专利名称：一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种紫苏籽提取物的用途。
背景技术：
紫苏，别名甚、赤苏、白苏、香苏等，学名Perillafrutescens L.,为唇形科一年生草本植物。具有特异的芳香，原产中国，如今主要分布于印度、緬甸、中国、日本、朝鲜、韩国、印度尼西亚和俄罗斯等国家。据医学临床研究，其茎、叶及种子可入药；茎叶有镇痛、镇静、解热作用，可治疗感冒、解鱼蟹中毒呕吐腹痛等种子(果实)有镇咳、祛痰、平喘及发散精
神沉闷之效。紫苏具有抗氧化、防衰老、降血脂、降血糖、抗过敏、抗微生物、提高记忆力和改善视觉功能等保健功能，是一种具有很高利用价值的药、食两用植物。近些年来，紫苏因其特有的活性物质及营养成分，日益成为国内外医疗保健、食品、化工领域备受关注的多用途植物，经济价值很高，但国外对紫苏叶中的活性酚类物质的研究较多，而对紫苏多糖的研究还处于起步阶段，目前还没有相关研究报道紫苏籽的提取物具有相应的保肝降酶作用。
发明内容
本发明提供了一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途。本发明的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物在制备保肝降酶的药物中的用途。本发明的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的制备方法是按照以下步骤进行的一、取紫苏籽进行破碎，过20目筛后，采用索式提取法对破碎后的紫苏籽粉末进行脱脂处理，得到紫苏籽脱脂粉末；二、对步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末，回流提取，将提取液在转速为4000r/min的条件下离心IOmin ;三、将步骤二离心后得到的上清液,加入无水乙醇至乙醇最终体积百分含量为70%，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心IOmin,收集沉淀；向沉淀中加入20倍体积百分含量为70%的乙醇溶液，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；四、将步骤三得到的沉淀在80°C水浴下挥干4h，然后冷却至_20°C，放入冷冻干燥机中，冷冻干燥10h，即得为紫苏籽粗提取物。本发明包含以下有益效果本发明得到的紫苏籽提取物具有显著降低血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)和谷草转氨酶(G0T/AST)的作用，并具有保肝作用。在降酶方面，阳性对照组降低GPT和GOT两种酶活性分别为65. 67%和48. 46%，与同等质量的阳性对照组相比，实验组降低GPT和GOT两种酶活性分别为和73. 22%和48. 17%，同样具有阳性对照组水飞蓟素混悬液的降酶能力。在保肝方面，随着实验组剂量的增加，肝脏系数和脾脏系数变化逐渐减小，说明该提取物能够减弱肝脏和脾脏因药物作用而增大的趋势。
图I为试验一的紫苏籽提取物的红外光谱图；图2为 试验一中标准葡聚糖的红外光谱图。
具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式
，还包括各具体实施方式
间的任意组合。
具体实施方式
一本实施方式的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物在制备保肝降酶的药物中的用途。本实施方式得到的紫苏籽提取物具有显著降低血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)和谷草转氨酶(G0T/AST)的作用，并具有保肝作用。在降酶方面，阳性对照组降低GPT和GOT两种酶活性分别为65. 67%和48. 46%，与同等质量的阳性对照组相比，实验组降低GPT和GOT两种酶活性分别为和73. 22%和48. 17%，同样具有阳性对照组水飞蓟素混悬液的降酶能力。在保肝方面，随着实验组剂量的增加，肝脏系数和脾脏系数变化逐渐减小，说明该提取物能够减弱肝脏和脾脏因药物作用而增大的趋势。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一不同的是所述的具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的制备方法是按照以下步骤进行的一、取紫苏籽进行破碎，过20目筛后，采用索式提取法对破碎后的紫苏籽粉末进行脱脂处理，得到紫苏籽脱脂粉末；二、对步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末，回流提取，将提取液在转速为4000r/min的条件下离心IOmin ;三、将步骤二离心后得到的上清液，加入无水乙醇至乙醇最终体积百分含量为70 %，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；向沉淀中加入20倍体积百分含量为70%的乙醇溶液，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；四、将步骤三得到的沉淀冷却至_20°C，然后放入冷冻干燥机中，冷冻干燥IOh时间，即得为紫苏籽粗提取物。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一或二不同的是步骤一中所述的索式提取法是指采用沸程为30°C 60°C石油醚，在温度为40°C的条件下，进行索式提取4h，收集上层粉末，即得到紫苏籽粉末；其中，紫苏籽粉末与石油醚的质量体积比为Ig:4mL。其它与具体实施方式
一或二相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一至三之一不同的是步骤二中所述的回流提取是指将步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末加入25倍体积的去离子水，在90°C水浴中回流3h，冷却至室温后过滤，收集滤液，即为提取液。其它与具体实施方式
一至三之一相同。通过以下试验验证本发明的效果试验一本试验的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物制备方法是按照以下步骤进行的一、取IOg紫苏籽(fruit of Perilla frutescens)进行破碎后,过20目筛,收集滤过物，进行索式提取，收集上层提取管中粉末，即得到紫苏籽脱脂粉末；二、将步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末加入20倍体积的蒸馏水，然后在90°C温度下回流提取3h，冷却至室温后，将提取液在转速4000r/min的条件下离心IOmin ;三、将步骤二离心后得到的上清液,力口入无水乙醇至乙醇最终体积百分含量为70%，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；将沉淀加入20倍体积百分含量为70%的乙醇溶液中，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集灰白色沉淀；四、将步骤三收集的灰白色沉淀冷却至_20°C，然后放入冷冻干燥机中，冷冻干燥10h，即为紫苏籽粗提取物。本试验步骤一中所述的索式提取方法为采用40mL沸程为60°C石油醚，在温度为40°C的条件下，进行索式提取4h，收集上层粉末，即得到紫苏籽粉末(抽提室温以12 25°C为宜)。本试验的紫苏籽购买自哈尔滨同泰药店。测定本试验得到的紫苏籽粗提取物的红外光谱，结果如图I所示，紫苏籽粗提取物分别在 3301. 58cm_\2930. 73cm_1U659. 23cm_\l541. lOcm'1402. 80cm_\l096. 21cm_\617. 09cm—1有特征吸收峰。在3378cm—1处吸收峰，为O-H的伸缩振动，表明多糖存在分子间和分子内氢键；在2927CHT1处吸收峰为饱和C-H伸缩振动的；在1417CHT1处吸收峰为C-H弯曲振动，它和C-H的伸缩振动构成了糖类的特征峰；在1626CHT1出吸收峰是多糖水合吸收振动；在1200 lOOOcnT1之间的吸收峰由糖环上和糖苷键上C-O伸缩振动所引起的；在831cm—1有一弱吸收峰，为a-糖苷键的吸收峰。通过将紫苏粗提取物的特征吸收峰与标准·葡聚糖的红外光谱图(如图2所示)吸收峰比对，由此可知，本试验得到的紫苏籽粗提取物为多糖物质。对本试验得到的紫苏籽提取物进行药效学实验试验条件I、试验动物，昆明种健康小鼠，雄性，体重20±2g，购自哈尔滨医科大学第二附属医院实验动物中心。饲养环境为普通级动物饲养室，温度为20 26°C，相对湿度为60-75 %，定时进行通风换气。2,CCl4油溶液的配制取0. 125mL的CCl4,以等量递加法加入IOOmL大豆油，充分搅拌均匀，配成0. 125% CCl4溶液。3、水飞蓟素混悬液的配制将益肝灵片(购自哈尔滨同泰药店)粉碎，以适量生理盐水配制成20. Omg/mL水飞蓟素混悬液备用。试验方法I、CCl4所致小鼠急性肝损伤模型的建立取小鼠20只，随机分为正常组和模型组0. lmL/10g灌胃生理盐水，每日I次，连续7d。于最后一次给药Ih后，模型组腹腔注射
0.125% CCl4, 24h后摘眼球取血，全血静置2h后，在转速为3000r/min的条件下离心15min，取上层血清，通过赖氏法测定血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)和谷草转氨酶(G0T/AST)活性。实验结果表明，GPT和GOT酶活力明显增加，表明建模成功。2、紫苏粗提取物保肝降酶试验取昆明种小鼠60只，按每组10只随机分为正常对照组、CCl4模型组、水飞蓟素阳性对照组、低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组共六组。正常对照组和CCl4模型组按0. lmL/10g灌胃生理盐水，水飞蓟素阳性对照组按
2.Omg/1Og灌胃水飞蓟素混悬液,给药组按剂量为I. 0mg/10g、2. 0mg/10g、3. 0mg/10g灌胃紫苏粗提取物，连续7d，第7d给药Ih后，正常对照组腹腔注射同等体积大豆油，其他组均腹腔注射0. 125% CCl4油溶液，采血前禁食不禁水，于腹腔注射24h后摘眼球取血，全血静置2h后,3000r/min离心15min,取上层血清。通过赖氏法(利用长春汇力生物技术有限公司生产的试剂盒)进行测定血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)活性以及血清中谷草转氨酶(GOT/AST)的活性，并通过观察肝脾的颜色变化，测定肝脏系数(肝脏系数=肝脏重量/体重)、脾脏系数(脾脏系数=脾脏重量/体重)，检查肝脾脏的变化。试验结果如表I至表3所示，同等浓度的紫苏籽粗提取物和水飞蓟素在降低转氨酶活性方面具有近似同等的效力。紫苏籽粗提取物(紫苏多糖)对模型组血清中GPT和GOT活性具有显著地降低效果(p〈0. 01)，且对GOT的降低效果更显著(p〈0. 005)。表I不同剂量组对CCl4急性肝损伤小鼠血清GPT的影响(n = 10，x土s)
权利要求
1.一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途，其特征在于具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物在制备保肝降酶的药物中的用途。
2.根据权利要求I所述的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途，其特征在于所述的具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的制备方法是按照以下步骤进行的一、取紫苏籽进行破碎，过20目筛后，采用索式提取法对破碎后的紫苏籽粉末进行脱脂处理，得到紫苏籽脱脂粉末；二、对步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末，回流提取，将提取液在转速为4000r/min的条件下离心IOmin ;三、将步骤二离心后得到的上清液，加入无水乙醇至乙醇最终体积百分含量为70%，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；向沉淀中加入20倍体积百分含量为70%的乙醇溶液，静置24h后，在转速4000r/min的条件下离心lOmin，收集沉淀；四、将步骤三得到的沉淀在80°C水浴下挥干4h，然后冷却至_20°C，放入冷冻干燥机中，冷冻干燥10h，即得为紫苏籽粗提取物。
3.根据权利要求2所述的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途，其特征在于步骤一中所述的索式提取法是指采用沸程为30°C 60°C石油醚，在温度为40°C的条件下，进行索式提取4h，收集上层粉末，即得到紫苏籽粉末；其中，紫苏籽粉末与石油醚的质量体积比为Ig 4mL。
4.根据权利要求3所述的一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途，其特征在于步骤二中所述的回流提取是指将步骤一得到的紫苏籽脱脂粉末加入25倍体积的去离子水，在90°C水浴中回流3h，冷却至室温后过滤，收集滤液，即为提取液。
全文摘要
一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途，它涉及一种紫苏籽提取物的用途。提供了一种具有保肝降酶作用的紫苏籽提取物的用途。具体方法为紫苏籽破碎、索式提取脱脂、水提醇沉、离心、水浴挥干、冷冻干燥，即得紫苏籽提取物。通过对紫苏籽提取物进行药效学实验表明本发明的紫苏籽提取物具有保肝降酶的作用，且保肝降酶作用较强。本发明应用于保肝防治领域。
文档编号A61P1/16GK102743435SQ201210268870
公开日2012年10月24日 申请日期2012年7月31日 优先权日2012年7月31日
发明者孟利, 宋福强, 李冲伟, 李宏涛, 程丽 申请人:黑龙江大学