靶向式抗肿瘤抗癌药剂及其制备方法

专利名称：靶向式抗肿瘤抗癌药剂及其制备方法
技术领域：
本发明所涉及的是在《国家药典》中常规使用无禁忌的中药制备方法及化学类药齐U，具体说是整合后的一种新型靶向式抗肿瘤抗癌药剂及其制备方法。
背景技术：
癌症仍然是目前威胁人类健康最主要的疾病之一，它每年夺走成千上万个患者的生命；目前大气污染、环境污染、肿瘤患者逐年增加。早在50至70年代美国曾投入大量的资力、人力，决心在上世纪末攻克癌症。但是；时至今日，癌症仍然是世界性难题，世界各国都在探索研究开发抗癌药物，每年都有多种新的抗癌品种药物问世，但这些药物普遍存在疗效差、毒副反应大等多种问题，在治疗方面任然没有明显的突破。对于癌症的治疗，至今仍然局限于手术、化疗、放疗为治疗手段。

发明内容
为了克服肿瘤患者通常进行手术、放疗、化疗手段后毒副反应带来的痛苦；本发明的目的在于提供一种靶向式抗肿瘤抗癌药剂。所谓的分子靶向治疗，是在细胞分子水平上，针对已经明确的致癌位点来设计相应的治疗药物,药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会波及肿瘤周围的正常细胞组织，所以靶向式的意思是:有目标针对性的、吸收更彻底、效果更佳。本发明的另一目的是提供靶向式抗肿瘤抗癌药剂的制备方法。本方法成本低、生产工艺先进简单、安全性可靠、可规模化生产。本发明的目的可通过如下技术方案来实现:一种靶向式抗肿 瘤抗癌药剂，含下列重量百分比原料:拟黑多刺蚂蚁56 % 59%，胎盘27 % 29%，红芪13 % 15%，虫草素0.05 % 0.15%，延胡索0.05 % 0.10%。上述药剂的制备方法，其步骤如下:①拟黑多刺蚂蚁制备拟黑多刺蚂蚁:春、夏、秋季在西部海拔3500米以上採挖野生活体洗净一在纯净水中生物技术饲养7日后致死一晒干或60°C烘干7h干燥一存储于冰箱备用一取冰箱备用拟黑多刺蚂蚁一粉碎一过24目筛选干粉一干粉置于CO萃取器内一调节萃取溶器流速15L/h —萃取压力30MPa —温度为60°C下进行3h —收集萃取用80°C石油醚分离一收集分离液在蒸馏器加热至125°C —控制流液量一蒸馏液流出冷却在0°C—过滤后装入溶器灭菌待用；②健康人胎盘制备取健康人胎盘一经过巴氏消毒器一速冻-20°C—剪切机切片一用胶体磨研磨成胶体化一加入适量红芪酶水解一煮沸灭酶一注入95 %的乙醇静止12h后离心，每分钟8000转，离心20分钟一去除沉淀一用切向流超滤设备截留上清液，取分子量< 3000道尔顿的胎盘提取物；进行过滤即得一装入溶器除菌待用；③红芪炮制制备；除去杂质、大小分开一取红芪一洗净一润透一切厚片一干燥一粉碎一过24目筛选干粉备用一注入蒸馏器一加去离子水23000ml加热至125°C—控制流液量一蒸馏液流出冷却在0°C —过滤后装入溶器灭菌待用；④.虫草素:成品由国内厂商或西安天丰生物科技有限公司购得；⑤.延胡索:成品由国内厂商或国家药品检验所购得。将以上①②③④⑤备用原料混合后注入二级药用蒸馏水25000ml制成液剂置入容器中，加入活性碳处理后过滤，加入总380立升注射用水中及含有0.9%的氯化钠溶液的容器中稀释，搅拌均匀。注射用水经氢氧化钠调节渗透压，并再次用过滤器过滤，滤液应符合国家GMP标准认定达标的大输液企业按要求生产；分装于250ml或500ml的玻璃瓶中，压力设定在0.39兆帕、温度设定在116°C条件下灭菌消毒后即得靶向式抗肿瘤抗癌药剂。用药方法与用量:成人患·者一次250ml 500ml缓慢静脉注射(每分钟40滴为宜)，对重症患者及儿童酌减或尊医嘱。35天为一个疗程；间歇2 5天开始第二疗程，总疗程2 4个，检查临床指标达标可以长期停药。对重症病患者必要时可重复使用。贮藏方法:阴凉、干燥、防晒、防潮、存放在10°C 25°C的室内。药物功效拟黑多刺蚂蚁具有丰富的营养价值，蚁卵含有42-69%的优质蛋白质，28种游离氨基酸，20多种人体必需的微量元素，如锌、钙、铁、硒、锰等；维生素A、B1、B2、B5、B6、B12、C、D、E等，以及三萜类化合物。蚁酸、草体蚁醛、三磷酸腺苷等共计70多种滋养成分。蚂蚁的营养成分最全面、最丰富、最均衡、最具有生物活性、最天然，吸收率最高，效果最快。蚂蚁能激活细胞、活化细胞、再生细胞，提高细胞的分裂增长，延缓细胞老化，延年益寿。蚂蚁含有蚁酸，有抗风湿的能力效果好。蚂蚁里有草体蚁醛，具有双向免疫调节的作用，调节人体免疫功能，平衡人体营养。使排毒功能达到平衡正常，蚂蚁具有抗炎解毒的作用。拟黑多刺蚂蚁抗肿瘤、抗癌；含有的硒元素有抑制癌细胞生长的作用。蚂蚁通过专家临床试验证明，抗癌率达到38%。拟黑多刺蚂蚁是一种温和的滋补良药，具有扶正固本、延年益寿、补肾壮阳、强壮筋骨、祛瘀通络、美容催乳的功效，其中以补肾之功尤为显著。对阴虚、阳虚、血虚及气血双虚均可适用，食用后起到护肝、抗炎、抑菌、防癌、抗癌、解痉、镇静、镇痛等作用。同时，临床上用于治疗类风湿、风湿、乙肝、托法、白发、性功能障碍、神经衰弱、病后体力不足等虚损性疾病均有良好的疗效。人体衰老的本质在与气虚血瘀、气血失衡。而益气活血、平衡气血则可延缓衰老，拟黑多刺蚂蚁在扶正祛邪和活血化瘀方面有着显著的作用。因而，拟黑多刺蚂蚁又是一种有效的抗衰老剂。功效1、营养细胞、活化细胞、促进细胞；2、具有广普双向调节，提升免疫功能；3、抗氧化、抗菌、抗风湿、降血脂、降血糖、降胆固醇、防癌、抗癌、防止多种疾病；4、美容护肤、增高、增智、增力、提升性功能、提高视力；
5、调解人体生命节律、调节睡眠；6、既是食品又是药品与保健品，互补免疫增效食疗之剂；7、是一种免疫兴奋剂和调节剂；8、是一种全面增强人体免疫功能、抗衰老制剂；因此，拟黑多刺蚂蚁它在体内具有特殊的生理功能，是生物体内不可缺少的成分
之一 O胎盘药理作用:胎盘进入人体后，可作为抗原，不需要T细胞的辅助就能直接刺激B细胞产生抗体。可诱导和促进T细胞分化、成熟；刺激B细胞产生并分泌免疫球红芪(抗体)参与人体免疫反应，提高自然杀伤(NK)活力，在无抗体的情况下，靶向杀伤肿瘤(癌)细胞，发挥广谱抗肿瘤，抗感染作用，参与免疫调节，提高白细胞介素_2 (1L-2)的产生水平和受体表达水平，增强外因单核细胞Y-干扰素的产生；增强血清中SOD活性sk显著增加淋巴细胞功能，能有效防止辐射核放化疗及污染中引起的肿瘤细胞生长，可防止恶性肿瘤放化疗引起的CD4+降低。总之是一种现代医学的新型免疫剂，是现代的免疫珍品。提取胎盘的特点是:高纯性胎盘 胎盘分子量极小，仅为3000道尔顿，可静脉注射和肌肉注射。所以本品研究制造过程中选用了静脉注射吸收更彻底，效果更明显。红芪的功效与作用:红芪为植物和中药材的统称。野生植物红芪主要产于甘肃省境内，分布在偏僻的高寒山区宕昌、武都、峡县、舟曲、临潭、卓尼、文县、礼县、武山、西和及临夏等地。由于红芪根入药，茎、叶可作饲料或燃料，多为人工栽培红芪。为国家三级保护植物。功能主治补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力、食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，血虚萎黄，内热消渴，慢性肾炎蛋白尿，糖尿病。贮藏置通风干燥处，防潮，防蛀。药理作用1、正常大鼠饲以含黄芪粉末的事务I周后，测其耗氧量比服药前逐渐增加。2、能加强正常心脏收缩，对衰竭的心脏有强心作用。3、本品能使管状血管和肾脏血管扩张，并使全身末梢血管扩张，皮肤循环畅盛，使高血压患者血压下降。4、实验者在自己身上进行了利尿试验，证明黄芪有中等的利尿作用。5、黄芪磨成粉末加入饲料给大白鼠喂服3日，有阻抑实验性肾炎作用。6、黄芪对小白鼠有镇静作用，能维持数小时。7、家兔口服黄芪，可使血糖明显下降。8、对大白鼠离体子宫具有兴奋收缩作用。9、抑菌试验:本品在体外对志贺氏痢疾杆菌、炭疽杆菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、白喉杆菌、假白喉杆菌、肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、枯草杆菌等均有抑制作用。虫草素:是从冬虫夏草中提取出来的一种天然生物活性物质。能溶于水、乙醇。虫草素为含氮配糖体的核酸衍生物，属嘌呤类生物碱。虫草素是一种核甙类新药，20世纪70年代发现有抑制肿瘤抗癌作用，引起医学界的高度重视。虫草素目前在美国作为抗癌、抗病毒新药已经进入三期临床试用阶段；这个品种也表明了在本合成剂中应用的重要性。延胡索:含多种异喹啉类生物碱，有延胡索甲素、乙素、丙素、丁素、戊素、己素、庚素、辛素、壬素、葵素、子素、丑素、寅素、黄连碱、去氢延胡索甲素、延胡索胺碱、去氢延胡索胺碱及古伦胺碱等.延胡索的药理作用:镇痛作用，延胡索粉有镇痛作用，其止痛效价约为阿片的1/100 ;延胡索总碱、延胡索甲素、乙素、丑素、癸素均有镇痛作用，以乙素较强.各种剂型以醇制浸膏及粉剂作用强；镇静、安定、催眠作用:延胡索乙素具有一定的镇静、安定作用，其左旋体为新型的中枢抑制剂，较大剂量时对兔、狗、猴有明显的催眠作用；对消化系统的影响:去氢延胡索甲素有显著的抗大鼠实验性胃溃疡作用对心血管的作用:延胡索乙素、丑素有轻微降压、减慢心率作用；去氢延胡索碱有降压、增加冠状窦血流量作用。在本剂中为了使病患者尽快解除痛疼，采用了静脉注射剂方法使用吸收更彻底、作用更明显的效果O将以上拟黑多刺蚂蚁、胎盘、红芪、虫草素、延胡索制成药剂后的综合优点是:人体不可缺少所需的微量元素，我们在选择配料时考虑到这一点；因为:癌症病大部分患者“邪气盛则实，精气夺则虚”的特征，采取双向调节，治疗与提升免疫功能并取；“扶正祛邪，标本兼治”的治疗原则，在靶向式杀死癌细胞的同时很快提高人体免疫功能，解除患者的疼痛，改善临床症状，使原本体弱的患者有了战胜癌魔的勇气。该组方从西药成分组成配伍上深入研究，使配伍组方更科学合理，工艺技术更先进，组方混合后其成分发生了变化，其药效功能发生了新的整合协同，不同于单药作用的简单相加，而是它们的作用机制发生了质的变化，产生了一种新的杀死癌细胞抗肿瘤治癌机制的有效奇特作用。动物反复长急毒理学试验本药剂在大鼠每日分别腹腔注射1.5g生药，0.75g生药/kg，连续3个月，与NS组大鼠的一般状况，摄食、饮食、粪便性状等无差别；体重增长；外周血象；肝、肾功能生化检查；重要脏器系数和病理组织学改变基本相同。停药后所留的大鼠(每组各10只)继续观察3周，其组织学未见异常改变。停药后3周内未见产生继发性毒性反应。表明本品在此剂量范围内长期使用是可靠安全的。另据试验:根据药物的毒性试验方法，找不出本药剂一次静脉注射或腹腔注射引起小鼠0%和100%死亡的剂量，故无法测出本品静脉注射或腹腔注射对小鼠的LD50。用最大耐受量测定方法，以0.05g生药/20g体重，一日3次小鼠腹腔注射，总给药量7.5生药/kg，连续观察7天，动物未出现中毒反应或死亡。计算出本品小鼠一日最大耐受量相当于临床用量的250倍，表明本品毒性甚低，无副作用，临床用药是安全的；无不良反应。该品按照《中国药典》二 00五年版
药效学研究报告表明:研究本制剂注射液对人肝细胞IfepG-2抗肿瘤作用的分子机制及其对细胞活性的影响。方法:用透射电镜观察超微结构的变化；H0echst33258荧光染色观察细胞核形态的变化；应用泫式细胞仪(FCM)PI染色检测细胞周期变化及bcl-2的变化，AV/PI双染检测细胞膜的变化；免疫组化方法测定Survivin蛋白及NF_kBp65的表达；用TRAP-PCR银染法对肝癌细胞活性进行检测。结果:H0echst33258荧光染色显示本品使细胞核轻微浓缩；免疫组化显示本品使Survivin蛋白及NF_kBp65的表达下调(p< 0.0005) ;FCM检测结果显示本品作用后，S期细胞比例增高，G0/G1期及G2/M期细胞比例下降(P < 0.01)。结论:本品对人肝癌细胞的作用主要是癌细胞自噬，导致细胞浆空泡变性，胞浆内容物降解，轻度的染色浓缩；明显改变细胞周期，阻滞细胞于S期，细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻，膜结构发生改变；其诱导细胞自噬作用机制主要与抑制癌细胞活性有关。本试验旨在研究本药剂对人体癌细胞的作用机制。本药剂药对小鼠移植瘤的抑瘤作用和生命延长率的实验观察本药剂是一种中药西制方法的注射剂，其作用和临床使用的作用机制是，靶向式破坏癌细胞及病变细胞的胞膜结构，内含解癌素6000ppm，对人体正常组织未发现毒副作用。为了验证本药剂注射对小鼠可移植性肿瘤有否抑制肿瘤生长和延长存活时间的作用，本实验用小鼠肝癌(H22);小鼠前胃癌(FC)和小鼠子宫颈癌(U14)等三种肿瘤模型进行疗效评估和实验观察。材料和方法:一、药物1.本药剂注射液为无色透明液体250ml瓶装，内含解癌素6000ppm,是用中药西制方法合成的一种物质，由何忠琳先生生产提供的成品药。2.吗特灵注射液，体内抗癌实验曾经被证明对小鼠S_180，EAC实体瘤和Lewis肺癌均有明显的抗癌作用，本实验作用为阳性对照组用药，由哈尔滨制药三厂生产出品，批号为:961201.
二、肿瘤模型1.小鼠肝癌(H22)，接种率100%，皮下移植后10天可有80%的淋巴结内转移，标
本实验室保存。2.小鼠前胃癌(FC)是一株肺内高转移模型，皮下接种可存活13-15天。试验室用甲基苄基亚硝胺建立的肿瘤模型。3.小鼠子宫颈癌(U14):皮下移植为实体癌，腹腔内注射可成为腹水瘤，腹腔内注射瘤细胞后一般可存活12-14天。是试验室建立和保存的瘤株。三、动物；615小鼠，为近交系二级动物，由中国医学科学院肿瘤所购进，动物合格证号9209M19号，本实验每批实验用同一性别，体重一般为18±2克。四、肿瘤移植；三种肿瘤细胞，从液氮内取出，复苏后，每一种瘤细胞先在数只小鼠的腋窝皮下和腹腔内接种，实体瘤待瘤体长至2cm大小时，处死动物，选择生长良好的瘤组织,剪成小块后再用不锈钢网过滤制成单细胞悬液，细胞计数后，每批实验均按2X10/0.2ml瘤细胞在小鼠腋窝下接种，5个组均用相同的瘤细胞同时在相同部位接种，腹水瘤一般是在肿瘤移植后6-8天取出腹水，用生理盐水调整细胞数后，在小鼠腹腔内接种2X10/0.2ml瘤细胞悬液。每批实验均相同。五、实验分组；瘤重抑制率，H22和FC瘤细胞腋皮下移植后随机每批实验分为5组同时进行。1、本药剂注射液组:高、中和低三个剂量组，高剂量组:于癌细胞移植后24小时，按20ml/kg体重腹腔内注射，(此剂量为人用量的2-4倍)2、中剂量组为10ml/kg体重，用原液稀释I倍，其溶积不变。
3、低剂量组为5ml/kg体重，其溶积仍与高剂量组相同。每天I次，每批实验，均连续给药11天。4、阳性对照组(吗特灵)组:每瓶IOml内含500mg，本实验稀释50倍，按15mg/kg体重腹腔内注射，每日一次，连续注射11次，实验用剂量低于人的最高剂量。5、阴性对照组，肿瘤移植后，每天一次腹腔内注射生理盐水0.3-0.4ml，连续注射11次。六、检查指标；1、瘤重抑制率:停药后第二天各组动物同时处死，剥离瘤体，称重，按公式:
权利要求
1.一种靶向式抗肿瘤抗癌药剂，含下列重量百分比原料: 将拟黑多刺蚂蚁56 % 59 %，胎盘27 % 29 %，红芪13 % 15 %，虫草素0.05 % 0.15%，延胡索 0.05% 0.10%。
2.制备权利要求1所述一种靶向式抗肿瘤抗癌药剂方法，其步骤如下: ①拟黑多刺蚂蚁制备 拟黑多刺蚂蚁:春、夏、秋季在西部海拔3500米以上採挖野生活体洗净一在纯净水中生物技术饲养7日后致死一晒干或60°C烘干7h干燥一存储于冰箱备用一取冰箱备用拟黑多刺蚂蚁一粉碎一过24目筛选干粉一干粉置于CO萃取器内一调节萃取溶器流速15L/h —萃取压力30MPa —温度为60°C下进行3h —收集萃取用80°C石油醚分离一收集分离液在蒸馏器加热至125°C—控制流液量一蒸馏液流出冷却在0°C —过滤后装入溶器灭菌待用； ②健康人胎盘制备 取健康人胎盘一经过巴氏消毒器一速冻-20°C—剪切机切片一用胶体磨研磨成胶体化—加入红芪酶水解一煮沸灭酶一注入95%的乙醇静止12h后离心，每分钟8000转，离心20分钟一去除沉淀一用 切向流超滤设备截留上清液，取分子量< 3000道尔顿的胎盘提取物；进行过滤即得一装入溶器除菌待用； ③红芪炮制制备； 除去杂质、大小分开一取红芪一洗净一润透一切厚片一干燥一粉碎一过24目筛选干粉备用一注入蒸馏器一加去离子水23000ml加热至125°C—控制流液量一蒸馏液流出冷却在0°C —过滤后装入溶器灭菌待用； ④.虫草素 ⑤.延胡索 将以上①②③④⑤备用原料混合后注入二级药用蒸馏水25000ml制成液剂置入容器中，加入活性碳处理后过滤，加入总380立升注射用水中及含有0.9%的氯化钠溶液的容器中稀释，搅拌均匀；注射用水经氢氧化钠调节渗透压，并再次用过滤器过滤，滤液应符合国家GMP标准认定达标的大输液企业按要求生产；分装于250ml或500ml的玻璃瓶中，压力设定在0.39兆帕、温度设定在116°C条件下灭菌消毒后即得靶向式抗肿瘤抗癌药剂。
全文摘要
本发明涉及一种靶向式抗肿瘤抗癌药剂，将制备后拟黑多刺蚂蚁，胎盘，红芪，虫草素，延胡索混合后注入二级药用蒸馏水制成液剂置入容器中，加入活性碳处理后过滤，加入注射用水中及含有氯化钠溶液的容器中稀释，搅拌均匀。注射用水经氢氧化钠调节渗透压，并再次用过滤器过滤，滤液应符合国家GMP标准认定达标的大输液企业按要求生产；分装于250ml或500ml的玻璃瓶中，压力设定在0.39兆帕、温度设定在116℃条件下灭菌消毒后即得靶向式抗肿瘤抗癌药剂。本发明安全、无毒、无副作用，发挥广谱抗肿瘤、抗癌、抗感染作用；本品还含有丰富的营养成分，参与免疫功能调节，提高白细胞介素-2(1L-2)的产生水平和受体表达水平。
文档编号A61K35/64GK103191197SQ20121000336
公开日2013年7月10日 申请日期2012年1月5日 优先权日2012年1月5日
发明者何忠琳 申请人:何忠琳