治疗类风湿性关节炎的复方制剂及其制备方法与流程

本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的复方制剂；此外，本发明还涉及前述复方制剂的制备方法。

背景技术：

现有技术公开了类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)是一种慢性、系统性、进行性、自身免疫性疾病，以广泛的持续存在的关节滑膜炎及对称性、破坏性的关节病变为特征。RA的治疗却非常困难，到目前为止，仍然缺乏安全有效的治疗药物。现代医学主要是抗炎及减轻后遗症，TNFα抑制剂Etanercept、Infliximab和Adalimumab等药物能够将一部分RA患者肿胀、触痛关节计数等客观症状指标减少到50％，但仍然有许多患者在初次治疗时对其不应答，或二次治疗失败，平均每年约有10％的患者因此停药。寻找安全有效的治疗药物成为RA研究亟待解决的重大问题。中医学在治疗RA方面历史悠久，积累了丰富的临床经验，在缓解和改善临床症状方面常能取得较好疗效。

RA是临床最常见的难治性关节疾病之一，中医归属于“顽痹”等病证范畴。其病变过程中，无论是正虚还是外邪，最终导致痰瘀互结，导致病情进行性加重，且变证多端，深入骨髓，耗血动气，败坏形体，采用逐痰祛瘀的治疗方法将取得较好的临床疗效。

加味牛蒡子汤是上海石氏伤科流派传承人施杞教授，根据多年临床实践和基础研究对石氏伤科“牛蒡子汤”进行优化形成。方中牛蒡子祛痰除风，消肿化毒，通行十二经络，僵蚕祛风解痉，化痰散结，为厥阴肝经之药，两味合为主药，宣滞破结，善搜筋络顽疾浊邪。助以秦艽之辛寒，独活之辛温， 舒筋和血，通达周身，透阳明之温热，理少阴之伏风；半夏之辛温，燥湿化痰，消痞散结而和胃。配以三七，止血活血止痛。全方宣达气血，开破痰结，导其壅滞，使痰瘀去，筋骨健。但其治疗类风湿性关节炎的疗效仍需确定。

技术实现要素：

针对现有技术的上述不足，根据本发明的实施例，希望提供一种疗效确切、安全性高的治疗类风湿性关节炎的中药复方制剂，并提供前述复方制剂的制备方法。

中医学将类风湿性关节炎归属于“痹症”“顽痹”范畴，认为痰瘀互结是类风湿性关节炎发生的根本原因，认为采用逐痰祛瘀的治疗方法将取得较好的临床疗效。本发明基于石氏伤科代表方剂“牛蒡子汤”在治疗关节滑膜炎症方面取得了良好的疗效的基础上，在原方基础上进行加减改进，本发明中采用炒牛蒡、僵蚕、三七、独活、秦艽、半夏提取物制成复方制剂。

本发明所涉及的中药药材质量均符合中国药典2010年版一部相应药材项下各有关规定。

具体而言，本发明提供的一种治疗类风湿性关节炎的复方制剂，由下列重量配比的原料药制备而成：炒牛蒡5-12、僵蚕4-11、三七8-15、独活4-12、秦艽3-9、半夏4-12。根据一个实施例，本发明前述治疗类风湿性关节炎的复方制剂，由下列重量配比的原料药制备而成：炒牛蒡6-12、僵蚕5-10、三七10-15、独活5-10、秦艽4-7、半夏5-12。

根据一个实施例，本发明前述治疗类风湿性关节炎的复方制剂，由下列重量配比的原料药制备而成：炒牛蒡5-10、僵蚕4-8、三七8-10、独活4-8、秦艽3-6、半夏4-10。

根据一个实施例，本发明前述治疗类风湿性关节炎的复方制剂，由下列重量配比的原料药制备而成：炒牛蒡6.5-11、僵蚕5.5-11、三七9.5-11、独活5.5-11、秦艽4.5-6、半夏5.5-11。

本发明复方制剂的有效成分经过乙醇或水溶剂提取和醇沉、滤过的方法纯化，其中所采用的提取方法是根据药物中有效成分的理化性质，选用醇沉、滤过的提取溶剂和提取条件；所采用的纯化方法在保证疗效的前提下，选用乙醇沉淀法进行纯化处理。

本发明提供了上述复方制剂的制备方法。

本发明复方制剂可按常规方法制成各种口服制剂，包括片剂、颗粒剂、胶囊、合剂、散剂等。

本发明中所述辅料为药用规格辅料，包括糊精、乳糖、碳酸氢钠、枸橼酸、羟甲基淀粉钠，微粉硅胶、淀粉、可溶性淀粉、聚乙二醇或硬脂酸镁。

根据实施例，本发明提供的一种治疗类风湿性关节炎的复方制剂的制备方法，包括如下工艺步骤：

按重量配比称取各原料药，浸泡，加水8-14倍，煎煮2-3次，每次煎煮1-3h，合并煎煮液，滤过，滤过液浓缩至相对密度为1.05-1.35的浸膏,备用；

上述浸膏液加入乙醇,使含醇浓度为50-80％,静置过夜,上清液浓缩,至相对密度为1.3-1.4；

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉；浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成10片,每片0.45g；或制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂。

根据实施例，本发明提供的另一种治疗类风湿性关节炎的复方制剂的制备方法，包括如下工艺步骤：

按重量配比称取各原料药，浸泡，加50-90％的乙醇8-10倍，煎煮2-3次，每次煎煮1-3h，合并煎煮液，滤过，滤过液浓缩至相对密度为1.05-1.4的浸膏,备用；

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉；

浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成10片,每片0.45g；或制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂。

根据实施例，本发明提供的再一种治疗类风湿性关节炎的复方制剂的制备方法，包括如下工艺步骤：

按重量配比称取各原料药，浸泡，煎煮2次，每次煎煮1-3h，一煎加50-90％的乙醇8-10倍，二煎加水6-10倍，煎煮液滤过，浓缩至相对密度为1.3-1.4的浸膏,备用；

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉；

浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成10片,每片0.45g；或制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂。本发明复方制剂能避免中药汤剂服用前临时煎煮，久置易霉败变质及给患者带来很多不方便，根据临床用药特点，保存处方中主要药味的理化性质，结合现代制剂技术，制成颗粒剂、片剂、胶囊剂、散剂等固体制剂，方便有效地满足患者需求。

本发明随后的试验例进行了动物实验，将20只清洁级3月龄左右TNF-Tg小鼠按照体重随机分为TNF-Tg组和加味牛蒡子汤组(后者为本发明复方制剂，也称治疗组)，另取10只同窝对照体重相似的野生型小鼠(WT)作为对照组，加味牛蒡子汤组每天以加味牛蒡子汤灌胃，Control组和TNF-Tg组每天以等量纯净水灌胃。经动物实验的体内micro-CT检测结果表明，加味牛蒡子汤能使TNF-Tg小鼠踝关节骨侵蚀降低；组织形态学分析结果显示加味牛蒡子汤能减轻TNF-Tg小鼠踝关节炎症，减少骨侵蚀和软骨侵蚀，减少破骨细胞数目。近红外淋巴成像技术显示加味牛蒡子汤可以促进TNF-Tg小鼠踝关节淋巴回流功能。

附图说明

图1是动物实验体内的HE染色检测结果图。

图2是动物实验体内的TRAP染色检测结果图(红染为破骨细胞)。

图3是动物实验的近红外淋巴成像技术检测结果图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修改同样落入本发明权利要求所限定的范围。

实施例1

称取炒牛蒡600g、僵蚕500g、三七900g、独活500g、秦艽400g、半夏500g。

取各原料药，浸泡1h，煎煮2次，每次煎煮1h，一煎加水14倍，二煎加水量10倍，合并煎煮液，滤过，滤过液浓缩至相对密度为1.05-1.07的浸膏,备用；

上述浸膏液加入乙醇,使含醇浓度为50-80％,静置过夜,上清液浓缩,至密度为1.3-1.4；

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉。浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成1000片,每片0.45g,每日服用10片。或按照药学上通常方法制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂等剂型。

实施例2

称取炒牛蒡1000g、僵蚕800g、三七1000g、独活800g、秦艽600g、半夏1000g。

取各原料药，浸泡1h，煎煮2次，每次煎煮1h，一煎加50-90％的乙醇8-10倍，二煎加50-90％的乙醇6-10倍，合并煎煮液，滤过，滤过液浓缩至相对密度为1.3-1.4的浸膏,备用。

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉。

浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成1000片,每片0.45g,每日服用10片。或按照药学上通常方法制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂等剂型。

实施例3

称取炒牛蒡650g、僵蚕550g、三七9500g、独活550g、秦艽450g、半夏550g。

取各原料药，浸泡1h，煎煮2次，每次煎煮1h，一煎加50-90％的乙醇8-10倍，二煎加水6-10倍，煎煮液滤过，浓缩至相对密度为1.3-1.4的浸膏,备用。

浓浸膏减压干燥,粉碎,得浸膏粉。

浸膏粉加入药用辅料,混匀,制粒,压成1000片,每片0.45g,每日服用10片。或按照药学上通常方法制成颗粒剂、胶囊剂、合剂或散剂等剂型。

试验例

将20只清洁级3月龄左右TNF-Tg小鼠按照体重随机分为TNF-Tg组和加味牛蒡子汤组(随机选取实施例1-3中制成的片剂，加水溶解)，另取10只同窝对照体重相似的野生型小鼠(WT)作为Control组，加味牛蒡子汤组每天以加味牛蒡子汤9.9g/(kg·d)灌胃，Control组和TNF-Tg组每天以等量纯净水灌胃，联系灌胃治疗12周后小鼠足底皮下注射吲哚菁绿(Indocyanine Green,ICG)测量小鼠淋巴管回流功能，并取踝关节制作石蜡切片进行苏木素-伊红(HE)染色观察炎性浸润和关节骨质破坏情况，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数量。

4.1进行动物实验的体内淋巴回流功能检测。

Clearance是小鼠淋巴管对组织间隙液体吸收能力的反映，Pulse是集合淋巴管平滑肌节律性收缩引起的信号变化，两者均被用于反映集合淋巴管的回流功能。在给药后第12周，小鼠足底皮下注射ICG 24h后，野生型小鼠足底有近80％ICG被清除，而TNF-Tg小鼠足底只有50％左右的ICG被清除。与WT小鼠相比，TNF-Tg小鼠的淋巴管搏动变弱，Pulse波形趋于平直。

如图3所示，加味牛蒡子汤治疗12周可以促进TNF-Tg小鼠足底ICG清除率，并且能够改善其淋巴波动pulse，结果表明，加味牛蒡子汤能够促进TNF-Tg小鼠淋巴回流功能，从而减轻关节炎症。

4.2进行动物实验的体内HE染色检测。

如图1所示，与WT小鼠相比TNF-Tg小鼠踝关节内出现大面积炎症浸润区域，骨质明显减少，关节结构破坏。

与TNF-Tg组比较加味牛蒡子汤组炎症面积明显减少，骨质破坏明显减轻。研究结果提示加味牛蒡子汤可以减轻类风湿性关节炎的炎症程度。

4.3进行动物实验的体内TRAP染色检测。

如图2所示，WT小鼠距骨内仅有少量破骨细胞，TNF-Tg组小鼠距骨内出破骨细胞数量明显增多。

加味牛蒡子汤组破骨细胞数量明显低于TNF-Tg组，研究结果提示加味牛蒡子汤可以减轻TNF-Tg小鼠踝关节破骨细胞的数目。