专利名称：利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法
技术领域：
本发明涉及一种海产品废弃物的处理，尤其是一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法。
背景技术：
我们知道，海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。海参不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。现代研究表明，海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化、糖尿病以及抗肿瘤等作用。随着生活水平的提高和保健意识的增强，食用海参的人数在逐渐增加。因此，海参的加工量越来越大。而在加工剖解海参过程中会从解剖口流出大量粘稠的海参体腔液，该海参体腔液未被收集和利用，不仅造成了资源浪费，而且极易造成环境污染。海参皂苷是海参中的一类主要活性成分，其具有多种药理活性，如抗肿瘤作用、 提高免疫力、抗新血管形成、抗凝血、促进纤维蛋白溶解、抑制栓塞形成、抗炎作用(如关节炎)和抗放射活性以及抑制艾滋病病毒、乙肝病毒、单纯疤疹病毒等；另外，研究还发现海参皂苷具有广谱的抗真菌功效。海参皂苷在海参体壁真皮结缔组织、体腔、内腺管及内脏中均有分布。目前，国内外对海参体壁、海参加工废液(又称海参煮液)中的皂苷提取工艺方法进行了大量的研究，例如，2011年8月17日公开的CN102150851A发明专利申请公开的“海参皂苷及其制备方法、在食品药品中的应用”；又如2011年5月18日公开的 CN102060905A发明专利申请公开的“利用鲜海参加工废液制备海参皂苷Holotoxin A1对照品的工艺方法”。目前，还未发现利用海参体腔液提取海参皂苷的相关报道。
发明内容
为了克服现有技术中海参体腔液废弃及易造成环境污染的不足，本发明提供一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其是将海参体腔液进行过滤，去除包括沙石、参肠、呼吸树在内的不溶物；将过滤后的体腔液进行浓缩；将所得的浓缩体腔液拌入适量硅胶粉，进行鼓风干燥；将干燥后的固体物质进行粉碎，再采用石油醚进行提取脱脂；将脱脂的固形物去除石油醚后采用乙醇进行提取2 3次，收集提取液浓缩至无醇味；将该浓缩液以1. 5 2. 0倍柱体积/h的流速通过大孔吸附树脂柱，而后用水以同样的流速冲洗大孔吸附树脂柱去除杂质，再用乙醇洗脱被吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分，收集洗脱液减压浓缩至浸膏状；将浸膏物干燥，得海参皂苷干品。上述拌入浓缩体腔液的硅胶粉，其与浓缩体腔液的质量比不低于1 20。上述去除脂类物质所用的石油醚，其与粉碎后的固形物的体积与质量比不低于 2 1。
上述对去除脂类物质的固形物进行乙醇提取所采用的乙醇浓度为70 90%，其乙醇与固形物的体积与质量比不低于为6 1。本发明是将海参解剖时所流出的体腔液通过浓缩，拌入硅胶粉鼓风干燥，以减少处理体积；再采用石油醚脱脂，70 90%乙醇提取，提取液浓缩后利用大孔吸附树脂吸附海参皂苷，有效脱盐，能使体腔液中90%以上的皂苷得到富集，使分离的皂苷保存完好的结构和有效的生物活性。实验表明，从海参体腔液分离到海参皂苷，具有良好的抗真菌生物学效应。该工艺的主要特点是充分利用了解剖海参时流出的体腔液，变废为宝，减少对环境的污染，其操作简单，技术含量高，生产成本低，产品具有极高的利用价值。
具体实施例方式下面结合实施例结本发明做进一步说明。一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其具体步骤如下
(1)、将海参体腔液进行过滤处理，去除体腔液中包括沙石、参肠、呼吸树在内的不溶
物；
(2)、将过滤后的体腔液进行减压浓缩，温度控制在45 60°C，浓缩至盐粒析出；
(3)、将所得的浓缩液加入硅胶粉拌勻，采用鼓风干燥，干燥温度不超过60°C，其中，硅胶粉与浓缩体腔液的质量比不低于1 20;
(4)、将干燥后的固体物质进行粉碎处理，粉碎后的固形物利用石油醚提取，去除其中的脂类物质，其中，石油醚与固形物的体积与质量比不低于2 1;脱脂后的固形物挥去残留的石油醚；
(5)、将去除石油醚的固形物采用浓度为70 90%的乙醇溶液进行搅拌提取，其乙醇与固形物的体积与质量比不低于为6 1，提取完毕后，收集上清液；然后再重复上述的乙醇提取1 2次；合并上清液；
(6)、将上清液减压浓缩，温度控制在45 60°C，去除上清液中的乙醇成分，得浓缩液；
(7)、将所得的浓缩液以1.5 2. 0倍柱体积(BV)/h的流速通过大孔吸附树脂柱；而后采用4 6倍柱体积(BV)的水以同样的流速冲洗上述大孔吸附树脂柱，以去除大孔吸附树脂中残留的包括盐分、糖类、色素在内的杂质；再用4 6倍柱体积(BV)、浓度为60 70% 的乙醇，将吸附在大孔树脂上的海参皂甙成分洗脱下来，收集洗脱液减压浓缩，温度控制在 45 50°C，得浸膏状海参皂苷；
(8 )、将上述浸膏状海参皂苷干燥，得海参皂苷干品。实施例1
鲜海参20公斤，从后口 1/3处剖开，收集体腔液，在该体腔液中含有参肠、呼吸树、沙石等不溶物，体腔液经纱布滤过，滤除不溶物，收集清液共5. 5kg ；将清液加入到加压浓缩设备中，控制温度温度50°C，浓缩至盐粒析出，得0. 9kg浓缩液；在40g硅胶粉中加入0. Ikg 浓缩液，50°C鼓风干燥，干燥完毕后再加入0. Ikg浓缩液，50°C鼓风干燥，再重复以上步骤， 只至浓缩液完全干燥得236g固形物；将固形物粉碎加入石油醚500ml加热回流提取，去除其中的脂类物质，提取完毕后，滤除石油醚，固形物挥去石油醚后，加入浓度为70%乙醇 2000ml搅拌提取，提取2天后，采用离心机控制转速为2000r/min，离心20min，收集上清液； 所得沉淀再加入浓度为70%乙醇2000ml搅拌提取，再重复上述步骤1次，收集的上清液合并，减压浓缩去除乙醇成分，减压浓缩时温度控制在50°C，得浓缩液IL ；将该浓缩液以2BV/ h的流速通过AB-8型大孔吸附树脂柱(R35mmXH90mm)，而后用4BV水以2BV/h的流速冲洗上述大孔吸附树脂柱，以去除大孔吸附树脂中残留的包括盐分、糖类、色素在内的杂质；再用4BV的浓度为70%乙醇将吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分洗脱下来，收集洗脱液减压浓缩，温度控制在50°C，至浸膏状，将浸膏干燥，得海参皂苷干品。实施例2
鲜海参50公斤，从后口 1/3处剖开，收集体腔液，采用纱布滤除包括参肠、参花、沙石在内的不溶物，得清液共14kg ；清液加入到加压浓缩设备中，控制温度60°C，浓缩至盐粒析出，得2. 4kg浓缩液；在80g硅胶粉中加入0. 3kg浓缩液，60°C鼓风干燥，干燥完毕后再加入 0. 3kg浓缩液，60°C鼓风干燥，再重复以上步骤，只至浓缩液完全干燥得620g固形物；将固形物粉碎后加入石油醚1500ml加热回流提取，去除其中的脂类物质，提取完毕后，滤除石油醚，固形物挥去石油醚后，加入浓度为80%乙醇6000ml搅拌提取，提取2天后，采用三足式离心机控制转速为2000r/min，离心20min，收集上清液，所得沉淀再重复上述的乙醇提取2次；收集的上清液合并，减压浓缩去除乙醇成分，减压浓缩时温度控制在45°C，得浓缩液2. 8L ；将该浓缩液以1. 5BV/h的流速通过DlOl型大孔吸附树脂柱(R30mmXH100mm)，而后用6BV水以同样的流速冲洗上述大孔吸附树脂柱，以去除大孔吸附树脂中残留的包括盐分、糖类、色素在内的杂质；用6BV的60%乙醇，将吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分洗脱下来，收集洗脱液减压浓缩，温度控制在45°C，得浸膏状海参皂苷；将浸膏状海参皂苷干燥，得海参皂苷干品。实施例3
鲜海参20公斤，从后口 1/3处剖开，收集体腔液，将该收集液采用纱布过滤，去除含有参肠、呼吸树、沙石等不溶物，得清液5. 5kg ；将清液加入到加压浓缩设备中，控制温度 450C，浓缩至粒析出，得0. 9kg浓缩液；在45g硅胶粉中加入0. Ikg浓缩液，50°C鼓风干燥， 干燥完毕后再加入0. Ikg浓缩液，50°C鼓风干燥，再重复以上步骤，只至浓缩液完全干燥得MOg固形物；将固形物粉碎加入石油醚720ml加热回流提取，去除其中的脂类物质，提取完毕后，滤除石油醚，固形物挥去石油醚后，加入浓度为75%乙醇2000ml搅拌提取，提取 2天后，采用离心机控制转速为2000r/min，离心20min，收集上清液，沉淀再加入75%乙醇 2000ml搅拌提取，再重复上述步骤1次，收集的上清液合并，减压浓缩去除乙醇成分，减压浓缩时温度控制在60°C，得浓缩液IL ；将该浓缩液以2BV/h的流速通过AB-8型大孔吸附树脂柱(R35mmXH90mm)，而后用5BV水以2BV/h的流速冲洗上述大孔吸附树脂柱，以去除大孔吸附树脂中残留的包括盐分、糖类、色素在内的杂质；再用5BV的浓度为65%乙醇将吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分洗脱下来，收集洗脱液减压浓缩，温度控制在50°C，得浸膏状海参皂苷；将浸膏状海参皂苷干燥，得海参皂苷干品。
权利要求
1.一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其特征在于其是将海参体腔液进行过滤，去除包括沙石、参肠、呼吸树在内的不溶物；将过滤后的体腔液进行浓缩；将所得的浓缩体腔液拌入适量硅胶粉，进行鼓风干燥；将干燥后的固体物质进行粉碎，再采用石油醚进行提取脱脂；将脱脂的固形物去除石油醚后采用乙醇进行提取2 3次，收集提取液浓缩至无醇味；将该浓缩液以1. 5 2. 0倍柱体积/h的流速通过大孔吸附树脂柱，而后用水以同样的流速冲洗大孔吸附树脂柱去除杂质，再用乙醇洗脱被吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分，收集洗脱液减压浓缩至浸膏状；将浸膏物干燥，得海参皂苷干品。
2.根据权利要求1所述的一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其特征在于所述拌入浓缩体腔液的硅胶粉，其与浓缩体腔液的质量比不低于1 20。
3.根据权利要求1所述的一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其特征在于所述去除脂类物质所用的石油醚，其与粉碎后的固形物的体积与质量比不低于2 1。
4.根据权利要求1所述的一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其特征在于所述对去除脂类物质的固形物进行乙醇提取所采用的乙醇浓度为70 90%，其乙醇与固形物的体积与质量比不低于为6 1。
5.一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其特征在于其具体步骤如下(1)、将海参体腔液进行过滤处理，去除体腔液中包括沙石、参肠、呼吸树在内的不溶物；(2)、将过滤后的体腔液进行减压浓缩，温度控制在45 60°C，浓缩至盐粒析出；(3)、将所得的浓缩液加入硅胶粉拌勻，采用鼓风干燥，干燥温度不超过60°C，其中，硅胶粉与浓缩体腔液的质量比不低于1 20;(4)、将干燥后的固体物质进行粉碎处理，粉碎后的固形物利用石油醚提取，去除其中的脂类物质，其中，石油醚与固形物的体积与质量比不低于2 1;脱脂后的固形物挥去残留的石油醚；(5)、将去除石油醚的固形物采用浓度为70 90%的乙醇溶液进行搅拌提取，其乙醇与固形物的体积与质量比不低于为6 1，提取完毕后，收集上清液；然后再重复上述的乙醇提取1 2次；合并上清液；(6)、将上清液减压浓缩，温度控制在45 60°C，去除上清液中的乙醇成分，得浓缩液；(7)、将所得的浓缩液以1.5 2. 0倍柱体积(BV)/h的流速通过大孔吸附树脂柱；而后采用4 6倍柱体积(BV)的水以同样的流速冲洗上述大孔吸附树脂柱，以去除大孔吸附树脂中残留的包括盐分、糖类、色素在内的杂质；再用4 6倍柱体积(BV)、浓度为60 70% 的乙醇，将吸附在大孔树脂上的海参皂甙成分洗脱下来，收集洗脱液减压浓缩，温度控制在 45 50°C，得浸膏状海参皂苷；(8 )、将上述浸膏状海参皂苷干燥，得海参皂苷干品。
全文摘要
本发明涉及一种利用海参体腔液制备海参皂苷的工艺方法，其是将海参体腔液过滤去除不溶物；清液进行浓缩后拌入适量硅胶粉，鼓风干燥；所得固体物质粉碎后采用石油醚提取脱脂；脱脂后用乙醇提取2～3次，收集提取液浓缩后通过大孔吸附树脂柱，而后用水冲洗大孔吸附树脂柱去除杂质，再用乙醇洗脱吸附在大孔吸附树脂上的海参皂苷成分，收集洗脱液减压浓缩至浸膏状，干燥，得海参皂苷干品。本发明工艺合理，技术含量高，操作简单，生产成本低，提高了海参体腔液的附加值。
文档编号A61P31/18GK102512452SQ20111038472
公开日2012年6月27日 申请日期2011年11月29日 优先权日2011年11月29日
发明者刘昌衡, 唐聚德, 孙永军, 孟秀梅, 张绵松, 胡炜, 袁文鹏 申请人:山东好当家海洋发展股份有限公司, 山东省科学院生物研究所