人参皂苷f1在制备用于抗动脉粥样硬化药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了人参皂苷F1的药物新用途，具体地公开了人参皂苷F1在制备用于预防和治疗动脉粥样硬化以及冠状动脉粥样硬化性心脏病的药物中的用途。
【专利说明】人参皂苷F1在制备用于抗动脉粥样硬化药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种药用活性成分在制备药物中的应用，尤其涉及人参皂苷Fl在预防和治疗动脉粥样硬化以及其作为首要发病因素的冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)中的新应用，属医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]冠状动脉性心脏病(coronary artery heart disease CHD,简称冠心病)作为一种最常见的缺血性心脏疾病，已成为威胁全人类生命安全的重大疾病。冠心病是多种冠状动脉病的结果，其中以冠状动脉粥样硬化引起的血管狭窄性病变为病理基础的占冠心病的绝大多数。动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)的形成机制复杂，近代学说认为动脉粥样硬化一种主要由氧化脂质引起慢性炎症反应的过程，目前临床上用药主要是采用降脂类药物及抗氧化化剂，但疗效不尽人意，亟需进行大量的新药开发研究。
[0003]人参皂苷是人参的主要活性成分，显示出了一系列的生物活性，比如抗炎、抗衰老和抗氧化。人参皂苷Fl是人参皂苷Rgl及三七皂苷Rl的肠内菌代谢产物，与人参皂苷Rgl相比，区别仅仅在C-6位上少一个葡萄糖，但在天然药材中的含量较低，属于稀有皂苷。近年来对人参皂苷Fl的活性研究表明，它在保护细胞凋亡具有明显的活性，同时随着生物转化技术的发展，可采用真菌将Rgl定向转化为Fl，为研究人参皂苷Fl的药理活性以及进一步作为新药开发奠定了基础。研究采用人参皂苷Fl对动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠的斑块形成以及氧化型密度脂蛋白引起的人脐静内皮细胞炎症损伤进行干预，表明人参皂苷Fl能在一定程度上减少ApoE-/-小鼠主动脉弓动脉粥样硬化斑块的生成以及血管内膜炎症受体的表达，同时，对氧化脂质引起的内皮细胞炎性因子表达以及单核细胞粘附具有明显的抑制作用，具有预防和治疗动脉粥样硬化的潜力。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是提供人参皂苷Fl在制备用于防治动脉粥样硬化的药物中的应用。本文所称的人参皂苷Fl均包括其药学上可接受的盐。
[0005]本发明同时提供了用于防治动脉粥样硬化的药物组合物，所述药物组合物由人参皂苷Fl与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制备而成。本发明的药物组合物中还可以含有一种或多种其他用于同类疾病的活性成分。
[0006]本发明提供的药物组合物可为临床上任何可接受的剂型形式。包括口服及肠胃外给药形式的各种剂型。用于口服时，可以是片剂、胶囊、软胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊；用于肠胃外给药途径时，可以是水针、冻干粉针、无菌粉针、输液。本发明药物组合物优选片剂和水针剂型。
[0007]所述药学上可接受的载体或赋形剂可选自适用于口服制剂的药用赋形剂，包括填充剂、粘合剂、润滑剂、崩解 剂、助溶剂、表面活性剂、吸附载体等。
[0008]所述药学上可接受的载体或赋形剂可选自适用于注射剂的药用赋形剂，包括溶齐?、抗氧剂、助溶剂、吸附剂、渗透压调节剂、pH调节剂。
[0009]本发明的药物剂型可使用药物制剂领域常规的方法生产，没有特别限制。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1: ApoE-/-小鼠主动脉弓斑块面积
[0011]图2:小鼠活体MPO炎症探针生物发光强度
[0012]图3 =ApoE-/-小鼠主动脉弓内膜L0X-1表达
[0013]图4 =ApoE-/-小鼠主动脉弓内膜TLR-4表达
[0014]图5:人参皂苷Fl对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的作用
[0015]图6:人参皂苷Fl对ox-LDL引起的单核细胞粘附的作用
【具体实施方式】
[0016]下面结合【具体实施方式】对本发明做进一步详细说明。
[0017]实施例1:人参皂苷Fl对ApoE-/-小鼠主动脉弓粥样硬化斑块生成的影响。
[0018]采用高脂饲料诱导8周对载脂蛋白E基因敲除ApoE-/-小鼠进行动脉粥样硬化斑块造模，C57小鼠作为空白对照，给药组每天给予50mg/kg人参皂苷F1。实验结束后，脱臼处死，4%多聚甲醛灌注固定，取主动脉弓及附近组织OTC包埋，_80°C冰箱保存。冰冻切片自出现三根完整的主动脉瓣`时开始留片，每只各留80张，每隔4张挑取I张染色(共16张)进行0.5%油红染色,苏木素复苏,水洗返蓝，中性树胶封片，奥林巴斯正置显微镜Image proPlus6.0软件40倍拍照后统计斑块所占血管腔面积比，结果见图1。
[0019]人参皂苷Fl给药组与模型组相比，斑块面积百分比从18.83±4.68下降至
12.24±3.95，Ρ〈0.05。
[0020]实施例2:人参皂苷Fl对ApoE-/-小鼠体内炎性反应的影响
[0021]采用生物发光的MPO炎性探针作指示，腹腔注射探针15min使用精诺真spectrum小动物活体成像对小鼠体内炎症介质的生成进行检测，激发光波长为750 Xm，测量总发光强度，结果见图2。
[0022]ApoE-/-模型组的发光强度是C57空白的2.9倍，而Fl给药组能够使发光强度降到空白组的1.5倍。
[0023]实施例3:人参皂苷Fl对对ApoE-/-小鼠主动脉弓内膜L0X-1和TLR-4受体的影响
[0024]ApoE-/-小鼠主动脉弓冰冻切片室温放置30min，水洗后PBS平衡IOmin,山羊血清封闭lh，一抗室温孵育lh，PBS洗3次，每次5min，用带FITC的二抗在室温闭光孵育Ih后PBS洗3次，每次5min，用含DAPI的防荧光猝灭封片剂封片后迅速观察，奥林巴斯荧光倒置显微镜100倍放大拍照，结果见图3和4。
[0025]模型组小鼠主动脉弓的内膜上出现高表达的L0X-1及TLR-4，Fl组可以明显减少这两个受体的表达。
[0026]实施例4:人参皂苷Fl对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的保护作用
[0027]体外分离人脐静脉内皮细胞，不同浓度的人参皂苷Fl以及阳性药普罗布考预孵育24时后采用70 μ g/mL的ox-LDL进行诱导损伤，24小时后CCK-8测定细胞存活率，结果见图5。
[0028]通过CCK-8细胞活力实验结果显示，不同浓度的人参皂苷Fl作用24小时对ox-LDL诱导的内皮损伤具有明显的保护作用。
[0029]实施例5:人参皂苷Fl对ox-LDL引起的单核细胞粘附的抑制作用
[0030]人参皂苷Fl预孵育24时后采用70 μ g/mL的ox_LDL进行诱导炎性损伤反应，损伤刺激24小时后各组加入I X IO5个CM-diL标记的人单核细胞，30min后吸去上层清液，PBS洗3次,每次5min,奥林巴斯突光倒置显微镜100倍放大拍照,结果见图6。
[0031]ox-LDL引起大量的人单核细胞粘附于人脐静脉内皮细胞上，人参皂苷Fl预孵育24小时可显著降低单核细胞的粘附。
[0032]显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而这些属于本发明的精神所引伸出的显而易见的变`化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
【权利要求】
1.人参皂苷Fl在制备用于预防和治疗动脉粥样硬化的药物中的用途。
2.人参皂苷Fl在制备用于预防和治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病药物中的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的人参皂苷Fl均包括其药学上可接受的盐。
4.一种用于预防和治疗动脉粥样硬化的药物组合物，其特征在于所述药物组合物由人参皂苷Fl与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制备而成。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物中还可以含有一种或多种其他用于同类疾病的活性成分。
6.根据权利要求4或5所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物可为临床上任何可接受的剂型形式。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物包括口服及肠胃外给药形式的各种剂型。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物用于口服时，是片剂、胶囊、软胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊；用于肠胃外给药途径 时，是水针、冻干粉针、无菌粉针、输液。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于所述的药学上可接受的载体或赋形剂可选自适用于口服制剂的药用赋形剂，包括填充剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、表面活性剂、吸附载体。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于所述药学上可接受的载体或赋形剂可选自适用于注射剂的药用赋形剂，包括溶剂、抗氧剂、助溶剂、吸附剂、渗透压调节剂、pH调节剂。
【文档编号】A61K31/7032GK103816167SQ201410004066
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2014年1月4日 优先权日:2014年1月4日
【发明者】孙晓波, 孙桂波, 秦蒙 申请人:中国医学科学院药用植物研究所