚氧乙烯⑵鲸蜡醇醚4g、辛酸甘油酯 12g、泊洛沙姆3g，混合，70°C加热熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在70°C含有8g聚 山梨酯80、0. 015g抗坏血酸、0. Olg对羟基苯甲酸乙酯的53. 97g蒸馏水中，形成脂质水化混 悬液；将该水化混悬液经剪切乳化和超声，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例10取白黎芦醇9. 5g、大豆卵磷脂8g、二棕榈酰磷脂酰胆碱2g、辛癸酸甘油酯13g、油 酸4g、丁羟基甲苯0. 05g,混合，90°C加热熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在70°C含 有0. 2g胆酸钠、3. 8g聚山梨酯、10g丙二醇、0. Olg对羟基苯甲酸乙酯、0. 015g对羟基苯甲 酸丙酯的49. 48g蒸馏水中，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液剪切乳化，即得白藜芦 醇柔性脂质体。实施例11取白黎芦醇1.5g、蛋黄卵磷脂4.8g、聚氧乙烯(2)鲸蜡醇醚2g、二鲸蜡磷酸酯 4g，置茄形瓶中，混合，用25ml 二氯甲烷60°C加热溶解，得到脂质溶液；60°C旋转挥发有机 溶剂，形成脂质薄膜；加入60°C溶解了 2g胆酸钠、0. 03g焦亚硫酸钠、0. 008g苯扎氯胺的 85. 67g蒸馏水，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇 柔性脂质体。实施例12取白黎芦醇lg、蛋黄卵磷脂2. 5g，置茄形瓶中，混合，用5ml无水乙醇58°C加热溶 解，得到脂质溶液；加入58°C含有3g聚山梨酯80、lg胆酸钠、0. 02g抗坏血酸、O.Olg对羟基 苯甲酸乙酯的89. 47g蒸馏水，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化， 即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例13取白黎芦醇2g、大豆卵磷脂3. 3g、辛癸酸甘油酯0. 5g，置茄形瓶中，混合，用20ml 氯仿55°C加热溶解，得到脂质溶液；60°C旋转挥发有机溶剂，形成脂质薄膜；加入55°C溶解 有0. lg胆酸钠、1. lg丙二醇、0. 02g抗坏血酸、0. 015g对羟基苯甲酸乙酯的92. 37g蒸馏水， 水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例14取白黎芦醇3g、大豆卵磷脂4. 5g、二鲸蜡磷酸酯3g、辛癸酸甘油酯4g，混合，用6ml 无水乙醇80°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在80°C含有4g聚山梨酯80、2g 丙二醇、0. 03g焦亚硫酸钠、0. 008g苯扎氯胺的79. 47g蒸馏水中，水化形成脂质水化混悬 液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例15
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取白黎芦醇4. 5g、大豆卵磷脂5g、二鲸蜡磷酸酯3g、辛癸酸甘油酯5g、维生素E 0. 02g，混合，用7ml无水乙醇75°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在75°C含有 2g丙二醇、0. Olg对羟基苯甲酸乙酯、0. 015g对羟基苯甲酸丙酯的73. 46g蒸馏水中，水化形 成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高速剪切乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例16取白黎芦醇1. 2g、大豆卵磷脂3. 5g、二鲸蜡磷酸酯3g、辛癸酸甘油酯2g、丁羟基甲 苯0. 008g，混合，用6ml无水乙醇68°C加热溶解，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在70°C 溶解有7g聚山梨酯80、3g丙二醇、0. 04g苯扎氯胺的80. 3g蒸馏水中，水化形成脂质水化混 悬液；将该水化混悬液超声乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例17取白黎芦醇1. 8g、大豆卵磷脂4g、二鲸蜡磷酸酯3g、泊洛沙姆4g，混合，80°C加热 熔融，得到脂质溶液；将该脂质溶液分散在80°C溶解有lg胆酸钠、6g丙二醇、0. 04g焦亚硫 酸钠、0. Olg对羟基苯甲酸乙酯的81. 2g蒸馏水中，水化形成脂质水化混悬液；将该水化混 悬液高压乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。实施例18取白黎芦醇lg、大豆卵磷脂2.5g、二鲸蜡磷酸酯4g、维生素E 0.02g，置茄形瓶中， 混合，用22ml三氯甲烷55°C加热溶解，得到脂质溶液；60°C旋转挥发有机溶剂，形成脂质薄 膜；加入60°C溶解了 2g胆酸钠、3g丙二醇、0. 04g焦亚硫酸钠、0. 02g对羟基苯甲酸丙酯的 87. 42g蒸馏水，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇 柔性脂质体。实施例19取白黎芦醇2g、大豆卵磷脂2g、蛋黄卵磷脂2g、聚氧乙烯(2)鲸蜡醇醚3g、二鲸蜡 磷酸酯3g、没食子酸丙酯0. 05g，置茄形瓶中，混合，用5ml无水乙醇80°C加热溶解，得到脂 质溶液；80°C旋转挥发有机溶剂，形成脂质薄膜；加入80°C溶解有5g聚山梨酯80、0. 04g苯 扎氯胺的82. 9g蒸馏水，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得 白藜芦醇柔性脂质体。实施例20取白黎芦醇5g、蛋黄卵磷脂5g、脂肪酸山梨坦807g、二鲸蜡磷酸酯2g、辛癸酸甘油 酯8g，置茄形瓶中，混合，用35ml三氯甲烷60°C加热溶解，得到脂质溶液；55°C旋转挥发有 机溶剂，形成脂质薄膜；加入55°C含有3g脱氧胆酸钠、0. 02g焦亚硫酸钠、0. 02g对羟基苯 甲酸丙酯的69. 96g蒸馏水，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即 得白藜芦醇柔性脂质体。实施例21取白黎芦醇1.5g、大豆卵磷脂4. 2g、置茄形瓶中，混合，用22ml 二氯甲烷60°C加热 溶解，得到脂质溶液；60°C旋转挥发有机溶剂，形成脂质薄膜；加入70°C含有2g胆酸钠、6g 丙二醇、0. 05g抗坏血酸、0. 02g对羟基苯甲酸乙酯的86. 23g蒸馏水，水化，形成脂质水化混 悬液；将该水化混悬液高压均质乳化，即得白藜芦醇柔性脂质体。对比实施例为了更好地理解本发明的白藜芦醇柔性脂质体的优越性，通过下述试验例，以离体透皮试验与变形性试验来比较本发明的白藜芦醇柔性脂质体与白藜芦醇普通脂质体的优劣性。以实施例1所制备的白藜芦醇柔性脂质体作为试验样品；白藜芦醇普通脂质体通过以下方法制备取白黎芦醇1. 2g、大豆卵磷脂3g、胆固 醇0. 2g，置茄形瓶中，混合，用适量氯仿45°C加热溶解，得到脂质溶液；55°C旋转挥发有机 溶剂，形成脂质薄膜；加入60°C的蒸馏水95. 6g，水化，形成脂质水化混悬液；将该水化混悬 液高压均质乳化，即得白藜芦醇普通脂质体对比样品。(一 )离体透皮试验1.试验材料和方法1. 1离体鼠皮的制备取雌性裸鼠6只(购自第二军医大学实验动物中心)，颈椎脱白法处死，取背部皮 肤，去除皮下组织，用生理盐水浸洗后冷冻备用。1. 2扩散实验装置与方法用改良的Franz扩散池，将鼠皮固定于扩散池的供给室与接受室之间，角质层面 向供给室，真皮层面向接受室，令其与接受液紧密接触，接受液为生理盐水，皮肤与接受液 的接触面积为1. 0cm2，接受液体积为4. 2ml，恒温水浴温度为32°C。取柔性脂质体和普通脂 质体样品各1ml置于不同供给室，均勻涂布于鼠皮角质层面。持续搅拌状态下，分别于涂布 脂质体后2h，5h，8h，llh，14h，17h，20h和24h取接受液lml, 0. 45 y m微孔滤膜滤过，置4°C 条件下保存，待测白藜芦醇浓度。同时补以等量同温新鲜空白接受液。为避免白藜芦醇在 实验条件下发生光解反应，实验过程需避光。1. 3单位面积累积透过量的测定液相条件Agilent1100 液相色谱，Agilent G1314A VWD 检测器，AgilentG1311A 型四元泵，Agilent G1314A VWD检测器，Agilent LC1100色谱数据工作站，分析柱为 Diamonsil C18分析柱(5 y，4. 6mmX 250mm)，乙腈-0. 2%冰醋酸(35 65)为流动相，流速 1. Oml/min,检测波长306nm，柱温为25°C。试验方法取接受液1ml，0. 45um微孔滤膜滤过，续滤液为样品溶液，另精密称取 白藜芦醇对照品适量，置棕色容量瓶中，加甲醇配制成每lml含50 y g对照品溶液，精密吸 取上述溶液1. 0ml，置100ml棕色容量瓶中，加生理盐水定容至刻度，混勻，为对照品溶液。 精密量取上述溶液各100 yl，注入液相色谱仪，以外标法计算白藜芦醇的浓度(Cn)。计算公式单位面积累积透过量= ( CnV+XC-^
i = lQn 第n个时间点的单位面积累积透过量；Cn 第n个时间点测得的浓度而第n_l 个时间点测得的浓度；V 接受液体积；Vi 取样体积；S 扩散面积。1.4统计方法统计接受液中各不同时间点的白藜芦醇累积透过量(ng/cm2)，所得结果均以均数 士标准差(& 土SD)表示，Student test对二组结果进行比较。2.试验结果2. 1白藜芦醇在生理盐水中的稳定性
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称取适量白藜芦醇置棕色容量瓶，先用少量甲醇溶解，再用生理盐水稀释至刻度。 置32°C水浴中避光考察其稳定性，结果表明，白藜芦醇在32°C水浴、避光条件下，经24小时 后样品仍较为稳定。结果详见表1 (峰面积比较)表1白藜芦醇在生理盐水中的稳定性试验 2. 2累积透过量在进行渗透的24小时内，白藜芦醇柔性脂质体与白藜芦醇普通脂质体对离体裸 鼠皮肤的累积透过量有显著性差异，且白藜芦醇柔性脂质体对离体裸鼠皮肤的累积透过量 比白藜芦醇普通脂质体大，P< 0.05。结果详见表2和附图1。表2 二种白藜芦醇脂质体对大鼠皮肤的累积透过量(ng/cm2，n = 6) 3.试验结论经过离体透皮试验证明，本发明的白藜芦醇柔性脂质体与普通脂质体对离体裸鼠 皮肤的透过量有显著性差异，本发明的白藜芦醇柔性脂质体对离体裸鼠皮肤的透过量要比 普通脂质体的大。(二)变形性实验1、实验方法在0.2MPa的外压作用下，分别考察白藜芦醇柔性脂质体与普通脂质体变形通 过孔径为0.20i!m微孔滤膜的性能。首先测定蒸馏水透过孔径为0.20i!m微孔滤膜 的速率(VwatCT)，然后分别记录柔性脂质体与普通脂质体透过0. 20 y m微孔滤膜的速率 (VtransfersoffleS)，以此计算相对透过速率 P = Vtransfersoffles/VwaterX 100%。2、实验结论在0. 2MPa外压作用下，本发明的白藜芦醇柔性脂质体的P值为88 %，普通白藜芦 醇脂质体的P值为56%。
3、实验结论试验表明本发明的白藜芦醇柔性脂质体较普通脂质体具有更好的变形性。
权利要求
一种白藜芦醇柔性脂质体，以脂质体的重量计，其含有以下质量百分比的组分白藜芦醇0.1～10％，磷脂0.5～10％，柔性剂0.1～30％。
2.如权利要求1所述的柔性脂质体，其中白藜芦醇的百分含量为0.1 7%，磷脂的百 分含量为0. 5 8%，柔性剂的百分含量为0. 1 20%。
3.如权利要求2所述的柔性脂质体，其中白藜芦醇的百分含量为0.5 5%，磷脂的百 分含量为1 5%，柔性剂的百分含量为1 10%。
4.如权利要求1所述的柔性脂质体，其还含有适量的稳定剂、抗氧剂和防腐剂。
5.如权利要求4所述的柔性脂质体，其特征在于稳定剂的含量大于0、小于等于15%， 抗氧剂的含量为0. 005 0. 5%，防腐剂的含量为0. 005 0. 5%。
6.如权利要求5所述的柔性脂质体，其特征在于，稳定剂的百分含量为大于0，小于等 于 10%。
7.如权利要求4所述的柔性脂质体，其特征在于磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二肉 豆蔻酰磷脂酰胆碱中的一种或几种；柔性剂选自聚山梨酯80、胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、脂肪酸山梨坦80、聚氧乙烯(2)鲸 蜡醇醚、丙二醇和无水乙醇中的一种或几种；稳定剂选自二鲸蜡磷酸酯、豆留醇、谷留醇、胆固醇、神经酰胺、油酸、油酸钠、单油酸甘 油酯、辛酸甘油酯、癸酸甘油酯、辛癸酸甘油酯和泊洛沙姆中的一种或几种；抗氧剂选自维生素E、丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、没食子酸丙酯、抗坏血酸、焦亚硫酸 钠和乙二胺四乙酸中的一种或几种；防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和苯扎氯胺中的一种或几种；
8.如权利要求7所述的柔性脂质体，其特征在于 磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂中的一种或几种；柔性剂选自聚山梨酯80、胆酸钠、丙二醇和无水乙醇中的一种或几种； 稳定剂选自二鲸蜡磷酸酯、辛癸酸甘油酯和泊洛沙姆中的一种或几种； 抗氧剂选自维生素E、抗坏血酸和焦亚硫酸钠的一种或几种； 防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯中的一种或几种种；
9.一种制备如权利要求1所述的白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次包含下列步骤(1)制备脂质溶液取白藜芦醇、磷脂和脂溶性的柔性剂混合，加入到适当的有机溶剂 中，在50 100°C下加热溶解；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液置于旋转蒸发器中，在50 85°C下经旋转薄 膜蒸发挥发有机溶剂，直到容器底部形成一层脂质薄膜，然后加水，水化形成脂质水化混悬 液；(3)柔性脂质体的制备脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处 理后，即可得到白藜芦醇柔性脂质体。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于步骤(2)制备脂质水化混悬液时，在 容器底部形成脂质薄膜后加入含有水溶性柔性剂的水溶液，水化形成脂质水化混悬液。
11.一种制备如权利要求1所述的白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次包含下列步骤 (1)制备脂质溶液取白藜芦醇和磷脂混合，加入到适当的有机溶剂中，在50 100°C下加热溶解；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液置于旋转蒸发器中，在50 85°C下经旋转薄膜 蒸发挥发有机溶剂，直到容器底部形成一层脂质薄膜，然后加入含有水溶性柔性剂的水溶 液，水化形成脂质水化混悬液；(3)柔性脂质体的制备脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处 理后，即可得到白藜芦醇柔性脂质体。
12.—种制备如权利要求1所述的白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次包含下列步骤(1)制备脂质溶液取白藜芦醇、磷脂和脂溶性的柔性剂混合，在50 100°C下加热熔融；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液直接注入50 85°C的水中，分散形成脂质水化 混悬液。(3)柔性脂质体的制备脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处 理后，即可得到白藜芦醇柔性脂质体。
13.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于步骤(2)制备脂质水化混悬液时，将 脂质溶液直接注入50 85°C含有水溶性柔性剂的水溶液中，水化形成脂质水化混悬液。
14.一种制备如权利要求1所述的白藜芦醇柔性脂质体的方法，其依次包含下列步骤(1)制备脂质溶液取白藜芦醇和磷脂混合，在50 100°C下加热熔融；(2)制备脂质水化混悬液将脂质溶液直接注入50 85°C含有水溶性柔性剂的水溶液 中，分散形成脂质水化混悬液。(3)柔性脂质体的制备脂质水化混悬液经均质、超声和剪切中的一种或多种技术处 理后，即可得到白藜芦醇柔性脂质体。
15.如权利要求9 14中任一项所述的制备方法，其特征在于在步骤⑴制备脂质溶液时，将脂溶性的稳定剂和/或抗氧剂和/或防腐剂，与白藜芦 醇和磷脂混合制成脂质溶液；或与白藜芦醇、磷脂和脂溶性柔性剂混合制成脂质溶液；和/ 或在步骤(2)制备脂质水化混悬液时，将水溶性的稳定剂、抗氧剂和防腐剂，与水一起加 入形成脂质水化混悬液；或与含有水溶性柔性剂的水溶液一起加入形成脂质水化混悬液。
16.如权利要求9 14中任一项所述的白藜芦醇柔性脂质体的制备方法，其特征在于 所用的有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚和甲醇中的一种或几种。
全文摘要
本发明公开了一种白藜芦醇柔性脂质体，其特征在于，以脂质体的重量计，其含有以下质量百分比的组分白藜芦醇0.1～10％，磷脂0.5～10％，柔性剂0.1～30％。此外，本发明还公开了白藜芦醇柔性脂质体的制备方法。本发明的白藜芦醇柔性脂质体具有高度的柔韧性和穿透性，可以大大提高活性成分的透皮吸收。
文档编号A61K8/55GK101874763SQ20091005024
公开日2010年11月3日 申请日期2009年4月29日 优先权日2009年4月29日
发明者史青, 吕洛, 李慧良, 金日昇, 陈建明, 陈明, 高保安 申请人:上海家化联合股份有限公司