专利名称：同时提取络石藤总木脂素和总黄酮的方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种同时提取络石藤总木脂素和总黄酮的方法。
背景技术：
络石藤为夹竹科植物络石Trachelospermum jasminoides (Lindl.) Lem.的干燥带 叶藤茎。味苦，性微寒。归心、肝、肾经。具有祛风通络，凉血消肿的功效。用于风湿热痹，筋 脉拘挛，腰膝酸痛，喉痹，痈肿，跌扑损伤。在《神农本草经》中被收载为上品。其主要成分为 生物碱、木脂素类化合物和黄酮类化合物。并有报道其黄酮类成分抑制黄嘌呤氧化酶活性、 木脂素类化合物松弛气管平滑肌、抑制II 6等药理活性。有人认为其木脂素类化合物的抗 癌作用可能与其抗雌激素样作用有关；Shimoi等研究黄酮类成分在机体内的抗氧化活性， 考察了 12种黄酮类化合物对放射线诱发的小鼠髓细胞染色体异常以及髓和脾脏中脂质过 氧化的抑制作用，发现木犀草素显示出最强的抗氧化活性和抑制染色体异常作用；在抗促 癌细胞成分的筛选试验中，去甲基络石藤苷元对十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)诱发的EB病 毒早期抗原的抑制作用随浓度的升高而增强，并对Raji细胞的毒性较小。络石藤应用较为 广泛，具有很高的药用价值，其木脂素类化合物和黄酮类化合物可望开发出抗癌、抗衰老、 治疗更年期综合症等作用的新药。
目前关于络石藤木脂素类化合物、黄酮类化合物的研究较少，中国专利申请号 200510093357. X采用水、丙酮、Cy烷基醇或它们的混合物提取络石藤，或与大孔树脂、液滴 逆流等柱层析法、液液、固液萃取法、CO2超临界萃取法等技术进行任意组合提取络石藤，该 方法从络石藤中仅提取出木脂素类化合物，大量存在的黄酮类化合物被浪费。中国专利申 请号200610049735. 9采用发酵法提取得到络石藤浸膏，再用酸解法或酶解法将浸膏中木 脂素苷转化为苷元，再酸碱调节，得到络石藤木脂素苷元总提取物，该方法所得产品纯度不 定，多次酸碱反应，对成分结构了造成较大破坏。
发明内容
本发明针对以上生产中的不足及技术上的缺陷，提供一种同时提取络石藤总木脂 素和总黄酮的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的
同时提取络石藤总木脂素和总黄酮的方法，其特征在于按照下列步骤进行制备 将络石藤粉碎成20-80目，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时后，以50% -90%的乙醇 回流提取，提取液回收乙醇至含醇量低于20%，静置除杂，清液浓缩后上大孔吸附树脂柱吸 附，不同浓度乙醇洗脱，分别收集富含木脂素和黄酮的流分，浓缩得络石藤总木脂素和总黄酮。
所述总木脂素的成分为牛蒡子苷及其苷元、络石藤苷及其苷元、去甲基络石藤 苷、罗汉松脂素、罗汉松脂苷等。
所述总黄酮的成分为芹菜素、芹菜素-7-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素-7-新橙皮糖苷等。
所述大孔树脂用量为提取浸膏重量的0. 3-5倍。
所述大孔树脂洗脱剂为10% -90%乙醇梯度洗脱，洗脱顺序为先用10-30%乙醇 洗脱至色淡，除去杂质，然后用40-60%乙醇洗脱至色淡，收集总黄酮洗脱液，再用65-90% 乙醇洗脱至色淡，收集总木脂素洗脱液。
本发明制备所得的络石藤总木脂素和总黄酮可与药学上可接受的赋形剂或载体 混合制成临床上可接受的药物剂型。
本发明方法与现有技术相比，具有以下优点
(1)本发明资源利用率高，避免只提取一种活性成分而造成药材资源浪费；
(2)本发明有害试剂用量少，毒性低；
(3)本发明方法简单可行，适用于工业生产。
具体实施例方式
实施例1
将络石藤茎叶粉碎过40目筛，取1kg，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时除去 脂溶性杂质，药渣用6倍量体积浓度为80%的乙醇溶液回流提取2-3小时，过滤，药渣再加 入50%乙醇回流1小时，过滤去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪在60°C条件下减压回收乙醇 至含醇量低于20 %，然后静置除杂，清液浓缩至相对密度为1. 07的浸膏，将浸膏加入1. 5 倍量大孔树脂层析柱上，蒸馏水冲洗至流出液无色为止，然后依次用20%乙醇、60%乙醇和 90%乙醇，以0. 6BV/h速度洗脱，同时以薄层层析检测流出物成分，分别收集总木脂素流分 和总黄酮流分，分别回收溶剂，在40°C 100°C下低温减压干燥，得到络石藤总木脂素提取 物18g，总黄酮提取物Mg。
实施例2:
将络石藤茎叶粉碎过60目筛，取3kg，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时除去 脂溶性杂质，药渣用8倍量体积浓度为70%的乙醇溶液回流提取2-3小时，过滤，药渣再加 入70%乙醇回流1小时，过滤去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪在60°C条件下减压回收乙醇 至含醇量低于20 %，然后静置除杂，清液浓缩至相对密度为1. 10的浸膏，将浸膏加入0. 5 倍量大孔树脂层析柱上，蒸馏水冲洗至流出液无色为止，然后依次用10%乙醇、40%乙醇和 80%乙醇，以0. 8BV/h速度洗脱，同时以薄层层析检测流出物成分，分别收集总木脂素流分 和总黄酮流分，分别回收溶剂，在80°C 100°C下低温减压干燥，得到络石藤总木脂素提取 物阳8，总黄酮提取物163g。
实施例3
将络石藤茎叶粉碎过80目筛，取10kg，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时除 去脂溶性杂质，药渣用10倍量体积浓度为85%的乙醇溶液回流提取2-3小时，过滤，药渣 再加入85%乙醇回流1小时，过滤去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪在60°C条件下减压回收乙 醇至含醇量低于20 %，然后静置除杂，清液浓缩至相对密度为1. 04的浸膏，将浸膏加入4 倍量大孔树脂层析柱上，蒸馏水冲洗至流出液无色为止，然后依次用30%乙醇、50%乙醇和 90%乙醇，以0. 5BV/h速度洗脱，同时以薄层层析检测流出物成分，分别收集总木脂素流分 和总黄酮流分，分别回收溶剂，在60°C 100°C下低温减压干燥，得到络石藤总木脂素提取物180g，总黄酮提取物536g。
实施例4
将络石藤茎叶粉碎过40目筛，取20kg，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时除 去脂溶性杂质，药渣用5倍量体积浓度为80%的乙醇溶液回流提取2-3小时，过滤，药渣再 加入80%乙醇回流1小时，过滤去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪在60°C条件下减压回收乙醇 至含醇量低于20%，然后静置除杂，清液浓缩至相对密度为1. 05的浸膏，将浸膏加入3. 5 倍量大孔树脂层析柱上，蒸馏水冲洗至流出液无色为止，然后依次用20%乙醇、50%乙醇和 85%乙醇，以0. 6BV/h速度洗脱，同时以薄层层析检测流出物成分，分别收集总木脂素流分 和总黄酮流分，分别回收溶剂，在40°C 90°C下低温减压干燥，得到络石藤总木脂素提取 物365g，总黄酮提取物1084g。
实施例5
将络石藤茎叶粉碎过20目筛，取50kg，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时除 去脂溶性杂质，药渣用6倍量体积浓度为90%的乙醇溶液回流提取2-3小时，过滤，药渣再 加入90%乙醇回流1小时，过滤去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪在60°C条件下减压回收乙醇 至含醇量低于20 %，然后静置除杂，清液浓缩至相对密度为1. 08的浸膏，将浸膏加入4. 5 倍量大孔树脂层析柱上，蒸馏水冲洗至流出液无色为止，然后依次用17%乙醇、55%乙醇和 80%乙醇，以0. 8BV/h速度洗脱，同时以薄层层析检测流出物成分，分别收集总木脂素流分 和总黄酮流分，分别回收溶剂，在40°C 80°C下低温减压干燥，得到络石藤总木脂素提取 物880g，总黄酮提取物2. 7kgo
权利要求
1.同时提取络石藤总木脂素和总黄酮的方法，其特征在于按照下列步骤进行制备将 络石藤粉碎成20-80目，用沸程为60-90°C的石油醚热提1小时后，以50% -90%的乙醇 回流提取，提取液回收乙醇至含醇量低于20%，静置除杂，清液浓缩后上大孔吸附树脂柱吸 附，不同浓度乙醇洗脱，分别收集富含木脂素和黄酮的流分，浓缩得络石藤总木脂素和总黄酮。
2.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述大孔树脂用量为提取浸膏重量的 0. 3-5 倍。
3.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述大孔树脂洗脱剂为10%-90%乙 醇梯度洗脱，洗脱顺序为先用10-30%乙醇洗脱至色淡，除去杂质，然后用40-60%乙醇洗 脱至色淡，收集总黄酮洗脱液，再用65-90%乙醇洗脱至色淡，收集总木脂素洗脱液。
4.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于制备所得的络石藤总木脂素和总黄酮 可与药学上可接受的赋形剂或载体混合制成临床上可接受的药物剂型。
全文摘要
本发明涉及同时提取络石藤总木脂素和总黄酮的方法，其中总木脂素含量和总黄酮含量均大于50％。络石藤药材经过粉碎、石油醚脱脂、乙醇加热回流提取、大孔树脂吸附、洗脱、干燥，获得总木脂素提取物和总黄酮提取物，该制备方法工艺简单可行，含量稳定，适合工业化生产。
文档编号A61P21/02GK102028729SQ201010558140
公开日2011年4月27日 申请日期2010年11月25日 优先权日2010年11月25日
发明者刘东锋, 杨成东, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司