专利名称：一种中药组合物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明属于中药和天然药物技术领域，具体涉及治疗脾虚湿热证2型糖尿病及胰岛素抵抗的中药及其制备与应用。
背景技术：
糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其患病率呈全球性增加，已成为继肿瘤、心血管疾病之后的第三大严重的慢性非传染性疾病，被世界卫生组织列为世界三大顽症之一。我国现有糖尿病患者人数约4，000万左右，而糖尿病类型中2型糖尿病(T2DM)占93. 7%，其中 80% -90%有胰岛素抵抗，这还不包括糖耐量受损及代谢综合征的患者，由此可见胰岛素抵抗或胰岛素抵抗综合证已构成了现代社会的重大的健康危机。目前对糖尿病的治疗，主要是胰岛素、磺酰脲类、双胍类、噻唑烷酮类等治疗，无论以上哪种治疗，都存在一定的副作用，而且一旦停药，疾病也很快复发，从这一方面考虑中医药治疗糖尿病及其并发症具有悠久历史和不可替代的优势，因此，研发一种有效而且能被大多数消费者接受的治疗2型糖尿病的药物已经成为消费者的需求。祖国医学在治疗2型糖尿病及胰岛素抵抗上有着丰富的治疗经验，糖尿病的中医药研究，无论是理论研究，还是动物实验或临床试验研究，在研究方法、科学性、先进性方面取得了一些令人瞩目的成就和进展。中医也对糖尿病进行了许多研究包括脏腑学研究、病因学研究、复方研究、单药单体研究。采用滋肾养阴、益气生津、清热除烦等方法，在临床上取得相当的疗效，在患者中有着很高的声誉，但由于诸多条件的限制，包括药学制剂问题、 药物稳定性以及临床疗效客观评价等问题，目前治疗2型糖尿病及胰岛素抵抗上中药制剂几乎是一片空白。目前主要采用临床治疗2型糖尿病的中药制剂，如消渴丸，适用人群有限制。鉴于上述情况，现在临床上中医中药治疗脾虚湿热证2型糖尿病主要采用中草药煎煮口服，给广大患者带来极大的不便，开发安全、有效的治疗2型糖尿病及胰岛素抵抗的中成药，将会对该病的治疗和预防起着积极推动作用。
发明内容
发明目的本发明公开了对四妙丸的改进处方，其可以治疗对属于“脾虚湿热”证相关的2型糖尿病有明显治疗作用的中药。本发明以2型糖尿病是“脾气虚导致的湿热内生”为理论基础，以黄柏为君药，苍术臣药与其它几位药物配伍制得。技术方案一种中药组合物，其特征是由下列中药材按对应的重量份制成黄柏3-12 份；苍术 5_10 份；意该仁9-30份；
黄连2-5 份。作为一种优化方式所述的中药组合物，其特征在于由下列中药材按对应的重量份制成黄柏6份；苍术10份；薏苡仁10份；黄连3份。一种中药组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤实施按重量份计黄柏3-12 份；苍术5_10 份；意该仁9-30份；黄连2-5 份。按上述组份称取原料，将苍术提取挥发油，挥发油用β -环糊精包合，提取后的药渣与黄柏、薏苡仁、黄连合并后煮沸提取得到提取液，浓缩提取液，浓缩至稠浸膏后真空干燥，所得浸膏粉粉碎后加入苍术挥发油包合物即得，成品。作为一种优化方式，其中挥发油用β-环糊精包合方法如下挥发油与β-环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨 O. 5h0作为一种优化方式，其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取 10小时。作为一种优化方式，一种中药组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤实施按重量份计黄柏3-12 份；苍术5_10 份；意该仁9-30份；黄连2-5 份。按上述组分称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。作为优选方式，将上述的成品，加入成品的重量10% -30%糊精，或成品的重量 O. 5%硬脂酸镁，或成品的重量O. 4% -O. 6%阿斯巴甜或乳糖干法制粒制得颗粒剂。制得的成品可以加入药学上可接受的载体制备成各种制剂，本发明优选制备成颗粒剂。中药组合物在制备治疗2型糖尿病或胰岛素抵抗疾病的药物中的应用。进一步说明本发明的中药组合物可以直接粉碎后入药，也可以按常规方法水煎煮后服用。为了服药方便，更为了提高药效。有益效果本发明的中药组合物特点是清热燥湿，标本兼顾，通过抑制炎性刺激或反应而改善或治疗胰岛素抵抗，所以在临床使用中适应症方面较广，不仅治疗II型糖尿病胰岛素抵抗，而且对肥胖症，高血脂或动脉粥样硬化等病患中具有胰岛素抵抗倾向亦有治疗和预防的作用。
本发明的中药组合物(命名为四妙颗粒)，全方以黄柏为君，黄柏苦寒，寒以清热， 苦以燥湿，其性沉降，长于清下焦湿热。苍术，辛苦温，善能燥湿健脾，为臣药。二药相伍，标本兼顾，合成清热燥湿之效。黄连苦寒，能清热燥湿，去中焦湿热，为佐药；使药薏苡仁味甘淡微寒，能清利湿热兼能健脾。全方黄柏、黄连苦寒，苍术性温，使本方寒而不凉温而不燥， 薏苡仁健脾益胃补肺，为高蛋白低脂肪易消化之品，可供给机体较多的优质蛋白。可见本方寒热并用，攻补兼施，共奏清热燥湿健脾之功效。可用于治脾虚湿热证相关2型糖尿病及胰岛素抵抗等疾病。本发明是四妙丸的改进方剂，四妙丸的处方为苍术，牛膝，黄柏(盐炒)，薏苡仁。 主治脾胃虚弱，不能运化，痰停胸臆，饮食减少，大便溏泄。用于由湿热下注引起的两足麻木，下肢痿弱，筋骨疼痛，足胫湿疹痒痛。通过组方改变，改变了其适用症或治疗范围。
图I为各实施例对胰岛素刺激下3T3-L1细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响， 其中A为空白及实施例1-5结果，B为实施例6-15结果；图2为各实施例对胰岛素刺激下3T3-L1细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响， 其中A为空白及实施例1-5，B为实施例6-15。
具体实施例方式实施例I.黄连2g，黄柏3g，苍术6g，薏苡仁9g，按照上述组份称取原料；苍术提取挥发油，其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时挥发油与β_环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h，获得苍术挥发油包合物。苍术药渣与其他组份加水提取2次，每次8倍量水，提取50分钟，滤过，合并二次滤液，浓缩至稠膏后80°C真空干燥，浸膏粉加入苍术挥发油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精混合均匀，干法制粒。实施例2黄连5g，黄柏12g，苍术6g，薏苡仁30g，按照上述组份称取原料，苍术提取挥发油， 其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时挥发油与β_环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h;挥发油包合后备用，药渣与其他药味加水提取3次，每次10倍量水，提取60分钟，滤过，合并三次滤液，浓缩至稠膏后70°C真空干燥，浸膏粉加入苍术挥发油包合物及浸膏粉重量的30%的糊精、浸膏粉重量的3%的乳糖，混合均匀，干法制粒。实施例3.黄连3g，黄柏6g，苍术10g，薏苡仁IOg ;按照上述组份称取原料，苍术馏提取挥发油，其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时挥发油与β-环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。挥发油包合后备用，药渣与其他药味加水提取3次，每次7倍量水，提取40分钟，滤过，合并三次滤液，浓缩至稠膏后 60°C真空干燥，浸膏粉加入苍术挥发油包合物及浸膏粉重量的25%的糊精、浸膏粉重量的 0.3%阿斯巴甜，混合均匀，干法制粒。实施例4.
黄连4g，黄柏10g，苍术9g，薏苡仁20g，按照上述组份称取原料，苍术提取挥发油， 其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时挥发油与β_环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。挥发油包合后备用，药渣与其他药味加水提取2次，每次8倍量水，提取45分钟，滤过，合并二次滤液，浓缩至稠膏后65°C真空干燥，浸膏粉加入苍术挥发油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精、浸膏粉重量的5%乳糖，混合均匀，干法制粒。实施例5黄连5g，黄柏6g，苍术6g，薏苡仁22g，按照上述组份称取原料，苍术提取挥发油， 其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时挥发油与β_环糊精的重量比例为I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。挥发油包合后备用，药渣与其他药味加水提取2次，每次8倍量水，提取45分钟，滤过，合并二次滤液，浓缩至稠膏后65°C真空干燥，浸膏粉加入苍术挥发油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精、浸膏粉重量的5%乳糖，混合均匀，干法制粒。实施例6黄连2g，黄柏3g，苍术6g，薏苡仁9g，按照上述组份称取原料，粉碎制得。实施例7黄连5g，黄柏12g，苍术6g，薏苡仁30g，按照上述组份称取原料，粉碎制得。实施例8黄连3g，黄柏6g，苍术10g，薏苡仁IOg ;按照上述组份称取原料，粉碎制得。实施例9黄连4g，黄柏10g，苍术9g，薏苡仁20g，按照上述组份称取原料，粉碎制得。实施例10黄连5g，黄柏6g，苍术6g，薏苡仁22g，按照上述组份称取原料，粉碎制得。实施例11黄连2g，黄柏3g，苍术6g，薏苡仁9g，按照上述组份称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。实施例12黄连5g，黄柏12g，苍术6g，薏苡仁30g，按照上述组份称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。实施例13黄连3g，黄柏6g，苍术10g，薏苡仁IOg ;按照上述组份称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。实施例14黄连4g，黄柏10g，苍术9g，薏苡仁20g，按照上述组份称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。实施例15黄连5g，黄柏6g，苍术6g，薏苡仁22g，按照上述组份称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品。实施例16
一、荧光法检测葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)筛选不同药物配比四妙颗粒的活性筛选受试药物实施例1-15实验方法选用生长良好的3T3-L1细胞(购自中科院上海细胞库)，以5 X IO5个细胞/ml接种于48孔培养板，每孔加入细胞悬浮液400 μ I。待细胞融合后，更换无血清HG-DMEM培养基(购自Gibco公司)使细胞同步化4h，然后进行分组I)空白对照组(Blank)；2)模型组(Control)，此组仅造模，不加药物干预；3)药物组造模，并加下列药物干预，共分为15个组(实施例1_15，500μ g/ml)；4)阳性对照组5mmol/l水杨酸钠.药物组加药后温育O. 5h，加LPS刺激巨噬细胞上清液(5 μ g/ml, I I稀释)Ih 后，KRH液洗3遍,加胰岛素(l(T7mmol/l)温育20min,KRH液洗3遍,加入2-NBDG避光温育 20min，PBS洗3遍，加入2%多聚甲醛4°C固定5min，在荧光显微镜下于480nm观察各组荧光，并拍照。结果见图I和图2.由图可见ΜΦ4Μ与3T3-L1细胞共培养使胰岛素刺激下的细胞摄取葡萄糖显著减少，提示GLUT4转位受阻，葡萄糖进入细胞内的转运率降低。本发明不同配比的四妙颗粒均可以促进GLUT4的转位，进而促进葡萄糖转运，改善IR，调节糖脂代谢，其中以配比3效果最明显。同时阳性药水杨酸钠效果也较明显。二、本发明对正常小鼠糖耐量的影响I. I实验动物健康ICR种清洁级雄性小鼠，购自扬州大学比较医学中心，合格证号 SCXK (苏)2007-0001，体重 18_22g。药物实施例1-15阳性对照药物盐酸二甲双胍片、消渴丸。I. 2药物配制二甲双胍(200mg/kg)，取一片研成粉末，称取IOOmg粉末溶于蒸馏水，配成5ml,灌胃O. lml/10g ;消渴丸(2g/kg):取5粒研成粉末,称取Ig粉末以蒸懼水配成 5ml,灌胃 O. lml/10g ；I. 3实验方法与结果将健康雄性小鼠按体重随机分成19组空白组，模型组，各实施例组，阳性药组， 每组12只。禁食不禁水12h，眼球静脉丛取血，此为0h，随即灌胃给药，剂量均为I. 2g/ kg (相当于生药量)，空白和模型组灌胃给予蒸馏水0. lml/10g, Ih后灌胃2g/kg葡萄糖，于 30min、lh、2h取血,静置15min, 3500rpm, 15min离心，吸取血清，用葡萄糖酶法试剂盒测血糖。结果见表l，0.5h时小鼠血糖达到峰值，模型组与空白组比较血糖明显升高(P < 0. 05)，各实施例组与模型组比较血糖明显降低，二甲双胍和消渴丸也明显降低血糖，2h 时各组血糖都恢复正常。结果提示四妙颗粒能有效的改善小鼠糖耐量。表I四妙颗粒对正常小鼠糖耐量的影响(X土 sd，η = 12)
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t检验，与模型组比较，*P < O. 05三、本发明各实施例对急性炎症引起的胰岛素抵抗小鼠糖耐量的影响I. I实验材料同二I. 2实验方法与结果从普通健康雄性小鼠提取腹腔巨噬细胞，细胞以6 X IO5接于6孔培养板，4小时细胞贴壁后换成无血清H-DMEM培养基，在每孔加入终浓度5 μ g/ml的LPS，48h后收集上清， O. 22 um滤膜过滤，储存于_70°C冰箱中。注射用上清配制取上述所收集上清按I : 2用生理盐水稀释为3倍。将健康小鼠按体重随机分成19组空白组，模型组，按照优化工艺制得各实施例组，二甲双胍组和消渴丸组，每组12只。禁食不禁水12h后，眼球静脉丛取血，此为O时，灌胃给药，空白和模型组灌胃给予蒸馏水O. lml/10g, O. 5h后腹腔注射LPS刺激小鼠巨噬细胞上清液O. 2ml/只,0. 5h后灌胃2g/kg葡萄糖，于30min、lh、2h取血,静置15min, 3500rpm, 15min离心,吸取血清,用葡萄糖酶法试剂盒测血糖。结果见表2，小鼠禁食12h后，取血后给小鼠灌药，O. 5h后腹腔注射巨噬细胞上清液，O. 5h后灌2g/kg的葡萄糖，O. 5h，lh，2h后取血。O. 5h时小鼠血糖达到峰值，模型组与空白组比较血糖明显升高(P < O. 05)，各实施例组与模型组比较血糖明显降低，二甲双胍和消渴丸也具有明显降低血糖作用，2h时血糖都基本恢复正常。结果显示各实施例组能有效的改善急性胰岛素抵抗小鼠的糖耐量。表2四妙颗粒对急性胰岛素抵抗小鼠糖耐量的影响(X土sd，η = 12)
权利要求
1.一种中药组合物，其特征是由下列中药材按对应的重量份制成黄柏3-12份；苍术5-10份；薏该仁9-30份；黄连2-5份。
2.权利要求I的中药组合物，其特征在于由下列中药材按对应的重量份制成黄柏6份；苍术10份；薏苡仁10份；黄连3份。
3.—种中药组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤实施按重量份计黄柏3-12份；苍术5-10份；薏该仁9-30份；黄连2-5份；按上述组份称取原料，将苍术提取挥发油，挥发油用P -环糊精包合，提取后的药渣与黄柏、薏苡仁、黄连合并后煮沸提取得到提取液，浓缩提取液，浓缩至稠浸膏，所得浸膏粉碎后加入苍术挥发油包合物即得。
4.根据权利要求3的一种中药组合物的制备方法，其特征在于其中挥发油用￠-环糊精包合方法如下挥发油与￠-环糊精的重量比例为I :10,加4倍量水,研磨0. 5h。
5.根据权利要求3的一种中药组合物的制备方法，其特征在于其中提取挥发油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸馏提取10小时。
6.一种中药组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤实施按重量份计黄柏3-12份；苍术5-10份；薏该仁9-30份；黄连2-5份；按上述组分称取原料，沸水提取，提取液浓缩制得成品，或将上述组份粉碎制得。
7.根据权利要求I或2的中药组合物在制备治疗2型糖尿病或胰岛素抵抗疾病的药物中的应用。
全文摘要
本发明属于中药和天然药物技术领域，具体涉及治疗脾虚湿热证2型糖尿病及胰岛素抵抗的中药及其制备与应用。一种中药组合物，其特征是由下列中药材按对应的重量份制成黄柏3-12份；苍术5-10份；薏苡仁9-30份；黄连2-5份。本发明的中药组合物特点是清热燥湿，标本兼顾，通过抑制炎性刺激或反应而改善或治疗胰岛素抵抗，所以在临床使用中适应症方面较广，不仅治疗Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗，而且对肥胖症，高血脂或动脉粥样硬化等病患中具有胰岛素抵抗倾向亦有治疗和预防的作用。
文档编号A61K36/8994GK102579904SQ20121009615
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月31日 优先权日2012年3月31日
发明者刘保林, 刘康, 张宁, 成俊, 高发红, 黄芳 申请人:成俊