专利名称：PEG、mPEG化学修饰剂及其制备水溶性白藜芦醇前药的方法
技术领域：
本发明属于化合物与制药领域，具体地说涉及一种PEG、mPEG化学修饰剂及制备 方法，以及以其作修饰剂修饰白藜芦醇制备水溶性白藜芦醇前药的方法。
背景技术：
白藜芦醇(resveratrol，RES)化学名为3，4'，5_三羟基二苯乙烯，是一种最常见 的二苯乙烯类化合物，广泛存在葡萄、虎杖和藜芦等诸多植物中，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、 抗过敏、降血脂和抗氧化等多方面的药理活性。但是，由于白藜芦醇包含二苯乙烯母核结 构，水溶解性很差，难溶于水，使用不方便，限制了其使用范围。另外，白藜芦醇性质不稳定， 容易氧化，在紫外光照射下容易转变为顺式构型，导致其生物活性的降低，因此，提高白藜 芦醇的水溶解度，增强其稳定性是提高其生物利用度和保健功效的关键。生物相容性高分子聚合物在天然药物中的应用近年来受到广泛关注，其中聚乙二 醇及其衍生物作为制作药物制剂的载体，已经在许多商业药品中得到了广泛应用。聚乙二 醇(简称PEG)具有高度的亲水性，在水溶液中有较大的水动力学体积，并且没有免疫原性， 当其连接到药物分子或药物表面时，可以将其优良的性质赋予药物分子，改变它们在水溶 液中的生物分配行为和溶解性，增加药物的水溶解度。为避免在修饰过程中发生交联和团 聚，也可以采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)作为修饰剂的合成原料。中国发明专利申请2009100710372，公开了一种“亲水性聚合物一白藜芦醇结 合物及制备方法”，就是利用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)、单甲氧基聚丙二醇依次经羧基化反 应、酰氯化反应后，再与白藜芦醇反应制备亲水性白藜芦醇结合物，这种产物与原有白藜芦 醇相比只是水溶性、稳定性得到提高。
发明内容
本发明的一个目的，旨在提供一种连接有氨基酸的PEG、mPEG化学修饰剂及其制 备方法，该修饰剂的制备方法简单，可以用来修饰化合物分子(包括药物分子)，以以改变 被修饰物的水溶性及稳定性，并使之在分解的同时释放出人体所需的氨基酸，修饰后化合 物的功能增加，应用范围更为广泛。本发明的另外一个目的，是提供了上述PEG、mPEG化学修饰剂的一种用途，即用于 修饰白藜芦醇制备白藜芦醇前药。其制备方法简单，所制前药与白藜芦醇相比具有良好的 水溶性，且其稳定性提高，生物活性提高，使用方便，前药在释放白藜芦醇的同时释放出人 体必需的氨基酸，使前药功能增加，其应用范围更为广泛。本发明要实现上述的发明目的，所采用的技术方案是一种PEG、mPEG化学修饰剂，分子结构式如下 其中 所述PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，以水溶性PEG或mPEG为载体，与丁二酸 酐、溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯反应，得到PEG或mPEG羧酸衍生物，再与氨基酸连接制备而 成。上述PEG或mPEG羧酸衍生物的制备方法分为两类，其中由水溶性载体与丁二酸 酐反应制备来进行的制备方法按照以下步骤顺序进行①将干燥的载体、丁二酸酐以氯仿为溶剂反应，加入吡啶，加热回流；②蒸去溶剂，加入饱和NaHCO3溶液，乙酸乙酯萃取，稀盐酸调pH2 3 ；③二氯甲烷萃取，干燥，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得羧末端有基 的PEG或mPPEG或mPEG羧酸衍生物。PEG或mPEG羧酸衍生物的第二类制备方法，是由水溶性载体与溴乙酸乙酯或溴乙 酸异丁酯反应来进行，其制备方法按照以下步骤顺序进行①将载体(PEG或mPEG)于甲苯中，蒸去部分甲苯。(本步骤的目的是将体系中的 水除去，大概蒸出甲苯总量的大概五分之一即可)②放至室温，冰浴下加入NaH搅拌10—20min ；③加入溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯，回流反应20-28h ；④反应结束，过滤，滤液减压蒸除甲苯，残余物用二氯甲烷溶解，浓缩，搅拌下慢慢 倒入乙醚，析出白色固体，抽滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸酯；⑤上述羧酸酯在NaOH溶液中水解，搅拌下于室温反应3_5h ；⑥在冰水冷却下，用盐酸溶液调节pH2 3，用二氯甲烷提取，合并有机层，用水洗 涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸除二氯甲烷，残留物用异丙醇重结晶，得PEG或mPEG羧酸 衍生物。
作为本发明的限定，PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法中，所述氨基酸为甘氨酸、丙 氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸或脯氨酸中的一种。所 述PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法中，PEG或mPEG羧酸衍生物与氨基酸间的 连接按照以下步骤顺序进行①制备相应的PEG活性酯或mPEG活性酯将PEG或mPEG羧酸衍生物溶于二氯甲烷，溶解后，温度降至0 5°C，加入二环己 基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减 压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG或mPEG活性酯；②制备目标产物PEG、mPEG化学修饰剂将PEG或mPEG活性酯溶于DMF中，搅拌使其溶解，温度降至0 5°C，滴加氨基酸 的NaHCO3溶液，升至室温，搅拌反应，反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用盐酸溶 液溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无 水乙醚，过滤，真空干燥，得连接有氨基酸的PEG、mPEG化学修饰剂，即目标产物PEG、mPEG化 学修饰剂。本发明还提供了上述PEG、mPEG化学修饰剂的一种用途，用于与白藜芦醇通过酯
键相连，制备水溶性白藜芦醇前药，其分子结构如下 其制备方法按照如下步骤顺序进行①将PEG、mPEG化学修饰剂溶于二氯甲烷中，搅拌使其溶解；②温度降至0 5°C，加入白藜芦醇、二环己基碳二亚胺、二甲氨基吡啶，升至室 温，搅拌反应；③反应完毕，加入HAc的THF溶液以分解过量的二环己基碳二亚胺；④用稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓 缩，用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。作为本发明的优化，前述制备白藜芦醇前药的方法中所涉及的PEG、mPEG的分子 量为2000 20000。对PEG、mPEG的分子量进行限定，表示低分子量聚合和高分子量聚合 的PEG、mPEG化学修饰剂都适合用于制备白藜芦醇前药。与现有技术相比，本发明所取得的技术进步是本发明所提供连接氨基酸的PEG或mPEG化学修饰剂，具有良好的化学性能，其制 备方法简单，产品水溶性与稳定性高，可用于修饰化合物分子(包括药物分子)如白藜芦 醇、带有醇羟基或酚羟基的化合物等，从而提高它们的水溶性及稳定性，以使这些物质方便 使用、提高生物活性，经体外释放试验证明在分解的同时观察到释放出了氨基酸，这一特性增加了物质的使用性能，使其应用范围更为广泛。本发明所提供PEG或mPEG化学修饰剂用于修饰白藜芦醇制备白藜芦醇前药的用途，经实验证明白藜芦醇的水中溶解度提高，稳定性增强，生物活性提高，使前药作为药物 时使用方便，该前药在进行体外释放试验时也被证明在分解的同时观察到释放出了人体所 需的氨基酸，这一特性增加前药的使用性能，使其应用范围较白藜芦醇更为广泛。本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。
具体实施例方式以下实施例只用于说明本发明，并非本发明的限定。实施例1以PEG6000制备PEG化学修饰剂，进一步将该修饰剂用于修饰白藜芦醇 以制备水溶性白藜芦醇前药本实施例包括以下步骤(1)PEG6000羧酸衍生物的制备反应式如下 具体操作过程取干燥PEG (聚乙二醇)30g(0. 005mol)，溶于200mL氯仿溶液中， 加入丁二酸酐1. 5g (0. 015mol)，搅拌均勻，加入2ml吡啶，加热回流；反应48h，反应完毕蒸 去溶剂，残余物用IOOmL饱和NaHCO3溶液溶解，30mL乙酸乙酯萃取3次，将所得的水相用 稀盐酸调PH2 3 ；再用二氯甲烷萃取，合并有机相，水洗中性，干燥，减压浓缩，加入无水乙 醚，析出白色固体PEG6000羧酸衍生物；(2) PEG6000活性酯的合成反应式如下 具体操作取5g(0.0008mol)PEG6000羧酸衍生物，用50mL 二氯甲烷溶解后， 温度降至0 5 °C，加入0. 33g (0. 0016mol) DCC和溶于IOmLDFM的N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 0. 18g(0. 0016mol)，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG6000活性酯。 具体操作取PEG或mPEG活性酯3g(0. 0005mol)，溶于15mLDMF中，搅拌使其溶 解，温度降至O 5°C，滴加0. 14g(0. 0018mol)甘氨酸的NaHCO3溶液5ml，升至室温，搅拌 反应，反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用5%盐酸溶解，用二氯甲烷萃取，合并有 机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得连接有 甘氨酸的PEG6000化学修饰剂。(4)以连接有甘氨酸的PEG6000化学修饰剂制备白藜芦醇前药具体操作取连接有甘氨酸的PEG6000化学修饰剂0. 5g (0. 078mmol)溶于 二氯甲烷中，搅拌使其溶解，温度降至O 5°C，加入白藜芦醇0. 005g(0. 24mmol)、 0. 06g(0. 27mmol)DDC、DMAP 0. 03g(0. 27mmol)，升至室温，搅拌反应，反应完毕，加入10%的 HAc的THF溶液分解过量的DCC，用2%稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。实验证明连接有甘氨酸的PEG6000化学修饰剂具有良好的水溶性与稳定性；白 藜芦醇前药具有良好的水溶性，使用方便，生物活性提高，在释放出白藜芦醇的同时还释放 出甘氨酸。
实施例2以PEG5000制备PEG化学修饰剂，进一步将该修饰剂用于修饰白藜芦醇 以制备水溶性白藜芦醇前药(1)PEG5000羧酸衍生物的制备反应式如下 具体操作取PEG5000 30g(0. 006mol)，溶于150mL甲苯中，蒸去30mL甲苯， 冷至室温，冰浴下加入NaH 0. 43g(0.018mol)溶液，搅拌15min，滴加入溴代乙酸乙酯 llg(0. 066mol)，回流反应24h，过滤，滤液减压蒸除甲苯，残余物用二氯甲烷溶解，搅拌下慢 慢倒入乙醚，析出白色固体，抽滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸酯，在120mL浓度为lmol/ L的NaOH溶液水解，搅拌下于室温反应4h。在冰水冷却下，用2mol/L盐酸调节使pH = 3， 用二氯甲烷提取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸除二氯甲烷，残留物 用异丙醇重结晶，得PEG5000羧酸衍生物。(2) PEG5000活性酯的合成反应式如下 具体操作取5g PEG5000羧酸衍生物(O.OOlmol)，用50mL 二氯甲烷溶解后， 温度降至O 5 °C，加入0. 41g (0. 002mol) DCC和溶于IOmLDFM的N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)O. 23g(0. 02mol)，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓缩，力口 入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG5000活性酯。(3)连接有脯氨酸的PEG5000化学修饰剂的合成反应式如下 具体操作将PEG5000活性酯3g (0. 0006mol)，溶于15mLDMF中，搅拌使其溶解，温 度降至0 5°C，滴加0. 24g(0. 0021mol)脯氨酸的NaHCO3溶液5ml，升至室温，搅拌反应， 反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用5%盐酸溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层， 用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得连接有脯氨 酸的PEG5000化学修饰剂。(4)以连接有脯氨酸的PEG5000化学修饰剂修饰白藜芦醇，制备白藜芦醇前药反应式如下 具体操作取连接有脯氨酸的PEG5000化学修饰剂0. 5g (0. 098mmol)，溶 于二氯甲烷中，搅拌使其溶解，温度降至O 5°C，加入白藜芦醇0. 06g(0. 29mmol)、 DDCO. 07g(0. 34mmol) ,DMAP 0. 04g(0. 34mmol)，升至室温，搅拌反应，反应完毕，加入10%的 HAc的THF溶液分解过量的DCC，用2%稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。实验证明连接有脯氨酸的PEG5000化学修饰剂具有良好的水溶性与稳定性；白 藜芦醇前药具有良好的水溶性，使用方便，生物活性提高，在释放出白藜芦醇的同时还释放 出了脯氨酸。实施例3 以mPEG4000制备PEG化学修饰剂，进一步将该修饰剂用于修饰白藜芦 醇以制备水溶性白藜芦醇前药(l)mPEG4000羧酸衍生物的制备反应式如下 具体操作取mPEG4000 30g(0. 0075mol)，溶于 150mL 甲苯中，蒸去 30mL 甲 苯，冷至室温，冰浴下加入0. 27g(0. Ollmol)溶液，搅拌20min，滴加入溴代乙酸异丙酯 8. 5g(0. 045mol)，回流反应20h，过滤，滤液减压蒸除甲苯，残余物用二氯甲烷溶解，搅拌 下慢慢倒入乙醚，析出白色固体，抽滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸酯，在120mL浓度为 lmol/L的NaOH溶液水解，搅拌下于室温反应3h。在冰水冷却下，用2mol/L盐酸调节使pH=3，用二氯甲烷提取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸除二氯甲烷，残 留物用异丙醇重结晶得mPEG4000羧酸衍生物；(2) mPEG4000活性酯的合成反应式如下 具体操作将取5g(0. 0012mol)mPEG4000羧酸衍生物，用50mL 二氯甲烷溶解 后，温度降至O 5°C，加入0. 25g(0. 0012mol)DCC、溶于IOmLDFM的N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 0. 14g(0. 0012mol)，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓缩， 加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得mPEG4000活性酯。(3)连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂的合成反应式如下 具体操作取3g(0. 0007mol)mPEG4000活性酯，溶于15mLDMF中，搅拌使其溶解，温 度降至O 5°C，滴加0. 12g(0. 0014mol)丙氨酸的NaHCO3溶液5ml，升至室温，搅拌反应， 反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用5%盐酸溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层， 用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得连接有丙氨 酸的mPEG4000化学修饰剂。(4)连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂修饰白藜芦醇，制备白藜芦醇前药反应式如下 具体操作取连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂0. 5g (0. 12mmol)，溶于 二氯甲烷中，搅拌使其溶解，温度降至O 5 °C，加入白藜芦醇0. 005g(0. 24mmol)、DDCO. 05g(0. 24mmol) ,DMAP O. 03g(0. 24mmol)，升至室温，搅拌反应，反应完毕，加入10%的 HAc的THF溶液分解过量的DCC，用2 %稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。实验证明连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂具有良好的水溶性与稳定性；白 藜芦醇前药具有良好的水溶性，使用方便，生物活性提高，在释放出白藜芦醇的同时还释放 出了丙氨酸。实施例4 以mPEG4000制备PEG化学修饰剂，进一步将该修饰剂用于修饰白藜芦 醇以制备水溶性白藜芦醇前药(3)mPEG4000羧酸衍生物的制备反应式如下 具体操作取mPEG4000 30g(0. 0075mol)，溶于 150mL 甲苯中，蒸去 30mL 甲 苯，冷至室温，冰浴下加入0. 27g(0. Ollmol)溶液，搅拌lOmin，滴加入溴代乙酸异丙酯 8. 5g(0. 045mol)，回流反应28h，过滤，滤液减压蒸除甲苯，残余物用二氯甲烷溶解，搅拌 下慢慢倒入乙醚，析出白色固体，抽滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸酯，在120mL浓度为 lmol/L的NaOH溶液水解，搅拌下于室温反应5h。在冰水冷却下，用2mol/L盐酸调节使pH =3，用二氯甲烷提取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸除二氯甲烷，残 留物用异丙醇重结晶得mPEG4000羧酸衍生物；(4) mPEG4000活性酯的合成反应式如下 具体操作取mPEG4000羧酸衍生物5g(0. 0012mol)，用50mL 二氯甲烷溶解后， 温度降至O 5 °C，加入0. 25g (0. 0012mol) DCC,溶于IOmLDFM的N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)O. 14g(0. 0012mol)，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓缩， 加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得mPEG4000活性酯。(3)连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂的合成反应式如下 具体操作取mPEG4000活性酯3g(0. 0007mol)，溶于15mLDMF中，搅拌使其溶解， 温度降至O 5°C，滴加0. 12g (0. 0014mol)丙氨酸的NaHCO3溶液5ml，升至室温，搅拌反应， 反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用5%盐酸溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层， 用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得连接有丙氨 酸的mPEG4000化学修饰剂。(4)连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂修饰白藜芦醇，制备白藜芦醇前药反应式如下 具体操作取连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂0. 5g (0. 12mmol)，溶于 二氯甲烷中，搅拌使其溶解，温度降至O 5 °C，加入白藜芦醇0. 005g(0. 24mmol)、 DDCO. 05g (0. 24mmol) ,DMAP 0. 03g (0. 24mmol)，升至室温，搅拌反应，反应完毕，加入10 %的 HAc的THF溶液分解过量的DCC，用2%稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩，用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。实验证明连接有丙氨酸的mPEG4000化学修饰剂具有良好的水溶性与稳定性；白 藜芦醇前药具有良好的水溶性，使用方便，生物活性提高，在释放出白藜芦醇的同时还释放 出了丙氨酸。当然，本发明的具体实施方式
不限于以上的几个具体实施例，其各种特征、各种 特征间可以有多种形式的等效变换，如氨基酸的种类可以在甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨 酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸与脯氨酸间择一进行选择；PEG与mPEG的分子量可以在 2000-20000间进行调整；制备方法中的控制条件的具体数值可以在权利要求中限定的范 围内调整等。但凡是不脱离本发明的权利要求之精神所实现的PEG化学修饰剂、其制备方 法、用途、以其作修饰剂制备水溶性白藜芦醇前药的方法，都认为落入本发明的保护范围之 内。
权利要求
一种PEG、mPEG化学修饰剂，其特征在于它的分子结构式如下其中FSA00000157927700011.tif,FSA00000157927700012.tif
2.一种制备如权利要求1所述的PEG、mPEG化学修饰剂的方法，其特征在于所述PEG、 mPEG化学修饰剂以水溶性PEG或mPEG为载体，与丁二酸酐、溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯反 应，得到PEG或mPEG羧酸衍生物，再与氨基酸连接制备而成。
3.根据要求2所述的PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，其特征在于所述的PEG或 mPEG羧酸衍生物是由水溶性载体PEG、mPEG与丁二酸酐反应制得，其制备方法按照以下步 骤顺序进行①将干燥的载体、丁二酸酐以氯仿为溶剂反应，加入吡啶，加热回流；②蒸去溶剂，加入饱和NaHC03溶液，乙酸乙酯萃取，稀盐酸调pH2 3；③二氯甲烷萃取，干燥，减压浓缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸 衍生物。
4.根据权利要求2所述的PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，其特征在于所述的PEG 或mPEG羧酸衍生物，是由水溶性载体PEG、mPEG与溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯反应来制备， 其制备方法按照以下步骤顺序进行①将载体溶于甲苯中，蒸去部分甲苯；②放至室温，冰浴下加入NaH搅拌10—20min；③加入溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯，回流反应20-28h；④反应结束，过滤，滤液减压蒸除甲苯，残余物用二氯甲烷溶解，浓缩，搅拌下慢慢倒入 乙醚，析出白色固体，抽滤，真空干燥，得PEG或mPEG羧酸酯；⑤上述羧酸酯在NaOH溶液中水解，搅拌下于室温反应3-5h；⑥在冰水冷却下，用盐酸溶液调节pH2 3，用二氯甲烷提取，合并有机层，用水洗涤， 无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸除二氯甲烷，残留物用异丙醇重结晶，得PEG或mPEG羧酸衍生 物。
5.如权利要求2-4中任一项所述的PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，其特征在于所述氨基酸为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸或脯氨酸中的一 种。
6.根据权利要求2-4中任一项所述的PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，其特征在于 由PEG或mPEG羧酸衍生物与氨基酸连接制备所述PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法按照以 下步骤顺序进行①制备相应的PEG活性酯或mPEG活性酯将PEG或mPEG羧酸衍生物溶于二氯甲烷，溶解后，温度降至O 5°C，加入二环己基碳 二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓 缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG或mPEG活性酯；②制备目标产物PEG、mPEG化学修饰剂将PEG或mPEG活性酯溶于DMF中，搅拌使其溶解，温度降至O 5°C，滴加氨基酸的 NaHCO3溶液，升至室温，搅拌反应，反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用盐酸溶液 溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水 乙醚，过滤，真空干燥，得连接有氨基酸的PEG化学修饰剂，即目标产物PEG、mPEG化学修饰 剂。
7.根据权利要求5所述的PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法，其特征在于由PEG或 mPEG羧酸衍生物与氨基酸连接制备所述PEG、mPEG化学修饰剂的制备方法按照以下步骤顺 序进行①制备相应的PEG活性酯或mPEG活性酯将PEG或mPEG羧酸衍生物溶于二氯甲烷，溶解后，温度降至0 5°C，加入二环己基碳 二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，升至室温，反应完毕，滤去反应中生成的二环己基脲，减压浓 缩，加入无水乙醚，过滤，真空干燥，得PEG或mPEG活性酯；②制备目标产物PEG、mPEG化学修饰剂将PEG或mPEG活性酯溶于DMF中，搅拌使其溶解，温度降至0 5°C，滴加氨基酸的 NaHCO3溶液，升至室温，搅拌反应，反应完毕，过滤，滤液减压除去溶剂，残余物用盐酸溶液 溶解，用二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥过夜，减压浓缩，加入无水 乙醚，过滤，真空干燥，得连接有氨基酸的PEG化学修饰剂，即目标产物PEG、mPEG化学修饰 剂。
8.一种水溶性白藜芦醇前药的制备方法，其特征在于将PEG、mPEG化学修饰剂与白藜 芦醇通过酯键相连，制备水溶性白藜芦醇前药，其分子结构如下HO a fPEG、mPEG化学條饰剂 ^^^ ν^ ^^ι^^01"^T^ PEG、mPEG化学修饰剂 OH\PEG、mPEG化学修饰剂其制备方法按照如下步骤顺序进行①将PEG、mPEG化学修饰剂溶于二氯甲烷中，搅拌使其溶解；②温度降至O 5°C，加入白藜芦醇、二环己基碳二亚胺、二甲氨基吡啶，升至室温，搅 拌反应；③反应完毕，加入HAc的THF溶液以分解过量的二环己基碳二亚胺；④用稀盐酸洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机层，用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩， 用异丙醇重结晶，得白藜芦醇前药。
9.根据权利要求8所述的水溶性白藜芦醇前药的制备方法，其特征在于所述PEG、 mPEG的分子量为2000 20000。
全文摘要
本发明公开了一种PEG、mPEG化学修饰剂及其制备水溶性白藜芦醇前药的方法。所述PEG、mPEG化学修饰剂是以PEG或mPEG为载体，通过丁二酸酐、溴乙酸乙酯或溴乙酸异丁酯与氨基酸连接制备而成，其制备的条件、步骤简单；该化学修饰剂用于修饰白藜芦醇制得白藜芦醇前药，能够改变白藜芦醇的水溶性及稳定性，使用方便，生物活性提高，该前药于体内分解时在释放白藜芦醇的同时还可释放出人体所需的氨基酸，使其应用范围较白藜芦醇更为广泛。
文档编号A61K47/48GK101870769SQ20101019965
公开日2010年10月27日 申请日期2010年6月13日 优先权日2010年6月13日
发明者卜辉娟, 张越, 郑和堂, 韩玉翠 申请人:河北科技大学