专利名称：颗粒状医药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及在颗粒状载体组合物中内包有药物的、能够作为药物传递系统(DDS)利用的颗粒状医药组合物。
背景技术：
利用蛋白质或核酸这样的生物体高分子的生物医药品，与利用低分子化合物的以往型的医药品相比，容易被酶分解或被免疫系统排除。从提高生物体内的生物医药品的稳定性的观点，专利文献I 3公开了在由脂质双层膜构成的脂质体中内包有生物体高分子的 DDS。现有技术文献
专利文献专利文献I :国际公开第2001 / 034115号小册子专利文献2 :国际公开第1998 / 58630号小册子专利文献3 :国际公开第2005 / 092389号小册子
发明内容
发明所要解决的课题在专利文献I 3中记载的以往型的DDS中，通过以脂质双层膜保护作为药物的生物体高分子，能够提高生物体内的药物的稳定性，但药物难以从载体放出。而且，这样的以往型的DDS由于其粒径的大小和构成脂质双层膜的脂质所具有的电荷，容易被肺、肝脏和脾脏这样的网状内皮系统捕捉，因此在到达给药对象物以前，有时从血液中被除去。以由具有疏水性聚合物链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物单元所构成的高分子胶束作为载体的DDS，与使用脂质体的以往型的DDS相比，能够将DDS颗粒大幅度小型化(例如，平均粒径IOOnm以下)。但是，以这样的高分子胶束作为载体的DDS，如后述的比较例所示，由于将生物体高分子保持在DDS颗粒内的作用过弱，仍然有难以对给药对象物适当输送药物的情况。另外，在这样的DDS中，在制造后的存储期间中也有药物从载体脱离的情况。本发明的发明人进行了防止颗粒外周面带有能够吸引带电性物质的电荷的高分子胶束DDS的开发(日本特愿2009 - 200681)。这样的DDS虽然能够防止能够导致妨碍向给药对象物的药物搬运的生物体分子向载体表面的附着，但从更长期地保持药物的观点出发，仍有能够改善的余地。用于解决课题的方法本发明在于提供一种颗粒状医药组合物，其含有具有疏水性聚合物链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物单元、药物、带有与药物的电荷相反的电荷的带电脂质，上述药物至少含有选自蛋白质或核酸中的生物体高分子，多个上述嵌段共聚物单元以上述疏水性聚合物链段朝向内侧且上述亲水性聚合物链段朝向外侧的状态配置为放射状，上述带电脂质以吸引在上述疏水性聚合物链段侧的状态配置，上述药物存在于比上述疏水性聚合物链段更靠近颗粒的内侧，由此防止该药物向颗粒外的脱落。发明的效果根据本发明，能够提高适于DDS的医药组合物的药物的封入稳定性。这样的医药组合物，与以往型的DDS相比，能够更可靠地输送药物。特别是在用于对于到达耗时的向给药对象物的药物送达中是有用的。
[图I]图I(a)和图I (b)是用于说明本发明的医药组合物的代表性结构的图。[图2]图2(a)和图2 (b)是用于说明由冻结操作造成的颗粒内的药物分布的变 化的图。[图3]图3(a)和图3 (b)是表示医药组合物的封入稳定性评价的结果的图。[图4]图4(a)和图4 (b)是表示医药组合物的血液中滞留性评价的结果的图。
具体实施例方式在以下的说明中，为了容易地理解本发明，参照图I和图2。但是，图I和图2均为示意图，本发明在任何意义上，都不限定于这些图。在图I和图2中，表示了带电脂质为阳离子性脂质、药物为阴离子性药物的情况，但本发明不限于这样的方式。在图I (a)中表示本发明的颗粒状医药组合物(以下，有时简称为“医药组合物”)的代表性结构。医药组合物I含有嵌段共聚物单元2、带电脂质3和药物4。在图I (b)中放大表示了嵌段共聚物单元2。嵌段共聚物单元2具有亲水性聚合物链段2a和疏水性聚合物链段2b，以疏水性聚合物链段2b朝向内侧且亲水性聚合物链段2a朝向外侧的状态，在医药组合物I内呈放射状配置。带电脂质3带有与药物4的电荷相反的电荷，以吸引在疏水性聚合物链段2b侧的状态配置。在本发明的医药组合物I中，如图I (a)所示，药物存在于疏水性聚合物链段2b内侧。此外，这并不是要限定于医药组合物I中所内包的全部药物4局部存在于疏水性聚合物链段2b内侧的状态，并没有排除一部分药物4存在于疏水性聚合物链段2b外侧的状态。本发明的医药组合物I通过使药物4存在于该位置，可以防止药物4的泄露，换而言之处于药物4的封入稳定性提高的状态。医药组合物1，例如，能够通过对处于药物被内包于疏水性聚合物链段2b外侧的区域的状态的医药组合物前体，实施冻结操作而形成。此外，如后所述，医药组合物前体I'能够通过公知的方法使药物内包于载体组合物而容易地形成。在图2 (a)中表示了冻结操作前的医药组合物前体I"中颗粒内的药物4分布，在图2(b)中表示了冻结操作后的医药组合物I中颗粒内的药物4分布。如图2 (a)所示，在医药组合物前体I'中，若实施冻结操作，比疏水性聚合物链段2b存在于颗粒外侧的药物4，就向着颗粒内侧移动，如图2 (b)所示，可以得到存在于疏水性聚合物链段2b内侧的医药组合物I。这样，本发明的医药组合物1，能够通过将在医药组合物前体I'中配置在疏水性聚合物链段2b的外侧的药物4经过冻结操作使其向疏水性聚合物链段2b的内侧移动而形成。这样得到的药物移动产生的原因尚未确定，但可以认为是由于构成载体组合物的嵌段共聚物2和带电脂质3的配置通过冻结操作被打乱，经过随之产生的间隙，药物4容纳在颗粒的更内部。冻结操作至少进行I次即可，但优选实施2次以上。通过重复冻结操作，能够促进药物4向颗粒内部的容纳。作为冻结操作，只要是冻结干燥操作和冻结熔融操作这样的、伴随规定的组合物的冻结的操作即可。冻结干燥操作包括冻结组合物的工序(冻结工序A)和将冻结组合物干燥的工序(干燥工序)。冻结工序A能够通过将组合物在一 200°C以上、优选在一 100°C以上，另外在一10°C以下、优选在一 20°C以下的温度，保持I小时以上、优选5小时以上，另外保持72小时以下、优选24小时以下来实施。干燥工序能够通过将冻结组合物的气氛气压力减压为真空状态(例如15Pa以下)，诱导水分的升华而实施。从促进该升华的观点出发，可以使减压中的气氛气温度阶段性或连续地升温至高于冻结工序的温度，例如一 20°C以上、或例如一 10°C以上。升温时的气氛气温度的上限可以为25°C左右。干燥工序的时间能够设定为5小时以上，优选设定为20小时以上。干燥工序时间的上限没有特别限制，可以为例如100小时。由于经过冻结干燥操作得到的医药组合物I处于干燥状态，因此可以使其再溶解在水这样的公知的溶剂中使用。 冻结熔融操作包括与冻结工序A同样操作的冻结组合物的工序，和将冻结的组合物熔融的工序(熔融工序)。熔融工序能够通过将组合物在4°C以上、优选在10°C以上，另外在40°C以下、优选在30°C以下的温度保持30分钟以上、优选I小时以上，另外保持24小时以下、优选5小时以下而实施。药物4存在于疏水性聚合物链段2b内侧的状态，例如，能够根据医药组合物I的Zeta电位的绝对值高于具有与该医药组合物I相同组成但不经过冻结操作形成的药物内包颗粒的Zeta电位的绝对值的现象来确定。这是由于若实施冻结操作则药物4向着颗粒的更内侧移动而离开颗粒的外表面，从而医药组合物I的Zeta电位的绝对值中带电脂质3的影响增加的缘故。在本说明书中，带电脂质3是指在生理pH (例如，pH7. 4)的水性介质中具有多于正电荷的负电荷的阴离子性脂质、和该水性介质中具有多于负电荷的正电荷的阳离子性脂质。因此，在本说明书中，关于具有阳离子性基团和阴离子性基团的所谓的两性带电脂质，按照上述基准进行处理。带电脂质3通过静电结合在医药组合物I内保持药物4。带电脂质3只要至少在医药组合物I的存储环境下，带有与药物的电荷相反的电荷即可。带电脂质3和药物4优选在以血液中为代表的生理环境下(例如，PH7. 4)也带有相反的电荷。根据下面的机理，带电脂质3以吸引在疏水性聚合物链段2b侧的状态配置。作为本发明的医药组合物I的原材料的载体组合物，例如，能够通过包括在水溶液中悬浊嵌段共聚物单元2和带电脂质3的工序形成。嵌段共聚物单元2的疏水性聚合物链段2b由于为疏水性，因此在水溶液中不扩散而凝集存在。亲水性聚合物链段2a可以在水溶液中扩散自由地运动。因此，嵌段共聚物单元2在水溶液中配置为疏水性聚合物链段2b朝向内侧、亲水性聚合物链段2a朝向外侧的放射状。而且，带电脂质由于疏水性强，与水和亲水性聚合物链段2a相比，与疏水性聚合物链段2b的亲和性高，因此被吸引在疏水性聚合物链段2b侦U。这样，带电脂质3就远离载体组合物的外周面而配置。而且，即使经过后述的冻结操作，带电脂质3也维持在吸引在疏水性聚合物链段2b侧的状态。
本发明的医药组合物I由于带电脂质3被吸引在疏水性聚合物链段2b侧而配置，因此处于防止医药组合物I的外周面带有能够吸引带有与带电脂质3相反电荷的带电性物质(例如,血液中的蛋白质)的电荷的状态。这样的状态,例如，能够通过从医药组合物I测定的Zeta电位的绝对值处于规定值以下的范围来确定。更具体而言，对于医药组合物1，希望Zeta电位的绝对值为15mV以下，优选为12mV以下，更优选为6mV以下，特别优选为3mV以下。通过在pH为7. 4的IOmM的HEPES缓冲溶液中，以载体组合物和医药组合物I中所含有的带电脂质的总量为每I毫升的该缓冲溶液为0. Img的方式添加来测定Zeta电位。嵌段共聚物单元相对于带电脂质3的比例，以重量比表示，希望为I. 0以上，优选为1.5以上，更优选为2.0以上，还希望为50以下，优选为20以下，更优选为10以下。越提高该比例，越能够降低医药组合物I的Zeta电位的绝对值。另一方面，带电脂质3的比例越高，越能够更积极地将药物摄入颗粒内，因此，如上所述，该比例希望限制在50以下。脂质可以为单纯脂质、复合脂质和衍生脂质中的任意种，能够例示磷脂、甘油糖月旨、鞘糖脂、鞘氨醇类和留醇类。更具体而言，作为阳离子性脂质，例如，可以列举1，2-二油酰基-3-三甲基铵基丙烷(DOTAP)、N-(2, 3- 二油烯基氧基丙烷_1_基)-N，N，N-三甲基氯 化铵(D0TMA)、2，3- 二油烯基氧基-N-[2-(精胺甲酰胺)乙基]-N，N- 二甲基-I-丙基三氟乙酸铵(DOSPA)、1，2- 二十四烷基氧基丙基-3- 二甲基羟基乙基溴化铵(DMRIE)、1，2- 二肉豆蘧基氧基丙基-3-二甲基羟基乙基溴化铵(D0RIE)、3P-[N-(N' N' -二甲基氨基乙基)氨基甲酰基]胆固醇(DC-Chol)。作为阴离子性脂质，例如，可以列举心磷脂、二酰基磷脂酰丝氨酸、二酰基磷脂酸、N-琥珀酰基磷脂酰乙醇胺(N-琥珀酰基PE)、磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酰乙二醇、胆固醇琥珀酸酯。医药组合物I能够含有2种以上的带电脂质3。亲水性聚合物链段2a优选为源自由聚乙二醇或聚氧乙烯构成的水溶性聚合物的链段。亲水性聚合物链段2a的分子量希望为2，500Da以上，优选为5，OOODa以上，更优选为8，OOODa以上，另外希望为200，OOODa以下，优选为20，OOODa以下，更优选为15，OOODa以下。疏水性聚合物链段2b优选为源自聚氨基酸链的链段。这样的聚氨基酸链能够在医药组合物I中其一部分或全部形成a螺旋。因此，带电脂质3以吸引在聚氨基酸链的a螺旋部分的状态，换而言之以分散在a螺旋部分的周边的状态配置。疏水性聚合物链段2b的重复单元数希望为10个以上，优选为20个以上，另外希望为200个以下，优选为100个以下，更优选为60个以下。从降低医药组合物I的Zeta电位的绝对值的观点出发，换而言之从减少医药组合物I的表面电荷的(接近中性)观点，在嵌段共聚物单元2中，优选使得亲水性聚合物链段2a的大小(分子量)大于疏水性聚合物链段2b的大小(重复单元数)。亲水性聚合物链段2a和疏水性聚合物链段2b也可以具有支链结构。例如，也可以为对于一条链段结合有2条以上的链段的状态。亲水性聚合物链段2a和疏水性聚合物链段2b只要是能够防止医药组合物I的颗粒外周面带有能够吸引带电性物质的电荷的程度，也可以还含有以氨基和羧基为代表的带电性的取代基。亲水性聚合物链段2a和疏水性聚合物链段2b能够使用使主链的末端之间经过共价键结合得到的链段。更具体而言，作为嵌段共聚物单元2，能够例示下面的通式(I)和通式(II)所示的化合物。医药组合物I也可以由2种以上的嵌段共聚物单元2形成。
权利要求
1.一种颗粒状医药组合物，其特征在于 含有具有疏水性聚合物链段和亲水性聚合物链段的嵌段共聚物单元、药物、带有与药物的电荷相反的电荷的带电脂质， 所述药物至少含有选自蛋白质和核酸中的生物体高分子， 多个所述嵌段共聚物单元以所述疏水性聚合物链段朝向内侧并且所述亲水性聚合物链段朝向外侧的状态配置为放射状，所述带电脂质以吸引在所述疏水性聚合物链段侧的状态配置，所述药物存在于比所述疏水性聚合物链段更靠颗粒的内侧，由此防止该药物向颗粒外脱落。
2.如权利要求I所述的颗粒状医药组合物，其特征在于 所述疏水性聚合物链段为源自聚氨基酸链的链段。
3.如权利要求2所述的颗粒状医药组合物，其特征在于· 所述聚氨基酸链的一部分或全部形成为a螺旋。
4.如权利要求3所述的颗粒状医药组合物，其特征在于 所述带电脂质分散于所述a螺旋的周围。
全文摘要
本发明提高了药物传递系统中适合的颗粒状医药组合物的药物封入稳定性。颗粒状医药组合物(1)含有以疏水性聚合物链段(2b)朝向内侧且亲水性聚合物链段(2a)朝向外侧的状态配置为放射状的嵌段共聚物单元(2)、含有生物体高分子的药物(4)、和带有与药物(4)的电荷相反电荷的带电脂质(3)，该带电脂质(3)以吸引在疏水性聚合物链段(2b)侧的状态配置，药物(3)配置在疏水性聚合物链段(2b)的内侧。根据该医药组合物(1)，能够显著防止药物(4)向颗粒外的脱落。
文档编号A61K9/19GK102753151SQ20118000906
公开日2012年10月24日 申请日期2011年2月14日 优先权日2010年2月12日
发明者加藤泰己, 石井笃史 申请人:那野伽利阿株式会社