胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于药物制剂领域，特别是涉及萘并二蒽酮类药物制剂领域。针对目前萘并二蒽酮类物质在药用领域中存在的问题，发现并证明了胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用。
【专利说明】胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物制剂领域，特别是涉及萘并二蒽酮类药物制剂领域。
【背景技术】
[0002] 金丝桃素是提取自贯叶连翘中的活性成分，可用于抗抑郁症治疗，并具有抗包膜 病毒的作用，对AIDS、乙型和丙型肝炎、单纯疱疹病毒、水痘病毒、流感等病毒感染性有治疗 作用。另外，研究表明金丝桃素对人体无基因毒性和系统毒性，是一种毒副作用较小的抗肿 瘤药物。最新研究表明，人们将 mI-HYP(mI标记金丝桃素）用于肿瘤内照射方面。金丝桃 素具有坏死亲和性，核素 mI可发射短射程β粒子，可对肿瘤进行放射治疗，从而达到肿瘤 的治愈作用。采用这种方法，发现金丝桃素对胰腺癌、膀胱癌、淋巴癌、前列腺癌、基体细胞 癌、喉癌、乳腺癌、肺癌等均有较好的疗效。
[0003] 因此，为了更好、更准确的对肿瘤进行治疗，就要提高金丝桃素在其药物制剂中的 溶解性。但是金丝桃素水溶性差，因此现实应用中多将其溶解于有机溶剂DMS0中。然而， DMS0具有极易渗透皮肤的特殊性质，可引起使用者出现恶心、呕吐、皮疹等不良反应。并且， DMS0存在一定毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性，具有血管毒性和肝 肾毒性。因此，DMS0并不是一个最为理想的金丝桃素溶解剂。
【发明内容】
[0004] 本发明针对目前萘并二蒽酮类物质在药用领域中存在的问题，发现并证明了胆酸 盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用。
[0005] 本发明中所指的胆酸盐溶液优选胆酸钠水溶液。
[0006] 在本发明中还特别公开了优选的胆酸盐为胆酸钠，由于胆酸钠是人体内胆汁的主 要成分，所以对人体完全无毒，同时，经过与其他的胆酸盐对比，溶解于胆酸钠中的萘并二 蒽酮类药物靶向性好，肿瘤治疗效果好。
[0007] 为了更进一步地说明胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用，本发明 公开了所述萘并二蒽酮类药物制剂是将萘并二蒽酮类原药溶解于胆酸盐溶液中制得。
【专利附图】
【附图说明】
[0008] 图1为胆酸钠溶液浓度与金丝桃素溶解度的线性关系图；
[0009] 图2为胆酸钠溶液浓度与伪金丝桃素溶解度的线性关系图；
[0010] 图3为DMS0-金丝桃素药物与胆酸钠-金丝桃素药物治疗肿瘤效果对比图；
[0011] 图4为DMS0-金丝桃素药物与脱氧胆酸钠-金丝桃素药物治疗肿瘤效果对比图；
[0012] 图5为DMS0-金丝桃素药物与牛黄脱氧胆酸钠-金丝桃素药物治疗肿瘤效果对比 图。
【具体实施方式】
[0013] 下面对本发明进行进一步的说明和阐述。
[0014] 实施例组1萘并二蒽酮类原药在胆酸盐溶液中的溶解度与胆酸盐溶液浓度的关 系
[0015] 缓冲溶液配制：精密称取磷酸氢二钠107. 44mg,置于50ml容量瓶中，加入适量蒸 馏水溶解，定容，并用磷酸调节PH为7,配成终浓度为0. 006mol/L的标准溶液。
[0016] 实施例1. 1金丝桃素在胆酸盐溶液中的溶解度与胆酸盐溶液浓度的关系
[0017] 胆酸钠溶液的配制：精密称取一定量的胆酸钠，加入磷酸缓冲液，分别配制形成终 浓度为 1· 34mg/ml、2. 51mg/ml、3. 77mg/ml、4. 82mg/ml、5. 77mg/ml、8. 58mg/ml、10. 65mg/ml、 13. 09mg/ml、17. 98mg/ml、23. 74mg/ml、35. 54mg/ml 的 11 份不同浓度的胆酸钠溶液。
[0018] 溶解度：向11个EP管（1.5ml离心管）中分别放入5mg金丝桃素，并依次加入 200ul上述浓度的胆酸钠溶液，在15°C超声5min，于离心机15°C下以4000rpm离心15min， 精密吸取上清液l〇〇ul，加入900ul胆酸钠稀释，涡旋混均，0. 45um的微孔膜过滤，然后进行 HPLC含量分析，胆酸钠溶液浓度与金丝桃素溶解度的线性关系图谱见图1。
[0019] 由图1线性曲线，可以看出，在低浓度时随着胆酸盐溶液浓度的提高，金丝桃素溶 解度快速升高，之后增长趋势趋于平缓。
[0020] 用药中可以根据金丝桃素药量的不同，在胆酸盐的允许临床用药量的范围内，选 择不同浓度的胆酸盐溶液浓度。
[0021] 实施例1. 2伪金丝桃素在胆酸盐溶液中的溶解度与胆酸盐溶液浓度的关系
[0022] 胆酸钠溶液的配制：精密称取一定量的胆酸钠，加入磷酸缓冲液，分别配制形成终 浓度为 1· 34mg/ml、2. 51mg/ml、3. 77mg/ml、4. 82mg/ml、5. 77mg/ml、8. 58mg/ml、10. 65mg/ml、 13. 09mg/ml、17. 98mg/ml、23. 74mg/ml、35. 54mg/ml 的 11 份不同浓度的胆酸钠溶液。
[0023] 溶解度：取5mg伪金丝桃素置于EP管（1. 5ml离心管）中，加入200ul的胆酸钠溶 液，在15°C超声5min，于离心机15°C下以4000rpm离心15min，精密吸取上清液lOOul，加入 900ul胆酸钠稀释，涡旋混均，0. 45um的微孔膜过滤，然后进行HPLC含量分析，胆酸钠溶液 浓度与金丝桃素溶解度的线性关系图谱见图2。
[0024] 用药中可以根据伪金丝桃素药量的不同，在临床胆酸盐允许用药量的范围内，选 择不同浓度的胆酸盐溶液浓度。
[0025] 分别选取不同的金丝桃素类药物与胆酸盐，进行上述溶解度实验，溶解度结果类 似，因此得到金丝桃素类药物溶解度与胆酸盐浓度之间为正比关系，且随着胆酸盐浓度的 增高，金丝桃素类药物溶解度的增长速度趋于平缓。
[0026] 实施例组2金丝桃素-胆酸盐溶液药物制备
[0027] 实施例2. 1金丝桃素-胆酸钠溶液药物制备
[0028] 首先取5mg金丝桃素置于EP管中，加入 200μl的胆酸钠溶液，在15°C超声5min， 于离心机15?下以4000rpm离心15min，得到金丝桃素-胆酸钠溶液药物。
[0029] 实施例2. 2金丝桃素-脱氧胆酸钠溶液药物制备
[0030] 首先取5mg金丝桃素置于EP管中，加入200 μ 1的脱氧胆酸钠溶液，在15°C超声 5min，于离心机15°C下以4000rpm离心15min，得到金丝桃素-脱氧胆酸钠溶液药物。
[0031] 实施例2. 3金丝桃素-牛黄脱氧胆酸钠溶液药物制备
[0032] 首先取5mg金丝桃素置于EP管中，加入200 μ 1的牛黄脱氧胆酸钠溶液，在15°C超 声5min，于离心机15°C下以4000rpm离心15min，得到金丝桃素-牛黄脱氧胆酸钠溶液药 物。
[0033] 实施例2. 4伪金丝桃素-胆酸钠溶液药物制备
[0034] 首先取5mg伪金丝桃素置于EP管中，加入200 μ 1的胆酸钠溶液，在15°C超声 5min，于离心机15°C下以4000rpm离心15min，得到伪金丝桃素-胆酸钠溶液药物。
[0035] 实施例3溶血性对比实验
[0036] 实验方法：
[0037] 取试管3支，分别加入新鲜配制的2%大鼠血液-生理盐水混悬液1. 0ml ;然后在 第一个试管中加入生理盐水1. 〇ml作为对照管，第二个试管中加入溶解于DMS0的金丝桃素 稀释液1. 0ml，第三个试管中加入溶解于胆酸钠的金丝桃素稀释液1. 0ml，摇匀，置37°C静 置，观察。
[0038] 实验结果：
[0039] 半小时后，我们发现第一个试管内液体无明显改变；第二个试管内血样因药液引 起红细胞全部破裂，呈现红色澄清液；第三个试管内液体无明显改变。
[0040] 分别采用脱氧胆酸钠、牛黄脱氧胆酸钠等其他胆酸盐按照上述试验方法进行溶血 性实验，发现溶解于胆酸盐的金丝桃素药液不会造成红细胞破裂，不具有溶血性。
[0041] 实施例组4131I-HYP的生物分布及肿瘤治疗效果对比实验
[0042] mI-HYP是放射性1311标记的金丝桃素的缩写。
[0043] 模型建立：
[0044] 皮下种植实体瘤鼠，将含小鼠 H22肝癌细胞的腹腔液注射到种植小鼠的皮下各 0. lmL，5天后肿瘤块形成，表示建模成功。
[0045] 说明，以下Ci为以活度来描述放射源大小的单位，居里。
[0046] 实施例4. 1胆酸钠-金丝桃素药物相关实验
[0047] 实施例4. 1. 1DMS0-金丝桃素药物与胆酸钠-金丝桃素药物生物分布对比实验
[0048] 选取肿瘤最大直径在0. 5cm?1. 5cm之间的荷瘤小鼠24只，按肿瘤大小随机分为 2组，12只/组。
[0049] 分别尾静脉注射20 μ Ci溶解于DMS0的1311-HYP和20 μ Ci溶解于胆酸钠的 mI-HYP，于注射后4h、24h摘眼球取血并处死，取心、肝、脾、肺、肾、甲状腺等主要脏器及组 织，称重并测量其放射性计数，经衰变校正后，计算每克脏器或组织的放射性摄取量占总注 射剂量的百分数ID/g)，获得其在荷瘤鼠体内的生物学分布结果，结果如表1所示，P < 0· 005。
[0050] 表 1 :
[0051]
【权利要求】
1. 胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用。
2. 根据权利要求1所述的胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用，其特征 是：所述的胆酸盐溶液优选胆酸钠水溶液。
3. 根据权利要求1或2中所述的胆酸盐溶液在制备萘并二蒽酮类药物制剂中的应用， 其特征是：所述萘并二蒽酮类制剂是将萘并二蒽酮类原药溶解于胆酸盐溶液中制得。
【文档编号】A61K31/122GK104096234SQ201310111593
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2013年4月2日 优先权日:2013年4月2日
【发明者】倪以成, 张健, 孙自平, 吉云, 蒋翠花, 江骁, 方志军, 高萌, 李玥, 姚楠 申请人:江苏省中医药研究院