复合超分子吴茱萸碱纳米粒及其制备方法

复合超分子吴茱萸碱纳米粒及其制备方法
【专利摘要】本发明属于药物制剂领域。本发明涉及复合超分子吴茱萸碱纳米粒的配方及制备方法。本发明通过制备得到的复合超分子吴茱萸碱纳米粒提高了吴茱萸碱的生物利用度，用于肿瘤及炎症治疗。
【专利说明】复合超分子吴茱萸碱纳米粒及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医药制剂领域，本发明涉及复合超分子吴茱萸碱纳米粒的配方及制备方法。
【背景技术】
[0002]吴茱萸始载于《神农本草经》，为芸香科植物吴茱萸石虎或疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实。吴茱萸碱是该植物中的主要生物碱，国内外研究表明吴茱萸碱具有扩张血管抗炎镇痛减肥，调节体温，抗肿瘤以及抑制癌细胞转移等药理学活性，但吴茱萸碱的水溶性极差，生物利用度低，吴茱萸碱其大鼠口服生物利用度仅为0.1 %。磷脂复合物作为新型给药系统，可增加中药活性成分的口服吸收，提高其生物利用度。文献(柳珊，谭群友，王红，廖红，张景勅.吴茱萸碱磷脂复合物的制备表征及体外抗肿瘤活性的研究.中国药学杂志.2012,47 (4):517-523)通过将吴茱萸碱制备成吴茱萸碱磷脂复合物，可提高药物溶解度3.4倍，促进了药物的吸收，有利于药物生物利用度的提高。羟丙基-β-环糊精是β-环糊精衍生物，包合化合物可望提高被包合物的稳定性、水溶性和生物利用度。
[0003]超分子药物指两个或两个以上的分子通过非共价键形成的、用于预防、诊断和治疗疾病的复合物。药物的磷脂复合物及环糊精包合物均属于超分子药物。磷脂复合吴茱萸碱可称为磷脂复合超分子吴茱萸碱。羟丙基-β -环糊精包合吴茱萸碱可称为羟丙基环糊精包合超分子吴茱萸碱(目前尚未见羟丙基环糊精包合超分子吴茱萸碱的研究报道)。
[0004]经查询专利及 文献，目前尚未见同时采用磷脂复合技术和羟丙基环糊精包合技术增加任何药物的生物利用度的研究报道，更无同时采用磷脂复合技术和羟丙基-环糊精包合技术制备吴茱萸碱磷脂复合羟丙基-环糊精包合纳米粒(即复合超分子吴茱萸碱纳米粒)的研究报道，更无将此复合超分子吴茱萸碱纳米粒用于增加吴茱萸碱的生物利用度，提高抗癌活性的研究报道。

【发明内容】

[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种复合超分子吴茱萸碱纳米粒及其制备方法。复合超分子吴茱萸碱纳米粒载体改善了药物的溶解性，促进了药物的吸收，增加了药物的生物利用度，提高了抗癌活性。本发明提供的复合超分子吴茱萸碱纳米粒制备工艺简单，成本较低，易于控制，易于工业化生产。
[0006]本发明提供的复合超分子吴茱萸碱纳米粒，制剂中各组分重量百分比为:吴茱萸碱1-4.2份，羟丙基- β -环糊4.1-26.8份，磷脂7-83.1份，无水乙醇790份。本发明提供的复合超分子吴茱萸碱纳米粒的制备方法如下:取处方量的吴茱萸碱、羟丙基_β -环糊精、磷脂，溶于无水乙醇中，60°C恒温磁力搅拌5h反应后，旋转蒸发除去无水乙醇，真空干燥除去残留的无水乙醇，即得复合超分子吴茱萸碱纳米粒。
[0007]用本发明制得的复合超分子吴茱萸碱纳米粒平均粒径约为180.Snm(图1)。大鼠口服给药后体内药动学考察结果表明，相对于吴茱萸碱、吴茱萸碱羟丙基- β -环糊精包合物和吴茱萸碱磷脂复合物，复合超分子吴茱萸碱纳米粒的曲线下面积增大，峰浓度增大，在体内的生物利用度明显增加。复合超分子吴茱萸碱纳米粒的曲线下面积AUCchoo (μ g/L*h)为(4085.86± 17.21)，分别约是吴茱萸碱(870.3±8.87)、吴茱萸碱羟丙基-β -环糊精包合物(2166.72±25.06)和吴茱萸碱磷脂复合物(2280.43± 13.69)的4.7、1.9、1.8倍。复合超分子吴茱萸碱纳米粒生物利用度分别是吴茱萸碱、吴茱萸碱羟丙基-β -环糊精包合物和吴茱萸碱磷脂复合物的469 %、188 %、180 %。
[0008]大鼠口服灌胃给药复合超分子吴茱萸碱纳米粒、吴茱萸碱、吴茱萸碱羟丙基-β_环糊精包合物和吴茱萸碱磷脂复合物，给药剂量均为250mg/kg。分别于给药后不同时间眼眶后静脉丛取血，置于肝素化试管中，混匀，离心(12000r/min) 5min,分离上层血浆，于-20°C冰箱中保存备用。血浆样品的制备:吸取血浆样品150 μ L，加入内标工作液(20 μ g.πι-1) 10 μ L，涡旋30s，加入氨水75 μ L，涡旋30s,加入乙醚750 μ L，涡旋3min (涡旋Imin后静置30s,再涡旋Imin,如此三次，总计润旋时间为3min),4000r.mirT1润旋5min，取上清液600 μ L至离心管中，40°C水浴挥干乙醚后，加入甲醇100 μ L涡旋lmin，12000r ?mirT1离心1min,取上清液40 μ L进样检测。结果代入回归方程计算血药浓度,得到药时曲线，见图2。
[0009]本专利不同于通常研究报道的药物的纳米载体的制备。本发明首次同时采用磷脂复合技术和羟丙基-β -环糊精包合技术制备了复合超分子吴茱萸碱纳米粒(即吴茱萸碱磷脂复合羟丙基-环糊精包合纳米粒)，明显促进了吴茱萸碱在体内的吸收，增加了吴茱萸碱的生物利用度。本发明首次通过同时利用药用辅料磷脂和羟丙基-β_环糊精，同时采用磷脂复合技术和羟丙基_β -环糊精包合技术，制备成吴茱萸碱磷脂复合羟丙基-β -环糊精包合纳米粒，即复合超分子吴茱萸碱纳米粒。此新型递药系统兼具了磷脂复合物和环糊精包合物的优势，一方面由于羟丙基-环糊精的存在，明显改善了吴茱萸碱的溶解性能；另一方面磷脂的存在，促进了吴茱萸碱能更好地从亲水环境转移至亲脂环境，可有效提高吴茱萸碱的体内吸收。复合超分子吴茱萸碱纳米粒，融合了羟丙基环糊精和磷脂提高吴茱萸碱水溶性，促进吸收的优点，极大地提高了吴茱萸碱的生物利用度，延长了药物作用时间，吴茱萸碱磷脂复合羟丙基_β -环糊精包合纳米粒(即复合超分子吴茱萸碱纳米粒)的体内生物利用度明显高于游离吴茱萸碱、单独采用磷脂复合技术得到的磷脂复合超分子吴茱萸碱、单独采用羟丙基-环糊精包合技术得到的羟丙基-环糊精包合超分子吴茱萸碱，复合超分子吴茱萸碱纳米粒为吴茱萸碱提供了一种生物利用度明显提高的新型载药系统，具有重要意义。
[0010]用本发明提供的复合超分子吴茱萸碱纳米粒进行的细胞实验表明复合超分子吴茱萸碱纳米粒可明显提高吴茱萸碱杀死肿瘤细胞的能力(见图3)，复合超分子吴茱萸碱纳米粒和吴茱萸碱抑制50%肿瘤细胞的药物浓度分别约为1.25 μ M和20 μ Μ,即复合超分子吴茱萸碱纳米粒的半数抑制浓度约为吴茱萸碱1/16。用本发明提供的复合超分子吴茱萸碱纳米粒进行的动物实验表明裸鼠静脉注射后具有明显的肿瘤靶向性及抑瘤效果。
【专利附图】

【附图说明】
[0011]图1为本发明制得的复合超分子吴茱萸碱纳米粒的粒径。[0012]复合超分子吴茱萸碱纳米粒平均粒径为180.8nm。
[0013]图2为本发明制得的复合超分子吴茱萸碱纳米粒的大鼠口服灌胃给药后体内药时曲线图。纵坐标为药物浓度，横坐标为时间。
[0014]本发明制备得到的复合超分子吴茱萸碱纳米粒较吴茱萸碱、吴茱萸碱羟丙基环糊精包合物、吴茱萸碱磷脂复合物有更大的曲线下面积，并且延长了作用了时间，复合超分子吴茱萸碱纳米粒生物利用度分别是吴茱萸碱、吴茱萸碱羟丙基_β -环糊精包合物和吴茱萸碱磷脂复合物的469%、188%, 180%。其生物利用度不仅较游离药物，而且相对于单一技术制备的吴茱萸碱羟丙基_β -环糊精包合物、吴茱萸碱磷脂复合物都有明显的提闻。
[0015]图3为分别给予肺癌Η446细胞等量的复合超分子吴茱萸碱纳米粒、游离吴茱萸碱、空白纳米粒后48小时的存活情况。纵坐标为肿瘤细胞的存活率，横坐标为给予的制剂中的药物浓度。复合超分子吴茱萸碱纳米粒和吴茱萸碱抑制50%肿瘤细胞的药物浓度分别约为1.25 μ M和20 μ Μ,即复合超分子吴茱萸碱纳米粒的半数抑制浓度约为吴茱萸碱1/16，说明复合超分子吴茱萸碱纳米粒可明显提高吴茱萸碱杀死肿瘤细胞的能力。
【具体实施方式】
[0016]为了进一步说明本发明及其优点，给出了下列特定的实施例，应理解这些实施例仅有于具体说明而不是作为本发明范围的限制。
[0017]实施例1:
[0018]配方中含有 的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱1.1份，羟丙基-环糊精4.6份，磷脂10.3份，无水乙醇410份。
[0019]制备方法包括下列步骤:取处方量的吴茱萸碱、羟丙基-环糊精、磷脂，溶于无水乙醇中，60°C恒温磁力搅拌5h反应后，旋转蒸发除去无水乙醇，真空干燥除去残留的无水乙醇，即得复合超分子吴茱萸碱纳米粒。
[0020]实施例2:
[0021]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱1.5份，羟丙基-β-环糊精12.1份，磷脂16.8份，无水乙醇600份。
[0022]制备方法基本同实施例1。
[0023]实施例3:
[0024]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱1.8份，羟丙基-环糊精16.7份，磷脂12份，无水乙醇790份。
[0025]制备方法基本同实施例1。
[0026]实施例4:
[0027]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱2.1份，羟丙基_β -环糊精5.3份，磷脂15.7份，无水乙醇800份。
[0028]制备方法基本同实施例1。
[0029]实施例5:
[0030]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱1.9份，羟丙基-环糊精5.1份，磷脂7份，无水乙醇850份。[0031]制备方法基本同实施例1。
[0032]实施例6:
[0033]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱2.5份，羟丙基-环糊精13.7份，磷脂10.6份，无水乙醇1200份。
[0034]制备方法基本同实施例1。
[0035]实施例7:
[0036]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱3份，羟丙基-环糊精13.9份，磷脂52.1份，无水乙醇1350份。
[0037]制备方法基本同实施例1。
[0038]实施例8:
[0039]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱3.1份，羟丙基_β -环糊精4.1份，磷脂9份，无水乙醇1400份。
[0040]制备方法基本同实施例1。
[0041]实施例9:
[0042]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱3.5份，羟丙基-环糊精26.8份，磷脂37.5份，无水乙醇1800份。
[0043]制备方法基本同实施例1。
[0044]实施例10:
[0045]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱4.1份，羟丙基-环糊精11.5份，磷脂34.8份，无水乙醇2100份。
[0046]制备方法基本同实施例1。
[0047]实施例11:
[0048]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱4.0份，羟丙基-β -环糊精26.7份，磷脂83份，无水乙醇2000份。
[0049]制备方法基本同实施例1。
[0050]实施例12:
[0051]配方中含有的各组分的重量组成比为:吴茱萸碱4.2份，羟丙基-β-环糊精11.6份，磷脂15.6份，无水乙醇2400份。
[0052]制备方法基本同实施例1。
【权利要求】
1.一种复合超分子吴茱萸碱纳米粒，其特征在于:制剂中各组分重量百分比为:
2.根据权利要求1所述的复合超分子吴茱萸碱纳米粒的制备方法:取处方量的吴茱萸碱、羟丙基-β -环糊精、磷脂，溶于无水乙醇中，40-60°C恒温磁力搅拌3-5小时反应后，旋转蒸发除去无水乙醇，真空干燥除去残留的无水乙醇，即得复合超分子吴茱萸碱纳米粒。
【文档编号】A61K9/14GK104027817SQ201410271043
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】张景勍, 罗见春, 刘宏明, 熊华蓉, 胡雪原, 谭群友, 何丹 申请人:重庆医科大学