专利名称：一种羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明属于兽用抗生素制剂领域，涉及一种羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法。
背景技术：
头孢噻呋又名塞得福(ceftiofur)，是第一个动物专用的头孢类抗生素，由于其突出的优点如抗菌谱广、抗菌活性强、药物残留少、毒副作用小、不易通过血脑屏障，在国内外兽医临床上的应用日趋广泛。头孢噻呋为酸碱两性化合物，可与氢氧化钠及盐酸反应生成酸性可溶性盐及碱性可溶性盐，其钠盐及盐酸盐的干燥粉末很稳定。该药对临床及标准菌株具有较大的抗菌活性；具有稳定的内酰胺环，不易产生耐药性及交叉耐药性，尤其可用于易产生耐药性的金黄色葡萄球菌感染，在世界各地广泛应用。头孢噻呋通过作用于转达肽酶而阻断粘肽的合成，粘肽是细菌细胞壁的重要组成成分，故可使细菌细胞壁缺失而死亡，从而达到快速杀菌的效果。现在头孢噻呋应用较多的制剂主要是预混剂、头孢噻呋钠注射液，用药后药物在血液及组织中均匀分布，只有少量能够到达靶部位，既造成了药物的大量浪费，也增大了药物的毒副作用及在体内的残留，因此开发具有靶向性的制剂已经迫在眉睫。本发明研制了一种靶向纳米粒制剂，专门用于治疗动物体内肝脏细菌感染。肝靶向微球能够将治疗药物最大限度的集中于肝部组织，使治疗药物在肝部的聚集浓度能够超出传统制剂数倍乃至数百倍，因此治疗效果显著提高，因而能够提高药物的生物利用度。另外，由于靶向制剂提高了抗菌效率，因此有可能降低细菌对药物产生抗药性的可能，从而延长兽医临床更有效地使用抗菌药的时间。本发明选用的包 埋头孢噻呋的材料是羧甲基壳聚糖，羧甲基壳聚糖是一种天然生物大分子材料，在体内具有较好的生物可降解性，来源广泛，价格较低，因此有实现工业生产的潜力。
发明内容
本发明的目的在于研制一种头孢噻呋的新剂型，有效提高药物的生物利用度，延缓药物的释放，增强药效，降低毒副作用，达到缓释、长效、靶向的目的。为达到上述目的，本发明提供了一种头孢噻呋的羧甲基壳聚糖纳米粒，该纳米粒以头孢噻呋为主要成分，以羧甲基壳聚糖载体。羧甲基壳聚糖能够在体内自动降解，并且无毒性、无免疫原性，具有很高的生物相容性，因此可以制备出高度安全性的羧甲基壳聚糖纳米粒。
具体实施例方式本发明中羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法步骤如下:
(I)将一定质量的羧甲基壳聚糖溶于蒸馏水中；(2)将一定量头孢噻呋加入TPP水溶液中溶解；
(3)在磁力搅拌(700r / min)下，将TPP水溶液以I滴/ 3 s的速度滴加人上述羧甲基壳聚糖溶液中，通过阴阳离子的静电作用自发形成纳米粒；
(4)将混悬液于4°C下高速离心(12000 r / min) 30 min，收集沉淀物；
(5)用纯水洗涤3次，冷冻干燥即得。 下面结合具体实例进一步说明本发明。实施例1
精确称量3g羧甲基壳聚糖，溶解于IOOml蒸馏水中，搅拌至形成澄清透明的溶液，配制浓度为4% (体积/体积)的TPP溶液，精确称量0.3g头孢噻呋溶解于TPP溶液中；在磁力搅拌(700 r / min)下，将TPP水溶液以I滴/ 3 s的速度滴加人上述羧甲基壳聚糖溶液中，通过阴阳离子的静电作用自发形成纳米粒；将混悬液于4°C下高速离心(12 000 r /min) 30 min，收集沉淀物；用纯水洗涤3次，冷冻干燥即得。上述方法制备的羧甲基壳聚糖纳米粒，外形为圆形，形状规整且无聚集现象，粒径为100nm±20nm,粒径分布较窄,体外药物释放实验结果表明，头孢噻呋在纳米粒中的释放时间达7天，具有非常显著的缓释作用。用兔子做动物实验表明，羧甲基壳聚糖包埋的头孢噻呋较传统的多拉菌素制剂吸收要更快，生物利用度更高。实施例2
精确称量6g羧甲基壳聚糖，溶解于IOOml蒸馏水中，搅拌至形成澄清透明的溶液，配制浓度为5% (体积/体积)的TPP溶液，精确称量0.4g头孢噻呋溶解于TPP溶液中；在磁力搅拌(700 r / min)下，将TPP水溶液以I滴/ 3 s的速度滴加人上述羧甲基壳聚糖溶液中，通过阴阳离子的静电作用自发形成纳米粒；将混悬液于4°C下高速离心(12 000 r /min) 30 min，收集沉淀物；用纯水洗涤3次，冷冻干燥即得。上述方法制备的羧甲基壳聚糖纳米粒，外形为圆形，形状规整且无聚集现象，粒径为220nm±40nm,粒径分布较窄,体外药物释放实验结果表明，头孢噻呋在纳米粒中的释放时间达7天，具有非常显著的缓释作用。用兔子做动物实验表明，羧甲基壳聚糖包埋的头孢噻呋较传统的多拉菌素制剂吸收要更快，生物利用度更高。实施例3
精确称量20g羧甲基壳聚糖，溶解于100ml蒸馏水中，搅拌至形成澄清透明的溶液，配制浓度为10% (体积/体积)的TPP溶液，精确称量1.8g头孢噻呋溶解于TPP溶液中；在磁力搅拌(700 r / min)下，将TPP水溶液以I滴/ 3 s的速度滴加人上述羧甲基壳聚糖溶液中，通过阴阳离子的静电作用自发形成纳米粒；将混悬液于4°C下高速离心(12 000 r /min) 30 min，收集沉淀物；用纯水洗涤3次，冷冻干燥即得。上述方法制备的羧甲基壳聚糖纳米粒，外形为圆形，形状规整且无聚集现象，粒径为640nm±40nm,粒径分布较窄,体外药物释放实验结果表明，头孢噻呋在纳米粒中的释放时间达8天，具有非常显著的缓释作用。用兔子做动物实验表明，羧甲基壳聚糖包埋的头孢噻呋较传统的多拉菌素制剂吸收要更快，生物利用度更高。
权利要求
1.一种羧甲基壳聚糖纳米粒，其特征在于以头孢噻呋为主要成分，以羧甲基壳聚糖为载体。
2.根据权利要求1所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒，其特征在于头孢噻呋与羧甲基壳聚糖的重量比为1:l(Tl:30。
3.根据权利要求2所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒，其特征在于头孢噻呋与羧甲基壳聚糖的重量比的最佳范围为1:4 1:8。
4.根据权利要求1所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒，其特征在于纳米粒的粒径范围为100_700nmo
5.根据权利要求1所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法，其特征如下:将羧甲基壳聚糖溶于蒸馏水中；将一定量头孢噻呋加入TPP水溶液中溶解；在磁力搅拌(700 r /min)下，将TPP水溶液以I滴/ 3 S的速度滴加人上述壳聚糖溶液中，通过阴阳离子的静电作用自发形成纳米粒；将混悬液于4°C下高速离心(12 000 r / min) 30 min,收集沉淀物.用纯水洗涤3次，冷冻干燥即得。
6.根据权利要求5所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法，其特征在于羧甲基壳聚糖浓度范围为3°/Γ20% (质量/体积)。
7.根据权利要求5所述的兽用羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法，其特征在于TPP的浓度范围为29Γ10% ( 体积/体积)。
全文摘要
本发明属于兽药的技术领域，本发明公开了一种羧甲基壳聚糖纳米粒的制备方法，以头孢噻呋为主要成分，以羧甲基壳聚糖为载体，头孢噻呋与羧甲基壳聚糖的重量比为110~130，头孢噻呋与羧甲基壳聚糖的重量比的最佳范围为14~18。制备的羧甲基壳聚糖纳米粒，外形为圆形，形状规整且无聚集现象，粒径较小，粒径分布较窄，以兔为动物模型的动物实验表明，羧甲基壳聚糖包埋的头孢噻呋较传统的头孢噻呋制剂吸收要更快，生物利用度更高。
文档编号A61K47/36GK103083242SQ20111034289
公开日2013年5月8日 申请日期2011年11月3日 优先权日2011年11月3日
发明者郝智慧, 王艳玲 申请人:青岛康地恩药业股份有限公司