专利名称：从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法
技术领域：
本发明属于食品功能成分提取分离领域，具体涉及一种从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法。
背景技术：
苹果多酚具有很强的抗肿瘤、抗氧化、抗癌、抗菌、清除体内自由基和预防心脑血管疾病等生理活性；苹果多酚还有许多其他药理功能，如抗动脉硬化、保护软骨与增强骨质、生发乌发、保护视网膜、抑菌、抗视力退化、抗过敏、防龋齿、防辐射、防治冠心病及中风等心脑血管疾病，可作为功能性食品添加剂，用于保健食品及化妆品的制造。苹果幼果多酚含量为成熟果的10倍，约占幼果的1_2%，是苹果多酚丰富的来源， 开发价值很高。每亩地疏除大约为50公斤的幼果，苹果幼果中还含有根皮苷、绿原酸等营养元素，因此，在废弃的苹果幼果中提取纯化营养成分即成为一个重要的研究项目。目前，对于从苹果中提取苹果多酚、根皮苷、绿原酸的方法主要是单独进行的，SP提取苹果多酚、根皮苷、绿原酸是三种单独进行的提取方法，其相互之间没有关联，这样，需要独立的提取设备，提取成本较高，而且原料利用率相对较低。
发明内容
为了解决现有技术中从苹果中提取苹果多酚、根皮苷、绿原酸的工艺所存在的不足，本发明提供了一种能够连续分离，原料利用率高且制备工艺简单的从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法。本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，由以下步骤实现I)总多酚提取苹果幼果破碎后用体积浓度为70%的乙醇浸提3小时，苹果幼果与乙醇的料液比为I :5 15g/ml，蒸发浓缩除去乙醇，至浓缩液的体积为原料液体积的0. I倍，用大孔吸附树脂吸附，吸附速率为I. 0^2. OBV/h, 70%乙醇洗脱，洗脱速率为I. 0^2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得到苹果幼果总多酚；2)绿原酸提取将步骤I)的苹果幼果总多酚用蒸馏水溶解，至苹果幼果总多酚水溶液的浓度为2. 5mg/ml，用大孔吸附树脂吸附，吸附速率为I. (T2. OBV/h, 30%乙醇洗脱，洗脱速率为
I.(T2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得苹果绿原酸；3)根皮苷提取将步骤2)中30%乙醇洗脱后的大孔吸附树脂再用70%乙醇水溶液洗脱，洗脱速率为I. (T2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得到根皮苷。上述步骤I)中的大孔吸附树脂是X-5吸附树脂、D4020吸附树脂或NKA-9吸附树脂。
本发明通过在废弃幼果中连续提取苹果多酚、绿原酸、根皮苷，简化了制备工艺，极大地降低提取纯化成本，合理利用了废弃的苹果幼果，而且提取绿原酸后的树脂可继续洗脱提取出根皮苷，分离方法简单，有广阔应用前景。
图I为乙醇浓度对x-5树脂洗脱效果的影响。图2为X-5树脂吸附效果。图3为X-5树脂解析效果。图4为洗脱液pH对总多酚吸附效果的影响。
图5为提取液多酚浓度对吸附效果的影响图6为上样速率对动态吸附效果的影响。 图7为洗脱速率对动态解吸效果的影响。图8为多酚动态洗脱曲线。图9为苹果幼果多酚液相图谱。图10为X-5树脂30%乙醇洗脱绿原酸的效果。图11为绿原酸粗品液相图谱。图12为X-5树脂70%乙醇水溶液洗脱。
具体实施例方式现结合附图及具体的实施例对本发明进行进一步说明，但是本发明不仅限于下述的实施例。实施例I以IOOOg苹果幼果为例，从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，由以下步骤实现步骤I :总多酚提取将IOOOg苹果幼果破碎后用10000ml的体积浓度为70%的乙醇浸提3小时，苹果幼果与乙醇的料液比为I : 10g/ml，蒸发浓缩除去乙醇，至浓缩液的体积为原料液体积的0. I倍，对浓缩液用X-5吸附树脂进行吸附，吸附速率为I. 5BV/h，加2000mL70%的乙醇洗脱，洗脱速率为I. 5BV/h，洗脱液蒸发除去乙醇，干燥12h，得到20g纯度为75. 5%的苹果幼果总多酚；步骤2:绿原酸提取取步骤I的苹果幼果总多酚20g加8000ml蒸馏水溶解，至苹果幼果总多酚水溶液的浓度为2. 5mg/ml，用X-5吸附树脂吸附，吸附速率为I. 5BV/h,加7000ml 30%的乙醇洗脱，洗脱速率为I. 5BV/h，蒸发除去乙醇，干燥12h，得11. 05g纯度为15. 2%的苹果绿原酸；3)根皮苷提取将步骤2中用30%乙醇洗脱后的X-5吸附树脂再用2000ml 70%的乙醇水溶液洗脱，洗脱速率为I. 5BV/h，蒸发除去乙醇，干燥12h，得到5g纯度为35. 3%根皮苷。实施例2以IOOOg苹果幼果为例，从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，由以下步骤实现步骤I :总多酚提取取IOOOg苹果幼果与5000ml乙醇，即苹果幼果与乙醇的料液比为I :5g/ml，用X_5吸附树脂进行吸附，吸附速率为I. OBV/h, 70%乙醇洗脱，洗脱速率为I. OBV/h，本步骤其他的操作与实施例I相同，得到20. 5g纯度为75%的苹果幼果总多酚；步骤2:绿原酸提取用X-5吸附树脂吸附，吸附速率为I. OBV/h, 30%乙醇洗脱，洗脱速率为I. OBV/h,本步骤其他的操作与实施例I相同，得11. 5g纯度为15%的苹果绿原酸；步骤3 :根皮苷提取 将步骤2)中30%乙醇洗脱后的X-5吸附树脂用70%乙醇水溶液洗脱，洗脱速率为
1.OBV/h，本步骤其他的操作与实施例I相同，得到4. 98g纯度为35. 5%的根皮苷。实施例3以IOOOg苹果幼果为例，从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，由以下步骤实现步骤I :总多酚提取取IOOOg苹果幼果与15000ml乙醇，即苹果幼果与乙醇的料液比为I :15g/ml，用X-5吸附树脂进行吸附，吸附速率为2. 0BV/h, 70%乙醇洗脱，洗脱速率为2. 0BV/h,本步骤其他的操作与实施例I相同，得到19. 60g纯度为75. 5%的苹果幼果总多酚；步骤2:绿原酸提取用X-5吸附树脂吸附，吸附速率为2. 0BV/h, 30%乙醇洗脱，洗脱速率为2. 0BV/h,本步骤其他的操作与实施例I相同，得10. 9g纯度为15. 1%的苹果绿原酸；步骤3 :根皮苷提取将步骤2)中30%乙醇洗脱后的X-5吸附树脂用70%乙醇水溶液洗脱，洗脱速率为
2.0BV/h，本步骤其他的操作与实施例I相同，得到4. 9g纯度为35. 4%的根皮苷。实施例4上述实施例f 3中，将X-5吸附树脂用等质量的D4020吸附树脂或NKA-9吸附树脂替换，其他的步骤与对应的实施例相同。为了确定本发明的可靠性，发明人进行了大量的实验室研究试验，各种试验情况如下试验原料及材料苹果疏除幼果、食品级乙醇、X-5树脂(西安蓝深树脂厂)。实验仪器高效液相色谱仪，P680ALPG-4，美国DIONEX公司；旋转蒸发仪，RE52-99，上海亚荣生化仪器厂；电脑横流泵，DHL-A，上海沪西分析仪器厂有限公司；电脑全自动部份收集器，DBS-100,上海沪西分析仪器厂有限公司。I.苹果总多酚纯化方法筛选①八种树脂对苹果多酚的吸附、洗脱效果表I八种树脂吸附、洗脱性能
权利要求
1.一种从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，其特征在于由以下步骤实现 1)总多酚提取 苹果幼果破碎后用体积浓度为70%的乙醇浸提3小时，苹果幼果与乙醇的料液比为I :5 15g/ml，蒸发浓缩除去乙醇，至浓缩液的体积为原料液体积的0. I倍，用大孔吸附树脂吸附，吸附速率为1.0 2. 0BV/h,70%乙醇洗脱，洗脱速率为1.0 2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得到苹果幼果总多酚； 2)绿原酸提取 将步骤I)的苹果幼果总多酚用蒸馏水溶解，至苹果幼果总多酚水溶液的浓度为2.5mg/ml，用大孔吸附树脂吸附，吸附速率为I. (T2. OBV/h，30%乙醇洗脱，洗脱速率为I. (T2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得苹果绿原酸； 3)根皮苷提取 将步骤2)中30%乙醇洗脱后的大孔吸附树脂再用70%乙醇水溶液洗脱，洗脱速率为I. (T2. OBV/h，蒸发除去乙醇，干燥，得到根皮苷。
2.根据权利要求I所述的从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，其特征在于所述步骤I)中的大孔吸附树脂是X-5吸附树脂、D4020吸附树脂或NKA-9吸附树脂。
全文摘要
本发明涉及一种从苹果幼果中连续提取总多酚、绿原酸和根皮苷的方法，通过在废弃幼果中提取苹果多酚，利用提取的苹果多酚溶解、树脂吸附、30%乙醇洗脱提取绿原酸、70%乙醇洗脱提取根皮苷，简化了制备工艺，极大地降低提取纯化成本，合理利用了废弃的苹果幼果，而且提取绿原酸后的树脂可继续洗脱提取出根皮苷，分离方法简单，有广阔应用前景。
文档编号A61K36/73GK102697895SQ201210190650
公开日2012年10月3日 申请日期2012年6月11日 优先权日2012年6月11日
发明者付成程, 孙立军, 孟永宏, 张娟, 郭玉蓉 申请人:陕西师范大学