一种治疗关节炎引起的关节疼痛的药物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开一种治疗关节疼痛的药物，该药物包括有效药物成份和药学上可接受的辅料，其中，所述有效药物成份为天山雪莲的乙醇浸出物。天山雪莲用体积百分浓度为70-90%的乙醇浸渍；浸渍液浓缩，调节醇体积含量至75-85%，醇沉，过滤，滤液经减压回收乙醇后，得乙醇浸出物；乙醇浸出物加水，静置沉淀后，再加入药学上可接受的辅料得到所述的药物。本发明的药物可促进细胞免疫和抑制体液免疫；对佐剂性关节炎原发性和继发性损害均有保护作用。
【专利说明】一种治疗关节炎引起的关节疼痛的药物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗关节疼痛的药物，特别是由急、慢性风湿 性关节炎、类风湿关节炎及骨关节炎引起的关节疼痛，以及该药物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 风湿性关节炎是一种常见的急性或慢性结缔组织炎症。可反复发作并累及心脏。 临床以关节和肌肉游走性酸楚、重著、疼痛为特征，属变态反应性疾病，是风湿热的主要表 现之一，多以急性发热及关节疼痛起病。类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA)是一种 以慢性侵蚀性关节炎为特征的全身性自身免疫病。类风湿关节炎的病变特点为滑膜炎，以 及由此造成的关节软骨和骨质破坏，最终导致关节畸形。如果不经过正规治疗，约75%的患 者在3年内出现残废。类风湿关节炎分布于世界各地，在不同人群中的患病率为0. 18%? 1. 07%。类风湿关节炎在各年龄中皆可发病，高峰年龄在30?50岁左右，一般女性发病多 于男性。据统计，我国风湿性、类风湿性关节炎病患者多达1000多万人，每年医疗费用支出 以7%的速度递增。
[0003] 天山雪莲中的主要化学成分为黄酮类化合物，现在已经鉴定出的有14种，天山雪 莲含有生物碱、黄酮、内脂、植物留醇、挥发油、萜类、木质素和还原糖等成分，并富含氨基 酸，必需氨基酸种类齐全而且含量较高。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种治疗关节炎引起的关节疼痛的药物及其制备方法。
[0005] 一种治疗关节炎引起的关节疼痛的药物，包括有效药物成份和药学上可接受的辅 料，其中，所述有效药物成份为天山雪莲的乙醇浸出物。
[0006] 进一步，所述乙醇浸出物通过包括如下步骤的方法得到：
[0007] (1)天山雪莲用体积百分浓度为70-90%的乙醇浸渍；
[0008] (2)浸渍液浓缩，调节醇体积含量至75-85%，醇沉，过滤，滤液经减压回收乙醇 后，得乙醇浸出物。
[0009] 进一步，浸渍时料液比为1 : (6-12)。
[0010] 制备上述治疗关节炎引起的关节疼痛的药物的方法，包括如下步骤：
[0011] (1)天山雪莲用体积百分浓度为70-90%的乙醇浸渍；
[0012] (2)浸渍液浓缩，调节醇体积含量至75-85 %，醇沉，过滤，滤液经减压回收乙醇 后，得乙醇浸出物；
[0013] (3)乙醇浸出物加水，静置沉淀后，再加入药学上可接受的辅料。
[0014] 进一步，步骤（2)浸渍液浓缩至相对密度为1. 06-1. 15。
[0015] 进一步，步骤（3)中，先将乙醇浸出物加热至60_85°C，然后加水，灭菌，再进行静 置沉淀。
[0016] 进一步，步骤（3)加入药学上可接受的辅料，制成口服液或注射液。
【具体实施方式】
[0017] 以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。
[0018] 取天山雪莲0. 5-2重量份置于提取容器中，加6-12倍量体积百分浓度为70-90% 的乙醇，浸渍2?3次，每次浸渍3-16天，合并浸渍液，浸渍液浓缩成相对密度为1. 06-1. 15 的药液；用95%乙醇调节药液中的醇含量，使药液的乙醇体积含量量控制在75-85%，搅 匀，药液温度保持在15_25°C，醇沉7天；过滤，浓缩至相对密度为1. 06-1. 15,再减压回收乙 醇，即得乙醇浸出物。然后所得乙醇浸出物加热至60-85°C，加入注射用水至天山雪莲药材 与药液比为1:1-1:3,冷却至40-50°C，灌装，置于IKTC下灭菌45分钟，静置沉淀3个月以 上，滤过，滤液按常规制药方法制成口服液；或向滤液加入聚山梨酯-80、氯化钠（0. 9%等 渗），搅拌均匀，用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5?8. 5,用微孔滤膜（0. 45-0. 2 μ m) 滤过，灌封，灭菌，制成小容量雪莲注射液。
[0019] 药效学实验
[0020] 1.材料
[0021] I. 1药品与试剂受试药：雪莲注射液，红棕色针剂，规格2. Oml/支（相当于0.6-2g 天山雪莲药材），肌内注射；阳性对照药：正清风痛宁注射液，无色针剂，2. Oml/支，肌肉注 射。脂多糖（LPS)，SIGMA公司；刀豆球蛋白A(ConA)，北京医药站进口分装；RPMI-1640,美 国LIFE CHN0L0GIES公司；MTT，德国MERCK KGaA公司；二甲基亚砜（DMSO)，北京化工厂出 品；Freund's完全佐剂，SIGMA公司。
[0022] 1. 2动物NIH小白鼠，Wistar大鼠，豚鼠，均由新疆医科大学实验动物中心提供，新 医动字 syxk (新）2003-0001。
[0023] 1. 3仪器722型分光光度计，上海第三分析仪器厂出品。SW-CT-IF净化工作台， 苏净集团安秦空气技术有限公司；2123TC-C02培养箱，美国SHELDONMANUFACTURING INC ; OLYMPUS生物显微镜，日本光电工业株氏会社；550型酶标仪，BIORAD公司；电子天平， Sartorius 公司。
[0024] 1. 4试液配制
[0025] Hank's 储备液：KC1 20. 0g，KH2PO4 0· 30g，NaCl 40. 0g，Na2HPO4 0· 24g，葡萄糖 5. 0g，MgSO4 · 7H20 I. 0g，CaCl2 7. 0g，酚红 0· 5g。
[0026] 依次将上述试剂溶于重蒸水并补足到1L，以NaOH(重蒸水配制）调pH至6. 7左 右，过滤除菌，即为5倍浓缩的储备液。应用时，取1份储备液加4份重蒸水混合成pH7. 2 的HBSS液。
[0027] RPMI-1640 营养液取 RPMI1640 培养基 10. 4g，HEPES 5. 9g，谷氨酰胺 300mg，丙酮 酸钠0. llg，环丙沙星注射液20ml，NaHCO3 2. Og溶于重蒸水并补加至1000ml，以似!10)3调 pH值至7. 1左右，再加灭活的NBS (约相当于总体积的15% )，以蔡氏滤器滤过除菌，无菌分 装，置0-4°C保存。
[0028] MTT显色液：MTT以PBS配成5mg/ml的溶液，滤过除菌，置0-4°C保存。
[0029] 2.实验方法
[0030] 2. 1对小鼠 B淋巴细胞增殖的影响：
[0031] 方法：（1)常规制备脾细胞悬液
[0032] 取NIH小鼠摘眼球放血处死，无菌取脾，剔除脂肪及结缔组织，置于100目尼龙布 上剪碎，尼龙布置内盛IOml冷Hank's液的培养皿上，以玻棒轻研脾碎块，收集细胞液，离心 (lOOOrpm，5min)，弃上清，经低渗（0· 8 %的NH4Cl处理）除去红细胞，作细胞计数，调整细胞 浓度为IX l〇6/ml，以上过程均在0-4°C进行。
[0033] (2)样品及LPS均以RPMI-1640液配成所需浓度，于96孔板按表1加样：
[0034] 表 1
[0035]
【权利要求】
1. 一种治疗关节炎引起的关节疼痛的药物，包括有效药物成份和药学上可接受的辅 料，其中，所述有效药物成份为天山雪莲的乙醇浸出物。
2. 根据权利要求1所述治疗关节炎引起的关节疼痛的药物，其特征在于，所述乙醇浸 出物通过包括如下步骤的方法得到： (1) 天山雪莲用体积百分浓度为70-90%的乙醇浸渍； (2) 浸渍液浓缩，调节醇体积含量至75-85%，醇沉，过滤，滤液经减压回收乙醇后，得乙 醇浸出物。
3. 根据权利要求2所述治疗关节炎引起的关节疼痛的药物，其特征在于，浸渍时料液 比为 1 : (6-12)。
4. 权利要求1所述治疗关节炎引起的关节疼痛的药物的制备方法，包括如下步骤： (1) 天山雪莲用体积百分浓度为70-90%的乙醇浸渍； (2) 浸渍液浓缩，调节醇体积含量至75-85%，醇沉，过滤，滤液经减压回收乙醇后，得乙 醇浸出物； (3) 乙醇浸出物加水，静置沉淀后，再加入药学上可接受的辅料。
5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（2)浸渍液浓缩至相对密度为 1. 06-1. 15〇
6. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（3)中，先将乙醇浸出物加热至 60-85 °C，然后加水，灭菌，再进行静置沉淀。
7. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（3)加入药学上可接受的辅料， 制成口服液或注射液。
【文档编号】A61P19/02GK104435043SQ201410738662
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年12月5日 优先权日:2014年12月5日
【发明者】黄磊, 何随梅, 冷英莉, 赵燕双, 王欢 申请人:新疆银朵兰维药股份有限公司