本发明涉及医药领域，具体涉及一种骨碎补提取物的生产工艺。
背景技术：
骨碎补(Rhizoma Drynariae)是指水龙骨科(Polypodiaceae S.F.Gary)槲蕨Drynaria(Bory)J.Sm.植物如槲蕨(Drynaria fortunei(kunze)J.Sm.、秦岭槲蕨D.baronii(chist)Diels、中华槲蕨D.sinica Diels、川滇槲蕨D.delavayi Chirst，以及骨碎补科骨碎补属(Davallia Sm.)植物骨碎补Davallia mariesii Moore ex Bak的一种或多种植物的根茎或全草。
骨碎补总黄酮具有补肾、强骨和止痛的功效，经常被用来治疗原发性骨质疏松以及腰骨或四肢关节疼痛等症状。骨碎补总黄酮一般是从骨碎补中提取出来的，而目前的生产工艺的骨碎补总黄酮的产率较低。
技术实现要素：
鉴于上述不足，本发明的目的是提供一种新的骨碎补总黄酮的生产工艺。
本发明的技术方案如下：
一种骨碎补提取物的生产工艺，包括下述步骤：
S100：煎煮处理；采用水对骨碎补原料进行煎煮处理得到煎煮药液，其中水与所述骨碎补原料的质量份数比为5～15∶1，煎煮时间为0.5～1.5小时；
S200：过滤处理；对所述煎煮药液采用100～150目的陶瓷膜进行过滤处理得到滤液；
S300：树脂吸附处理；采用大孔吸附树脂柱对所述滤液进行树脂吸附处理，其中所述滤液的流速为5～7L/分钟*100kg树脂，所述大孔吸附树脂柱中大孔吸 树脂与所述骨碎补原料的质量份数比为1.5～2.5∶1；
S400：水洗处理；树脂吸附处理完成后，对所述大孔吸附树脂柱进行水洗处理至流出液无色；
S500：乙醇洗脱处理；采用乙醇对所述大孔吸附树脂柱进行洗脱处理并收集洗脱流出液得到收集液，乙醇的流速为1～3L/分钟*100kg树脂；
S600：浓缩处理；对所述收集液进行浓缩处理得到稠膏，所述稠膏与所述收集液的相对密度为1.19～1.21∶1；
S700：干燥处理；对所述稠膏进行真空干燥处理得到骨碎补总黄酮中间体；所述干燥处理的温度≤80℃，真空度≤-0.085MPa；
S800：粉碎处理；对所述骨碎补总黄酮中间体进行粉碎处理得到骨碎补提取物。
进一步的，步骤S100中所述煎煮处理进行三次，煎煮处理的温度为100℃。
进一步的，步骤S200中过滤处理的压力为0.4MPa以内。
进一步的，步骤S400中水洗处理的水的流速为30～50L/分钟。
进一步的，所述步骤S500中当洗脱流出液变成棕红色时开始收集直至所述洗脱流出液变为淡黄色或无色和/或乙醇浓度为3％时停止收集。
进一步的，所述步骤S500中使用的乙醇的质量百分比为70～72％。
进一步的，步骤S600中所述浓缩处理在真空度为0.05～0.06MPa下进行。
进一步的，所述骨碎补原料时通过将骨碎补原药材进行切片或粉碎处理得到的，其中骨碎补原药材的切片的厚度为1～2mm，或者经过粉碎处理得到的骨碎补原料的粒度小于等于10目。
进一步的，步骤S800得到的所述骨碎补提取物中所含的总黄酮以柚皮苷计含量为60％～65％。
本发明的有益效果是：本发明的骨碎补提取物的生产工艺在现有的骨碎补提取物的生产工艺的基础上进行了改进，提高了提取物中总黄酮的含量，提高了骨碎补总黄酮的产率。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。本发明的实施例中所采用的仪器均为市售，水均为饮用水或纯净水。
本发明提供了一种骨碎补提取物的生产工艺，包括下述步骤：
S100：煎煮处理；采用水对骨碎补原料进行煎煮处理得到煎煮药液，其中水与所述骨碎补原料的质量份数比为5～15∶1，煎煮时间为0.5～1.5小时。
步骤S100的煎煮处理可以进行多次，将多次煎煮处理得到的煎煮药液合并后进行过滤，或者也可以每次煎煮后直接进行过滤然后将过滤后的药液合并。第一次煎煮处理前需浸泡20～40分钟后开始加热。
具体的，步骤S100包括下述步骤：
S110：给水；骨碎补原料放置在提取罐中，打开进水阀门，按照生产工艺加入适量的饮用水，浸泡20～40分钟后开始加热；
S120：加热至沸腾；开启冷却塔使循环冷却水运行；首先打开直通蒸汽阀门用直通蒸汽管道加热至沸腾，控制直通蒸汽压力为0.15MPa以下，温度显示仪显示为100±2℃；同时通过提取罐的视镜观察到混合物完全沸腾后关闭直通蒸汽阀门；
S130：保温；关闭直通加热阀门后打开间接加热阀门，采用间接夹层加热，控制蒸汽压力为0.2MPa以下，使药液保持沸腾状态。煎煮过程中产生的二次蒸汽通过冷却塔冷却后回到提取罐内保持循环。保温时间为0.5～1.5小时。煎煮时间达到预设时间后，关闭蒸汽阀门，打开放气阀和出液阀，开启药液泵，将煎煮出的第一药液打入过滤器中进行过滤处理或者将煎煮出的药液打入第一储液罐中暂存；
S140：二次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第二药液；
S150：三次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第三药液。
S200：过滤处理；对所述煎煮药液采用100～150目的陶瓷膜进行过滤处理得到滤液。本步骤中的陶瓷膜设置在过滤器中。本步骤中过滤的压力在0.4MPa以内。
其中步骤S200具体操作步骤为加满药液灌，打开药液灌的罐底阀、供料泵进出阀、循环侧的截止阀，其余阀门关闭。启动供料泵向过滤器内加注药液，排净过滤器中的空气，循环泵采用变频启动(启动时采用低频率，待循环泵运行平稳后再慢慢提升频率直至额定频率)，运行平稳后打开陶瓷膜的渗透侧阀门收集滤液。
S300：树脂吸附处理；采用大孔吸附树脂柱对所述滤液进行树脂吸附处理，其中所述滤液的流速为5～7L/分钟*100kg树脂，所述大孔吸附树脂柱中大孔吸树脂与所述骨碎补原料的质量份数比为1.5～2.5∶1。本步骤中采用的大孔吸附树脂为HPD-D大孔吸附树脂。
其中步骤S300包括如下步骤：
S310：装柱；将大孔吸附树脂柱底部放置60目不锈钢编织网以避免大孔吸附树脂流失，关闭出口阀门，并预先放入50升水；按照一定比例放入大孔吸附树脂；一般的，大孔吸附树脂柱的直径为700mm至800mm，优选750mm。
S320：预处理；首先用水把大孔吸附树脂冲洗至无醇味待流出液无色后开始吸附处理；
S330：吸附处理；开启药液泵，打开大孔吸附树脂柱进液阀，同时打开大孔吸附树脂出液口阀门，控制滤液流速为5～7L/分钟*100kg树脂。
经试验，其他制备条件相等，当流速为5～7L/分钟*100kg树脂时最后得到的骨碎补提取物中总黄酮的含量为60％～65％，与流速为10～20L/分钟*100kg树脂得到的骨碎补提取物中总黄酮的含量为50～55％相比，提高了总黄酮的含量，提高了总黄酮的转移率。
S400：水洗处理；树脂吸附处理完成后，对所述大孔吸附树脂柱进行水洗处理至流出液无色。本步骤中水的流速为40L/分钟。其具体步骤为打开进水阀门，压出大孔吸附树脂柱上的残存的药液，当流出液颜色由深变浅直至无色时水洗完毕。此时大孔吸附树脂柱上需保留2cm液面待乙醇洗脱。进一步的，为 了保证放液流速，水洗过程中可用水从放液阀反冲洗大孔吸附树脂。
S500：乙醇洗脱处理；采用质量百分比为70～72％乙醇对所述大孔吸附树脂柱进行洗脱处理并收集洗脱流出液得到收集液，乙醇的流速为1～3L/分钟*100kg树脂。
步骤S500的具体操作步骤为打开乙醇储液罐放液阀门，将乙醇注入大孔吸附树脂柱内，开始洗脱。洗脱液开始时颜色由无色变为浅黄，当流出液变成棕红色时开始收集至流出液由棕红色变为淡黄色或无色和/或乙醇浓度为3％时停止收集。收集完毕后用水冲洗大孔吸附树脂进无色保留液面下次备用。S600：浓缩处理；对所述收集液进行浓缩处理得到稠膏，所述稠膏与所述收集液的相对密度为1.19～1.21∶1。步骤S600中所述浓缩处理在真空度为0.05～0.06MPa下进行。
步骤S600包括如下步骤：
S610：预浓缩；预浓缩在浓缩锅中进行；具体操作步骤为打开真空泵和药液进液阀，将收集液抽至浓缩锅中，当收集液的液面到达浓缩锅上的下视镜的1/2处时关闭进液阀，打开蒸汽阀和冷却循环水阀，控制真空度为0.05～0.06MPa，当药液蒸发减少时从进液阀补充洗脱液直至收集液全部抽净；
S620：再浓缩；当收集液全部抽净后，关闭加热室蒸汽阀、循环蝶阀；打开放空阀和进液阀，将浓缩锅中的药液全部抽入至蒸发室，打开夹层蒸汽继续浓缩直至得到符合工艺要求的稠膏。
步骤S600分段进行，在预浓缩阶段采用蒸汽直接加热可以提高预浓缩效率，而在再浓缩阶段采用夹层蒸汽进行加热可以控制稠膏的浓缩比。本步骤采用预浓缩和再浓缩分段进行，可以节省浓缩处理时间，同时可以很好的控制预浓缩的质量。浓缩处理阶段全部采用蒸汽直接加热在后续的浓缩阶段很难控制稠膏的浓缩度，根据实验在同样的药液量的条件下，本发明中的浓缩处理所用的时间为全部采用蒸汽直接加热的时间的1.1倍，得到的稠膏的合格率高达99％以上，同时降低了操作难度。
S700：干燥处理；对所述稠膏进行真空干燥处理得到骨碎补总黄酮中间体；所述干燥处理的温度≤80℃，真空度≤-0.085MPa。本步骤中干燥处理的标准 为水分小于3％。
S800：粉碎处理；对所述骨碎补总黄酮中间体进行粉碎处理得到骨碎补提取物。
需要说明的是步骤S700和步骤S800必须在D级洁净区中进行。
较佳的，步骤S100中所述煎煮处理进行三次，煎煮处理的温度为100℃。
较佳的，步骤S200中过滤处理的压力为0.4MPa以内。
较佳的，步骤S400中水洗处理的水的流速为30～50L/分钟。
较佳的，所述步骤S500中当洗脱流出液变成棕红色时开始收集直至所述洗脱流出液变为淡黄色或无色和/或乙醇浓度为3％时停止收集。
较佳的，本发明中所使用的骨碎补原料时通过将骨碎补原药材进行切片或粉碎处理得到的，其中骨碎补原药材的切片的厚度为1～2mm，或者经过粉碎处理得到的骨碎补原料的粒度小于等于10目。
较佳的，步骤S800得到的所述骨碎补提取物中所含的总黄酮以柚皮苷计含量为60％～65％。
具体实施例：
试验中所用试药、试剂均为分析纯，水为双重蒸馏水。
提取物中的总黄酮以四氢硼钾显色反应定性判断。用紫外吸光光度法对总黄酮定量。用高效液相色谱法(HPLC)对柚皮甙定量。
四氢硼钾显色反应：用小试管接取测试液约5ml，加入四氢硼钾约5mg，摇匀，加盐酸数滴，呈樱红色或紫红色表示存在二氢黄酮类化合物，灵敏度为55μg/ml。如不显樱红色或紫红色，则为阴性反应。
紫外分光光度法对总黄酮进行含量测定：按照中国药典2010年版一部紫外分光光度法(附录VA)测定。
用HPLC对柚皮甙进行含量测定：按照中国药典1995年版一部高效液相色谱法(附录VID)进行测定。
实施例一
S110：给水；称取100克骨碎补原料放置在提取罐中，打开进水阀门，按照生产工艺加入适量的水，浸泡40分钟后开始加热；水与骨碎补原料的质量份数比为5∶1；
S120：加热至沸腾；开启冷却塔使循环冷却水运行；首先打开直通蒸汽阀门用直通蒸汽管道加热至沸腾，控制直通蒸汽压力为0.15MPa以下，温度显示仪显示为100±2℃；同时通过提取罐的视镜观察到混合物完全沸腾后关闭直通蒸汽阀门；
S130：保温；关闭直通加热阀门后打开间接加热阀门，采用间接夹层加热，控制蒸汽压力为0.2MPa以下，使药液保持沸腾状态。煎煮过程中产生的二次蒸汽通过冷却塔冷却后回到提取罐内保持循环。保温时间为0.5小时。煎煮时间达到预设时间后，关闭蒸汽阀门，打开放气阀和出液阀，开启药液泵，将煎煮出的第一药液打入过滤器中进行过滤处理或者将煎煮出的药液打入第一储液罐中暂存；
S140：二次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第二药液；
S150：三次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第三药液。
S200：过滤处理；对所述煎煮药液采用100目的陶瓷膜进行过滤处理得到滤液。本步骤中的陶瓷膜设置在过滤器中。本步骤中过滤的压力在0.4MPa以内。
S300：树脂吸附处理；采用大孔吸附树脂柱对所述滤液进行树脂吸附处理，其中所述滤液的流速为5L/分钟*100kg树脂，所述大孔吸附树脂柱中大孔吸树脂与所述骨碎补原料的质量份数比为1.5∶1。
S400：水洗处理；树脂吸附处理完成后，对所述大孔吸附树脂柱进行水洗处理至流出液无色。本步骤中水的流速为30L/分钟。
S500：乙醇洗脱处理；采用质量百分比为70～72％乙醇对所述大孔吸附树脂柱进行洗脱处理并收集洗脱流出液得到收集液，乙醇的流速为1L/分钟*100kg树脂。
S600：浓缩处理；对所述收集液进行浓缩处理得到稠膏；
S700：对所述稠膏进行真空干燥处理得到骨碎补总黄酮中间体；所述干燥 处理的温度≤80℃，真空度≤-0.085MPa；
S800：对所述骨碎补总黄酮中间体进行粉碎处理得到骨碎补提取物。
最后得骨碎补提取物1.95克。所得样品用紫外分光光度法测其总黄酮含量，总黄酮含量60.08％，HPLC方法测定柚皮甙含量37.5％(占总黄酮的67.2％)。
实施例二
S110：给水；称取100克骨碎补原料放置在提取罐中，打开进水阀门，按照生产工艺加入适量的水，浸泡30分钟后开始加热；水与骨碎补原料的质量份数比为10∶1；
S120：加热至沸腾；开启冷却塔使循环冷却水运行；首先打开直通蒸汽阀门用直通蒸汽管道加热至沸腾，控制直通蒸汽压力为0.15MPa以下，温度显示仪显示为100±2℃；同时通过提取罐的视镜观察到混合物完全沸腾后关闭直通蒸汽阀门；
S130：保温；关闭直通加热阀门后打开间接加热阀门，采用间接夹层加热，控制蒸汽压力为0.2MPa以下，使药液保持沸腾状态。煎煮过程中产生的二次蒸汽通过冷却塔冷却后回到提取罐内保持循环。保温时间为0.5小时。煎煮时间达到预设时间后，关闭蒸汽阀门，打开放气阀和出液阀，开启药液泵，将煎煮出的第一药液打入过滤器中进行过滤处理或者将煎煮出的药液打入第一储液罐中暂存；
S140：二次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第二药液；
S150：三次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第三药液。
S200：过滤处理；对所述煎煮药液采用120目的陶瓷膜进行过滤处理得到滤液。本步骤中的陶瓷膜设置在过滤器中。本步骤中过滤的压力在0.4MPa以内。
S300：树脂吸附处理；采用大孔吸附树脂柱对所述滤液进行树脂吸附处理，其中所述滤液的流速为6L/分钟*100kg树脂，所述大孔吸附树脂柱中大孔吸树脂与所述骨碎补原料的质量份数比为2∶1。
S400：水洗处理；树脂吸附处理完成后，对所述大孔吸附树脂柱进行水洗处理至流出液无色。本步骤中水的流速为40L/分钟。
S500：乙醇洗脱处理；采用质量百分比为70～72％乙醇对所述大孔吸附树脂柱进行洗脱处理并收集洗脱流出液得到收集液，乙醇的流速为3L/分钟*100kg树脂。
S600：浓缩处理；对所述收集液进行浓缩处理得到稠膏；
S700：对所述稠膏进行真空干燥处理得到骨碎补总黄酮中间体；所述干燥处理的温度≤80℃，真空度≤-0.085MPa；
S800：对所述骨碎补总黄酮中间体进行粉碎处理得到骨碎补提取物。
最后得骨碎补提取物1.98克。所得样品用紫外分光光度法测其总黄酮含量，总黄酮含量64.08％，HPLC方法测定柚皮甙含量37.7％(占总黄酮的67.1％)。
实施例三
S110：给水；骨碎补原料放置在提取罐中，打开进水阀门，按照生产工艺加入适量的水，浸泡20分钟后开始加热；水与骨碎补原料的质量份数比为15∶1；
S120：加热至沸腾；开启冷却塔使循环冷却水运行；首先打开直通蒸汽阀门用直通蒸汽管道加热至沸腾，控制直通蒸汽压力为0.15MPa以下，温度显示仪显示为100±2℃；同时通过提取罐的视镜观察到混合物完全沸腾后关闭直通蒸汽阀门；
S130：保温；关闭直通加热阀门后打开间接加热阀门，采用间接夹层加热，控制蒸汽压力为0.2MPa以下，使药液保持沸腾状态。煎煮过程中产生的二次蒸汽通过冷却塔冷却后回到提取罐内保持循环。保温时间为0.5小时。煎煮时间达到预设时间后，关闭蒸汽阀门，打开放气阀和出液阀，开启药液泵，将煎煮出的第一药液打入过滤器中进行过滤处理或者将煎煮出的药液打入第一储液罐中暂存；
S140：二次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第二药液；
S150：三次煎煮处理；重复步骤S110至S130得到第三药液。
S200：过滤处理；对所述煎煮药液采用100目的陶瓷膜进行过滤处理得到滤液。本步骤中的陶瓷膜设置在过滤器中。本步骤中过滤的压力在0.4MPa以内。
S300：树脂吸附处理；采用大孔吸附树脂柱对所述滤液进行树脂吸附处理，其中所述滤液的流速为7L/分钟*100kg树脂，所述大孔吸附树脂柱中大孔吸树脂与所述骨碎补原料的质量份数比为2.5∶1。
S400：水洗处理；树脂吸附处理完成后，对所述大孔吸附树脂柱进行水洗处理至流出液无色。本步骤中水的流速为20L/分钟。
S500：乙醇洗脱处理；采用质量百分比为70～72％乙醇对所述大孔吸附树脂柱进行洗脱处理并收集洗脱流出液得到收集液，乙醇的流速为2L/分钟*100kg树脂。
S600：浓缩处理；对所述收集液进行浓缩处理得到稠膏；
S700：对所述稠膏进行真空干燥处理得到骨碎补总黄酮中间体；所述干燥处理的温度≤80℃，真空度≤-0.085MPa；
S800：对所述骨碎补总黄酮中间体进行粉碎处理得到骨碎补提取物。
最后得骨碎补提取物1.99克。所得样品用紫外分光光度法测其总黄酮含量，总黄酮含量65.01％，HPLC方法测定柚皮甙含量38.5％(占总黄酮的68.2％)。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以权利要求为准。