专利名称：一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用超临界萃取的方法从地胆草中制备地胆草总内酯的方法。
背景技术：
地胆草(Ekphantopus scaber Linn.)为菊科地胆草属植物，在我国仅有地胆草和白花地胆草两种，主产于浙江、福建、台湾、广东、广西、云南、贵州等地。民间用其全草入药，主治感冒、扁桃体炎、眼结膜炎、黄疸、湿疹等症，该药有清热、凉血、解毒、利湿之功效。 据报道地胆草主要含倍半萜内酯、三萜、黄酮、留醇等化合物。其中倍半萜内酯有抑制肿瘤及细胞毒作用。地胆草总内酯即地胆草倍半萜内酯，主要包括吉玛烷内酯型、愈创木内酯型和榄香烷内酯型三种构型。地胆草内酯对体外人鼻咽癌KB细胞和小鼠白血病P388有显著的抑制作用，而去氧地胆草内酯能显著抑制肉瘤W256，该属其它种植物所含的倍半萜内酯也有较强的抗肿瘤和细胞毒活性。梁侨丽等研究表明地胆草倍半萜内酯化合物Scabertopin(I) 和isodeoxyel印hantopin(2)在体外对SMMC_7721、Hela和Caco_2三种肿瘤细胞增殖的影响。发现这两个化合物在1 IOOym浓度内对三种肿瘤细胞增殖有显著的抑制作用，且呈一定剂量依赖关系。现有提取地胆草总内酯的方法较少，大多是通过醇提，乙酸乙酯萃取等方法制备， 有机溶剂用量大，且制备量少。因此本发明提供一种采用超临界萃取的方法从地胆草中制备地胆草总内酯，希望对地胆草的进一步研究提供帮助。黄婷等发表的“地胆草化学成分的研究”，该文献公开的方法是采用醇提，提取液浓缩后加水分散，再用乙酸乙酯萃取，萃取液通过反复柱层析得地胆草的各种化学成分，该方法制备周期长，制备量少，仅适合实验室少量制备。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，该方法操作简单，制备量大。本发明是通过以下技术方案实现的—种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，其特征在于包含以下步骤1)超临界萃取将地胆草全草粉碎，过20目筛，置于萃取釜中，采用超临界CO2萃取，通入甲醇作为夹带剂参与萃取，收集萃取物；2)石油醚脱脂向上述萃取物中加入2 5倍量石油醚回流提取1 3次，离心分离固液，得脱脂物；3)纯化将上述脱脂物用低碳醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，过滤除去活性炭，脱色液回收溶剂至适量体积，缓慢加入适量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯。所述的地胆草总内酯为倍半萜内酯，包括吉玛烷内酯型、愈创木内酯型和榄香烷内酯型。所述步骤1)中的萃取参数为萃取温度为25_40°C，萃取压力为15_30MPa，CO2流量为15-25L/h，萃取时间为2-4h，分离釜I温度为20_30°C，压力为6_12MPa，分离釜II温度为12-15°C，压力为4-6MPa。所述步骤3)中的低碳醇为C1-C4醇，优选甲醇或乙醇。本发明的积极效果是(1)超临界萃取，萃取过程耗能低，萃取剂(X)2来源丰富、清洁无污染。(2)本发明使用的溶剂系统较为简单，还具有低成本，回收率高的优点。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取地胆草全草1kg，粉碎过20目筛，加入至萃取釜中，采用超临界CO2萃取，通入 200ml甲醇作为夹带剂参与萃取，设定萃取参数为萃取温度40°C，萃取压力15MPa，萃取时间2h，CO2通入的量为15L/h，设定分离釜I温度为20°C，压力为6MPa，分离釜II温度为 12°C，压力为4MPa，在分离釜II中收集萃取物，加入500ml石油醚回流提取3次，离心除去液体，再将脱脂物用甲醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，脱色液回收溶剂至原体积的1/3， 缓慢加入8倍量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯晶体10. Sg。实施例2 取地胆草全草1kg，粉碎过20目筛，加入至萃取釜中，采用超临界(X)2萃取，通入 300ml甲醇作为夹带剂参与萃取，设定萃取参数为萃取温度25°C，萃取压力30MPa，萃取时间4h，CO2通入的量为25L/h，设定分离釜I温度为25°C，压力为12MPa，分离釜II温度为 15°C，压力为6MPa，在分离釜II中收集萃取物，加入800ml石油醚回流提取1次，离心除去液体，再将脱脂物用乙醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，脱色液回收溶剂至原体积的1/4， 缓慢加入10倍量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯晶体11. 2g。实施例3 取地胆草全草^g，粉碎过20目筛，加入至萃取釜中，采用超临界(X)2萃取，通入 1.2L甲醇作为夹带剂参与萃取，设定萃取参数为萃取温度30°C，萃取压力^MPa,萃取时间2. 5h，CO2通入的量为18L/h，设定分离釜I温度为22°C，压力为8MPa，分离釜II温度为 13°C，压力为6MPa，在分离釜II中收集萃取物，用2. 5L石油醚回流提取2次，离心除去液体，再将脱脂物用异丙醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，脱色液回收溶剂至原体积的1/4， 缓慢加入10倍量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯晶体48. 7g。实施例4 取地胆草全草10kg，粉碎过20目筛，加入至萃取釜中，采用超临界(X)2萃取，通入 2L甲醇作为夹带剂参与萃取，设定萃取参数为萃取温度35°C，萃取压力20MPa，萃取时间 3h，CO2通入的量为22L/h，设定分离釜I温度为25°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为14°C， 压力为5MPa，在分离釜II中收集萃取物，用5L石油醚回流提取3次，离心除去液体，再将脱脂物用甲醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，脱色液回收溶剂至原体积的1/5，缓慢加入7倍量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯晶体100. 3g。
权利要求
1.一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，其特征在于包含以下步骤1)超临界萃取将地胆草全草粉碎，过20目筛，置于萃取釜中，采用超临界CO2萃取，通入甲醇作为夹带剂参与萃取，收集萃取物；2)石油醚脱脂向上述萃取物中加入2 5倍量石油醚回流提取1 3次，离心分离固液，得脱脂物；3)纯化将上述脱脂物用低碳醇加热溶解，加入活性炭回流脱色，过滤除去活性炭，脱色液回收溶剂至适量体积，缓慢加入适量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯。
2.如权利要求所述的一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，其特征在于所述的地胆草总内酯为倍半萜内酯，包括吉玛烷内酯型、愈创木内酯型和榄香烷内酯型。
3.如权利要求所述的一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，其特征在于所述步骤 1)中的萃取参数为萃取温度为25-40°C，萃取压力为15-30MPa，CO2流量为15_25L/h，萃取时间为2-4h，分离釜I温度为20-30°C，压力为6-12MPa，分离釜II温度为12_15°C，压力为 4-6MPa。
4.如权利要求所述的一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，其特征在于所述步骤 3)中的低碳醇为C1-C4醇，优选甲醇或乙醇。
全文摘要
本发明涉及了一种从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，尤其是涉及一种应用超临界萃取的方法从地胆草中制备地胆草总内酯的方法，方法步骤包括取地胆草全草粉碎，置于超临界萃取釜中，采用超临界CO2萃取，在分离釜中收集萃取物，用石油醚回流脱除脂溶性杂质，再将脱脂物用低碳醇热溶，加入活性炭回流脱色，脱色液回收溶剂至适量体积，缓慢加入适量水，放置，析出晶体，滤出得地胆草总内酯。本发明工艺路线环保、效率高、简单易操作，可实现大量制备。
文档编号A61K36/28GK102178717SQ201110117910
公开日2011年9月14日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司