一种山羊痘、羊口疮二联细胞弱毒疫苗及其制备方法和用途与流程

文档序号:11409570阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗,其特征在于有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒,其中,所述的山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱毒GoatpoxVirusHN-XY2010F43株,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏时间为2015年1月14日,保藏编号为CCTCCNO:V201503,所述的羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒为羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒OrfVirusHB-TS09F65株,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏时间为2014年3月19日,保藏编号为CCTCCNO:V201406。2.权利要求1所述的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗在制备防治羊痘以及羊口疮药物中的应用。3.一种制备权利要求1所述的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)病毒抗原的制备选生长良好布满单层的新生牛睾丸原代细胞和新生羊睾丸原代细胞,倾去营养液,按原营养液体积的1-10%分别接种权利要求1所述的羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒以及山羊痘病毒细胞传代致弱毒的病毒液,吸附5-15分钟后加DMEM维持液,调PH至7.0~7.2,加青霉素、链霉素各100单位/ml,于37℃、5%CO2浓度培养箱中进行培养;培养40~72h,细胞病变达到75%以上时收获病毒,置-20℃冰箱反复冻融两次,然后进行无菌检验、安全检验、支原...
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