一种新的丹参提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种新的丹参提取物及其制备，本发明所述丹参提取物的制备方法，包括如下步骤：（1）丹参药材用低级醇提取，过滤得到醇提液，药渣A备用；（2）药渣A加水提取，过滤，得水提液，药渣B弃去；（3）醇提液、水提液分别降温静置，再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液；（4）水提上清液浓缩得水提浓缩液；（5）水提浓缩液逐步加入醇提上清液，合并浓缩，得混合浓缩液；（6）在混合浓缩液加入纯化水，合并浓缩，至一定浓缩比重收膏，即得丹参提取物。
【专利说明】-种新的丹参提取物及其制备
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药材的提取方法，具体涉及中药丹参提取物及提取方法。
【背景技术】
[0002] 丹参为唇形科鼠尾草植物丹参（Salvia miltiorrhiza Beg.)干燥的根。在我国 治疗冠也病也绞痛方面，已有近千年的使用历史，最早记载于东汉的《神农本草经》，并列为 上品，具有行气止痛，宁也安神，清热凉血，活血化癒等功效。
[0003] 自上世纪W来，随着化学分离手段的不断发展，W及近代植物化学的悄然兴起，人 们对丹参的化学成分也有了进一步的研究。
[0004] 研究表明，丹参的活性成分主要有两类；一类是W丹参丽为代表的脂溶性有效部 位；另一类则是W丹酷酸为代表的水溶性有效部位。近年来研究认为，水溶性有效成分是活 血化癒的有效成分。例如，丹酷酸A对缺血再灌注引起的也肌细胞损伤有明显的保护作用， 总丹酷酸表现出较强的抗缺血再灌性也律失常作用；丹酷酸A、丹酷酸B W及总丹酷酸对 小鼠脑缺血再灌注引起的脑损伤有保护作用，可W减少脑组织中MDA含量；丹酷酸抗血栓 作用；丹酷酸对肝、肾的保护作用；丹酷酸具有很强的抗氧化作用，可W清除超氧阴离子和 释基自由基，抑制脂质过氧化反应，等等。（杜冠华等，基础医学与临床，2000,20巧）；10? 14)。
[0005] 目前，丹参水溶性部位的提取方法多为水提后过树脂柱或聚醜胺柱，例如， Takashi Tanaka等报道的丹参多酷酸盐的提取方法（Qiemical Pharmaceutical Bulletin, 1989, 37 (2)，340 ?：M4)，另外，KojiHase 等（PlantaMedica，1997,63, 22 ?26)、 徐亚明等（中国专利CN1247855A，2000年3月公开）、刘平等（中国专利CN1270809A，2000 年10月公开）、黎莲娘等（中国专利，申请号01142288. 2,申请日2001年9月）亦采用类 似的方法从丹参中提取酷酸类化合物。
[0006] 现有技术中，丹参提取方法大概分为W下几种：
[0007] 1、丹参水煎煮得水提取液，提取液浓缩后醇沉，将醇沉液浓缩得丹参粗提取物，主 要成分为丹酷酸类成分；
[0008] 2、丹参水煎煮得水提取液，提取液浓缩后醇沉，将醇沉液浓缩一定程度后，过大孔 树脂柱或聚醜胺柱，水洗，醇洗，洗脱液浓缩干燥即可，得丹参精提取物，主要成分为丹酷酸 类成分。
[0009] 3、丹参C02超临济萃取得丹参丽提取物，药渣水提醇沉后，上清液过树脂柱，水 洗，醇洗得水溶性成分提取物。
[0010] 上述方法中，一般都是选择一类成分作为有效成分，如丹参酷酸类或丹参丽类，丹 参药材的利用率比较低，舍弃了丹参的另一种有效活性成分，没有将丹参药材的全部成分 表达出来。造成药材资源的浪费。
【发明内容】
[0011] 为了更好的利用丹参药材，充分发挥丹参药材的药理作用，本发明提供了具有较 强药理活性的丹参提取物。
[0012] 本发明还提供了丹参提取物的制备方法，该方法能够充分将丹参药材的水溶性成 分及脂溶性成分完全提取出来，并能够适应产业化。
[0013] 本发明是通过W下技术方案实现的：
[0014] 本发明提供一种丹参提取物，是通过下述制备方法得到：
[0015] ( 1)丹参药材用醇提取，过滤得到醇提液，药渣A备用；
[0016] (2)药渣A加水提取，过滤，得水提液，药渣B弃去；
[0017] (3)醇提液、水提液分别降温静置，再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清 液；
[0018] (4)水提上清液浓缩得水提浓缩液；
[0019] (5)水提浓缩液逐步加入醇提上清液，合并浓缩，得混合浓缩液；
[0020] (6)混合浓缩液中加入纯化水，混合均匀后浓缩，即得丹参提取物。
[0021] 其中步骤（1)所述醇为己醇，其用量为药材用量2-7倍重量，醇浓度为50-100%(V/ V)，提取时间0. 5-4小时。
[0022] 其中步骤（2)中的加水量为药渣的3-7倍重量，提取时间0. 5-4小时。
[0023] 其中步骤（3)中降温静置是将提取液揽拌20-60分钟，料液温度降至15C W下静 置6-24小时吸取上清液。
[0024] 优选的，本发明的丹参提取物的制备方法，包括W下步骤：
[00巧](1)丹参药材加药材量2-7倍量50-100%己醇，回流提取约0. 5-4小时，过滤得醇 提液，药渣A备用；
[0026] (2)上述药渣A加药材量3-7倍量水，煎煮约0. 5-4小时，过滤，得水提液，药渣B 弃去；
[0027] (3)步骤（1)中的醇提液揽拌20-60分钟，醇提液温度降至15C W下静置6?24 小时吸取上清液得醇提上清液，步骤（2)中的水提液揽拌20-60分钟，水提液温度降至15C W下静置6?24小时，吸取上清液得水提上清液；
[0028] (4)水提上清液浓缩至相对密度1. 10?1. 35 (优选1. 20-1. 30)，得水提浓缩液；
[0029] (5)水提浓缩液逐步加入步骤（3)醇提上清液，合并浓缩，浓缩过程中料液相对密 度不得低于1. 10,减压浓缩至相对密度> 1. 20,得混合浓缩液；
[0030] (6)混合浓缩液分次加入1化?10化纯化水，每次加入5?5化纯化水，合并浓 缩，减压浓缩至82. 5 + 2. 5°C相对密度为1. 25?1. 35,趁热过滤，得丹参提取物。
[0031] 其中，优选的步骤（5)中浓缩水提液至相对密度1. 10?1.35后逐步加入步骤（3) 醇提上清液。
[0032] 其中，更优选的步骤（5)中浓缩水提液至相对密度1. 10?1. 35后逐步加入步骤 (3)醇提上清液，浓缩至相对密度为1. 25?1. 35 (82. 5 + 2. 5°C)收膏。
[0033] 本发明所述步骤（3)中降温静置是将提取液揽拌20-60分钟，料液温度降至15C W下静置6?24小时吸取上清液。作用：降至室温W下，可W迅速除去杂质，如泥±颗粒 等，二温度低可W缩短静置时间，适合产业化，同时也能保证丹参丽和丹酷酸的稳定性。
[0034] 本发明所述步骤（5)水提浓缩液逐步加入步骤（3)醇提上清液，合并浓缩，减压浓 缩至相对密度> I. 20得混合浓缩液；如果单独先浓缩醇提上清液时，随着料液己醇浓度降 低，丹参丽类成分容易析出结块，粘附在设备壁上。本发明采取水提浓缩液逐步加入醇提上 清液合并浓缩，可W使醇提上清液中丹参丽类成分均匀分散在水提浓缩液中，因此本发明 浓缩方式所得提取物粒度均匀，丹参丽类成分回收率比较高，对设备清洁的要求比较简单， 更易于操作和产业化，更重要的是对后续制剂工艺是有利的。本发明将后附不同浓缩方式 对丹参提取物性状影响实验进行详细阐述。
[00巧]本发明所述步骤（6)混合浓缩液分两次加入1化纯化水，每次加化，合并浓缩，减 压浓缩至82. 5 + 2. 5°C相对密度为1. 25?1. 35,趁热过滤，得丹参提取物。此加水步骤为 挥发掉己醇，控制己醇残留量，提高了丹参提取物的质量，本工艺产品能满足欧盟市场对提 取物己醇残留限度要求（《0. 5%)。
[0036] 。
[0037] 为了更好都说明本发明都浓缩方式与现有技术的不同，特做如下实验分析比较：
[0038] 试验例一
[0039] 不同浓缩方式对丹参提取物影响
[0040] -、实验目的；考察不同浓缩方式对丹参提取物性状、粒度分布W及酷酸成分影 响。
[0041] 二、实验结论：
[0042] 从提取物浓缩过程中粘壁情况、粒度分布W及多酷酸成分浓缩过程中含量变化的 结果分析显示；先浓缩水提液后逐步加醇提液浓缩，优于先浓缩醇提液后浓缩水提液浓缩 方式。
[004引 S、实验设备：
[0044] 电热套、旋转蒸发器、UPLC、鼓风干燥箱等
[0045] 四、实验原料；丹参20100309
[0046] 五、实验方案
[0047] 准确称量丹参药材450g，用4倍量90%己醇提取1.化，药液过滤；药渣用5倍量水 回流提取比，过滤，得醇提液和水提液。每个实验平行提取两次。
[0048] 实验方案一、先浓缩醇提液后逐步加入浓缩水提液合并浓缩，至糖度86 + 2%收 膏。
[0049] 实验方案二、先浓缩水提液至糖度84 + 2%后，逐步加入醇提液合并浓缩，至糖度 86 + 2%收膏。
[0050] 六、丹参提取物实验过程中图片
[0051] 样品来源：20120823先浓缩醇提液再加水提液浓缩
[0052] 20120829先浓缩水提液再加醇提液浓缩
[0053] 6. 1实验过程中实验图片，见图1。
[0054] 1、从丹参提取物放料后烧瓶粘附的图片可知20120823黑子渣子颗粒大且粘附比 较严重，20120829可W看到析出黑色渣子比较细小并且比较均匀，从而20120829浓缩方式 提取物性状较好。
[00巧]2、用水清洗各自批次烧瓶结果图片可W看出20120823烧瓶黑子渣子粘附比严 重，后种浓缩方式粘壁情况较少。从而从水清洗效果来说20120829批次浓缩方式对设备清 洗较好。
[0056] 3、从95%己醇清洗的照片可知20120823清洗溶液颜色比较重，20120829溶液颜色 较清。
[0057] 综上所述，从丹参提取物表观性状和后续设备清洗来说20120829批次浓缩方式 先浓缩水提液后逐步加入醇提液合并浓缩方式最优。
[0058] 6. 2不同浓缩方式对丹参提取物粒度分布的影响
[0059] 6. 2. 1丹参提取物涂布照片
[0060] 从上图2可W看出涂布图片中，20120823有明显大颗粒的黑子渣子析出，另种浓 缩方式丹参提取物黑色渣子分布比较均匀且颗粒比较小，对丹参提取物对后续制剂影响较 小。
[0061] 6. 2. 2药典筛检测粒度分布
[0062] 分别取各批次丹参提取物浸膏50,加5倍量水溶解，过1-8号药典筛(药典筛依次 叠放)，用约500ml蒸觸水冲洗，观察每层药典筛中浸膏颗粒分布情况，然后将每层中的颗粒 用水冲洗，收集，抽滤，连同滤纸烘干称重。
[0063]
[0064]
[0065] 如上述图表可知从提取物颗粒大小W及大颗粒出现顺序可知，提取物性状优略顺 序为 20120829-J〉20120823-J。因此 20120829 浓缩方式较好。
[0066] 本发明浓缩方式给制剂带来的好处主要是：提取物中难溶性颗粒显著改善，载药 过程不在出现堵喷枪问题。提取物己醇残留水平较低，制剂过程不再增加挥醇操作，确保产 品己醇残留符合要求。提取物稳定性提高，制剂过程指标成分转移率稳定。
[0067] 本发明所涉及丹参提取物及其制备方法具有如下优势：
[006引1、本工艺利用醇提和水提两种工序，将丹参药材脂溶性成分和水溶性成分充分浸 出。
[0069] 2、本工艺通过调整水提液和醇提液的浓缩顺序，并且严格控制浓缩工序中间体浓 缩过程中相对比重，W便水溶性和脂溶性成分均匀分散，为后续制剂提供性状均匀分散的 原料。
【权利要求】
1. 一种丹参提取物，其特征在于，是通过如下制备方法得到： (1) 丹参药材用醇提取，过滤得到醇提液，药渣A备用； (2) 药渣A加水提取，过滤，得水提液，药渣B弃去； (3) 醇提液、水提液分别降温静置，再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液； (4) 水提上清液浓缩得水提浓缩液； (5) 水提浓缩液逐步加入醇提上清液，合并浓缩，得混合浓缩液； (6) 混合浓缩液中加入纯化水，混合均匀后浓缩，进一步浓缩即得丹参提取物。
2. 权利要求1所述的丹参提取物，其特征在于，其中步骤（1)所述醇为乙醇，其用量为 药材用量2-7倍量，醇浓度为50-100%，提取时间0. 5-4小时。
3. 权利要求1所述的丹参提取物，其特征在于，其中步骤（2)中的加水量为药渣的3-7 倍量，提取时间0.5-4小时。
4. 权利要求1所述的丹参提取物，其特征在于，其中步骤（3)中降温静置是将提取液搅 拌20-60分钟，料液温度降至15°C以下静置6?24小时吸取上清液。
5. 权利要求1所述的丹参提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 丹参药材用醇提取，过滤得到醇提液，药渣A备用； (2) 药渣A加水提取，过滤，得水提液，药渣B弃去； (3) 醇提液、水提液分别降温静置，再分别吸取上清液为醇提上清液、水提上清液； (4) 水提上清液浓缩得水提浓缩液； (5) 水提浓缩液逐步加入醇提上清液，合并浓缩，得混合浓缩液； (6) 混合浓缩液中加入纯化水，混合均匀后浓缩，进一步浓缩即得丹参提取物。
6. 如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：包括如下步骤： (1) 丹参药材加药材量2-7倍量50-100%乙醇，回流提取约0. 5-4小时，过滤得醇提液， 药渣A备用； (2) 上述药渣A加药材量3-7倍量水，煎煮约0. 5-4小时，过滤，得水提液，药渣B弃去； (3) 步骤（1)中的醇提液搅拌20-60分钟，15°C以下静置6?24小时吸取上清液得醇 提上清液，步骤（2)中的水提液搅拌20-60分钟，15°C以下静置6?24小时，吸取上清液得 水提上清液； (4) 水提上清液浓缩至相对密度1. 10?1. 35,得水提浓缩液； (5) 水提浓缩液逐步加入步骤（3)醇提上清液，合并浓缩，浓缩过程中料液相对密度不 得低于1. 10,减压浓缩至相对密度> 1. 20,得混合浓缩液； (6) 混合浓缩液分次加入10L?100L纯化水，每次加入5?50L纯化水，合并浓缩，减 压浓缩至82. 5±2. 5°C相对密度为1. 25?1. 35,趁热过滤，得丹参提取物。
7. 如权利要求5或6任何一项所述的制备方法，其特征在于：步骤（5)中浓缩水提液至 相对密度1. 10?1. 35后逐步加入步骤（3)醇提上清液。
8. 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤（5)中浓缩水提液至相对 密度1. 10?1. 35后逐步加入步骤（3)醇提上清液，浓缩至相对密度为1. 25?1. 35 (82. 5±2. 5°C)收膏。
【文档编号】A61K36/537GK104224911SQ201310276924
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年7月3日 优先权日:2013年6月17日
【发明者】张文生, 闫希军, 叶正良, 章顺楠, 马长雨, 丛德刚, 文甜甜, 杨文静, 赵万顺, 翟伟, 李晨鸣, 郑永锋, 范立君 申请人:天士力制药集团股份有限公司