专利名称：一种羊齿天门冬甾体总皂苷提取物的制备方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，特别是涉及一种羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法。
背景技术：
羊齿天门冬为百合科(LiIiaceae)天门冬属植物羊齿天门冬Asparagusfilicinus Ham. ex D. Don的干燥块根,又名月牙一支蒿、土百部、小天冬等。主产于云南、四川等地，味甘、苦，性平。民间多用于治疗气管炎、肺炎和咳嗽，其治疗肺结核、肺癌、止咳效果优于百部属植物。现代药理学研究表明羊齿天门冬具有较强的抗肿瘤作用，超过同属植物抗癌保健药芦笋，另外还具有显著的抗二氧化硫毒气作用。羊齿天门冬主要含有甾体皂苷类、木脂素类、苯丙素类等化合物。胡嘉蕴等对羊齿天门冬块根进行分离得到了 12个甾体皂苷，体外抗肿瘤活性测试发现，其中小百部苷甲、小百部苷B等6个化合物对人肺腺癌A-549和乳腺癌MCF-7肿瘤细胞株均有不同程度的生长抑制活性，表明皂苷类化合物是 小百部抗肿瘤作用的主要活性成分，并且小百部苷B的抗肿瘤活性较强。胡嘉蕴等在文献“小百部药材的总皂苷含量与质量标准研究”中采用醇提、正丁醇萃取和大孔树脂纯化等手段得到小百部总皂苷，所得产品皂苷含量较低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，为羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备提供一种简便易行的方法。为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的
1)将羊齿天门冬原料粉碎，用60-80%的乙醇溶液渗漉提取，得到提取液；
2)提取液回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤得到沉淀；
3)沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加氧化铝拌样烘干，装柱，正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集留体皂苷流分；
4)将上述流分加活性炭脱色，减压浓缩，干燥即得留体总皂苷提取物。所述步骤I)中乙醇溶液的用量为原料的4-6倍(v/w)。所述步骤3)中的氧化铝为中性氧化铝，粒度120-200目。所述步骤3)中正丁醇-1%醋酸水溶液比例为78:22。所述步骤4)中活性炭为药用类活性炭，用量为液体的1_3%。本工艺采用氧化铝柱层析，正丁醇-醋酸水溶剂洗脱，操作简单、能耗低，易于放大生产。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。实施例I :取羊齿天门冬原料粉碎，称取2kg，加60%的乙醇溶液渗漉提取I. 5h，得到提取液，回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤，沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加200g中性氧化铝(120-200目)拌样烘干，装柱(径高比1:6)，用比例为78:22的正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集留体皂苷流分，加入1%药用活性炭70°C脱色I. 5h，减压回收正丁醇，真空干燥，得到羊齿天门冬留体总皂苷提取物186g，含量78%。实施例2:
取羊齿天门冬原料粉碎，称取5kg，加70%的乙醇溶液渗漉提取4h，得到提取液，回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤，沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加450g中性氧化铝(120-200目)拌样烘干，粉碎装柱(径高比1:5)，用比例为78:22的正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集集留体皂苷流分，加入I. 5%药用活性炭80°C脱色2. 0h，减压回收正丁醇，真空干燥，得到羊齿天门冬留体总皂苷提取物447g，含量73%。 实施例3
取羊齿天门冬原料粉碎，称取5kg，加75%的乙醇溶液渗漉提取2. 5h，到提取液，回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤，沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加500g中性氧化铝(120-200目)拌样烘干，粉碎装柱(径高比1:6)，用比例为78:22的正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集集留体皂苷流分，加入3%药用活性炭75°C脱色I. 0h，减压回收正丁醇，真空干燥，得到羊齿天门冬留体总皂苷提取物468g，含量76%。实施例4:
取羊齿天门冬原料粉碎，称取10kg，加80%的乙醇溶液渗漉提取5h，得到提取液，回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤，沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加Ikg中性氧化铝(120-200目)拌样烘干，粉碎装柱(径高比1:6)，用比例为78:22的正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集集留体皂苷流分，加入1%药用活性炭80°C脱色2. 5h，减压回收正丁醇，真空干燥，得到羊齿天门冬留体总皂苷提取物923g，含量84%。实施例5:
取羊齿天门冬原料粉碎，称取20kg，加65%的乙醇溶液渗漉提取3h，得到提取液，回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤，沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加2. 2kg中性氧化铝(120-200目)拌样烘干，粉碎装柱(径高比1:6)，用比例为78:22的正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集集留体皂苷流分，加入2%药用活性炭75°C脱色2h，减压回收正丁醇，真空干燥，得到羊齿天门冬留体总皂苷提取物I. 8kg，含量82%。
权利要求
1.一种羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 1)将羊齿天门冬原料粉碎，用60-80%的乙醇溶液渗漉提取，得到提取液； 2)提取液回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，过滤得到沉淀； 3)沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加氧化铝拌样烘干，装柱，正丁醇-1%醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集留体皂苷流分； 4)将上述流分加活性炭脱色，减压浓缩，干燥即得留体总皂苷提取物。
2.根据权利要求I所述羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述步骤I)中乙醇溶液的用量为原料的4-6倍(v/w)。
3.根据权利要求I所述羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述步骤3)中的氧化铝为中性氧化铝，粒度120-200目。
4.根据权利要求I所述羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述步骤3)中正丁醇-1%醋酸水溶液比例为78:22。
5.根据权利要求I所述羊齿天门冬留体总皂苷提取物的制备方法，其特征在于所述步骤4)中活性炭为药用类活性炭，用量为液体的1_3%。
全文摘要
本发明涉及一种羊齿天门冬甾体总皂苷提取物的制备方法。其通过下列的步骤得到1)将羊齿天门冬原料粉碎，用60-80%的乙醇溶液渗漉提取；2)提取液回收乙醇，滴加丙酮，放置沉淀，滤出沉淀；3)沉淀用无水甲醇溶解，过滤，滤液加氧化铝拌样烘干，装柱，正丁醇-醋酸水溶液洗脱，薄层检测，收集甾体皂苷流分，加活性炭脱色，减压浓缩，干燥即得甾体总皂苷提取物。采用该方法制备甾体总皂苷提取物，工艺简单，成本低，含量高，易于放大生产。
文档编号A61P35/00GK102824525SQ20121037326
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司