专利名称：取代的酰肼类化合物及其制备方法、药物组合物和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，更具体涉及取代的酰肼类化合物及其制备方法、药物组合物和用途。该类化合物可用于制备治疗B-Raf及其同工酶或突变体(如B-Rafv600e)引起的疾病的药物。
背景技术：
Raf激酶及其介导的Raf/MEK/ERK (MAPK)通路在肿瘤进展及转移过程中具有显著作用。目前已知，所有真核细胞中均存在MAPK这一转导通路，其通过Ras、Raf、MEK及ERK的特异性级联磷酸化将信号由细胞外传入细胞核内。在许多肿瘤细胞中，这一通路上调，而Raf为该通路中的一个关键激酶，可通过依赖或不依赖Ras的方式发挥其信号转导调节作用。作为Raf激酶的下游底物，激活的MEK磷酸化ERK，而ERK通过作用多种底物以调节细胞功能。一旦该通路发生过度激活，细胞增殖的加速与细胞生存期的延长可导致肿瘤的形成及发展。临床前研究发现，包括血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子^ O3DGF-P)、表皮生长因子(EGF)及转化生长因子a (TGF- a )等多种生长因子一旦与其同源受体结合以后，即可通过受体酪氨酸激酶自体磷酸化的方式激活Raf/MEK/ERK通路。Raf激酶有三个同工酶，包括A-Raf、B_Raf与C-Raf，与细胞增殖、分化、生存、附着及血管生成的调节密切相关。它们有不同的调节方式。迄今已发现Raf激酶在多种肿瘤中存在异常激活，主要涉及B-Raf与C-Raf B-raf主要在恶性黑色素瘤与乳头状甲状腺癌中突变或过度表达；C_Raf 主要在富血管的实体肿瘤中异常激活。除了可能参与肿瘤形成外，B-Raf同C-Raf与新生血管的生成也密切相关，B-Raf可以上调VEGFR。肿瘤转移与Raf激酶的相关性可能归因于ras基因的参与。目前已知50%的转移性肿瘤存在ras基因的突变，进而通过Raf/MEK/ERK通路发挥作用。针对恶性黑色素瘤和乳头状甲状腺癌的研究同样发现，B-Raf的激活与肿瘤的高转移性相关。因此，Raf激酶不但参与了肿瘤的形成及发展，针对Raf激酶进行抑制可能成为靶向治疗的有效途径之一。B-Raf在许多肿瘤细胞中都出现突变，而约80%的恶性黑色素瘤细胞株存在B-Raf的突变。许多研究都表明B-Raf/MEK/ERK通路很可能参与了恶性黑色素瘤的发生、发展及转移。多项临床研究结果显示，口服多靶点药物索拉非尼(sorafenib)具有较为广谱的抗肿瘤作用。索拉非尼不但可以抑制Raf激酶，阻断Raf/MEK/ERK通路，而且还能够抑制多种受体酪氨酸激酶，其中包括与促新生血管有关的VEGFR-2、VEGFR-3与H)GFR、C-Kit、Ret、FLT。目前美国已批准将转移性肾癌(renal cell cancer，RCC)和肝癌等作为索拉非尼治疗的适应证，并开展了多项针对其他肿瘤治疗疗效的临床试验。由于B-Raf、C-Raf以及它们的突变体，如B-Rafv6,的活性位点结构十分相似，所以活性化合物往往可以同时抑 制这些酶及其突变体，但也可表现出一定程度的选择性。针对B-Raf及其V600E突变体的抑制剂的抗肿瘤药物研究已经取得令人鼓舞的进展。如化合物PLX4032，它由日本第一三共株式会社和罗氏共同开发，针对黑色素瘤处于三期临床研究。因为一半的病人含有B_RafV6°°E的突变，在临床实验时，挑选了含有B_RafV6°°E突变体的转移性黑色素瘤(metastatic melanoma)病人,发现80%的病人对PLX4032有反应。紧随PLX4032，还有其他的B-Raf及其同工酶抑制剂处于临床前及临床研究中。如，葛兰素史克公司的GSK-2118436也是针对黑色素瘤的治疗，目前也已经进入了三期临床研究。近年来,“计算机辅助药物设计”(Computer-Aided Drug Design, CADD)已成为现代药物研究与开发的一个重要方法和工具，被广泛地应用于先导化合物的发现与优化。其原理是通过大量计算，运用计算模拟、分子对接和相似性分析等多种方法在寻找、设计和优化成药性高的可以与某一特定疾病靶标蛋白结合的化学结构，为进一步的分子、细胞、动物和临床研究提供高效可靠的小分子先导化合物。综上所述，以B-Raf激酶为靶标，结合CADD和各种水平的生物活性测试试验，设计并合成的小分子化合物，对开发抗肿瘤药物具有重要的现实意义。本发明综合运用CADD和酶抑制活性实验，发现了一类取代的酰肼类化合物具有抑制B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)的活性。本发明进一步运用合理药物设计 方法针对此化合物进行结构修饰获得了一类结构全新的取代酰肼类化合物，并测试此类化合物在体外酶水平实验测试中抑制B-Raf及其V600E突变体的活性，结果证明本申请化合物具有较强的B-Raf及其V600E突变体的抑制活性。并且本发明进一步在MTT细胞实验中，发现本发明化合物具有明显的抗肿瘤活性。
发明内容
本发明以B-Raf激酶为靶标设计了一类取代的酰肼类化合物，发明了其制备方法，并测定了该类化合物抑制B-Raf及其V600E突变体的活性和杀伤肿瘤细胞的能力。本发明的一个目的是提供靶向B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)的、具有抗癌作用的新型取代的酰肼类化合物，其结构通式如式I所示。本发明的另一个目的是提供上述取代的酰肼类化合物的制备方法。本发明还提供包含治疗有效量的一种或多种上述取代的酰肼类化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。本发明的再一个目的是提供作为B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)抑制剂的上述取代的酰肼类化合物在制备预防和/或治疗B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)导致的相关疾病方面的药物中的用途。本发明所涉及的取代的酰肼类化合物可作为B-Raf及其同工酶或突变体(如B-Rafv600e)的小分子抑制剂，通过抑制B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)而抑制肿瘤细胞的生长。因此可开发成为新的抗肿瘤药物，用于预防或治疗B-Raf及其同工酶或突变体(如B_RafV6°°E)引起的各类疾病,如黑色素瘤(melanoma),结肠癌(colon cancer)和甲状腺癌(thyroid carcinoma)等。根据本发明的一个目的，本发明提供具有如下通式I结构的取代的酰肼类化合物
权利要求
1.具有如下通式I结构的取代的酰肼类化合物
2.如权利要求I所述的取代的酰肼类化合物，其具有如下结构
3.如权利要求I所述的取代的酰肼类化合物，其具有如下结构
4.如权利要求I所述的取代的酰肼类化合物，其具有如下结构
5.如权利要求I所述的取代的酰肼类化合物，其为以下化合物
6.权利要求I所述的取代的酰肼类化合物的制备方法，其中，Ia的合成方法包括如下步骤
7.包含治疗有效量的一种或多种权利要求I所述的取代的酰肼类化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。
8.权利要求I所述的取代的酰肼类化合物在制备预防和/或治疗B-Raf及其同工酶或突变体导致的疾病的药物中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，所述B-Raf及其同工酶或突变体导致的疾病为黑色素瘤、结肠癌或甲状腺癌。
全文摘要
本发明涉及具有如下通式I结构的取代的酰肼类化合物及其制备方法、药物组合物和用途。该类化合物可用于制备治疗B-Raf及其同工酶或突变体(如B-RafV600E)引起的疾病的药物。
文档编号A61K31/381GK102775381SQ20111012476
公开日2012年11月14日 申请日期2011年5月13日 优先权日2011年5月13日
发明者张奇军, 张小东, 徐志建, 徐炜均, 曾步斌, 朱维良, 李波, 杨卓, 王改红, 王贺瑶, 罗小民, 罗成, 蒋华良, 闫桂蕊, 陈凯先, 黄贤贵 申请人:中国科学院上海药物研究所, 华东理工大学, 南京派乐兴医药科技有限公司