专利名称：含丹参、三七有效部位组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及含丹参、三七有效部位组合物及其制备方法；以及该有效部位组合物 制备的药物在防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑梗塞、脑缺血及其由脑缺血引起的其他各 种疾病药物中应用，属于中药技术领域。
背景技术：
心血管病是中老年人易患的常见病和多发病，严重危害着人类的健康。其中我国 的冠心病所发病例，每年超过100万人，并且冠心病发病率呈现逐年上升的趋势。据流行病 学研究表明，我国人群心血管病的死亡率在人口总死亡中约占40%。随着我国人口老龄化 趋势的加剧，老年心血管病日益突出，并成为致残致死的首要原因，日益严重地威胁着人类 的健康和生命，因此对心血管病尤其冠心病的治疗防治研究，是社会和医学界关注的热点 和难点之一，具有很好的开发前景。目前市场上治疗同类疾病的制剂都没有解决服用量大、生物利用度低、质量标准 可控性不好、有效成分不能有效利用等问题，其工艺基本上都是传统的技术，没有什么新的 技术引进，无法占有足够的市场，更难以打开国际市场。因此，有必要深入研究含丹参、三七 有效部位及开发有效部位组合物制剂，从而为临床上提供一种疗效更好、更方便、质量可 控、安全可靠的中药有效部位复方制剂。
发明内容
本发明的目的是采用现代先进的提取、大孔树脂纯化分离技术、制剂技术以及质 量控制技术，制备一种成本低、药效高、无毒副作用的治疗心血管疾病的中药制剂——含丹 参、三七有效部位组合物制剂及其制备方法。本发明公开含丹参、三七有效部位组合物具有 较好的抗心肌缺血作用，并有一定的抗血栓形成和抗凝血作用；其能通过降低心肌耗氧、改 善心肌供血供氧、提高心肌对缺血缺氧的耐受性、对抗心肌缺血时心肌组织的过氧化、改善 血液流变学的作用以及对凝血功能的影响等途径发挥的功效。一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸10-99份 丹参酮0-50份三七总皂苷10-99份 降香总黄酮0-50份降香油总萜0-20份。一种含丹参、三七有效部位组合物的制备方法，其制备方法包括以下步骤A、重量份含量50%以上丹参总酚酸的制备方法将丹参药材水提液经大孔吸附 树脂精制，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得。B、重量份含量50%以上丹参酮的制备方法丹参药材水提液，减压浓缩，加水沉 淀，干燥既得。C、重量份含量50%以上三七总皂苷的制备方法三七药材水提液上大孔吸附树 脂柱，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，干燥即
3得。D、重量份含量50%以上降香油挥发性总萜的制备方法降香药材切断，加水浸 泡，水蒸气蒸馏，收集馏分，用无水硫酸钠干燥，即得。E、重量份含量50%以上降香总黄酮的制备方法降香药材醇提液，浓缩，加水定 容，上大孔吸附树脂柱，水洗，乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩干燥既得。F、将上述提取物混合，分装即得。该有效部位组合物制剂的剂型可以是片剂、胶囊剂、口服液、注射剂、粉针剂、经皮 吸收制剂、粘膜吸收制剂。一种含丹参、三七有效部位组合物的用途在于用于防治心脑血管疾病、老年痴呆 症、脑梗塞、脑缺血及其由脑缺血引起的其他各种疾病。鉴于药物剂型和生产使用的需要，可以在上述配方的基础上合理添加填充剂、赋 形剂、PH值调节剂、矫味剂、助溶剂、抗氧剂等药用辅料，以满足药物生产和使用。以下是对发明所选择的中药提取物进行介绍丹参总酚酸具有显著扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，降低心肌耗氧量，减慢心 率，增加心肌收缩力，降低中性脂肪，延长小鼠耐缺氧时间，减轻缺氧引起的心肌损伤，促进 心肌再生，抑制ADP诱导血小板凝集、抑制血小板TXA2的合成与释放缩血管物质及促进纤 维蛋白降解作用；丹参酮具有抑制血管平滑肌细胞增殖，抑制血管内膜增生，改善冠状动 脉，缩小心肌梗塞面积，减轻心肌缺血再灌注损伤，防止心肌肥厚，抗心率失常，减轻脑缺 血缺氧损伤，防治再灌注损伤，抗血栓形成、抗血小板聚集，制心和脑微粒体Na+，K+-ATP酶 Na+, K+-ATP酶与正性肌力作用以及抗炎抗菌抗肿瘤等作用；三七总皂苷具有具有提高机体对缺氧的耐受力，抑制血小板聚集，改善心肌缺血、 抗心率失常、降血脂、降血压、抗血栓、镇痛、镇静等作用；降香挥发油具有提高血小板cAMP含量，具有抑制血栓形成的作用，能抗心肌缺血 和增加冠脉流量，其中橙花叔醇、氧化橙花叔醇等挥发性萜类是降香油的主要活性成分；降 香总黄酮具有抗氧化、抗炎、镇痛、抗癌和松弛血管等作用。本发明公开含丹参、三七有效部位组合物具有较好的抗心肌缺血作用，并有一定 的抗血栓形成和抗凝血作用；其能通过降低心肌耗氧、改善心肌供血供氧、提高心肌对缺血 缺氧的耐受性、对抗心肌缺血时心肌组织的过氧化、改善血液流变学的作用以及对凝血功 能的影响等途径发挥的功效。
具体实施例方式实施例1一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸10份 丹参酮20份 三七总皂苷10份降香总黄酮50份 降香油总萜10份。一种含丹参、三七有效部位组合物的制备方法，其制备方法包括以下步骤A、重量份含量50%以上丹参总酚酸的制备方法将丹参药材水提液经大孔吸附 树脂精制，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得。B、重量份含量50%以上丹参酮的制备方法丹参药材水提液，减压浓缩，加水沉淀，干燥既得。C、重量份含量50%以上三七总皂苷的制备方法三七药材水提液上大孔吸附树 脂柱，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，干燥即得。D、重量份含量50%以上降香油挥发性总萜的制备方法降香药材切断，加水浸 泡，水蒸气蒸馏，收集馏分，用无水硫酸钠干燥，即得。E、重量份含量50%以上降香总黄酮的制备方法降香药材醇提液，浓缩，加水定 容，上大孔吸附树脂柱，水洗，乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩干燥既得。F、将上述提取物混合，分装即得。该有效部位组合物制剂的剂型可以是片剂、胶囊剂、口服液、注射剂、粉针剂、经皮 吸收制剂、粘膜吸收制剂。一种含丹参、三七有效部位组合物的用途在于用于防治心脑血管疾病、老年痴呆 症、脑梗塞、脑缺血及其由脑缺血引起的其他各种疾病。实施例2一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸50份 三七总皂苷50份降香总黄酮10份 降香油总萜20份。其制备方法和用途与实施例1 一致。实施例3一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸99份 丹参酮20份 三七总皂苷99份降香油总萜20份。其制备方法和用途与实施例1 一致。实施例4一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸50份 丹参酮20份 三七总皂苷99份降香总黄酮20份。其制备方法和用途与实施例1 一致。实施例5一种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸99份 三七总皂苷50份。其制备方法和用途与实施例1 一致。实施例6—种含丹参、三七有效部位组合物，所用药材组份重量配比为丹参总酚酸10份 三七总皂苷99份降香油总萜10份。其制备方法和用途与实施例1 一致。本发明效果见如下实验例实验例1 冠心丹参有效部位组合物对垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血作用的影
5响实验分组与剂量设计，实验动物随机分为6组①模型动物组实验动物10只。每日灌服0. 25 % CMC (溶剂对照)，lml/100g体
重，连续5天。②阳性药冠心丹参片高剂量组实验动物10只。每日灌服冠心丹参片80mg/100g 体重，连续5天。③阳性药冠心丹参片中剂量组实验动物10只。每日灌服冠心丹参片40mg/100g 体重，连续5天。④含丹参、三七有效部位组合物高剂量组实验动物10只。每日灌服含丹参、三七 有效部位组合物80mg/100g体重，连续5天。⑤含丹参、三七有效部位组合物中剂量组实验动物10只。每日含丹参、三七有效 部位组合物40mg/100g体重，连续5天。⑥含丹参、三七有效部位组合物低剂量组实验动物10只。每日含丹参、三七有效 部位组合物20mg/100g体重，连续5天。实验步骤，末次给药1小时后，用25%的乌拉坦(4ml/kg)，腹腔麻醉，仰位固定于 鼠台上，用心电图机标II导联。电压定标Imv= 10mm，纸速50mm/s。测得给药前的心电图。 然后尾静脉注射垂体后叶素(lU/kg)，要求5S内注射完毕。立即记录0S、15S、30S、lmin、 3min、5min、10min时的心电图。测量给垂体后叶素前后J点(大鼠ST段不明显，故以J点 的变化表示ST段的变化)高度，计算位移变化的绝对值(AJ)，同时测量给垂体后叶素前以 及给垂体后叶素后30秒内T波高度，计算变化值(Δ T)，进行t检验；记录各组发生心律失 常的动物数和给垂体后叶素后30秒后T波的异常率(高耸、双向、倒置、低平均为异常)，进 行X2检验。实验结果见表1、2表1含丹参、三七有效部位组合物对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的影响(ΔΤ 波变化，I±SD，n = 10)
A 、，Θ 给pit后T波变化(ΔΤ波，mv)或异常(倒置、高耸、双向、低平均为异常) 1 且剂I例数
力,J15s30sImin3min5minIOmin含丹高0.11士0.05***0.09±0.03***2**1 **0参,三中0.16 士 0.08*0.13±0.04**1 **0七有效部 位组低0.23±0.130.21±0.07*62**1合物阳性高0.13±0.05**0.11±0.03***2****0药冠心丹中0.20±0.09*0.16±0.07*5*3**ι**0参片模型 组一0.41 士 0.120.35±0.1010993
*P < 0. 05，**P < 0. 01与空白对照组比较表2含丹参、三七有效部位组合物对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血损伤的影响 (心律失常发生例数，X±SD，n= 10)
*，**，与空白组比较，ρ < 0. 05，ρ < 0. 01含丹参、三七有效部位组合物各剂量组对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血J点 变化和T波变化有显著对抗作用，与模型对照组相比有统计学意义(P < 0. 05或ρ < 0. 01)， 并有一定剂量相关性；含丹参、三七有效部位组合物各剂量组可不同程度的对抗垂体后叶 素(Pit)所致大鼠心律失常(主要表现为房室传导阻滞和室性早搏)。其中含丹参、三七有 效部位组合物中剂量组的发生率为30%，与空白对照组比较ρ <0. 05，冠心丹参有效部位 群高剂量组的发生率为0 %，与模型组比较ρ < 0. 01，冠心丹参片相应剂量组亦能对抗垂体 后叶素(Pit)所致大鼠心电图J点变化、T波变化和心律失常，同剂量相比，其作用弱于含 丹参、三七有效部位组合物，但组间无统计学意义，这些结果均提示含丹参、三七有效部位 组合物具有对抗垂体后叶素引起的急性心肌缺血作用，其功效稍强于冠心丹参片。实施例2 含丹参、三七有效部位组合物对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞的影响实验 分组，实验动物随机分为6组 ①模型动物组实验动物6只。②阳性药冠心丹参片高剂量组实验动物6只。③阳性药冠心丹参片中剂量组实验动物6只。④含丹参、三七有效部位组合物高剂量组实验动物6只。⑤含丹参、三七有效部位组合物中剂量组实验动物6只⑥含丹参、三七有效部位组合物低剂量组实验动物6只。实验步骤，动物经戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接SC-3型电动 呼吸机；左侧第4、5肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左侧前降支中 段下1/2处，穿线以备结扎用，结扎后，结扎线以下心肌立刻出现黑紫，表明结扎成功，即造 成急性心肌缺血模型；缝制多点固定式心外膜电极，描记心外膜电图。结扎冠脉前及后15 分钟后进行记录，作为给药前对照值，十二指肠给予实验药物或生理盐水，于给药后15、30、 60、120、180、240分钟记录30个标测点心外膜电图，以S-T段升高大于2mv为判断标准， 以此计算心肌缺血程度(s-τ段升高总mv数Σ -ST)及心肌缺血程度(S-T段升高总点数 N-ST)，并于给药后60min、120min、180min、240min于冠脉窦取血，分离血清分别测CK、LDH 含量。实验结束后，立即取下心脏，生理盐水冲洗，称量全心重，在心脏结扎线以下，平行于 冠状沟均勻地将心室部分横断切成5片，然后，置于硝基四氮唑(N-BT)染液中，37°C水浴染
7色15分钟。称重每片心肌双侧的梗死区(N-BT染色区)的重量。计算梗塞区占心室及占 心脏重量的百分比。实验结果1.含丹参、三七有效部位组合物对犬急性心肌梗死范围(N-BT染色法)的影响含丹参、三七有效部位组合物高、中两个剂量组能明显缩小心肌梗死范围。以 N-BT染色法显示心肌梗死范围，模型对照组梗塞区分别占心室及心脏重量的34. 2士4. 5% 和21. 3士3. 3 %，含丹参、三七有效部位组合物高剂量组梗塞区分别占心室及心脏的 15. 8 士 3. 4%和9.8士2.1%，与模型对照组比较P < 0.01 ；含丹参、三七有效部位组合 物中剂量组梗塞区分别占心室及心脏的23. 9 士 4. 1 %和16. 4 士 1. 9 %，与模型对照组比 较P < 0.05 ；冠心丹参片中、高剂量组也能明显缩小心肌梗死范围，与模型对照组比较P <0. 05，同剂量相比，冠心丹参片作用弱于含丹参、三七有效部位组合物，但同剂量组间比 较无统计学意义，结果见表3。
表3含丹参、三七有效部位组合物对冠脉结扎犬心肌梗死范围的影响
(I 土 SD, n=6) 与空白组比较*P < 0. 05 **P < 0. 01 ***P < 0. 0012.含丹参、三七有效部位组合物对急性心肌梗死犬心肌血清酶CPK、LDH的影响与模型对照组比较，含丹参、三七有效部位组合物高、中剂量组与冠心丹参片高、 中剂量组对血清酶CPK、LDH均能明显显抑制冠脉结扎犬血清CPK及LDH活性的升高；但同 剂量的含丹参、三七有效部位组合物作用优于冠心丹参片，但同剂量组间比较无统计学意 义。表4、5。表4冠心丹参有效部位群对冠脉结扎犬血清肌酸磷酸激酶(CK)的影响(U/ πι1)(Φ>χ士SD，η=6) *p < 0. 05，**p < 0.01 与对照组比较表5含丹参、三七有效部位组合物对冠脉结扎犬血清乳酸脱氢酶(LDH)的影响(U/ 1) (Φ>χ士SD，η=6) *p < 0. 05，**p < 0.01 与对照组比较3.含丹参、三七有效部位组合物对冠脉结扎犬心外膜电图的影响含丹参、三七有效部位组合物经十二指肠给药对冠状动脉结扎犬心肌缺血有明显 改善作用，表现为含丹参、三七有效部位组合物高、中剂量组与冠心丹参片高、中剂量组给 药后心外膜电图ST段偏移总合(Σ -ST)及ST移位超过2mv导联数(N-ST)的变化与模型 对照组比较有显著差异(P <0.05或0.01或0.001)；同剂量相比，冠心丹参片作用弱于含 丹参、三七有效部位组合物，但组间无统计学意义，结果见表6、7。表6含丹参、三七有效部位组合物对实验性急性心肌缺血犬心肌缺血程度的影响 (E-ST)(J±SD，n:6) 与空白组比较< 0. 05 林P < 0. 01 < 0. 001表7冠心丹参有效部位群对实验性急性心肌缺血犬心肌缺血程度的影响 (N-ST)(叉士 SD, n:6)
11 与空白组比较*P < 0. 05 **P < 0. 01实施例3含丹参、三七有效部位组合物对小鼠常压耐缺氧作用的影响实验分组与剂量设计，实验动物随机分为6组①模型动物组实验动物10只。每日灌服0. 25% CMC (溶剂对照)，lml/100g体
重，连续5天。②阳性药冠心丹参片高剂量组实验动物10只。每日灌服冠心丹参片80mg/100g 体重，连续5天。③阳性药冠心丹参片中剂量组实验动物10只。每日灌服冠心丹参片40mg/100g 体重，连续5天。④含丹参、三七有效部位组合物高剂量组实验动物10只。每日灌服含丹参、三七 有效部位组合物80mg/100g体重，连续5天。⑤含丹参、三七有效部位组合物中剂量组实验动物10只。每日含丹参、三七有效 部位组合物40mg/100g体重，连续5天。⑥含丹参、三七有效部位组合物低剂量组实验动物10只。每日含丹参、三七有效 部位组合物20mg/100g体重，连续5天。实验步骤，末次给药后1小时后将小鼠分别移入底部盛有15g钠石灰的150ml广 口瓶中，加盖密封。观察其呼吸停止即死亡所用时间，进行t检验。另取6组小鼠同上，分组和给药同上，末次给药后1小时，各组动物分别尾静脉注 射给予盐酸异丙肾上腺素2mg/kg，并立即放入广口瓶内密封。观察方法同前。实验结果经 统计学处理，作t检验判断显著性。实验结果表明，含丹参、三七有效部位组合物各剂量组均能显著延长常压耐缺氧 动物的存活时间(P <0.05或0.01)；同时含丹参、三七有效部位组合物各剂量组剂量组也能明显延长给予异丙肾上腺素小鼠常压耐缺氧存活时间(P < 0. 05或0. 01)，提示含丹参、 三七有效部位组合物具有调节异丙肾上腺素增加心肌耗氧量的作用；冠心丹参片亦有此功 效，结果见表8。表8含丹参、三七有效部位组合物对常压耐缺氧小鼠存活时间的影响 0· 5% CMC 比 *P < 0· 05 **P < 0· 01 ；与0. 5% CMC+异丙肾比 #P < 0. 05，##P < 0. 0权利要求
一种含丹参、三七有效部位组合物，其特征在于所用药材组份重量配比为丹参总酚酸10 99份丹参酮0 50份三七总皂苷10 99份降香总黄酮0 50份降香油总萜0 20份。
2.一种含丹参、三七有效部位组合物的制备方法，其特征在于其制备方法包括以下步骤A、重量份含量50%以上丹参总酚酸的制备方法将丹参药材水提液经大孔吸附树脂 精制，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得；B、重量份含量50%以上丹参酮的制备方法丹参药材水提液，减压浓缩，加水沉淀，干 燥既得；C、重量份含量50%以上三七总皂苷的制备方法三七药材水提液上大孔吸附树脂柱， 先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，干燥即得；D、重量份含量50%以上降香油挥发性总萜的制备方法降香药材切断，加水浸泡，水 蒸气蒸馏，收集馏分，用无水硫酸钠干燥，即得；E、重量份含量50%以上降香总黄酮的制备方法降香药材醇提液，浓缩，加水定容，上 大孔吸附树脂柱，水洗，乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩干燥既得；F、将上述提取物混合，分装即得。
3.根据权利要求1所述的含丹参、三七有效部位组合物，其特征在于该有效部位组合 物制剂的剂型可以是片剂、胶囊剂、口服液、注射剂、粉针剂、经皮吸收制剂、粘膜吸收制剂。
4.一种如权利要求1所述的含丹参、三七有效部位组合物的用途，其特征在于用于防 治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑梗塞、脑缺血及其由脑缺血引起的其他各种疾病。
全文摘要
本发明涉及含丹参、三七有效部位组合物及其制备方法；以及该有效部位组合物制备的药物在防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑梗塞、脑缺血及其由脑缺血引起的其他各种疾病药物中应用，属于中药技术领域。所用药材组份重量配比为丹参总酚酸10-99份、丹参酮0-50份、三七总皂苷10-99份、降香总黄酮0-50份、降香油总萜0-20份。本发明公开含丹参、三七有效部位组合物具有较好的抗心肌缺血作用，并有一定的抗血栓形成和抗凝血作用；对抗心肌缺血时心肌组织的过氧化、改善血液流变学的作用以及对凝血功能的影响等途径发挥的功效。
文档编号A61P9/10GK101912441SQ20101025645
公开日2010年12月15日 申请日期2010年8月18日 优先权日2010年8月18日
发明者张爱玲, 杨世林, 王金钱, 简晖, 胡宏辉, 范玫玫, 钱霞, 魏惠珍 申请人:江西本草天工科技有限责任公司