专利名称：一种禽用油乳剂疫苗及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种疫苗及其制备方法，尤其是一种禽用油乳剂疫苗及其通过罐体恒流乳化的制备方法。
背景技术：
油乳剂灭活疫苗是兽用生物制品中的一种常用剂型，以其免疫刺激持续、免疫保护期长的特点在疫苗的应用方面有着不可替代的作用，但油乳剂灭活疫苗在制作过程中由于工艺配方、温度差异等因素的影响，往往造成油乳剂灭活疫苗的不稳定，影响了灭活疫苗的实际应用。由于油乳剂疫苗具有较大的油水界面，属于热力学不稳定体系。其不稳定性主要表现有分层、破裂、转型和败坏，以分层、破裂最为常见，是疫苗生产者长期存在的一个难题。佐剂制作和乳化过程的不合理，或破乳后再乳化，均难以保证乳化效果。生产免疫性好、安全性高、易于使用、保存期长的油乳剂疫苗，需要控制合理的工艺流程和技术参数。油包水型油乳剂疫苗通常是将油相和水相(毒液)在乳化剂的作用下， 均质乳化，形成稳定的油包水型乳化体系。通常油乳剂疫苗的制备方法如下将生产用毒种用磷酸盐缓冲溶液或生理盐水稀释一定倍数，接种于易感鸡胚中，收获胚液，浓缩灭活作为水相，水相油相按比例进行乳化， 制成一种安全、稳定、高效的灭活疫苗。影响油乳剂疫苗性状的因素主要有，油相水相比例、乳化剂种类和比例以及乳化条件，而这三者之间是相互影响的。—、油相水相比例。油包水剂型的油乳剂疫苗水相为分散性，水相比例大会使分散相液滴的界面膜不稳定，容易出现破乳或转型，影响疫苗的保存时间，而水相比例过小，会增加疫苗粘度，造成注射困难，不利于临床应用。二、乳化剂和助乳化剂的种类和比例。乳化剂均为表面活性剂，可降低乳化后形成内向液滴而产生的自由能；助乳化剂可使油水两相之间形成稳定的界面膜，并有增粘、悬浮的作用。所以乳化剂选用比例不但影响疫苗性状，而且影响疫苗的效价。三、乳化工艺条件。分为乳化时间、温度和乳化剪切速度。在开始阶段，搅拌促使小液滴的形成，继续搅拌增加小液滴碰撞机会，持续过久搅拌，分散的小液滴会合并增大，甚至完全破乳；适宜的乳化温度，乳液粘度适中，界面膜不易发生破裂，又有利于乳化剂水化作用；适中的剪切速度可以使油水相充分混合，剪切速度过高会将气泡带入体系，形成三相体系，使乳剂不稳定。选择适当的剪切速度，使分散相液滴的大小和均勻度与乳化剂的比例相适应，使疫苗性状稳定，粘度适宜，保存时间长，易于注射。此外，粘度对乳剂稳定性的影响也不容忽略，通常粘度大的体系不容易分层，破裂，但是对于疫苗注射剂而言，粘度不宜太大，否则会给注射带来不便，同时会引起动物的过激反应。因此要设法使较低粘度的乳液保持很好的粘度。
油乳剂灭活疫苗的稳定性通过离心法(3000r/min离心15min)、定时保存法 (2-8°C放置1年不分层)、抗老化试验(37°C放置21天不分层)来检测。事实上离心法检测不分层的乳液，2-8°C定时保存检测常有分层的现象。
油乳剂疫苗的稳定性一直以来就是疫苗生产的难题，由于乳化不均勻，致使乳液的稳定性不好，2-8°C极易分层，直接影响产品的质量和效价。常用的乳化技术一是使用胶体磨，主要是通过转速和齿间距来控制分散相液滴的半径，胶体磨使用时调节麻烦，规模小，不易实现自动控制，而且多为敞开式非管线式操作， 不适于工业化的无菌生产。二是采取罐内的均质机进行乳化，这种均质机适用于实验室研究和小规模的生产，对于产业化时需要乳化量较大的情况，会出现局部剪切过度，导致体系破坏，很难达到均勻的乳化效果。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种能应用于罐体批量生产的禽用油乳剂疫苗及其制备方法。为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是一种禽用油乳剂疫苗，包括油相、水相，水相组成为浓缩的疫苗抗原、亲水性表面活性剂，油相组成为白油、亲油性表面活性剂、助乳化剂。所述浓缩的疫苗抗原为灭活的禽类病毒微生物，包括新城疫病毒、禽流感病毒、支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、法氏囊病毒中的一种或任意几种病毒的混合物。所述油乳剂疫苗的水油体积比为1 1.5-1 4(V/V)0所述亲水性表面活性剂选自吐温80，用量为依水相比例而定，占水相体积总量的 4% -6%。所述油乳剂疫苗水油比例为1 2 (V/V)，吐温80用量为5% (V/V)。 所述亲油性表面活性剂选自司盘80、司盘85中的一种，助乳化剂选自硬脂酸铝。所述油相的白油、亲油性表面活性剂、助乳化剂重量配比为94 6 2。上述的禽用油乳剂疫苗的制备方法，包括以下步骤(1)称取处方量白油，加入亲油性表面活性剂，搅拌均勻后加入助乳化剂，加热使其充分混合均勻后，加入到第一乳化反应釜中，降温至35-40°C ；(2)打开第一乳化反应釜的出料口阀门，开启乳化机，乳化机的剪切转速恒为 2500-3000r/min，同时开始从第一乳化反应釜的进料口加入按配比配好的水相，控制加水相的流速为0. 02-0. 15L/s，至水相加完；(3)乳化过程分为4个阶段，每个阶段保持恒定流速0. 4-0. 5L/s,管线式乳化机的剪切转速为2500-3000r/min 第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化1遍的时间；第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入第二乳化反应釜，停止乳化；第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化；第四阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化2遍的时间。
步骤(2)中水相流速为0. 10L/s,乳化装置的转速恒定为2900r/min。步骤(3)中乳化过程中流速恒定为0. 5L/s，剪切转速恒定为2900r/min。本发明的有益效果是本发明提供的油乳剂疫苗成熟的乳化生产工艺，用于油乳剂疫苗批量生产，通过外置乳化装置的勻速剪切，持续控制乳液流过乳化装置时的流速、温度、剪切速度，进行连续剪切，不流死角，同时菌液通过乳化反应釜的置换过程避免流体的短路，使乳化更彻底。从而达到改善乳液粒径的均一性和均勻度的目的，解决乳液保存中存在的稳定性问题。通过合理的乳化生产过程和外置乳化装置，解决了规模性无菌生产的批量生产问题，使乳化条件稳定，不受产量的限制，使规模性乳化生产也能获得稳定的乳化体系。可完成200万ml疫苗产量的批量生产，生产的疫苗2-8°C保存1年不分层。将乳液放于5°C、35°C温度下，每12小时改变一次温度，经过12天进行比较观察，无分层现象。
具体实施例方式下面结合具体实施方式
对本发明作进一步详细说明本发明公开一种能应用于罐体批量生产的禽用油乳剂疫苗及其制备方法，采用外置乳化装置，连续进行剪切，不留死角，同时毒液通过乳化反应釜的置换过程避免流体的短路，使乳化更彻底。本发明所说的外置乳化装置是由管线式乳化机和冷却装置组成，通过乳化机的高速剪切，完成乳化过程，获得理想的乳化效果。油乳剂疫苗包括油相、水相，水相组成为浓缩的疫苗抗原、亲水性表面活性剂，比例为 1 1.5-1 4% (V/V)，优选 1 1.6(V/V),1 2 (V/V), 1 3(V/V)，亲水性表面活性剂选自吐温80，用量为依水相比例而定，占水相体积总量的4% -6% (V/V)，水相比例 1 1.6,1 2,1 3时，亲水性表面活性剂用量分别为4%，5%，6%。油相组成为白油、 亲油性表面活性剂、助乳化剂，重量配比为94 6 2，加热充分混合搅勻，其混合过程中先加入亲油性表面活性剂，再加助乳化剂。乳化工序具体步骤如下1、加水相。将油相加入到第一乳化反应釜中，降温至35_40°C后，打开第一乳化反应釜出料口阀门，打开管线式乳化机开关，同时从第一乳化反应釜进料口加入水相，控制水相的加入速度为0. 08-0. 15L/s，优选0. 10L/s,0. 12L/s，乳化装置的温度控制在30_35°C， 乳化装置的转速恒为2500-3000r/min，优选2900r/min。2、乳化过程分为4个阶段，每个阶段保持流速0. 4-0. 5L/s,管线式乳化机的剪切转速为2500-3000r/min，优选2900r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化1遍的时间； 第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入第二乳化反应釜，停止乳化；第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化；第四阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化2遍的时间。乳化结束后，取IOml乳液，3000转/分钟离心15分钟，下层分离的水不超过0. 5ml为乳化合格。 优化为步骤(2)中水相流速为0. lOL/s，乳化装置的转速恒定为2900r/min。步骤(3)中乳化过程中流速恒定为0. 5L/s，剪切转速恒定为2900r/min。其中温度和粘度直接影响乳液是否能勻速的流经乳化装置。保持流经乳化装置流体的粘度控制在2s以下(中华人民共和国兽用生物制品规程2000年版的测试方法)。实施例1制备200万ml新城疫油乳剂灭活疫苗。将浓缩后的新城疫抗原63. 27万ml，灭活后加吐温-80 3. 33万ml，备用。取 125. 51 万ml (密度 0. 818g/ml，1026. 7kg)白油，先加司盘-80 6. 592 万ml (密度为 0. 994g/ ml, 65. 5kg)，再加硬脂酸铝21. 8kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度35°C加入水相，水相流速为0. lOL/s，乳化装置的剪切速度为2900r/min。水相加入后，开始乳化过程， 控制流速为0. 5L/s，乳化装置转速为2900r/min，第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化60min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入第二乳化反应釜，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化120分钟，乳化结束。实施例2制备500万ml减蛋综合征油乳剂灭活疫苗。将浓缩后的减蛋综合征抗原117. 5万ml，灭活后加吐温-80 7. 5万ml，备用。取 353. 36 万ml (密度 0. 818g/ml, 2890. 5kg)白油，先加司盘80 18. 56 万ml (密度0. 994g/ml， 184. 5kg)，再加硬脂酸铝61. 5kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度35°C加入水相，水相流速为0. 15L/s，乳化装置的剪切速度为2900r/min。水相加入后，开始乳化过程， 控制流速为0. 4L/s，乳化装置转速为2900r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化160分钟，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化320分钟。实施例3制备500万ml禽流感油乳剂灭活疫苗。将浓缩后的禽流感抗原125万ml，灭活后加吐温80 5万ml，备用。取353. 36万 ml (密度 0. 818g/ml，2890. 5kg)白油，先加司盘 80 18. 56 万 ml (密度 0. 994g/ml，184. 5kg)， 再加硬脂酸铝61. 5kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至 40°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度40°C加入水相，水相流速为0. 08L/S,乳化装置的剪切速度为2900r/min。水相加入后，开始乳化过程，控制流速为 0. 5L/s，乳化装置转速为2900r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化160min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化320分钟。实施例4制备200万法氏囊油乳剂灭活疫苗将浓缩的法氏囊抗原70. 5万ml，灭活后加吐温80 4. 5万ml，备用。取106. 01万 ml 白油(密度 0. 818g/ml，867. 15kg)，先加司盘80 5. 568万ml (密度 0. 994g/ml，55. 35kg)， 再加硬脂酸铝18. 45kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至 40°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度40°C加入水相，水相流速为0. 08L/s,乳化装置的剪切速度为2500r/min。水相加入后，开始乳化过程，控制流速为 0. 5L/s，乳化装置转速为2500r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化160min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化320分钟
实施例5制备200万ml鸡新城疫、减蛋综合征二联油乳剂灭活疫苗。将收获的减蛋综合征抗原25万ml，浓缩至16. 7万ml，鸡新城疫抗原50万ml，灭活后加吐温-80 3. 3万ml，备用。125. 51万ml (密度0. 818g/ml, 1026. 7kg)白油，先加司盘-80 6. 592万ml (密度为0. 994g/ml，65. 5kg)，再加硬脂酸铝21. 8kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度35°C加入水相，水相流速为0. 08L/s，乳化装置的剪切速度为3000r/min。 水相加入后，开始乳化过程，控制流速为0. 5L/s,乳化装置转速为3000r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化60min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化120分钟。实施例6制备500万ml鸡新城疫、禽流感二联油乳剂灭活疫苗。将收获的新城疫抗原150万ml，浓缩至62. 5万ml，禽流感抗原150万ml，浓缩至 62. 5 万ml，灭活后加吐温-80 7. 5 万ml，备用。取 353. 36 万ml (密度 0. 818g/ml，2890. 5kg) 白油，先加司盘80 18. 56万ml (密度0. 994g/ml, 184. 5kg)，再加硬脂酸铝61. 5kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度35°C加入水相，水相流速为0. 12L/s，乳化装置的剪切速度为2900r/min。水相加入后，开始乳化过程，控制流速为0. 45L/s,乳化装置转速为 2900r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化 150min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化300分钟。实施例7 制备200万ml鸡新城疫、支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联油乳剂灭活疫苗取水相浓缩6倍NDV La Sota株、IBV M41株、AIV HL株病毒液和浓缩4倍的EDSV AV127株病毒液按1 1 1 1的比例混合，取混合后的病毒液50万ml，灭活后加入吐温2万ml作为水相。取142. 5万ml (密度0. 818g/ml，1165. 6kg)白油，先加司盘80 7.5 万ml (密度0. 994g/ml，74. 55kg)，再加硬脂酸铝24. 8kg，加热120°C充分搅拌至溶液透明。 加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，打开乳化装置，同时打开乳化装置冷却水使乳化装置温度35°C加入水相，水相流速为0. lOL/s，乳化装置的剪切速度为2800r/min。水相加入后，开始乳化过程，控制流速为0. 5L/s,乳化装置转速为2800r/min。第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化60min，第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入乳化反应釜二，停止乳化。第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，乳化至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化。第四阶段。从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化120分钟。实施例8用罐内均质乳化工艺生产鸡新城疫疫苗200万ml将收获的新城疫抗原200万ml，浓缩至63. 27万ml，灭活后加吐温-80 3. 33万ml， 备用。125. 51万ml (密度0. 818g/ml，1026. 7kg)白油，先加司盘-80 6. 592万ml (密度为 0. 994g/ml，65. 5kg)，再加硬脂酸铝21. 8kg，，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，开启搅拌，搅拌速度为50转/min，加入水相速度为0. 5L/s，乳化机转速为12000转/分钟，乳化6分钟，制备疫苗。实施例9将收获的新城疫抗原200万ml，浓缩至63. 27万ml，灭活后加吐温-80 3. 33万ml， 备用。125. 51万ml (密度0. 818g/ml，1026. 7kg)白油，先加司盘-80 6. 592万ml (密度为 0. 994g/ml，65. 5kg)，再加硬脂酸铝21. 8kg，，加热120°C充分搅拌至溶液透明。加到第一乳化反应釜中，降温至35°C时，加水相，加水相速度为3000ml/min，调整尺距为7. 7mm，转速为 2800转/min，乳化5分钟。实施例10根据优选的实施例制备的新城疫病毒、禽流感病毒、减蛋综合征病毒、法氏囊病毒、支气管炎病毒或其二联四联苗的稳定性、安全性、无菌进行检测，相应的对优选的胶体磨、罐内均质机乳化技术制备的产品进行对比检测。1检测方法1. 1稳定性检测1. 1. 1离心法取IOml油乳剂疫苗加入离心管中，以3000转/分钟离心15分钟，
管底部无水分析出。1. 1. 2抗老化实验取IOml乳液至于30ml试管中，将其放入37°C温箱存放21天， 无水相析出。1. 1.3定时保存法2_8°C保存1. 1. 3稳定性加速试验法将乳液放于5°C、35°C温度下，每12小时改变一次温度， 共12天进行比较观察。1. 2 粘度用IOml吸管(上口内径2. 7mm，下口内径1.2ml)，吸取25°C左右的疫苗lml，令其垂直自然流出，记录流出0. 4ml所需要的时间，以秒记。1. 3安全检测取30日龄的SPF鸡10只，每只胸肌注射疫苗1ml，观察14天，注射部位或全身无不良反应。2检测结果优选的恒流乳化技术制备的新城疫病毒、禽流感病毒、减蛋综合征病毒、法氏囊病毒、支气管炎病毒及其二联四联苗的稳定性、安全性和无菌进行检测，相应的结果如下。以及本专利方法与优选的胶体磨、罐内均质机乳化技术制备的产品的对比结果如下。2. 1实验分组情况
权利要求
1.一种禽用油乳剂疫苗，包括油相、水相，其特征在于，水相组成为浓缩的疫苗抗原、亲水性表面活性剂，油相组成为白油、亲油性表面活性剂、助乳化剂。
2.根据权利要求1所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述浓缩的疫苗抗原为灭活的禽类病毒微生物，包括新城疫病毒、禽流感病毒、支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、法氏囊病毒中的一种或任意几种病毒的混合物。
3.根据权利要求1所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述油乳剂疫苗的水油体积比为 1 1. 5-1 4。
4.根据权利要求1或3所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述亲水性表面活性剂选自吐温80，用量为依水相比例而定，占水相体积总量的4% -6%。
5.根据权利要求4所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述油乳剂疫苗水油体积比例为1 2，吐温80用量为5%。
6.根据权利要求1所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述亲油性表面活性剂选自司盘80、司盘85中的一种，助乳化剂选自硬脂酸铝。
7.根据权利要求1或6所述的禽用油乳剂疫苗，其特征在于，所述油相的白油、亲油性表面活性剂、助乳化剂重量配比为94 6 2。
8.如权利要求1-7任一项所述的禽用油乳剂疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)称取处方量白油，加入亲油性表面活性剂，搅拌均勻后加入助乳化剂，加热使其充分混合均勻后，加入到第一乳化反应釜中，降温至35-40°C ；(2)打开第一乳化反应釜的出料口阀门，开启乳化机，乳化机的剪切转速恒为 2500-3000r/min，同时开始从第一乳化反应釜的进料口加入按配比配好的水相，控制加水相的流速为0. 02-0. 15L/s，至水相加完；(3)乳化过程分为4个阶段，每个阶段保持恒定流速0.4-0. 5L/s,管线式乳化机的剪切转速为2500-3000r/min 第一阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化1遍的时间；第二阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第二乳化反应釜的上端进料口，至第一乳化反应釜中疫苗全部移入第二乳化反应釜，停止乳化；第三阶段，从第二乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至第一乳化反应釜的上端进料口，至第二乳化反应釜中的疫苗全部移入第一乳化反应釜后，停止乳化；第四阶段，从第一乳化反应釜的下端出料口经乳化装置流至上端进料口，乳化时间为第一乳化反应釜中所有物料按流速乳化2遍的时间。
9.根据权利要求8所述的禽用油乳剂疫苗的制备方法方法，其特征在于，步骤(2)中水相流速为0. lOL/s，乳化装置的转速恒定为2900r/min。
10.根据权利要求8所述的禽用油乳剂疫苗的制备方法方法，其特征在于，步骤(3)中乳化过程中流速恒定为0. 5L/s，剪切转速恒定为2900r/min。
全文摘要
本发明公开了一种禽用油乳剂疫苗及其制备方法，采用恒流乳化的技术，利用外置乳化装置，连续进行反应釜置换式乳化，通过控制各种工艺条件，使乳液流经乳化装置后的液珠粒径小，粒径的差异小，分散均匀，从而确保乳液均一，提高疫苗的稳定性。恒流乳化技术不受批量的限制，处理量大，可在线连续无菌生产，节能高效，运转平稳，可用于规模性生产的罐体乳化工序。本发明所说的高稳定性油乳剂疫苗的水油体积比为1∶1.6-1∶4，水相中含禽用疫苗抗原和4％-6％亲水性表面活性剂，油相组成为94份白油、4份亲油表面活性剂和2份助乳化剂。
文档编号A61J3/00GK102389394SQ201110359618
公开日2012年3月28日 申请日期2011年11月15日 优先权日2011年11月15日
发明者刘建, 杨旭, 贾绍辉, 陈利红, 韩春贺 申请人:天津瑞普高科生物药业有限公司