专利名称：一种灯盏花素磷脂复合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于药物制剂领域，涉及一种灯盏花素磷脂复合物及其制备方法，特别涉及一种灯盏花素磷脂复合物脂质制剂的制备方法。
背景技术：
灯盏花素(Brevescapine)是从菊科植物短亭飞蓬(原名灯盏花，又名灯盏细辛，Erigeron Breviscapus)中分离得到的一类黄酮类物质,主要含灯盖乙素(Scutellarin,化学名为4’，5，6-三羟基黄酮-7-葡萄糖醛酸苷)，少量灯盏甲素及其它黄酮类成分。药效学研究表明，灯盏花素具有扩张脑血管，降低脑血管阻力及增加脑部血流速度、血流量，改善微循环，提高血脑屏障通透性；抗血小板聚集，抗凝血和抑制血栓形成，改善血液流变性；明显增加冠脉流量，缩小心肌梗塞范围和提高机体耐缺氧等作用。在临床上广泛用于治疗脑血栓形成、脑梗塞、类型未定的中风后瘫痪，以及缺血性心血管疾病等。现有研究表明，灯盏花素溶解性能差，为水不溶解和油不溶解性药物，灯盏花素在有机溶剂中的溶解度也很小。其在正己烷及氯仿中基本不溶，水中的溶解度为(79.35±0.68) μ g/mL,在乙醇中的溶解度为(184.34±1.47) μ g/mL石森林，徐莲英，毛展凯，等.灯盏花素理化性质及其稳定性影响因素研究，中国中药杂志，2009, 34(7): 843-847，为一特殊难溶性药物；灯盏花素在正辛醇_水中的油/水分配系数为0.466 (250C )和0.923 (37°C)卢秀霞，何琳，陈莉，等.灯盏花素溶解度及油水分配系数的测定，广东药学院学报，2011, 27(1): 1-4，此外灯盏花素还是一弱酸性药物，在肠道由于解离而使吸收变差。上述理化性质决定了灯盏花素口服生物利用度低，研究报道灯盏花素片口服生物利用度仅为0.40±0.19%葛庆华等.灯盏花素在犬体内的药动学和绝对生物利用度研究，中国医药工业杂志，2003, 34(12):618-620。FDA(美国食品药品监督管理局)认为决定药物口服吸收的生物药剂学性质主要是药物溶解度大小和粘膜通透性的高低，并以此为标准将药物分为1、I1、III和IV类。灯盏花素属于IV药物，即溶解度低和粘膜通透性低的药物，该类药物口服生物利用度往往较低。因此，提高灯盏花素口服生物利用度的关键因素应当是提高其溶解度和肠粘膜通透性。现有技术公开的灯盏花素制剂，大多数缺乏能够同时解决灯盏花素上述缺陷的具针对性方法，如口 腔崩解片(CN1695629A ；CN1698638A ；CN1429618A ；CN1582955A)分散片(CN1530113A ;CN1416817A)、缓释或控释制剂(CN1233327C;CN1212I14C;CN1205940C;CNl172679C;CN1480147A;CN1530I14A;CN1565472A;CN1515264A)、舌下片(CN1634105A)、软胶囊(CN1069520C)等；有的采用制剂新技术以提高灯盏花素的溶解度或溶出度，如制备滴丸(CN156547IA;CN1480148A;CN1408392A;CN1768763A;CN1437950A;CN1531929A;CN1444947A);采用固体分散技术(C N1102392C);纳米技术(CN1364516A);采用环糊精包合技术(CNl739537A);已有研究表明，同时增加灯盏花素黏膜通透性和水溶性而言，磷脂复合物(Phytosome)是一种非常有效的方法。磷脂复合物是药物与磷脂在非质子溶剂中通过范德华力或氢键结合而成的、以一定配比关系结合而形成的复合物。药物与磷脂结合形成复合物后，常常表现出与原化合物显著不同的理化性质和生物特性，能显著地改善药物的脂溶性和稳定性，进而提高药物的生物利用度。因此，磷脂复合物被认为是改善难溶性药物口服生物利用度的一种有效手段。己成功被制备成磷脂复合物的包括丹酚酸B、小檗碱、水飞蓟宾、姜黄素、苦参素和黄芩苷等中药活性成分，且体内药动学研究证实磷脂复合物可有效促进药物的吸收，提高血药浓度和口服生物利用度。刘安昌，赵丽霞，翟光喜等，姜黄素磷脂复合物的制备及其形成机制研究，中国中药杂志[J]，2008，33(17):2112-2117.专利CN1359682A公开了一种“灯盏花素磷脂复合物及其制备方法”，其权利要求1限定了灯盏花素与磷脂的重量比为1:0.5 50，但是通过对其说明书及实施例进行分析，发现其实施例中灯盏花素与磷脂的重量比大多在1:1.5 4，磷脂的比重相对来说比较大。磷脂复合物在实际应用中存在如下问题:一是由于磷脂本身具有较高的粘性，形成的磷脂复合物在胃肠液中极易成团，很难在胃肠道中分散并穿透胃肠道生物膜；二是磷脂复合物由于具有较强的疏水性，很难分散在普通制剂中。如果磷脂复合物中磷脂的比重越大，一方面所形成的磷脂复合物就具有更高的粘性，上述磷脂复合物的2个问题就更加突出；另外一方面，复合物磷脂比重越高，意味着药物的比重就越小，那么制备的磷脂复合物载药量也比较低。同时，磷脂本身容易被氧化，专利CN1359682A采用“加热回流”并且没有加入抗氧化稳定剂的方法容易导致磷脂被氧化，从而导致磷脂复合物的结合率低下。专利CN1359682A说明书中也缺乏其制备的灯盏花素磷脂复合物改善吸收的支持性数据，由于以上几个问题，该专利最终没有获得授权。此外，制备成磷脂复合物后比较粘稠，流动性差，限制了实际的工业化生产，以及开发成其他制剂的前景。因此，在制备成磷脂复合物以后有必要寻找一些能有效改善复合物的分散性以及流动性的相关技术。
发明内容
本发明的目的之一就是克服现有技术的不足，提供一种载药量高、质量稳定、分散性好、生物膜透过性好、生物利用度高、毒副反应小的灯盏花素磷脂复合物及其制备方法。本发明的另一目的是提供一种灯盏花素磷脂复合物油溶液和自微乳脂质制剂及其制备方法。本发明还有一个目的是提供上述灯盏花素磷脂复合物在药物制剂中的应用。本发明的目的通过以下技术方案实现:本发明所涉及的灯盏花素磷脂复合物由灯盏花素与磷脂组成，其中灯盏花素与磷脂的质量比为1:0.5 1.2。本发明采用的磷脂为天然磷脂、合成磷脂或二者的混合物。其中，天然磷脂为大豆磷脂、蛋黄卵磷脂或二者的混合物；合成磷脂为氢化大豆磷脂、氢化卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的一种或其混合物。本发明的灯盏花素磷脂复合物的制备方法是:(I)、取适量灯盏花 素与相当于灯盏花素0.5 1.2倍重量的磷脂，加入到适量有机溶剂中，然后再加入适量抗氧化剂；(2)、于一定温度下磁力搅拌，得澄明溶液；
(3)、将步骤(2)制备的澄明溶液减压浓缩除去有机溶剂，得黄褐色固体物质，真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。在本发明中所述的抗氧化稳定剂选自亚硫酸氢钠、焦硫酸氢钠、维生素C、EDTA及其盐或维生素E及其衍生物的一种或其混合物。所述的有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、石油醚、乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙酸乙酯、正己烷、C1-C6直链或者支链的低级烷醇中的一种或一种以上的混合物。其中，C1-C6直链或者支链的低级烷醇选自甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。所述的有机溶剂其用量为应使灯盏花素的反应浓度为10-30mg/mL。在本发明中，步 骤(2)的反应温度为20_60°C，反应时间为0.5-2.0小时。步骤(3)减压浓缩温度为30-50°C、真空干燥温度为20-50°C、干燥时间为3.0 — 5.0小时。在本发明中所述的灯盏花素磷脂复合物的油溶液和自微乳制剂的制备方法为:将上述得到的灯盏花素磷脂复合物进一步溶解在油相或加入两性亲表面活性剂的油相中，制成磷脂复合物的油溶液；或将灯盏花素磷脂复合物溶于一定比例的乳化剂、助乳化剂和油相中制成自微乳制剂。从而增强灯盏花素磷脂复合物的稳定性、增强磷脂复合物与胃肠道的接触面积和穿透生物膜的能力，使药物的生物利用度得到显著提高，并形成均一、稳定的口服制剂，最终增强其药理作用与临床疗效。在本发明中所述的油溶液的油相为中链和/或长链脂肪酸甘油酯，其中，所述的中链脂肪酸甘油酯选自具有8-10个碳原子链长的脂肪酸甘油单、双、三或其混合物；所述的长链脂肪酸甘油酯选自具有12-18个碳原子链长的甘油单、双、三酯或其混合物；所述的两性亲表面活性剂物质选自油酸聚乙二醇甘油酯(Labrafi I M1944CS)、聚甘油油酸酯(Plurol Oleique CC497)、聚乙二醇辛基苯基醚、单硬脂酸丙二醇、单硬脂酸乙二酯、司盘60、司盘80或司盘80中的一种或几种。本发明所述自微乳制剂的油相为天然植物油或动物油、中链脂肪酸甘油三酯、中链脂肪酸单_，二-或单/ 二-甘油酯、脂肪酸的单价烷醇酯、油酸、亚油酸或者其中几种的混合物；所述的乳化剂为聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚山梨酯20，聚山梨酯80，聚山梨酯85，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或其混合物；所述的助乳化剂为二乙
二醇单乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇200、聚乙二醇600、异丙醇、丙二醇、丙三醇、无水乙醇和辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或其混合物。本发明所述的灯盏花素磷脂复合物油溶液，可用软胶囊囊材包裹制成软胶囊；或加入吸附型材料使其固化后制成各种制剂如片剂、胶囊、微丸、颗粒剂、凝胶剂、栓剂、贴剂等，可通过胃肠道、口腔、直肠、皮肤等给药途径应用。本发明所述的灯盏花素磷脂复合物自微乳组合物，可直接或者通过水性介质分散成液体制剂，或通过固体吸附材料吸附后制备成固体制剂后，用于口服、注射、外用或者粘
膜给药。本发明所制备灯盏花素磷脂复合物可以加入药用辅料，制备成各种制剂，如胶囊、片剂、颗粒剂、混悬剂、栓剂、凝胶剂、贴剂等剂型，可通过胃肠道、口腔、直肠、皮肤等给药途径应用。本发明将灯盏花素与磷脂制备成磷脂复合物，灯盏花素与磷脂的极性基团部分发生了较强的相互作用，抑制了分子中单链的自由转动，而磷脂的两个长脂肪酸链不参与复合反应，可自由移动，包裹了磷脂的极性部分形成一个亲脂性的表面，使复合物表现出较强的脂溶性，改善了灯盏花素的理化性质，提高了灯盏花素的脂溶性，改善了灯盏花素与磷脂双分子构成的细胞膜的亲和性，从而改善了灯盏花素肠粘膜通透性，提高了灯盏花素生物利用度。本发明进一步将灯盏花素磷脂复合物制备成油溶液和自微乳制剂，改善了磷脂复合物的分布、分散状态，增大磷脂复合物与胃肠道的接触面积和穿透生物膜的能力，使药物的生物利用度得到显著提高，使磷脂复合物能够形成均一、稳定的制剂，从而达到进一步提高生物利用度的效果，最终增强其药理作用与临床疗效。与现有技术相比，本发明具有以下优点:1、本发明制备的灯盏花素磷脂复合物磷脂含量低，由现有技术的灯盏花素-磷脂质量比为1:1.5 4降低至1:0.5 1.2 ;载药量高，灯盏花素磷脂复合物的载药量为45% 67%，高于专利CN1359682A制备的灯盏花素磷脂复合物载药量20% 40%，本发明制备的灯盏花素磷脂复合物由于磷脂用量少而产生粘度更低、分散性更好的效果；2、本发明采用的灯盏花素磷脂复合物制备方法为低温磁力搅拌，并且反应中加入了抗氧化稳定剂，克服了专利CN1359682A加热回流温度高并且没有使用抗氧化稳定剂而致使反应中磷脂被氧化最终导致复合率低、磷脂使用量大的缺点；3、本发明进一步将灯盏花素磷脂复合物制备成油溶液或自微乳制剂，克服了灯盏花素磷脂复合物分散性差、流动性差的缺点，增强灯盏花素磷脂复合物的稳定性、增强磷脂复合物与胃肠道的接触面积和穿透生物膜的能力，使药物的生物利用度得到显著提高；4、灯盏花素是一弱酸性药物，在胃肠道由于pH的影响而稳定性较差，同时灯盏花素容易被胃肠道内的酶所酶解，从而导致口服吸收较差。磷脂复合物改善了灯盏花素的理化性质，减小了 PH值对灯盏花素的影响，保护灯盏花素免于胃肠道中酸和酶的降解；5、灯盏花素磷脂复合物提高了灯盏花素的脂溶性，增强了灯盏花素生物膜透过性，提高其吸收转运的作用，从而提高了灯盏花素口服生物利用度。本发明所述的灯盏花素磷脂复合物对动物体内吸收效果药代动力学研究如下:取灯盏花素磷脂复合物(本发明实施例3制备)、灯盏花素磷脂复合物油溶液(本发明实施例8制备)，以市售灯盏花素片(规格20mg/片)为参比制剂:将6只Beagle犬按体重随机分成三组，实验前12h禁食，给药后4h后统一进食。采用5mg/kg单剂量(以灯盏花素计算)口服灯盏花素片、灯盏花素磷脂复合物和灯盏花素磷脂复合物自微乳，进行三周期三交叉实验。实验间隔I周。于给药前及给药后于不同时间点犬前肢静脉采集血液2mL肝素纳抗凝,高速离心(5000rpm) 15min得血楽:lmL。所得血浆_20°C保存，并及时进行血浆样品的预处理和测定。由AUC计算相对生物利用度，灯盏花素磷脂复合物对灯盏花素片的相对生物利用度为375.4%，灯盏花素磷脂复合物油溶液对灯盏花素的相对生物利用度为635.6%，见图1，结果表明，灯盏花素磷脂复合物与灯盏花素磷脂复合物油溶液相对于灯盏花素片，显著提高了灯盏花素口服生物利用度。
图1为Beagle犬口服灯盏花素片、 灯盏花素磷脂复合物和灯盏花素磷脂复合物油溶液(本发明实施例8制备)后的体内血药浓度一时间曲线图。图2灯盏花素磷脂复合物与混合物的紫外分析结果比较(a.磷脂；b.灯盏花素；C.磷脂复合物；d.混合物)图3灯盏花素磷脂复合物与混合物的HPLC分析结果比较(a.磷脂；b.灯盏花素；c.磷脂复合物；d.混合物)图4灯盏花素磷脂复合物与混合物的IR分析结果比较(a.磷脂；b.灯盏花素；c.磷脂复合物；d.混合物)图5灯盏花素磷脂复合物与混合物的DSC分析结果比较(a.磷脂；b.灯盏花素；c.磷脂复合物；d.混合物)
具体实施例方式下面结合附图对本发明的实施例作详细说明:本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例1取灯盏花素0.5g，加入25ml的乙醇，加入蛋黄卵磷脂0.60g和0.05g亚硫酸氢钠，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去乙醇，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例2取灯盖花素0.5g、加入50mL的甲醇,加入蛋黄卵磷脂0.55g和0.05g亚硫酸氢钠，55°C水浴加热，磁力搅拌，保温55°C反应1.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去甲醇，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例3取灯盖花素0.5g,加入50ml的四氢呋喃,加入蛋黄卵磷脂0.4g和0.05g亚硫酸氢钠，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去四氢呋喃，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。对灯盏花素、磷脂，本实施例制备的灯盏花素磷脂复合物及混合物进行紫外扫描，结果见附图2。由紫外扫描结果可以看出，磷脂在250-400nm波长范围内无吸收；灯盏花素及其磷脂复合物和物理混合物的紫外扫描图谱形状几乎相同，在284nm和335nm处均有吸收峰。由此表明灯盏花素与磷脂形成复合物后，其原有的发色团结构并未发生改变，也说明了灯盏花素磷脂复合物并不是一种新的化合物。采用甲醇-0.1%磷酸溶液(40:60)为流动相、检测波长为335nm、十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱条件对灯盏花素、卵磷脂、本实施例制备的灯盏花素磷脂复合物及灯盏花素与磷脂的物理混合物进行HPLC分析，结果见图3。结果表明，灯盏花素磷脂复合物与灯盏花素在此色谱条件下的色谱行为一致，保留时间分别为7.16min和7.133min，说明灯盏花素与磷脂形成的复合物不是新的化合物。分别取灯盏花素、磷脂、本实施例制备的灯盏花素磷脂复合物及灯盏花素与磷脂的物理混合物少许，采用KBr压片法制样，于4000-4000^1范围内测定红外吸收光谱，结果见图4。从灯盏花素的红外光 谱图上可以看出酚-OH的收峰在3377.24CHT1，C=C吸收峰在 1661.54CHT1，苯环上的 C=C 吸收峰为 1608.35cm_1,1573.TAcm1, 1498.75cm_1, 1467.39cπΓ1 ;磷脂的特征吸收峰有非极性端饱和长脂肪链的C-H伸缩振动峰2923.90cm-1, C=O吸收峰1736.96CHT1，P=O吸收峰1239.29CHT1，等等；由图可以看出，灯盏花素与磷脂混合物的红外图谱基本是灯盏花素和磷脂主要峰的叠加，说明灯盏花素与磷脂的混合物中二者之间并没有相互作用的发生。混合物中OH吸收峰3385.99cm—1，复合物中OH吸收峰3422.ΟδαιΓ1，明显向移向高波数，说明复合物中灯盏花素的酚-OH可能与磷脂的某些基团发生了相互作用；磷脂本身的P=O吸收峰在1239.29CHT1，磷脂复合物的P=O吸收峰峰位虽然基本没什么变化，但是峰强度均明显减弱，峰形被钝化，说明可能是灯盏花素的酚羟基与磷脂的P=O发生了一定程度的缔合作用；而磷脂中的C=O吸收峰位于1736.96CHT1，与混合物和复合物中C=O吸收峰位几乎没有变化，说明磷脂中的羰基并没有参与灯盏花素磷脂复合物的形成。红外光谱分析结果表明磷脂复合物中灯盏花素与磷脂基本化学结构没有发生根本的改变，未形成新的化合物，但也不是两者间简单的物理混合物，这也说明灯盏花素磷脂复合物中灯盏花素是和磷脂以分子间力相结合的物态形式存在。采用差示扫描量热法(DSC)对灯盏花素、磷脂、本实施例制备的灯盏花素磷脂复合物及灯盏花素与卵磷脂的物理混合物进行了热分析，结果见图5。从图5所示的DSC图谱可以看出，灯盏花素的熔点为181.74 °C，190度左右开始分解；磷脂出现26.540C ,65.790C ,90.04°C，125.52°C四个相变温度，由于磷脂为一混合物，四个相变温度可能表示其不同组分随外界温度的升高而呈现的相应热量变化，而磷脂在200°C以内没有明显的熔点吸收峰；灯盏花素磷脂复合物在0-140°C检测到一个较宽范围的吸热峰，可能是制备工艺中残留的溶剂·挥发的吸热峰，灯盏花素181.74°C特征吸收熔融峰消失；而灯盏花素与磷脂的物理混合物的DSC图谱可以看出是蛋黄卵磷脂与灯盏花素特征吸收峰出现重叠，可能灯盏花素与磷脂之间相互影响，灯盏花素熔点吸收峰由181.74°C前移至143.39°C，虽然灯盏花素熔点吸收峰在磷脂的影响下前移，但仍然存在。因此，由以上分析结果可以说明灯盏花素与磷脂形成的灯盏花素磷脂复合物不是一种简单的物理混合，而是一种新的结合状态。实施例4取灯盖花素0.8g,加入40ml的无水乙醇,加入大豆磷脂0.96g和0.08g维生素E,55°C水浴加热，磁力搅拌，保温55°C回流反应0.5小时后，减压除去无水乙醇，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例5取灯盏花素0.5g，加入50ml的四氢呋喃，加入蛋黄卵磷脂0.lg，二棕榈酰磷脂酰胆碱0.15g和0.05g维生素E，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应2小时后，减压除去四氢呋喃，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例6取灯盖花素0.9g,加入30ml的四氢呋喃和甲醇(四氢呋喃:甲醇体积比为1:1),加入蛋黄卵磷脂0.9g和0.09g维生素E，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，减压除去四氢呋喃和甲醇的混合溶液，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例7取灯盏花素0.5g，加入50ml的三氯甲烷，加入蛋黄卵磷脂0.5g和0.05g维生素E，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，减压除去三氯甲烷，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例8取灯盖花素0.5g,加入50ml的乙酸乙酯,加入蛋黄卵磷脂0.5g和0.05g维生素E，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，减压除去乙酸乙酯，得黄褐色固体物质，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例9取灯盖花素0.5g,加入50ml的二氧六环,加入蛋黄卵磷脂0.5g和0.05g的亚硫酸氢钠，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去二氧六环，得黄褐色固体物，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例10取灯盖花素0.5g,加入25ml的二氧六环和25ml的甲基叔丁基醚,加入二棕榈酰磷脂酰乙醇胺0.5g和0.05g的亚硫酸氢钠，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去二氧六环和甲基叔丁基醚的混合液，得黄褐色固体物，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。实施例11取灯盏花素0.5g，加入25ml的乙酸乙酯和25ml石油醚，加入大豆磷脂0.6g和
0.06g的亚硫酸氢钠，50°C水浴加热，磁力搅拌，保温50°C反应0.5小时后，过滤除去亚硫酸氢钠，滤液减压除去乙酸乙酯和石油醚的混合液，得黄褐色固体物，40°C真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物。 实施例12称取灯盏花素磷脂复合物lg(实施例1制备)，加入IOg的中链脂肪酸甘油酯及5g聚甘油油酸酯(Plurol⑧Oleique CC497)，搅拌至形成透明的溶液状，得到磷脂复合物的油溶液组合物。实施例13称取灯盏花素磷脂复合物Ig (实施例3制备)，加入6g的中链脂肪酸甘油酯及3g司盘80，搅拌至形成透明的溶液状，得到磷脂复合物的油溶液组合物。实施例14称取灯盏花素磷脂复合物1.0g (实施例3制备)，加入6g的月桂酸聚乙二醇甘油酯及3g辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯，搅拌至形成透明的溶液状，得到磷脂复合物的油溶液组合物。实施例15取灯盏花素磷脂复合物1.0g (实施例3制备)，加入4.5g亚油酸甘油酯和4.5g维生素E，搅拌混合均匀，得灯盏花素磷脂复合物的油溶液组合物。实施例16称取质量比为5.32%的灯盏花素磷脂复合物，加入5-10倍量的无水乙醇，在20-60°C下搅拌溶解均匀至透明油状液体，得灯盏花素磷脂复合物乙醇溶液。向灯盏花素磷脂复合物乙醇溶液中加入12.63%的亚油酸甘油酯、12.63%的中链甘油三酯(MCT)、20.72%的聚氧乙烯氢化蓖麻油、11.10%的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、37.6 %的聚乙二醇400，磁力搅拌或者超声搅拌均匀至澄清透明油状液体，得灯盏花素磷脂复合物自微乳溶液。再将灯盏花素磷脂复合物自微乳在200-1500bar压力条件下通过高压均质机或微射流均质机循环均质2-10次，然后再减压浓缩，除去无水乙醇，即得灯盏花素磷脂复合物自微乳组合物。水稀释100倍后，采用马尔文粒度电位测定仪(Nano-ZS90)测定粒径分布为26.71nm。实施例17灯盏花素磷脂复合物干混悬剂的制备取灯盏花素磷脂复合物80g(实施例6制备)，羟丙甲纤维素100g，羧甲基纤维素钠40g分别粉碎过100目筛，用等量递加法将灯盏花素磷脂复合物与羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠和750g甘露醇混合均匀，再加入微粉化滑石粉10g，硬脂酸镁10g，矫味剂10g，充分混合均匀，分装，得1000袋。实施例18灯盏花素磷脂复合物乳剂的制备取实施实例6制备的灯盏花素磷脂复合物0.Sg,大豆油10g，油酸0.5g，甘油2g，吐温1.5g,注射用水适量，合计100g。采用高剪切机制备初乳，在200-1500bar压力条件下通过高压均质机或微射流均质机循环均质2-10次，0.45 μ m滤膜过滤，灌装即得乳剂。实施例19用灯盏花素磷脂复合物油溶液制备软胶囊将灯盏花素磷脂复合物油溶液0.45g(约相当于20mg灯盏花素)(实施例9制备)及明胶、甘油、山梨醇、水配制明胶溶液，置铺展箱中备用。在室温25±2°C、相对湿度40%的条件下用滴制法制成软胶囊，在25±2°C、相对湿度40%的条件下冷风干燥24小时即得。实施例20灯盏花素磷脂复合物制备硬胶囊取实施实例6制备的灯盏花素磷脂复合物40g(相当于灯盏花素20g)，淀粉120g，微晶纤维素40g，微分硅胶2g，交联羧甲淀粉钠10g，将上述物料混合均匀，填充胶囊，得1000 粒。实施例21用灯盏花素磷脂复合物制备片取实施例3制备的灯盏花素磷脂复合物36g (相当于灯盏花素20g)，加入微晶纤维素32g，乳糖32g，羧甲基淀粉钠5g，以95%乙醇为润湿剂湿法制粒，烘干，外加硬脂酸镁
0.5g，压片，得1000片。实施例22灯盏花素磷脂复合物制备颗粒剂取实施实例6制备的灯盏花 素磷脂复合物80g (相当于灯盏花素40g)，加入微晶400g,鹿糖400g,香精20g,交联羧甲淀粉钠50g,混勻后用30%的乙醇为润湿剂湿法制粒,过40目筛，烘干，分装，得1000袋。
权利要求
1.一种灯盏花素磷脂复合物，其特征在于该磷脂复合物由灯盏花素与磷脂组成，其中灯盏花素与磷脂的质量比为1:0.5 — 1.2，所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂或二者的混合物。
2.根据权利要求1所述的灯盏花素磷脂复合物，其特征在于其所述的天然磷脂为大豆磷脂、蛋黄卵磷脂或二者的混合物；所述的合成磷脂为氢化大豆磷脂、氢化卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的一种或其混合物。
3.根据权利要求1或2所述的灯盏花素磷脂复合物的制备方法，包括以下步骤: (1)、取灯盏花素与相当于灯盏花素0.5 - 1.2倍重量的磷脂，加入到有机溶剂中，然后再加入相当于灯盏花素0.05-0.15倍重量的抗氧化剂，所述的有机溶剂的用量应使灯盏花素的反应浓度为10 — 30mg/mL ； (2)、于20— 60°C、300-600r/min条件下磁力搅拌，得澄明溶液，反应时间为0.5-2.0小时； (3)、将步骤(2)制备的澄明溶液在30- 50°C条件下减压浓缩直至无有机溶剂蒸出，得黄褐色固体物质，真空干燥即得灯盏花素磷脂复合物，真空干燥温度为20 - 50°C，干燥时间为3.0 — 5.0小时。
4.根据权利要求3所述的灯盏花素磷脂复合物的制备方法，其特征在于所述的抗氧化剂为亚硫酸氢钠、焦硫酸氢钠、维生素C、EDTA及其盐或维生素E及其衍生物的一种或其混合物；所述的有机溶剂选 自氯仿、二氯甲烷、石油醚、乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙酸乙酯、正己烷、甲基叔丁基醚、C1 - C6直链或者支链的低级烷醇中的一种或一种以上的混合物。
5.根据权利要求4所述的灯盏花素磷脂复合物的制备方法，其特征在于所述的C1- C6直链或者支链的低级烷醇选自甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。
6.一种灯盏花素磷脂复合物的油溶液的制备方法，其特征在于将权利要求3得到的灯盏花素磷脂复合物进一步溶解在油相或加入到两性亲表面活性剂的油相中，制成磷脂复合物的油溶液。
7.一种灯盏花素磷脂复合物的自微乳制剂的制备方法，其特征在于将权利要求3得到的灯盏花素磷脂复合物溶于质量百分比为10 - 50%的乳化剂、10 - 55%的助乳化剂和10 — 40%的混合油相中制成自微乳制剂。
8.根据权利要求6所述的灯盏花素磷脂复合物的油溶液的制备方法，其特征在于所述灯盏花素磷脂复合物与油相或者加入两亲性表面活性剂的油相的质量比为1:1 15。
9.根据权利要求6或8所述的灯盏花素磷脂复合物油溶液，其特征在于灯盏花素磷脂复合物与两亲性表面活性剂的重量比为1:0.5 10。
10.根据权利要求6或7所述的灯盏花素磷脂复合物的油溶液和自微乳制剂的制备方法，其特征在于所述的油相是中链和/或长链脂肪酸甘油酯，其中所述的中链脂肪酸甘油酯选自具有8 10个碳原子链长的脂肪酸甘油单、双、三或其混合物；所述的长链脂肪酸甘油酯选自具有12 18个碳原子链长的甘油单、双、三酯或其混合物。
11.根据权利要求6所述的灯盏花素磷脂复合物的油溶液的制备方法，其特征在于所述的两亲性表面活性剂，选自油酸聚乙二醇甘油酯、聚甘油油酸酯、聚乙二醇辛基苯基醚、单硬脂酸丙二醇、单硬脂酸乙二酯、司盘60、司盘80或辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或几种。
12.根据权利要求7所述的灯盏花素磷脂复合物的自微乳制剂的制备方法，其特征在于所述自微乳制剂的油相为天然植物油或动物油、中链脂肪酸甘油三酯、中链脂肪酸单_，二 -或单/ 二-甘油酯、脂肪酸的单价烷醇酯、油酸、亚油酸或者其中几种的混合物；所述的乳化剂为聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚山梨酯20，聚山梨酯80，聚山梨酯85，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或其混合物；所述的助乳化剂为二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇200、聚乙二醇600、异丙醇、丙二醇、丙三醇、无水乙醇和辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或其混合物。
13.根据权利要求1或2所述的灯盏花素磷脂复合物，其特征在于所述的磷脂复合物油溶液用软胶囊囊材包裹制成软胶囊，或加入吸附型材料制成可制成经胃肠道、口腔粘膜、直肠或皮肤途径给药的制剂。
14.根据权利要求1或2所述的灯盏花素磷脂复合物，其特征在于所述的磷脂复合物自微乳可直接或者通过水性介质分散成液体制剂，或通过固体吸附材料吸附后制备成固体制剂后，用于口服、注射、外用或者粘膜给药。
15.根据权利要求1或2所述的灯盏花素磷脂复合物，其特征在于所述的灯盏花素磷脂复合物加入药学 上适合的辅料，制成颗粒剂、片剂、硬胶囊、软胶囊或口服混悬液。
全文摘要
本发明提供了一种灯盏花素磷脂复合物及其制备方法和应用，所述的磷脂复合物由灯盏花素与磷脂按质量比1∶0.5－1.2复合而成。利用本发明的制备方法制备的灯盏花素磷脂复合物改变了灯盏花素的理化性质，增强其脂溶性、稳定性和水分散性，改善其跨膜转运性能，从而提高其生物利用度。本发明制备工艺简单、重现性好，适合工业化生产。
文档编号A61K31/7048GK103083683SQ20131004714
公开日2013年5月8日 申请日期2013年2月5日 优先权日2013年2月5日
发明者陈小新, 龙超峰, 谢称石, 吴雄, 廖小英, 周晓丽, 原素 申请人:广东华南药业集团有限公司